Ultrazvučna priprema seruma bogatog trombocitima

• Plazma bogata trombocitima (PRP) je krvna plazma koja je obogaćena trombocitima, koja se koristi za medicinske i estetske tretmane.
• Ultrazvučna liza i kondicioniranje je vrlo efikasna metoda za pripremu plazme bogate trombocitima.
• Hielscher Ultrasonics nudi različite ultrazvučne sisteme koji odgovaraju zahtjevima tretmana krvi (npr. za unutarnju i vanjsku pripremu čiste sobe).

serum bogat trombocitima

Sonikacija je pouzdana i jednostavna metoda za lizu trombocita u autolognom krvnom serumu kako bi se oslobodili faktori rasta. Frakcije izvedene iz trombocita – također poznat kao autologni kondicionirani serum (ACS) – koriste se za popravku tkiva ili estetske tretmane. Za postizanje optimalnih rezultata, PRP se obogaćuje prije ubrizgavanja.
Da bi se pripremila plazma obogaćena faktorima rasta ćelija, ultrazvuk je veoma efikasan i efikasan metod za lizu ćelijskih membrana i oslobađanje skoro kompletnih faktora rasta ćelija iz trombocita. Ultrazvučnom lizom i kondicioniranjem može se koristiti čak i krv protiv zgrušavanja.
Kondicioniranje PRP-a putem ultrazvuka je zgodan i isplativ način da se dobije prinos u koncentriranim faktorima rasta.

Ultrazvučna liza plazme bogate trombocitima (PRP)

Ultrazvučni efekti lize

Ultrazvučni tretman krvnog seruma dovodi do homogene lize trombocita kako bi se oslobodili zarobljeni faktori rasta (faktor rasta AB (PDGF-AB), faktor rasta AA (PDGF-AA), faktor rasta BB (PDGF-BB), vaskularni faktor endotelni faktor rasta (VEGF), transformirajući faktor rasta β (TGF-β), epidermalni faktor rasta (EGF), faktor rasta sličan insulinu (IGF), faktor rasta epitelnih ćelija ECGF i fibroblastični faktor rasta (FGF)). Trombociti i njihove alfa-granule se poremete ultrazvukom, koristeći fenomen akustična kavitacija. Korištenje ultrazvučne kavitacije za lizu trombocita umanjuje mogući negativni utjecaj na aktivnost faktora rasta ponovljene metode zamrzavanja-odmrzavanja.

Protokol za ultrazvučnu PRP pripremu

Pribl. 16 mL svježe sakupljenog uzorka autologne krvi lagano se preokreće 8-10 puta u epruveti tako da se krv i antikoagulansi dobro pomiješaju. Nakon toga, uzorak se centrifugira na 1800 g 20 minuta na sobnoj temperaturi. Nakon centrifugiranja, trombociti i mononuklearne ćelije grade bjelkasti sloj na dnu sloja plazme, koji je poznat kao plazma bogata trombocitima (PRP). Gornji sloj je poznat kao plazma siromašna trombocitima (PPP). Mononuklearne ćelije se mogu ukloniti ili ostati u uzorku. Često mononuklearne ćelije ostaju u uzorku PRP-a kako bi se izbjegli dodatni koraci, koji nose rizik od kontaminacije.
Napomena: Ultrazvučni tretman autolognog PRP-a mora se izvesti u sterilnim uslovima.
PRP i PPP se odvajaju i prikupljaju. U PPP se dodaje 1,5 mL 10% rastvora kalcijum hlorida, dok se u PRP dodaje 0,5 mL 5% etanola. Obje suspenzije se lagano protresu i ostave da odstoje 5 minuta na sobnoj temperaturi. Na kraju, 1 mL PPP se dodaje u PRP suspenziju i ostavi da stoji dok se ne formira fibrinski ugrušak.
Ultrazvučni tretman: Kako formirani trombocitni gel djeluje kao rezervoar za oslobođene faktore rasta, fibrinski gel mora biti poremećen kako bi se oslobodili dostupni faktori rasta. Parametri za ultrazvučnu lizu i oslobađanje faktora rasta su sljedeći: Sonicate with an UP200Ht ili UP200St (200W, 26kHz) sa sonotrodom S26d2 uzorak u cijevi. Da bi se izbjeglo pregrijavanje uzorka krvi, ultrazvuk se može izvoditi u pulsirajućim ciklusima (npr. 10 sekundi uključeno, 30 sekundi isključeno). Uzorak treba staviti na led radi hlađenja tako da se temperatura optimalno održava između 2 – 5°C. Nakon sonikacije, uzorak se centrifugira na 16000 g 5 min. na sobnoj temperaturi. Supernatant se sakuplja i može se čuvati na -70°C.
Koncentracija trombocita u PRP frakciji je obogaćena za 1,7 – 4,5 puta u ultrazvučnoj metodi u poređenju sa literaturnim prosječnim brojem trombocita u punoj krvi.

PRP je kombinovan sa terapijom matičnim ćelijama dobijenom od masnih naslaga (ultrazvučno oslobođene autologne matične ćelije iz masnog tkiva, pomešan sa PRP-om i ubrizgan nazad u pacijentovo tkivo radi popravke).

ultrazvučna oprema

Hielscher Ultrasonics je stručnjak za sofisticiranu i pouzdanu ultrazvučnu tehnologiju. Naši ultrazvučni uređaji se koriste širom svijeta za lizu, ekstrakciju i pripremu uzoraka – direktnim i indirektnim. autoklav kao i za jednokratnu upotrebu pribor osigurava a bez kontaminacije tretman autolognih uzoraka krvi. Većina naših sistema može se koristiti za ultrazvučnu lizu matične ćelije i PRP, što naše ultrazvučne uređaje čini ekonomski još efikasnijim.
U ovoj tabeli ispod su navedeni naši ultrazvučni uređaji, koji su pogodni za pripremu plazme bogate trombocitima, i njihov preporučeni volumen uzorka, respektivno. Dostupni su i veći ultrasonikatori i prilagođeni sistemi.

Kontaktirajte nas danas! Biće nam drago da Vam pomognemo u pronalaženju optimalnog ultrazvučnog uređaja!