Kako koristiti Hielscher ultrazvučne homogenizatore tkiva
Prije pročišćavanja ili karakterizacije intracelularnih makromolekula kao što su proteini, organele, enzimi ili aktivni spojevi, neophodno je primijeniti efikasnu metodu lize tkiva i dezintegracije ćelija. Ultrazvučna obrada vrlo je efikasna tehnika pripreme ćelija koja brzo oslobađa intracelularni materijal u puferski rastvor. Mehaničke smične sile koje nastaju tokom ultrazvučne homogenizacije tkiva mogu se precizno podesiti prema određenim materijalima. To omogućava blagu pripremu mekih tkiva ili smicanje DNK/RNK blažom ultrazvučnom obradom, kao i intenzivnu ultrazvučnu kavitaciju za destruktivnu razgradnju ćelija (npr. za Nannochloropsis, kvasac).
U nastavku je izbor tkiva, ćelija i druge biološke materije s preporučenim protokolima ultrazvučne obrade i smjernicama za efikasnu pripremu vaših uzoraka pomoću ultrazvučnog homogenizatora tkiva ili drobilice ćelija.
Laboratorijski ultrazvučni uređaj UP200Ht (200W, 26kHz) za zadatke pripreme uzoraka
Kako pripremiti lizate, homogenate i ekstrakte iz bioloških materijala
Abecednim redom:
Acetobacter suboxydans
Actinomyces
Aktivnost ALP i LDH
Ultrazvučna primjena:
Određivanje aktivnosti ALP-a i LDH-a te sadržaja proteina
Zamrznuti uzorci ćelija odmrzavani su 20 min na ledu, nakon čega je uslijedila liza ćelija pomoću PBS-a koji sadrži 1% Triton X-100 tokom 50 min na ledu. Tokom lize ćelija svaki uzorak je ultrazvučno obrađivan 1 min pri 80 W pomoću ultrazvučnog procesora UP100H (Hielscher Ultrasonics).
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Bernhardt, A. et al. (2008): Mineralizirani kolagen – umjetni, ekstracelularni koštani matriks – poboljšava osteogenu diferencijaciju stromalnih ćelija koštane srži.
Određivanje aktivnosti ALP-a i LDH-a te sadržaja proteina
Zamrznuti uzorci ćelija odmrzavani su 20 min na ledu, nakon čega je uslijedila liza ćelija pomoću PBS-a koji sadrži 1% Triton X-100 tokom 50 min na ledu. Tokom lize ćelija svaki uzorak je ultrazvučno obrađivan 1 min pri 80 W pomoću ultrazvučnog procesora UP100H (Hielscher Ultrasonics).
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Bernhardt, A. et al. (2008): Mineralizirani kolagen – umjetni, ekstracelularni koštani matriks – poboljšava osteogenu diferencijaciju stromalnih ćelija koštane srži.
Amorfni trikalcij-fosfat (ATCP)
Ultrazvučna primjena:
ATCP nanočestice, koje su izuzetno reaktivan prekursor za nastanak hidroksiapatita, dispergirane su u hloroformu koji sadrži 5 % (w/w) Tween20 u odnosu na PLGA pomoću Hielscher ultrazvučnog uređaja UP400S pri 320W tokom 5 min. uz primjenu pulsnih intervala (50%) radi relaksacije čestica.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Referenca / istraživački rad:
Mohn, Dirk; Ege, Duygu; Feldman, Kirifl; Schneider, Oliver D.; Imfeld, Thomas; Boccaccini, Aldo R. (2014): Sferična punila od nanočestica kalcijum-fosfata omogućavaju polimernu preradu naprava za fiksaciju kostiju visoke bioaktivnosti. Besplatna biblioteka 01. maj 2010. 21. januar 2014.
ATCP nanočestice, koje su izuzetno reaktivan prekursor za nastanak hidroksiapatita, dispergirane su u hloroformu koji sadrži 5 % (w/w) Tween20 u odnosu na PLGA pomoću Hielscher ultrazvučnog uređaja UP400S pri 320W tokom 5 min. uz primjenu pulsnih intervala (50%) radi relaksacije čestica.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Referenca / istraživački rad:
Mohn, Dirk; Ege, Duygu; Feldman, Kirifl; Schneider, Oliver D.; Imfeld, Thomas; Boccaccini, Aldo R. (2014): Sferična punila od nanočestica kalcijum-fosfata omogućavaju polimernu preradu naprava za fiksaciju kostiju visoke bioaktivnosti. Besplatna biblioteka 01. maj 2010. 21. januar 2014.
Antocijani
Ultrazvučna primjena:
Antocijanini: diglukozidi, monoglukozid, acilirani monoglukozidi i acilirani diglukozidi peonidina, malvidina, cijanidina, petunidina i delfinidina: ekstrakcija iz kožice grožđa za 40 sek.; pH 5,0; omjer materijala i ekstrakcijskog otapala 1:6.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Antocijanini: diglukozidi, monoglukozid, acilirani monoglukozidi i acilirani diglukozidi peonidina, malvidina, cijanidina, petunidina i delfinidina: ekstrakcija iz kožice grožđa za 40 sek.; pH 5,0; omjer materijala i ekstrakcijskog otapala 1:6.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Antrakinoni
Ultrazvučna primjena:
Ekstrakcija antrakinona iz korijena biljke Morinda citrifolia
Preporučeni uređaj:
UP400S
Ekstrakcija antrakinona iz korijena biljke Morinda citrifolia
Preporučeni uređaj:
UP400S
Sjemenke kajsije
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučni predtretman prije ekstrakcije ulja iz sjemenki Jatropha curcas L. radi poboljšanja ekstrakcije.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Ultrazvučni predtretman prije ekstrakcije ulja iz sjemenki Jatropha curcas L. radi poboljšanja ekstrakcije.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Artemisia selengensis Turcz
Ultrazvučna primjena:
Ekstrakcija rutina (1,0g samljevenog uzorka u 30 mL metanola) na 25°C za 5-10 min.
Preporučeni uređaj:
UP50H
Ekstrakcija rutina (1,0g samljevenog uzorka u 30 mL metanola) na 25°C za 5-10 min.
Preporučeni uređaj:
UP50H
Aspergillus flavus
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna inaktivacija Aspergillus flavus u Sabouraudovoj hranjivoj podlozi
Preporučeni uređaj:
UP200S
Ultrazvučna inaktivacija Aspergillus flavus u Sabouraudovoj hranjivoj podlozi
Preporučeni uređaj:
UP200S
B. sphaericus / Bacillus sphaericus
Spore Bacillus anthracis sterne 34F2
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučno uklanjanje spora Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 i Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Upotreba 150 ppm natrijum-hipohlorita zajedno s ultrazvukom dovela je do inaktivacije spora.
Preporučeni uređaj:
UP200S pri 100% amplitude
Referenca / istraživački rad:
Pamarthi, S.R. et al.: Efikasnost ultrazvuka u uklanjanju prljavštine sa spora Bacillus spp. ugrađenih u složene prehrambene matrice vezane za različite kontaktne površine.
Ultrazvučno uklanjanje spora Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 i Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Upotreba 150 ppm natrijum-hipohlorita zajedno s ultrazvukom dovela je do inaktivacije spora.
Preporučeni uređaj:
UP200S pri 100% amplitude
Referenca / istraživački rad:
Pamarthi, S.R. et al.: Efikasnost ultrazvuka u uklanjanju prljavštine sa spora Bacillus spp. ugrađenih u složene prehrambene matrice vezane za različite kontaktne površine.
Spore Bacillus cereus ATCC 21281
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučno uklanjanje spora Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 i Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Upotreba 150 ppm natrijum-hipohlorita zajedno s ultrazvukom dovela je do inaktivacije spora.
Preporučeni uređaj:
UP200S pri 100% amplitude
Referenca / istraživački rad:
Pamarthi, S.R. et al.: Efikasnost ultrazvuka u uklanjanju prljavštine sa spora Bacillus spp. ugrađenih u složene prehrambene matrice vezane za različite kontaktne površine.
Ultrazvučno uklanjanje spora Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 i Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Upotreba 150 ppm natrijum-hipohlorita zajedno s ultrazvukom dovela je do inaktivacije spora.
Preporučeni uređaj:
UP200S pri 100% amplitude
Referenca / istraživački rad:
Pamarthi, S.R. et al.: Efikasnost ultrazvuka u uklanjanju prljavštine sa spora Bacillus spp. ugrađenih u složene prehrambene matrice vezane za različite kontaktne površine.
Bacillus subtilis
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvuk velike snage i niske frekvencije u malim volumenima bakterijske suspenzije dovodi do kontinuiranog smanjenja broja bakterijskih ćelija, tj. dominira stopa uništavanja. U većim volumenima ultrazvučna obrada dovodi do početnog porasta broja ćelija, što upućuje na razdvajanje nakupina bakterija, ali taj početni porast zatim opada kako razdvajanje nakupina završava, a stopa uništavanja postaje važnija.
Preporučeni uređaj:
UP200St
Referenca / istraživački rad:
Joyce, E.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P.; Mason, T. J. (2003): Razvoj i evaluacija ultrazvuka za tretman bakterijskih suspenzija. Studija frekvencije, snage i vremena ultrazvučne obrade na kultiviranim vrstama roda Bacillus. Ultrason. Sonochem. 10/2003. pp. 315-318.
Ultrazvuk velike snage i niske frekvencije u malim volumenima bakterijske suspenzije dovodi do kontinuiranog smanjenja broja bakterijskih ćelija, tj. dominira stopa uništavanja. U većim volumenima ultrazvučna obrada dovodi do početnog porasta broja ćelija, što upućuje na razdvajanje nakupina bakterija, ali taj početni porast zatim opada kako razdvajanje nakupina završava, a stopa uništavanja postaje važnija.
Preporučeni uređaj:
UP200St
Referenca / istraživački rad:
Joyce, E.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P.; Mason, T. J. (2003): Razvoj i evaluacija ultrazvuka za tretman bakterijskih suspenzija. Studija frekvencije, snage i vremena ultrazvučne obrade na kultiviranim vrstama roda Bacillus. Ultrason. Sonochem. 10/2003. pp. 315-318.
Alfa-amilaza ječma
Ultrazvučna primjena:
Stimulacija ili inhibicija aktivnosti alfa-amilaze ječma: Uzorak (10 g sjemenki ječma) dispergiran je u 80 ml vode iz vodovoda direktnom ultrazvučnom obradom pri ultrazvučnom intenzitetu od 20, 60 i 100% amplitude, ciklusu od 50% i uz dodatno miješanje. Sonotroda je bila uronjena oko 9 mm u rastvor. Rastvor je obrađivan pri konstantnoj temperaturi od 30C° tokom 5, 10 i 15 min.
Preporučeni uređaj:
UP200S, amplitude: 20, 60 i 100%; ciklus od 50%; sonotroda S3, 30C°.
Referenca / istraživački rad:
Yaldagard et al. (2008): Učinak ultrazvučne snage na aktivnost alfa-amilaze ječma pri tretmanu sjemenki nakon sjetve
Stimulacija ili inhibicija aktivnosti alfa-amilaze ječma: Uzorak (10 g sjemenki ječma) dispergiran je u 80 ml vode iz vodovoda direktnom ultrazvučnom obradom pri ultrazvučnom intenzitetu od 20, 60 i 100% amplitude, ciklusu od 50% i uz dodatno miješanje. Sonotroda je bila uronjena oko 9 mm u rastvor. Rastvor je obrađivan pri konstantnoj temperaturi od 30C° tokom 5, 10 i 15 min.
Preporučeni uređaj:
UP200S, amplitude: 20, 60 i 100%; ciklus od 50%; sonotroda S3, 30C°.
Referenca / istraživački rad:
Yaldagard et al. (2008): Učinak ultrazvučne snage na aktivnost alfa-amilaze ječma pri tretmanu sjemenki nakon sjetve
Naupliji vitičara
Ultrazvučna primjena:
Razgradnja ćelija / uništavanje mezozooplanktona: ultrazvučnom obradom pri sljedećim uvjetima od četiri protoka (200, 400, 520 i 800 lh-1) i četiri amplitude (25, 50, 75 i 100 %) postignuta je stopa uništavanja između 61 i 97 %.
Preporučeni uređaj:
UIP2000hd
Referenca / istraživački rad:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraljubičasto svjetlo, ultrazvuk i vodikov peroksid kao tretmani balastnih voda – eksperimenti s mezozooplanktonom u slabo slanoj bočatoj vodi.
Razgradnja ćelija / uništavanje mezozooplanktona: ultrazvučnom obradom pri sljedećim uvjetima od četiri protoka (200, 400, 520 i 800 lh-1) i četiri amplitude (25, 50, 75 i 100 %) postignuta je stopa uništavanja između 61 i 97 %.
Preporučeni uređaj:
UIP2000hd
Referenca / istraživački rad:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraljubičasto svjetlo, ultrazvuk i vodikov peroksid kao tretmani balastnih voda – eksperimenti s mezozooplanktonom u slabo slanoj bočatoj vodi.
Sojevi bifidobakterija: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. lactis (BB-12), B. longum (BB-46)
Ultrazvučna primjena:
Razaranje bakterijskih ćelija i oslobađanje ß-galaktozidaze iz sojeva bifidobakterija: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46): 100 mL pasteriziranog mlijeka pomiješanog s bakterijskom kulturom izloženo je ultrazvuku. Kavitacija uzrokuje razaranje bakterijskih ćelija i istovremeno oslobađanje ß-galaktozidaze.
Preporučeni uređaj:
UIP1000hd: amplituda: 10%, snaga: 80W, amplituda: 100%, snaga: 200W; sonotroda BS2d34; 15-30 min.
Referenca / istraživački rad:
Hung et al. (2009): Fermentacija jogurta s probioticima potpomognuta ultrazvukom.
Razaranje bakterijskih ćelija i oslobađanje ß-galaktozidaze iz sojeva bifidobakterija: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46): 100 mL pasteriziranog mlijeka pomiješanog s bakterijskom kulturom izloženo je ultrazvuku. Kavitacija uzrokuje razaranje bakterijskih ćelija i istovremeno oslobađanje ß-galaktozidaze.
Preporučeni uređaj:
UIP1000hd: amplituda: 10%, snaga: 80W, amplituda: 100%, snaga: 200W; sonotroda BS2d34; 15-30 min.
Referenca / istraživački rad:
Hung et al. (2009): Fermentacija jogurta s probioticima potpomognuta ultrazvukom.
Ćelije BL21(DE3) pAtHNL (ćelije Arabidopsis thaliana)
Ultrazvučna primjena:
Razgradnja ćelija: 15 g ćelija BL21-(DE3)_pAtHNL polako je suspendirano u 50 mM kalijum-fosfatnom puferu (pH 7,5) na 0 degC.
Preporučeni uređaj:
UP200S + sonotroda S14D: pri 70W/cm2 (4 x 5 min), hlađeno u ledenoj kupelji
Referenca / istraživački rad:
Okrob, D. et al (2009): Hidroksinitril-liaza iz Arabidopsis thaliana: određivanje reakcijskih parametara za sintezu enantiopurnog cijanohidrina čistim i imobiliziranim katalizatorom. Adv. Synth. Catal. 2011, 353, 2399 – 2408.
Razgradnja ćelija: 15 g ćelija BL21-(DE3)_pAtHNL polako je suspendirano u 50 mM kalijum-fosfatnom puferu (pH 7,5) na 0 degC.
Preporučeni uređaj:
UP200S + sonotroda S14D: pri 70W/cm2 (4 x 5 min), hlađeno u ledenoj kupelji
Referenca / istraživački rad:
Okrob, D. et al (2009): Hidroksinitril-liaza iz Arabidopsis thaliana: određivanje reakcijskih parametara za sintezu enantiopurnog cijanohidrina čistim i imobiliziranim katalizatorom. Adv. Synth. Catal. 2011, 353, 2399 – 2408.
Krvne ćelije (crvene i bijele)
Boldin iz listova bolda (Peumus boldus Molina)
Ultrazvučna primjena:
Važan aktivni spoj u boldu je boldin ((S)-2,9-dihidroksi-1,10-dimetoksiaporfin), koji je pored katehina ((2S,3R)-2-(3,4-dihidroksifenil)-3,4-dihidro-1(2H)-benzopiran-3,5,7-triol) glavna komponenta alkaloidne i flavonoidne frakcije u listovima bolda. Boldin je snažno antioksidativno sredstvo koje podliježe peroksidativnom oštećenju posredovanom slobodnim radikalima i djeluje kao efikasan hvatač hidroksilnih radikala.
Postupak ekstrakcije: Za tipičan postupak ekstrakcije, uzorci listova bolda ekstrahirani su s 1L destilirane vode pri atmosferskom tlaku pomoću ultrazvučnog uređaja UIP1000hd u šaržnom i protočnom načinu rada. Vrijeme ekstrakcije kreće se između 10 i 40 min., uz ultrazvučni intenzitet od 10 do 23 W/cm2, te temperaturni raspon od 10 do 70°C. Najbolji rezultati postignuti su pod sljedećim uvjetima: ultrazvučni intenzitet od 23 W/cm2 tokom 40 min. na temperaturi od 36°C
Rezultati: Rezultati analize pokazuju da ultrazvučna obrada velike snage znatno povećava stopu oslobađanja analita iz biljne matrice bolda u poređenju s konvencionalnom metodom: jednak prinos oslobođen je ultrazvučnom obradom za 30 min., dok je vrijeme konvencionalne ekstrakcije bilo 2h.
Chemat (2013) i saradnici pokazali su da ultrazvukom potpomognuta ekstrakcija poboljšava efikasnost ekstrakcije biljaka uz skraćenje vremena ekstrakcije pri povećanoj koncentraciji ekstrakata (ista količina otapala i biljnog materijala). Analiza je pokazala da su optimizirani uvjeti bili: ultrazvučna snaga 23 W/cm2 s UIP1000hd tokom 40 min. i temperatura od 36°C. Optimizirani parametri ultrazvučne ekstrakcije daju bolju ekstrakciju u odnosu na konvencionalnu maceraciju u pogledu trajanja procesa (30 min. umjesto 120 min.), većeg prinosa, veće energetske efikasnosti, bolje čistoće, veće sigurnosti i bolje kvalitete proizvoda.
Preporučeni uređaj:
UIP1000hd sa sonotrodom BS2d34 i protočnom ćelijom
Referenca / istraživački rad:
Petigny, L.; Périno-Issartier, S.; Wajsman, J.; Chemat, F. (2013): Šaržna i kontinuirana ultrazvukom potpomognuta ekstrakcija listova bolda (Peumus boldus Mol.). Međunarodni časopis za molekularnu nauku 14, 2013. 5750-5764.
Važan aktivni spoj u boldu je boldin ((S)-2,9-dihidroksi-1,10-dimetoksiaporfin), koji je pored katehina ((2S,3R)-2-(3,4-dihidroksifenil)-3,4-dihidro-1(2H)-benzopiran-3,5,7-triol) glavna komponenta alkaloidne i flavonoidne frakcije u listovima bolda. Boldin je snažno antioksidativno sredstvo koje podliježe peroksidativnom oštećenju posredovanom slobodnim radikalima i djeluje kao efikasan hvatač hidroksilnih radikala.
Postupak ekstrakcije: Za tipičan postupak ekstrakcije, uzorci listova bolda ekstrahirani su s 1L destilirane vode pri atmosferskom tlaku pomoću ultrazvučnog uređaja UIP1000hd u šaržnom i protočnom načinu rada. Vrijeme ekstrakcije kreće se između 10 i 40 min., uz ultrazvučni intenzitet od 10 do 23 W/cm2, te temperaturni raspon od 10 do 70°C. Najbolji rezultati postignuti su pod sljedećim uvjetima: ultrazvučni intenzitet od 23 W/cm2 tokom 40 min. na temperaturi od 36°C
Rezultati: Rezultati analize pokazuju da ultrazvučna obrada velike snage znatno povećava stopu oslobađanja analita iz biljne matrice bolda u poređenju s konvencionalnom metodom: jednak prinos oslobođen je ultrazvučnom obradom za 30 min., dok je vrijeme konvencionalne ekstrakcije bilo 2h.
Chemat (2013) i saradnici pokazali su da ultrazvukom potpomognuta ekstrakcija poboljšava efikasnost ekstrakcije biljaka uz skraćenje vremena ekstrakcije pri povećanoj koncentraciji ekstrakata (ista količina otapala i biljnog materijala). Analiza je pokazala da su optimizirani uvjeti bili: ultrazvučna snaga 23 W/cm2 s UIP1000hd tokom 40 min. i temperatura od 36°C. Optimizirani parametri ultrazvučne ekstrakcije daju bolju ekstrakciju u odnosu na konvencionalnu maceraciju u pogledu trajanja procesa (30 min. umjesto 120 min.), većeg prinosa, veće energetske efikasnosti, bolje čistoće, veće sigurnosti i bolje kvalitete proizvoda.
Preporučeni uređaj:
UIP1000hd sa sonotrodom BS2d34 i protočnom ćelijom
Referenca / istraživački rad:
Petigny, L.; Périno-Issartier, S.; Wajsman, J.; Chemat, F. (2013): Šaržna i kontinuirana ultrazvukom potpomognuta ekstrakcija listova bolda (Peumus boldus Mol.). Međunarodni časopis za molekularnu nauku 14, 2013. 5750-5764.
Goveđi serumski albumin (BSA)
Ultrazvučna primjena:
Mikroenkapsulacija u poli(mliječno-ko-glikolnu kiselinu) za 40 sek.
Preporučeni uređaj:
GDmini
Referenca / istraživački rad:
Freitas et al. (2005): Protočno ultrazvučno emulgiranje u kombinaciji sa statičkim mikromiješanjem za aseptičnu proizvodnju mikrosfera ekstrakcijom otapalom.
Mikroenkapsulacija u poli(mliječno-ko-glikolnu kiselinu) za 40 sek.
Preporučeni uređaj:
GDmini
Referenca / istraživački rad:
Freitas et al. (2005): Protočno ultrazvučno emulgiranje u kombinaciji sa statičkim mikromiješanjem za aseptičnu proizvodnju mikrosfera ekstrakcijom otapalom.
Moždano stablo + nadbubrežna žlijezda
Ultrazvučna primjena:
Disperzija i analiza nukleotida; veličina uzorka: 10 mg uzoraka u 10 ml tekućine.
Preporučeni uređaj:
UP50H
Disperzija i analiza nukleotida; veličina uzorka: 10 mg uzoraka u 10 ml tekućine.
Preporučeni uređaj:
UP50H
Candida albicans
Ugljikohidrati, polisaharidi i drugi funkcionalni spojevi
Ultrazvučna primjena:
Ekstrakcija ugljikohidrata, polisaharida i drugih funkcionalnih spojeva
Preporučeni uređaj:
UP200St
Ekstrakcija ugljikohidrata, polisaharida i drugih funkcionalnih spojeva
Preporučeni uređaj:
UP200St
Karnozinska kiselina iz ružmarina
Ultrazvučna primjena:
Ekstrakcija karnosne kiseline, aktivnog spoja, iz ruzmarina.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Ekstrakcija karnosne kiseline, aktivnog spoja, iz ruzmarina.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Kapsaicinoidi
Ultrazvučna primjena:
Ekstrakcija kapsaicinoida (kapsaicin, nordihidrokapsaicin) iz čili papričica: kapsaicinoidi iz paprika vrste Capsicum frutescens dobiveni su ultrazvučnom ekstrakcijom pod sljedećim uvjetima: otapalo: 95% (v/v) etanol, omjer otapala i mase 10 ml/g, 40 min. trajanje ultrazvučne ekstrakcije, temperatura ekstrakcije 45°C. Prinos ekstrakta: 85% kapsaicinoida
Preporučeni uređaj:
UP400S
Ekstrakcija kapsaicinoida (kapsaicin, nordihidrokapsaicin) iz čili papričica: kapsaicinoidi iz paprika vrste Capsicum frutescens dobiveni su ultrazvučnom ekstrakcijom pod sljedećim uvjetima: otapalo: 95% (v/v) etanol, omjer otapala i mase 10 ml/g, 40 min. trajanje ultrazvučne ekstrakcije, temperatura ekstrakcije 45°C. Prinos ekstrakta: 85% kapsaicinoida
Preporučeni uređaj:
UP400S
Karotenoidi, beta-karotenoidi
cDNA
Ultrazvučna primjena:
Poli-A RNK pročišćena je kitom za pročišćavanje mRNK Dynabeads (Invitrogen) prema uputama proizvođača i tretirana 30 min na 37°C enzimom TURBO DNase (Ambion; 0,2 jedinice/1 μg RNK). Sinteza prvog i drugog lanca provedena je prema protokolu proizvođača. Oko 500ng dvolančane cDNK fragmentirano je ultrazvučnom obradom uređajem tvrtke Hielscher UTR200. DNK je razdvojena u 2% agaroznom gelu visoke rezolucije, a fragmenti od 230–270 bp su izrezani.
Preporučeni uređaj:
UTR200 ili TD_CupHorn
Referenca / istraživački rad:
Delft, J. van; Gaj, St.; Lienhard,M.; Albrecht, M. W.; Kirpiy, A.; Brauers, K.; Claessen, S.; Lizarraga, D.; Lehrach, H.; Herwig, R.; Kleinjans, J. (2012): RNA-Seq pruža nove uvide u odgovore transkriptoma izazvane karcinogenom benzo[a]pirenom. Toxicological Sciences 130/2, 2012. 427–439.
Poli-A RNK pročišćena je kitom za pročišćavanje mRNK Dynabeads (Invitrogen) prema uputama proizvođača i tretirana 30 min na 37°C enzimom TURBO DNase (Ambion; 0,2 jedinice/1 μg RNK). Sinteza prvog i drugog lanca provedena je prema protokolu proizvođača. Oko 500ng dvolančane cDNK fragmentirano je ultrazvučnom obradom uređajem tvrtke Hielscher UTR200. DNK je razdvojena u 2% agaroznom gelu visoke rezolucije, a fragmenti od 230–270 bp su izrezani.
Preporučeni uređaj:
UTR200 ili TD_CupHorn
Referenca / istraživački rad:
Delft, J. van; Gaj, St.; Lienhard,M.; Albrecht, M. W.; Kirpiy, A.; Brauers, K.; Claessen, S.; Lizarraga, D.; Lehrach, H.; Herwig, R.; Kleinjans, J. (2012): RNA-Seq pruža nove uvide u odgovore transkriptoma izazvane karcinogenom benzo[a]pirenom. Toxicological Sciences 130/2, 2012. 427–439.
Caryophanon latum
Ultrazvučna primjena:
Ekstrakcija glukozamina, muraminske kiseline, alanina, glutaminske kiseline i lizina iz caryophanon datum.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Ekstrakcija glukozamina, muraminske kiseline, alanina, glutaminske kiseline i lizina iz caryophanon datum.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Celuloza
Ultrazvučna primjena:
Homogenizacija / priprema izotopski homogene celuloze.
Preporučeni uređaj:
UP200S; u ledenoj kupelji
Referenca / istraživački rad:
Laumer et al. (2009): Novi pristup homogenizaciji celuloze radi upotrebe mikrokoličina za analize stabilnih izotopa.
Homogenizacija / priprema izotopski homogene celuloze.
Preporučeni uređaj:
UP200S; u ledenoj kupelji
Referenca / istraživački rad:
Laumer et al. (2009): Novi pristup homogenizaciji celuloze radi upotrebe mikrokoličina za analize stabilnih izotopa.
Nanokristali celuloze (CNC) pripremljeni od nanokristala celuloze eukaliptusa
Ultrazvučna primjena:
Celulozni nanokristali (CNC) pripremljeni iz eukaliptusove celuloze modificirani su reakcijom s metil-adipoil-hloridom, CNCm, ili smjesom octene i sumporne kiseline, CNCa. U tu svrhu, liofilizirani CNC, CNCm i CNCa ponovno su dispergirani u čistim otapalima (EA, THF ili DMF) pri 0,1 wt%, magnetnim miješanjem preko noći na (24 ± 1) C, nakon čega je slijedilo 20 min u ultrazvučnoj kupelji pomoću UP100H Hielscher Ultrasonics (Njemačka), opremljenog sonotrodom od 130 W/cm2, na 24 ± 1 degC. Nakon toga je CAB dodan u disperziju CNC, tako da je konačna koncentracija polimera iznosila 0,9 wt%.
Preporučeni uređaj:
UP100H; na 24 degC tokom 20 min.
Referenca / istraživački rad:
Blachechen, L. S. et al (2013): Međudjelovanje koloidne stabilnosti celuloznih nanokristala i njihove dispergibilnosti u matrici celuloznog acetat-butirata. Cellulose 2013.
Celulozni nanokristali (CNC) pripremljeni iz eukaliptusove celuloze modificirani su reakcijom s metil-adipoil-hloridom, CNCm, ili smjesom octene i sumporne kiseline, CNCa. U tu svrhu, liofilizirani CNC, CNCm i CNCa ponovno su dispergirani u čistim otapalima (EA, THF ili DMF) pri 0,1 wt%, magnetnim miješanjem preko noći na (24 ± 1) C, nakon čega je slijedilo 20 min u ultrazvučnoj kupelji pomoću UP100H Hielscher Ultrasonics (Njemačka), opremljenog sonotrodom od 130 W/cm2, na 24 ± 1 degC. Nakon toga je CAB dodan u disperziju CNC, tako da je konačna koncentracija polimera iznosila 0,9 wt%.
Preporučeni uređaj:
UP100H; na 24 degC tokom 20 min.
Referenca / istraživački rad:
Blachechen, L. S. et al (2013): Međudjelovanje koloidne stabilnosti celuloznih nanokristala i njihove dispergibilnosti u matrici celuloznog acetat-butirata. Cellulose 2013.
Celuloza iz bagase šećerne trske
ChIP analiza
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna obrada koristi se za lizu ćelija radi oslobađanja kromatina. Blaga (pulsna) ultrazvučna obrada koristi se za fragmentaciju kromatina. Osim toga, ultrazvuk ubrzava brzinu vezanja antitijela za ciljne proteine i time skraćuje vrijeme imunoprecipitacije.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Basselet, P. et al. (2008): Priprema uzoraka za analizu enterohemoragijske Escherichia coli (EHEC) zasnovanu na DNK čipovima.
Lauri, A. (2005): Molekularna analiza razvoja latica pomoću X-ChIP i dvohibridne tehnologije. Dissertation University of Cologne 2005.
Ultrazvučna obrada koristi se za lizu ćelija radi oslobađanja kromatina. Blaga (pulsna) ultrazvučna obrada koristi se za fragmentaciju kromatina. Osim toga, ultrazvuk ubrzava brzinu vezanja antitijela za ciljne proteine i time skraćuje vrijeme imunoprecipitacije.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Basselet, P. et al. (2008): Priprema uzoraka za analizu enterohemoragijske Escherichia coli (EHEC) zasnovanu na DNK čipovima.
Lauri, A. (2005): Molekularna analiza razvoja latica pomoću X-ChIP i dvohibridne tehnologije. Dissertation University of Cologne 2005.
Hromatin
Ultrazvučna primjena:
Smicanje kromatina
Preporučeni uređaj:
UP400S; pri 30% amplitude i ciklusu 0,5; na ledu.
Referenca / istraživački rad:
Oh et al. (2003): Gen za acetil-CoA karboksilazu reguliran je proteinom 1 koji veže regulatorni element sterola u jetri.
Smicanje kromatina
Preporučeni uređaj:
UP400S; pri 30% amplitude i ciklusu 0,5; na ledu.
Referenca / istraživački rad:
Oh et al. (2003): Gen za acetil-CoA karboksilazu reguliran je proteinom 1 koji veže regulatorni element sterola u jetri.
Ekstrakcija hromatina
Ultrazvučna primjena:
Lizat ćelija MEL DS19 ultrazvučno je obrađen u 10 ciklusa od po 20 s pri 70% maksimalne izlazne snage pomoću Hielscher ultrazvučnog procesora UP200H od 200W
Preporučeni uređaj:
UP200H; 70% maksimalne izlazne snage; pulsni način rada: 10 ciklusa od po 20 sek.
Referenca / istraživački rad:
Kang, H. Ch. et al (2010): PIAS1 regulira lokalizaciju CP2c i formiranje aktivnog promotorskog kompleksa u ekspresiji a-globina specifičnoj za eritroidne ćelije. Nucleic Acids Res. 38/ 16, 2010. pp. 5456–5471.
Lizat ćelija MEL DS19 ultrazvučno je obrađen u 10 ciklusa od po 20 s pri 70% maksimalne izlazne snage pomoću Hielscher ultrazvučnog procesora UP200H od 200W
Preporučeni uređaj:
UP200H; 70% maksimalne izlazne snage; pulsni način rada: 10 ciklusa od po 20 sek.
Referenca / istraživački rad:
Kang, H. Ch. et al (2010): PIAS1 regulira lokalizaciju CP2c i formiranje aktivnog promotorskog kompleksa u ekspresiji a-globina specifičnoj za eritroidne ćelije. Nucleic Acids Res. 38/ 16, 2010. pp. 5456–5471.
Hromatografija
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna obrada adsorbenta u otapalu eliminira aglomerate u roku od nekoliko sekundi i priprema ujednačenu, lako pakujuću kolonu. Relevantno za pripremu adsorbenta (npr. silika-gela) prije kolonske hromatografije.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Ultrazvučna obrada adsorbenta u otapalu eliminira aglomerate u roku od nekoliko sekundi i priprema ujednačenu, lako pakujuću kolonu. Relevantno za pripremu adsorbenta (npr. silika-gela) prije kolonske hromatografije.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Rašljoticalci
Ultrazvučna primjena:
Razgradnja ćelija mezozooplanktona
Preporučeni uređaj:
UP2000hd s protočnom ćelijom
Referenca / istraživački rad:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraljubičasto svjetlo, ultrazvuk i vodikov peroksid kao tretmani balastnih voda – eksperimenti s mezozooplanktonom u slabo slanoj bočatoj vodi.
Razgradnja ćelija mezozooplanktona
Preporučeni uređaj:
UP2000hd s protočnom ćelijom
Referenca / istraživački rad:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraljubičasto svjetlo, ultrazvuk i vodikov peroksid kao tretmani balastnih voda – eksperimenti s mezozooplanktonom u slabo slanoj bočatoj vodi.
Odrasli kopepodi i kopepoditi
Ultrazvučna primjena:
Razgradnja ćelija mezozooplanktona: ultrazvučnom obradom pri sljedećim uvjetima od četiri protoka (200, 400, 520 i 800 lh-1) i četiri amplitude (25, 50, 75 i 100%) postignuta je stopa uništavanja između 87 i 99%.
Preporučeni uređaj:
UIP2000hd s protočnom ćelijom
Referenca / istraživački rad:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraljubičasto svjetlo, ultrazvuk i vodikov peroksid kao tretmani balastnih voda – eksperimenti s mezozooplanktonom u slabo slanoj bočatoj vodi.
Razgradnja ćelija mezozooplanktona: ultrazvučnom obradom pri sljedećim uvjetima od četiri protoka (200, 400, 520 i 800 lh-1) i četiri amplitude (25, 50, 75 i 100%) postignuta je stopa uništavanja između 87 i 99%.
Preporučeni uređaj:
UIP2000hd s protočnom ćelijom
Referenca / istraživački rad:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraljubičasto svjetlo, ultrazvuk i vodikov peroksid kao tretmani balastnih voda – eksperimenti s mezozooplanktonom u slabo slanoj bočatoj vodi.
Naupliji kopepoda
Ultrazvučna primjena:
Razgradnja ćelija mezozooplanktona: ultrazvučnom obradom pri sljedećim uvjetima od četiri protoka (200, 400, 520 i 800 lh-1) i četiri amplitude (25, 50, 75 i 100%) postignuta je stopa uništavanja između 87 i 99%.
Preporučeni uređaj:
UIP2000hd s protočnom ćelijom
Referenca / istraživački rad:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraljubičasto svjetlo, ultrazvuk i vodikov peroksid kao tretmani balastnih voda – eksperimenti s mezozooplanktonom u slabo slanoj bočatoj vodi.
Razgradnja ćelija mezozooplanktona: ultrazvučnom obradom pri sljedećim uvjetima od četiri protoka (200, 400, 520 i 800 lh-1) i četiri amplitude (25, 50, 75 i 100%) postignuta je stopa uništavanja između 87 i 99%.
Preporučeni uređaj:
UIP2000hd s protočnom ćelijom
Referenca / istraživački rad:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraljubičasto svjetlo, ultrazvuk i vodikov peroksid kao tretmani balastnih voda – eksperimenti s mezozooplanktonom u slabo slanoj bočatoj vodi.
Ćelije COS7
Ultrazvučna primjena:
Liza u 400 μl pufera
Preporučeni uređaj:
UP200S; 7 ciklusa
Referenca / istraživački rad:
Zaim (2005): Analiza miševa s deficitom nesprina-2.
Liza u 400 μl pufera
Preporučeni uređaj:
UP200S; 7 ciklusa
Referenca / istraživački rad:
Zaim (2005): Analiza miševa s deficitom nesprina-2.
Cryptosporidium parvum
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna inaktivacija Cryptosporidium parvaum (protozoa) u vodi.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Referenca / istraživački rad:
Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivacija Saccharomyces cerevisiae ultrazvučnim zračenjem. Ultrasonics Sonochemistry 11/2004. pp. 61–65.
Ultrazvučna inaktivacija Cryptosporidium parvaum (protozoa) u vodi.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Referenca / istraživački rad:
Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivacija Saccharomyces cerevisiae ultrazvučnim zračenjem. Ultrasonics Sonochemistry 11/2004. pp. 61–65.
Kubosomi
Ultrazvučna primjena:
Kubosomi – prazni ili dopirani molekulama fluorofora – pripremljeni su dispergiranjem odgovarajuće količine monoolena u rastvoru Pluronic F108 pomoću ultrazvučnog uređaja UP100H. Za dobivanje fluorescentnih kubosoma, fluorofor je dispergiran u rastopljenom monoolenu blagom sonikacijom prije dispergiranja u Pluronic F108. Isti postupak primijenjen je kada su fluorescentni kubosomi dodatno napunjeni kvercetinom.
Uzorak: veličina uzorka: 4 mL – približno 96,4 wt% vode, 3,3 wt % monoolena, 0,3 wt% Pluronic F108. Postotak fluorofora bio je 2,5 × 10−3 i 2,8 × 10−3 wt%. Količina dodanog kvercetina: 6,4 × 10−6 wt%.
Ultrazvučna obrada: UP100H, amplituda 90%, pulsni ciklus 0,9, tokom 10 min.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Murgia, S.; Bonacchi,S.; Falchi, A. M.; Lampis, S.; Lippolis, V.; Meli, V.; Monduzzi, M.; Prodi, L.; Schmidt, J.; Talmon, Y.; Caltagirone, C. (2013): Fluorescentni kubosomi napunjeni lijekom: svestrane nanočestice za potencijalne teranostičke primjene. Langmuir 29, 2013. 6673-6679.
Kubosomi – prazni ili dopirani molekulama fluorofora – pripremljeni su dispergiranjem odgovarajuće količine monoolena u rastvoru Pluronic F108 pomoću ultrazvučnog uređaja UP100H. Za dobivanje fluorescentnih kubosoma, fluorofor je dispergiran u rastopljenom monoolenu blagom sonikacijom prije dispergiranja u Pluronic F108. Isti postupak primijenjen je kada su fluorescentni kubosomi dodatno napunjeni kvercetinom.
Uzorak: veličina uzorka: 4 mL – približno 96,4 wt% vode, 3,3 wt % monoolena, 0,3 wt% Pluronic F108. Postotak fluorofora bio je 2,5 × 10−3 i 2,8 × 10−3 wt%. Količina dodanog kvercetina: 6,4 × 10−6 wt%.
Ultrazvučna obrada: UP100H, amplituda 90%, pulsni ciklus 0,9, tokom 10 min.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Murgia, S.; Bonacchi,S.; Falchi, A. M.; Lampis, S.; Lippolis, V.; Meli, V.; Monduzzi, M.; Prodi, L.; Schmidt, J.; Talmon, Y.; Caltagirone, C. (2013): Fluorescentni kubosomi napunjeni lijekom: svestrane nanočestice za potencijalne teranostičke primjene. Langmuir 29, 2013. 6673-6679.
Dekkera bruxellensis
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna inaktivacija Dekkera bruxellensis u vodi
Preporučeni uređaj:
UIP1500hd
Referenca / istraživački rad:
Borthwick, K. A. J.; Coakley, W. T.; McDonnell, M. B.; Nowotny, H.; Benes, E.; Grfschl, .M (2005): Razvoj novog kompaktnog sonikatora za razgradnju ćelija. J. Microbio. Meths. 60/2005. pp. 207–216. / Lörincz, A. (2004): Ultrazvučna razgradnja ćelija kvasca u suspenzijama na bazi vode. Biosys. Eng. 89/ 2004. pp. 297–308. / Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivacija Saccharomyces cerevisiae ultrazvučnim zračenjem. Ultrason. Sonochem. 11/2004. pp. 61–65.
Ultrazvučna inaktivacija Dekkera bruxellensis u vodi
Preporučeni uređaj:
UIP1500hd
Referenca / istraživački rad:
Borthwick, K. A. J.; Coakley, W. T.; McDonnell, M. B.; Nowotny, H.; Benes, E.; Grfschl, .M (2005): Razvoj novog kompaktnog sonikatora za razgradnju ćelija. J. Microbio. Meths. 60/2005. pp. 207–216. / Lörincz, A. (2004): Ultrazvučna razgradnja ćelija kvasca u suspenzijama na bazi vode. Biosys. Eng. 89/ 2004. pp. 297–308. / Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivacija Saccharomyces cerevisiae ultrazvučnim zračenjem. Ultrason. Sonochem. 11/2004. pp. 61–65.
Dekkera/Brettanomyces bruxellensis
Ultrazvučna primjena:
Inaktivacija za 90-120 sek.
Preporučeni uređaj:
UIP1500hd
Referenca / istraživački rad:
vidi gore
Inaktivacija za 90-120 sek.
Preporučeni uređaj:
UIP1500hd
Referenca / istraživački rad:
vidi gore
DNK
Ultrazvučna primjena:
Fragmentacija DNK: 2 min. ultrazvučne obrade 100μL uređajem UP100H ili 4 min. ultrazvučne obrade 100μL uređajem UTR200.
Preporučeni uređaj:
UP100H, UTR200 ili VialTweeter
Referenca / istraživački rad:
Larguinho M. et al. (2010): Razvoj brze i efikasne strategije fragmentacije DNK zasnovane na ultrazvuku.
Fragmentacija DNK: 2 min. ultrazvučne obrade 100μL uređajem UP100H ili 4 min. ultrazvučne obrade 100μL uređajem UTR200.
Preporučeni uređaj:
UP100H, UTR200 ili VialTweeter
Referenca / istraživački rad:
Larguinho M. et al. (2010): Razvoj brze i efikasne strategije fragmentacije DNK zasnovane na ultrazvuku.
Ćelije S2 vrste Drosophila melanogaster
Ultrazvučna primjena:
Ekstrakcija ćelijskih proteina iz ćelija Drosophila melanogaster S2: Zamrznute S2 ćelije (1,56108) lizirane su u 1 mL ledeno hladnog pufera za homogenizaciju (100 mM Tris-HCl pH 7,5, 1% SDS) i ostavljene na ledu 10 min. Liza ćelija završena je ultrazvučnom obradom na ledu (6615 impulsa, puls od 0,5 s; intenzitet 75%) pomoću Hielscher ultrazvučnog procesora UP200S.
Preporučeni uređaj:
UP200S (200W), intenzitet 75%; pulsni način rada: 6615 impulsa, puls od 0,5 s.
Referenca / istraživački rad:
Schwientek, T. et al. (2007): Serijski lektinski pristup O-glikoproteomu mucinskog tipa ćelija Drosophila melanogaster S2. Proteomics 7, 2007. pp. 3264-3277.
Ekstrakcija ćelijskih proteina iz ćelija Drosophila melanogaster S2: Zamrznute S2 ćelije (1,56108) lizirane su u 1 mL ledeno hladnog pufera za homogenizaciju (100 mM Tris-HCl pH 7,5, 1% SDS) i ostavljene na ledu 10 min. Liza ćelija završena je ultrazvučnom obradom na ledu (6615 impulsa, puls od 0,5 s; intenzitet 75%) pomoću Hielscher ultrazvučnog procesora UP200S.
Preporučeni uređaj:
UP200S (200W), intenzitet 75%; pulsni način rada: 6615 impulsa, puls od 0,5 s.
Referenca / istraživački rad:
Schwientek, T. et al. (2007): Serijski lektinski pristup O-glikoproteomu mucinskog tipa ćelija Drosophila melanogaster S2. Proteomics 7, 2007. pp. 3264-3277.
Derivati E. coli
Ultrazvučna primjena:
Razgradnja ćelija derivata E. coli: Zamrznuti peleti koji odgovaraju volumenu uzorka Vculture = 4/OD mL resuspendirani su u 580 μL 10 mM kalijum-fosfatnog pufera pH 7, 1 mM EDTA. Dodano je 20 μL lizozima (koncentracija 1 g L-1), a suspenzija ćelija inkubirana je na ledu oko 30 min. Nakon toga su ćelije razgrađene kontinuiranom ultrazvučnom obradom ultrazvučnim uređajem (UP 200S Ultraschallprozessor, Dr. Hielscher GmbH, Teltow) na ledu, pri amplitudi od 50 % tokom 20 sek. Topljive i netopljive frakcije ćelija razdvojene su centrifugiranjem pri 13.000 rpm tokom 20 min. Netopljivi proteini dvaput su isprani 10 mM kalijum-fosfatnim puferom pH 7, 1 mM EDTA i pohranjeni na –20°C.
Preporučeni uređaj:
UP200S s 50% amplitude
Referenca / istraživački rad:
HA (2005): Optimizacija proizvodnje aktivnog rekombinantnog proteina, istraživanje utjecaja malih proteina toplotnog šoka Escherichia coli, IbpA i IbpB, na reaktivaciju inkluzijskih tijela in vivo.
Razgradnja ćelija derivata E. coli: Zamrznuti peleti koji odgovaraju volumenu uzorka Vculture = 4/OD mL resuspendirani su u 580 μL 10 mM kalijum-fosfatnog pufera pH 7, 1 mM EDTA. Dodano je 20 μL lizozima (koncentracija 1 g L-1), a suspenzija ćelija inkubirana je na ledu oko 30 min. Nakon toga su ćelije razgrađene kontinuiranom ultrazvučnom obradom ultrazvučnim uređajem (UP 200S Ultraschallprozessor, Dr. Hielscher GmbH, Teltow) na ledu, pri amplitudi od 50 % tokom 20 sek. Topljive i netopljive frakcije ćelija razdvojene su centrifugiranjem pri 13.000 rpm tokom 20 min. Netopljivi proteini dvaput su isprani 10 mM kalijum-fosfatnim puferom pH 7, 1 mM EDTA i pohranjeni na –20°C.
Preporučeni uređaj:
UP200S s 50% amplitude
Referenca / istraživački rad:
HA (2005): Optimizacija proizvodnje aktivnog rekombinantnog proteina, istraživanje utjecaja malih proteina toplotnog šoka Escherichia coli, IbpA i IbpB, na reaktivaciju inkluzijskih tijela in vivo.
Antigen vrste Echinococcus granulosus
Ultrazvučna primjena:
Liza i dezintegracija ćelija: Homogenizirani uzorak topljivog proteina zrelog E. granulosus, pripremljen zamrzavanjem i odmrzavanjem u tekućem azotu i na 42◦C, ultrazvučno je obrađen pri 110V, 170W 3×15 sek na ledu. Nakon toga je uzorak centrifugiran 15min pri 10.000g. Koncentracija proteina izmjerena je Bradfordovom metodom, a uzorak je pohranjen na -20◦C.
Preporučeni uređaj:
UP200S; 170W, hlađenje na ledu; 3 x 15 sek.
Referenca / istraživački rad:
Tabar et al. (2010): Serodijagnostika hidatidoze ovaca hidatidnom tekućinom, protoskoleksom i cijelim tijelom antigena Echinococcus granulosus.
Liza i dezintegracija ćelija: Homogenizirani uzorak topljivog proteina zrelog E. granulosus, pripremljen zamrzavanjem i odmrzavanjem u tekućem azotu i na 42◦C, ultrazvučno je obrađen pri 110V, 170W 3×15 sek na ledu. Nakon toga je uzorak centrifugiran 15min pri 10.000g. Koncentracija proteina izmjerena je Bradfordovom metodom, a uzorak je pohranjen na -20◦C.
Preporučeni uređaj:
UP200S; 170W, hlađenje na ledu; 3 x 15 sek.
Referenca / istraživački rad:
Tabar et al. (2010): Serodijagnostika hidatidoze ovaca hidatidnom tekućinom, protoskoleksom i cijelim tijelom antigena Echinococcus granulosus.
Escherichia coli Gr-
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna inaktivacija Escherchia coli Gr- u mlijeku i sokovima.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Primjena termičke obrade potpomognute ultrazvukom za očuvanje i zadržavanje kvalitete tekućih namirnica. J Food Prot 66/2003. pp. 1642–1649.
Ultrazvučna inaktivacija Escherchia coli Gr- u mlijeku i sokovima.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Primjena termičke obrade potpomognute ultrazvukom za očuvanje i zadržavanje kvalitete tekućih namirnica. J Food Prot 66/2003. pp. 1642–1649.
Escherichia coli Gr- u fiziološkoj otopini
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna inaktivacija Escherchia coli Gr- u fiziološkom rastvoru.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Duckhouse, H.; Mason, T. J.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P. (2004): Učinak ultrazvučne obrade na mikrobiološku dezinfekciju hipokloritom. Ultrason. Sonochem. 11/ 2004. pp. 173–176.
Ultrazvučna inaktivacija Escherchia coli Gr- u fiziološkom rastvoru.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Duckhouse, H.; Mason, T. J.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P. (2004): Učinak ultrazvučne obrade na mikrobiološku dezinfekciju hipokloritom. Ultrason. Sonochem. 11/ 2004. pp. 173–176.
Escherichia coli Gr- u vodi
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna inaktivacija Escherchia coli Gr- u vodi.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Furuta, M.; Yamaguchi, M.; Tsukamoto, T.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Hasiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivacija Escherichia coli ultrazvučnim zračenjem. Ultrason. Sonochem. 11/2004. pp. 57–60.
Ultrazvučna inaktivacija Escherchia coli Gr- u vodi.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Furuta, M.; Yamaguchi, M.; Tsukamoto, T.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Hasiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivacija Escherichia coli ultrazvučnim zračenjem. Ultrason. Sonochem. 11/2004. pp. 57–60.
Glaukom, glava vidnog živca
Ultrazvučna primjena:
Fragmentacija RNK optičkih nervnih glava (iz očiju štakora): Optička nervna glava (ONH) zamrznuta je na suhom ledu i pohranjena na 80°C prije ekstrakcije. RNK je izolirana ultrazvučnom obradom zamrznutih nervnih glava u ekstrakcijskom puferu kita pomoću sonde MS 0.5 (UP50H), a zatim prema uputama koje daje kit Arcturus, uključujući tretman DNazom radi uklanjanja svake DNK. Pročišćena RNK je kvantificirana.
Preporučeni uređaj:
UP50H sa sondom MS0.5
Referenca / istraživački rad:
Johnson et al. (2007): Globalne promjene u ekspresiji gena glave optičkog živca nakon izlaganja povišenom intraokularnom tlaku u modelu glaukoma kod štakora.
Fragmentacija RNK optičkih nervnih glava (iz očiju štakora): Optička nervna glava (ONH) zamrznuta je na suhom ledu i pohranjena na 80°C prije ekstrakcije. RNK je izolirana ultrazvučnom obradom zamrznutih nervnih glava u ekstrakcijskom puferu kita pomoću sonde MS 0.5 (UP50H), a zatim prema uputama koje daje kit Arcturus, uključujući tretman DNazom radi uklanjanja svake DNK. Pročišćena RNK je kvantificirana.
Preporučeni uređaj:
UP50H sa sondom MS0.5
Referenca / istraživački rad:
Johnson et al. (2007): Globalne promjene u ekspresiji gena glave optičkog živca nakon izlaganja povišenom intraokularnom tlaku u modelu glaukoma kod štakora.
Glikozaminoglikan hondroitin sulfat (CS)
Ultrazvučna primjena:
Određivanje CS testom s dimetilmetilen-plavim
Resuspenzija ćelija: peleti CS u mikrocentrifugalnim epruvetama resuspendirani su u 0,5 ml rastvora papaina od 0,1mg/ml u Hankovom uravnoteženom slanom rastvoru (HBSS) pomoću impulsa ultrazvučnog sonotrode (UP 100H, Hielscher Ultrasonics GmbH, Njemačka) pri ciklusu 1 i 100 % amplitude tokom 3 sek. Nakon toga je probava trajala na 60 °C tokom 24 h.
Za imunoenzimski test (ELISA), ćelije su zatim suspendirane u destiliranoj i deioniziranoj vodi pri koncentraciji od 106 ćelija/ml i držane u zamrzivaču na –70°C preko noći radi lakše lize ćelija. Ćelije su potom homogenizirane ultrazvučnom obradom tokom 40 sek. pomoću Hielscher ultrazvučnog homogenizatora tkiva UP100H.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Vandrovcova et al. (2011): Utjecaj prevlaka kolagena i hondroitin-sulfata (CS) na poli(laktid-ko-glikolid) (PLGA) na osteoblastima sličnim ćelijama MG 63. Physiol. Res. 60; 2011. 797-813.
Određivanje CS testom s dimetilmetilen-plavim
Resuspenzija ćelija: peleti CS u mikrocentrifugalnim epruvetama resuspendirani su u 0,5 ml rastvora papaina od 0,1mg/ml u Hankovom uravnoteženom slanom rastvoru (HBSS) pomoću impulsa ultrazvučnog sonotrode (UP 100H, Hielscher Ultrasonics GmbH, Njemačka) pri ciklusu 1 i 100 % amplitude tokom 3 sek. Nakon toga je probava trajala na 60 °C tokom 24 h.
Za imunoenzimski test (ELISA), ćelije su zatim suspendirane u destiliranoj i deioniziranoj vodi pri koncentraciji od 106 ćelija/ml i držane u zamrzivaču na –70°C preko noći radi lakše lize ćelija. Ćelije su potom homogenizirane ultrazvučnom obradom tokom 40 sek. pomoću Hielscher ultrazvučnog homogenizatora tkiva UP100H.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Vandrovcova et al. (2011): Utjecaj prevlaka kolagena i hondroitin-sulfata (CS) na poli(laktid-ko-glikolid) (PLGA) na osteoblastima sličnim ćelijama MG 63. Physiol. Res. 60; 2011. 797-813.
Ćelije HaCaT
Ultrazvučna primjena:
Liza ćelija HaCaT za imunoprecipitaciju kromatina (ChIP): ćelije HaCaT fiksirane su 1% formaldehidom tokom 10 minuta na 37uC. Fiksirane ćelije lizirane su u RIPA puferu i ultrazvučno obrađene na ledu ultrazvučnim uređajem od 100W pri amplitudi = 1 i radnom ciklusu = 100% u 12 jednominutnih (12 x 1 min.) pulseva.
Preporučeni uređaj:
UP100H; tokom 12 min. na ledu,
Referenca / istraživački rad:
Zhang et al. (2007): Bazonuklin regulira podskup gena za ribosomsku RNK u ćelijama HaCaT.
Liza ćelija HaCaT za imunoprecipitaciju kromatina (ChIP): ćelije HaCaT fiksirane su 1% formaldehidom tokom 10 minuta na 37uC. Fiksirane ćelije lizirane su u RIPA puferu i ultrazvučno obrađene na ledu ultrazvučnim uređajem od 100W pri amplitudi = 1 i radnom ciklusu = 100% u 12 jednominutnih (12 x 1 min.) pulseva.
Preporučeni uređaj:
UP100H; tokom 12 min. na ledu,
Referenca / istraživački rad:
Zhang et al. (2007): Bazonuklin regulira podskup gena za ribosomsku RNK u ćelijama HaCaT.
Heparin: depolimerizacija heparina
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna metoda omogućava proizvodnju niskomolekularnog heparina (LMWH). Pritom heparin podliježe radikalnoj depolimerizaciji kataliziranoj vodikovim peroksidom. Reakcija je vrlo brza i traje manje od 1 sata, dok se fizikalno-hemijski proces depolimerizacije oslanja na blage reakcijske uvjete, ne zahtijeva agresivne ili toksične reagense i daje proizvod bez hemijskih artefakata. Stoga je ultrazvučni proces dobro prikladan za proizvodnju LMWH u velikim razmjerima, ali i analoga proizvedenih iz prirodnih sulfatiranih polisaharida.
Ultrazvučni postupak:
Za fizikalno-hemijsku depolimerizaciju nefrakcioniranog heparina radikalnom depolimerizacijom potpomognutom ultrazvukom, heparin je otopljen u vodi do konačne koncentracije od 25 mg/mL (5 mL). Reakcijska smjesa ultrazvučno je obrađena pomoću ultrazvučnog uređaja sa sondom UP50H. Ultrazvučni uređaj bio je opremljen sondom (mikro vrh MS3) promjera 3mm, koja je davala amplitudu od 180μm. Procesor je generirao mehaničke longitudinalne vibracije frekvencije 30 kHz koje su proizvedene električnom pobudom. Reakcijska smjesa održavana je na 60°C u reaktoru Radleys®, a ultrazvučni valovi primjenjivani su kao puls od 0.5sek kako bi se spriječilo zagrijavanje smjese. Alikvot nultog vremena (250μl) uzet je iz rastvora prije pokretanja reakcije istovremenim dodavanjem vodikovog peroksida i primjenom ultrazvučnih valova. Vodikov peroksid dodan je kako bi se dobio konačni omjer vodikov peroksid/heparin (w/w) od 0,15 (3,75 mg/mL).
Preporučeni uređaj:
UP50H sa sonotrodom MS3
Referenca / istraživački rad:
Achour, Oussama; Bridiau, Nicolas; Godhbani, Azza; Le Joubioux, Florian; Bordenave Juchereau, Stephanie; Sannier, Fredéric; Piot, Jean-Marie; Fruitier Arnaudin, Ingrid; Maugard, Thierry (2013): Ultrazvukom potpomognuta priprema niskomolekularnog heparina (LMWH) s antikoagulantnim djelovanjem. Carbohydrate Polymers 97; 2013. 684–689.
Ultrazvučna metoda omogućava proizvodnju niskomolekularnog heparina (LMWH). Pritom heparin podliježe radikalnoj depolimerizaciji kataliziranoj vodikovim peroksidom. Reakcija je vrlo brza i traje manje od 1 sata, dok se fizikalno-hemijski proces depolimerizacije oslanja na blage reakcijske uvjete, ne zahtijeva agresivne ili toksične reagense i daje proizvod bez hemijskih artefakata. Stoga je ultrazvučni proces dobro prikladan za proizvodnju LMWH u velikim razmjerima, ali i analoga proizvedenih iz prirodnih sulfatiranih polisaharida.
Ultrazvučni postupak:
Za fizikalno-hemijsku depolimerizaciju nefrakcioniranog heparina radikalnom depolimerizacijom potpomognutom ultrazvukom, heparin je otopljen u vodi do konačne koncentracije od 25 mg/mL (5 mL). Reakcijska smjesa ultrazvučno je obrađena pomoću ultrazvučnog uređaja sa sondom UP50H. Ultrazvučni uređaj bio je opremljen sondom (mikro vrh MS3) promjera 3mm, koja je davala amplitudu od 180μm. Procesor je generirao mehaničke longitudinalne vibracije frekvencije 30 kHz koje su proizvedene električnom pobudom. Reakcijska smjesa održavana je na 60°C u reaktoru Radleys®, a ultrazvučni valovi primjenjivani su kao puls od 0.5sek kako bi se spriječilo zagrijavanje smjese. Alikvot nultog vremena (250μl) uzet je iz rastvora prije pokretanja reakcije istovremenim dodavanjem vodikovog peroksida i primjenom ultrazvučnih valova. Vodikov peroksid dodan je kako bi se dobio konačni omjer vodikov peroksid/heparin (w/w) od 0,15 (3,75 mg/mL).
Preporučeni uređaj:
UP50H sa sonotrodom MS3
Referenca / istraživački rad:
Achour, Oussama; Bridiau, Nicolas; Godhbani, Azza; Le Joubioux, Florian; Bordenave Juchereau, Stephanie; Sannier, Fredéric; Piot, Jean-Marie; Fruitier Arnaudin, Ingrid; Maugard, Thierry (2013): Ultrazvukom potpomognuta priprema niskomolekularnog heparina (LMWH) s antikoagulantnim djelovanjem. Carbohydrate Polymers 97; 2013. 684–689.
Hmelj
Ultrazvučna primjena:
Ekstrakcija aktivnih spojeva / biljnih ekstrakata u vodi i etanolu.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Ekstrakcija aktivnih spojeva / biljnih ekstrakata u vodi i etanolu.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Lactobacillus (liza/izolacija DNK iz različitih sojeva roda Lactobacillus)
Ultrazvučna primjena:
Sojevi Lactobacillus: L. pontis, L. sanfranciscensis, L. farciminis, L. panis, L. oris, L. vaginalis i L. reuteri, L. sp.
Postupak: Za izolaciju DNK iz pojedinačnih kolonija razvijen je protokol ultrazvučne lize. Jedna kolonija (promjera 2 do 3 mm) suspendirana je u 100μl pufera za lizu (20 mM EDTA, 10 mM Tris [pH 7,9], 1% Triton X-100, 500 mM guanidin-HCl, 250 mM NaCl). Ćelije su lizirane 1 min ultrazvučne obrade ultrazvučnim uređajem sa sondom UP50H. Nakon dodavanja 150μl hladnog etanola (-20°C), smjesa je centrifugirana preko spin-kolone kita QIAamp tissue i na kraju eluirana sa 60μl pufera (10 mM Tris [pH 7,5]).
Da bi se dobio alat za brzu i pouzdanu identifikaciju pojedinačnih čistih kultura, PCR test je kombiniran s brzim postupkom izolacije DNK. Dugotrajni enzimski postupci lize i promjenjiva osjetljivost bakterija na lizozim prevladani su ultrazvučnim tretmanom ćelija, uz naknadno pročišćavanje i koncentriranje vezivanjem DNK na silikatni matriks. Ćelijski materijal jedne kolonije pokazao se dovoljnim za PCR.
Preporučeni uređaj:
UP50H
Referenca / istraživački rad:
Müller, M. R. A. (2000): Karakterizacija mikrobnog ekosistema fermentacija žitarica molekularno-biološkim metodama. Dissertation University of Cologne, 2000.
Sojevi Lactobacillus: L. pontis, L. sanfranciscensis, L. farciminis, L. panis, L. oris, L. vaginalis i L. reuteri, L. sp.
Postupak: Za izolaciju DNK iz pojedinačnih kolonija razvijen je protokol ultrazvučne lize. Jedna kolonija (promjera 2 do 3 mm) suspendirana je u 100μl pufera za lizu (20 mM EDTA, 10 mM Tris [pH 7,9], 1% Triton X-100, 500 mM guanidin-HCl, 250 mM NaCl). Ćelije su lizirane 1 min ultrazvučne obrade ultrazvučnim uređajem sa sondom UP50H. Nakon dodavanja 150μl hladnog etanola (-20°C), smjesa je centrifugirana preko spin-kolone kita QIAamp tissue i na kraju eluirana sa 60μl pufera (10 mM Tris [pH 7,5]).
Da bi se dobio alat za brzu i pouzdanu identifikaciju pojedinačnih čistih kultura, PCR test je kombiniran s brzim postupkom izolacije DNK. Dugotrajni enzimski postupci lize i promjenjiva osjetljivost bakterija na lizozim prevladani su ultrazvučnim tretmanom ćelija, uz naknadno pročišćavanje i koncentriranje vezivanjem DNK na silikatni matriks. Ćelijski materijal jedne kolonije pokazao se dovoljnim za PCR.
Preporučeni uređaj:
UP50H
Referenca / istraživački rad:
Müller, M. R. A. (2000): Karakterizacija mikrobnog ekosistema fermentacija žitarica molekularno-biološkim metodama. Dissertation University of Cologne, 2000.
Lactobacillus acidophilus Gr+
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna inaktivacija Lactobacillus acidophilus Gr+ u mlijeku i sokovima.
Preporučeni uređaj:
UIP500hd
Referenca / istraživački rad:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Primjena termičke obrade potpomognute ultrazvukom za očuvanje i zadržavanje kvalitete tekućih namirnica. J Food Prot 66/2003. pp. 1642–1649.
Ultrazvučna inaktivacija Lactobacillus acidophilus Gr+ u mlijeku i sokovima.
Preporučeni uređaj:
UIP500hd
Referenca / istraživački rad:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Primjena termičke obrade potpomognute ultrazvukom za očuvanje i zadržavanje kvalitete tekućih namirnica. J Food Prot 66/2003. pp. 1642–1649.
Legionella pneumophila Gr+ u razrijeđenom mediju
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna inaktivacija Legionella pneumophila Gr+ u razrijeđenom mediju.
Preporučeni uređaj:
UIP500hd
Referenca / istraživački rad:
Dadjour, M. F.; Ogino, C.; Matsumura, S.; Nakamura, S.; Shimizu N. (2006): Dezinfekcija Legionella pneumophila ultrazvučnim tretmanom s TiO2. Water Res 40/2006. pp.1137–1142.
Ultrazvučna inaktivacija Legionella pneumophila Gr+ u razrijeđenom mediju.
Preporučeni uređaj:
UIP500hd
Referenca / istraživački rad:
Dadjour, M. F.; Ogino, C.; Matsumura, S.; Nakamura, S.; Shimizu N. (2006): Dezinfekcija Legionella pneumophila ultrazvučnim tretmanom s TiO2. Water Res 40/2006. pp.1137–1142.
Leuconostoc mesenteroides
Ultrazvučna primjena:
Aktivnost lizozima leukocita kod mijelocitne leukemije: suspenzija ćelija ultrazvučno je obrađivana 15 min., a uzorci su testirani na aktivnost lizozima. Određena je koncentracija lizozima leukocita ug./10 ćelija.
Preporučeni uređaj:
UP50H
Aktivnost lizozima leukocita kod mijelocitne leukemije: suspenzija ćelija ultrazvučno je obrađivana 15 min., a uzorci su testirani na aktivnost lizozima. Određena je koncentracija lizozima leukocita ug./10 ćelija.
Preporučeni uređaj:
UP50H
Aktivnost leukocitnih izoenzima kod mijelocitne leukemije
Ultrazvučna primjena:
Priprema uzoraka: suspenzija ćelija ultrazvučno je tretirana, a uzorci su testirani na aktivnost lizozima. Određena je koncentracija lizozima leukocita ug/106.
Preporučeni uređaj:
UP200St
Priprema uzoraka: suspenzija ćelija ultrazvučno je tretirana, a uzorci su testirani na aktivnost lizozima. Određena je koncentracija lizozima leukocita ug/106.
Preporučeni uređaj:
UP200St
Liposomi
Ultrazvučna primjena:
Formiranje SUV-ova
Kliknite ovdje da biste saznali više o ultrazvučnoj pripremi liposoma!
Preporučeni uređaj:
UP50H; 3 ciklusa od 5 min; u ledenoj kupelji.
Formiranje SUV-ova
Kliknite ovdje da biste saznali više o ultrazvučnoj pripremi liposoma!
Preporučeni uređaj:
UP50H; 3 ciklusa od 5 min; u ledenoj kupelji.
Malahitno zelenilo
Ultrazvučna primjena:
Sonofotokatalitička razgradnja malahitnog zelenila (snažnog baktericida): Sama fotokatalitička razgradnja znatno je brža od sonolitičke razgradnje, a efikasnost se može poboljšati spajanjem ta dva procesa. Malahitno zelenilo, snažan baktericid, vrlo je ekotoksično za morske bakterije, ali se pretvara u organske tvari koje su manje toksične ili netoksične.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Sonofotokatalitička razgradnja malahitnog zelenila (snažnog baktericida): Sama fotokatalitička razgradnja znatno je brža od sonolitičke razgradnje, a efikasnost se može poboljšati spajanjem ta dva procesa. Malahitno zelenilo, snažan baktericid, vrlo je ekotoksično za morske bakterije, ali se pretvara u organske tvari koje su manje toksične ili netoksične.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Acilacija mangiferina
Ultrazvučna primjena:
Mangiferin (1,3,6,7-Tetrahydroxy-2-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]xanthen-9-one; formula: C19H18O11) je polifenol strukture C-glikozilksantona koji se može naći u mnogim biljnim vrstama. Mangiferin pokazuje različita farmakološka djelovanja. Regioselektivna acilacija mangiferina može se vrlo efikasno katalizirati lipazom pod ultrazvučnom obradom. U poređenju s konvencionalnim metodama, ultrazvukom potpomognuta kataliza ističe se prednostima kraćeg reakcijskog vremena i većih prinosa. Optimalni uvjeti za ultrazvučnu acilaciju mangiferina utvrđeni su kako slijedi:
lipaza: PCL, donor acila: vinil-acetat; reakcijsko otapalo: DMSO, reakcijska temperatura: 45 degC, ultrazvučna snaga: 200W; omjer supstrata: donor acila/mangiferin 6/1, opterećenje enzimom: 6 mg/ml
Prinos regioselektivne acilacije iznosio je do 84%.
Preporučeni uređaj:
UP200St ili UP200Ht
Referenca / istraživački rad:
usp.: Wang, Z.; Wang, R.; Tian, J.; Zhao, B; Wei, X.F.; Su, Y.L.; Li, C.Y.; Cao, S.G.; Wang, L. (2010): Učinak ultrazvuka na regioselektivnu acilaciju mangiferina kataliziranu lipazom u nevodenim otapalima. J. Asian Nat Prod. Res. 12/1, 2010. 56-63.
Mangiferin (1,3,6,7-Tetrahydroxy-2-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]xanthen-9-one; formula: C19H18O11) je polifenol strukture C-glikozilksantona koji se može naći u mnogim biljnim vrstama. Mangiferin pokazuje različita farmakološka djelovanja. Regioselektivna acilacija mangiferina može se vrlo efikasno katalizirati lipazom pod ultrazvučnom obradom. U poređenju s konvencionalnim metodama, ultrazvukom potpomognuta kataliza ističe se prednostima kraćeg reakcijskog vremena i većih prinosa. Optimalni uvjeti za ultrazvučnu acilaciju mangiferina utvrđeni su kako slijedi:
lipaza: PCL, donor acila: vinil-acetat; reakcijsko otapalo: DMSO, reakcijska temperatura: 45 degC, ultrazvučna snaga: 200W; omjer supstrata: donor acila/mangiferin 6/1, opterećenje enzimom: 6 mg/ml
Prinos regioselektivne acilacije iznosio je do 84%.
Preporučeni uređaj:
UP200St ili UP200Ht
Referenca / istraživački rad:
usp.: Wang, Z.; Wang, R.; Tian, J.; Zhao, B; Wei, X.F.; Su, Y.L.; Li, C.Y.; Cao, S.G.; Wang, L. (2010): Učinak ultrazvuka na regioselektivnu acilaciju mangiferina kataliziranu lipazom u nevodenim otapalima. J. Asian Nat Prod. Res. 12/1, 2010. 56-63.
Ekstrakcija molekula
Ultrazvučna primjena:
Protokol ekstrakcije iz gipsa, rheolite, bazalta, edfell pepela i opsidijanskog stakla:
Uzorak od 1g regolita ili drobljene stijene podvrgava se tečnoj ekstrakciji pod ultrazvučnim zračenjem radi ekstrakcije i solubilizacije ciljnih molekula. U tu svrhu, 3ml MeOH P80 dodano je u 1g analognog uzorka u staklenoj epruveti i ultrazvučno obrađivano 20 minuta ultrazvučnim uređajem sa sondom UP50H podešenim na 40% amplitude. Smjesa je ostavljena da stoji 10 minuta, a zamućeni supernatant koji se formirao iznad sedimentiranog analognog uzorka dekantiran je u centrifugalne epruvete od 1,5 ml. Da bi se smanjio gubitak ekstrahiranih komponenti adsorpcijom na površine hidrofobnih polimernih centrifugalnih epruveta, epruvete su prethodno blokirane s 0,5% (w/v) BSA u 100 mM HEPES pH 7,4. Supernatanti su bistreni centrifugiranjem pri 17.000 G tokom 10 minuta i pohranjeni na 2 – 8°C u staklenim bočicama do testiranja imunotestom.
Preporučeni uređaj:
UP50H
Referenca / istraživački rad:
Rix, C.(2012): Detekcija života na Marsu i Life Marker Chip: antitijelni testovi za detekciju organskih molekula u tečnim ekstraktima marsovskih uzoraka. Dissertation Cranfield University 2012.
Protokol ekstrakcije iz gipsa, rheolite, bazalta, edfell pepela i opsidijanskog stakla:
Uzorak od 1g regolita ili drobljene stijene podvrgava se tečnoj ekstrakciji pod ultrazvučnim zračenjem radi ekstrakcije i solubilizacije ciljnih molekula. U tu svrhu, 3ml MeOH P80 dodano je u 1g analognog uzorka u staklenoj epruveti i ultrazvučno obrađivano 20 minuta ultrazvučnim uređajem sa sondom UP50H podešenim na 40% amplitude. Smjesa je ostavljena da stoji 10 minuta, a zamućeni supernatant koji se formirao iznad sedimentiranog analognog uzorka dekantiran je u centrifugalne epruvete od 1,5 ml. Da bi se smanjio gubitak ekstrahiranih komponenti adsorpcijom na površine hidrofobnih polimernih centrifugalnih epruveta, epruvete su prethodno blokirane s 0,5% (w/v) BSA u 100 mM HEPES pH 7,4. Supernatanti su bistreni centrifugiranjem pri 17.000 G tokom 10 minuta i pohranjeni na 2 – 8°C u staklenim bočicama do testiranja imunotestom.
Preporučeni uređaj:
UP50H
Referenca / istraživački rad:
Rix, C.(2012): Detekcija života na Marsu i Life Marker Chip: antitijelni testovi za detekciju organskih molekula u tečnim ekstraktima marsovskih uzoraka. Dissertation Cranfield University 2012.
Talozi mišje jetre
Ultrazvučna primjena:
Peleti su isprani i ultrazvučno obrađivani 5 min s dodatnih 0,5 mL LB2 te centrifugirani pri 12.000 g tokom daljnjih 20 min, a dobivene dvije frakcije supernatanta su prikupljene. Na kraju su peleti otopljeni u 0,5 mL pufera koji sadrži 40 mM tris bazu, 5 M ureu, 2 M tioureu, 4% CHAPS, 100 mM DTT, 0,5% (v/v) biolyte 3-10 (LB3), te su ultrazvučno obrađeni i centrifugirani pri 12.000 g tokom 20 min.
Preporučeni uređaj:
UP200S; tokom 5min.
Referenca / istraživački rad:
Gazzana et al. (2009): Ažuriranje o proteomu jetre miša.
Peleti su isprani i ultrazvučno obrađivani 5 min s dodatnih 0,5 mL LB2 te centrifugirani pri 12.000 g tokom daljnjih 20 min, a dobivene dvije frakcije supernatanta su prikupljene. Na kraju su peleti otopljeni u 0,5 mL pufera koji sadrži 40 mM tris bazu, 5 M ureu, 2 M tioureu, 4% CHAPS, 100 mM DTT, 0,5% (v/v) biolyte 3-10 (LB3), te su ultrazvučno obrađeni i centrifugirani pri 12.000 g tokom 20 min.
Preporučeni uređaj:
UP200S; tokom 5min.
Referenca / istraživački rad:
Gazzana et al. (2009): Ažuriranje o proteomu jetre miša.
Suspenzija mišje jetre
Ultrazvučna primjena:
Homogenizacija uzorka radi dobivanja ćelijskog lizata.
Preporučeni uređaj:
UP200S; tokom 3 x 20 sek.
Referenca / istraživački rad:
Gazzana et al. (2009): Ažuriranje o proteomu jetre miša.
Homogenizacija uzorka radi dobivanja ćelijskog lizata.
Preporučeni uređaj:
UP200S; tokom 3 x 20 sek.
Referenca / istraživački rad:
Gazzana et al. (2009): Ažuriranje o proteomu jetre miša.
Penicillium digitatum
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna inaktivacija Penicillium digitatum (biljni patogen) u Sabouraudovoj hranjivoj podlozi.
Preporučeni uređaj:
UP200St
Referenca / istraživački rad:
López-Malo, A.; Palou, E.; Jiménez-Fernández, M.; Alzamora, S. M.; Guerrero, S. (2005): Multifaktorska inaktivacija gljivica kombinacijom termosonikacije i antimikrobnih sredstava. J. Food Eng. 67/ 2005. pp. 87–93.
Ultrazvučna inaktivacija Penicillium digitatum (biljni patogen) u Sabouraudovoj hranjivoj podlozi.
Preporučeni uređaj:
UP200St
Referenca / istraživački rad:
López-Malo, A.; Palou, E.; Jiménez-Fernández, M.; Alzamora, S. M.; Guerrero, S. (2005): Multifaktorska inaktivacija gljivica kombinacijom termosonikacije i antimikrobnih sredstava. J. Food Eng. 67/ 2005. pp. 87–93.
Fikocijanin iz Spirulina platensis (Arthrospira platensis)
Ultrazvučna primjena:
Ekstrakcija fikocijanina iz ćelija Spirulina platensis (Arthrospira platensis).
Preporučeni uređaj:
UP400S
Ekstrakcija fikocijanina iz ćelija Spirulina platensis (Arthrospira platensis).
Preporučeni uređaj:
UP400S
Biljne ćelije i biljno tkivo
Ultrazvučna primjena:
30% zbijenih biljnih ćelija (W/V) i destilirana voda razgrađuju se ultrazvučnom obradom 1-15 min.; dezintegracija biljnog tkiva: 1 g osušenog tkiva suspendiranog u alkoholu dezintegrira se tokom ultrazvučne obrade od oko 5 min.
Preporučeni uređaj:
UP100H
30% zbijenih biljnih ćelija (W/V) i destilirana voda razgrađuju se ultrazvučnom obradom 1-15 min.; dezintegracija biljnog tkiva: 1 g osušenog tkiva suspendiranog u alkoholu dezintegrira se tokom ultrazvučne obrade od oko 5 min.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Trombociti
Ultrazvučna primjena:
Priprema lizata trombocita: razgradnja za 1-5 min.
Preporučeni uređaj:
UP200Ht
Priprema lizata trombocita: razgradnja za 1-5 min.
Preporučeni uređaj:
UP200Ht
Pleurotus tuberregium
Ultrazvučna primjena:
Ekstrakcija polisaharida iz jestive gljive Pleurotus tuberregium
Preporučeni uređaj:
UP400S
Ekstrakcija polisaharida iz jestive gljive Pleurotus tuberregium
Preporučeni uređaj:
UP400S
Poli(mliječna-ko-glikolna kiselina) (PLGA)
Ultrazvučna primjena:
Priprema poli(mliječno-ko-glikolne kiseline) (PLGA) napunjene govedim serumskim albuminom (BSA) ultrazvučnom obradom za 40 sek.
Preporučeni uređaj:
Dmini; tokom 40sek.
Referenca / istraživački rad:
Freitas et al. (2005): Protočno ultrazvučno emulgiranje u kombinaciji sa statičkim mikromiješanjem za aseptičnu proizvodnju mikrosfera ekstrakcijom otapalom.
Priprema poli(mliječno-ko-glikolne kiseline) (PLGA) napunjene govedim serumskim albuminom (BSA) ultrazvučnom obradom za 40 sek.
Preporučeni uređaj:
Dmini; tokom 40sek.
Referenca / istraživački rad:
Freitas et al. (2005): Protočno ultrazvučno emulgiranje u kombinaciji sa statičkim mikromiješanjem za aseptičnu proizvodnju mikrosfera ekstrakcijom otapalom.
Polifenoli iz jabuke
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna ekstrakcija polifenola iz jabuke. Otapalo: vodeno. Povećanje prinosa za 6%; intenzitet ultrazvučne obrade: 20-75Ws/ml; temperatura procesa: zagrijano na 80 degC.
Preporučeni uređaj:
UIP2000hd
Referenca / istraživački rad:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvučno dobivanje i modifikacija sastojaka hrane. U: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Ultrazvučna ekstrakcija polifenola iz jabuke. Otapalo: vodeno. Povećanje prinosa za 6%; intenzitet ultrazvučne obrade: 20-75Ws/ml; temperatura procesa: zagrijano na 80 degC.
Preporučeni uređaj:
UIP2000hd
Referenca / istraživački rad:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvučno dobivanje i modifikacija sastojaka hrane. U: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Polifenoli iz crnog čaja
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna ekstrakcija polifenola iz crnog čaja. Otapalo: vodeno. Povećanje prinosa za 6-18%; intenzitet ultrazvučne obrade: 8-10Ws/ml; okolni tlak, temperatura procesa: zagrijano na 90 degC.
Preporučeni uređaj:
UIP2000hd
Referenca / istraživački rad:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvučno dobivanje i modifikacija sastojaka hrane. U: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Ultrazvučna ekstrakcija polifenola iz crnog čaja. Otapalo: vodeno. Povećanje prinosa za 6-18%; intenzitet ultrazvučne obrade: 8-10Ws/ml; okolni tlak, temperatura procesa: zagrijano na 90 degC.
Preporučeni uređaj:
UIP2000hd
Referenca / istraživački rad:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvučno dobivanje i modifikacija sastojaka hrane. U: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Polifenoli iz komine crnog grožđa
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna ekstrakcija polifenola iz komine crnog grožđa. Otapalo: vodeno. Povećanje prinosa za 11-35%; intenzitet ultrazvučne obrade: 20-75Ws/ml; okolni tlak.
Preporučeni uređaj:
UIP2000hd
Referenca / istraživački rad:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvučno dobivanje i modifikacija sastojaka hrane. U: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Ultrazvučna ekstrakcija polifenola iz komine crnog grožđa. Otapalo: vodeno. Povećanje prinosa za 11-35%; intenzitet ultrazvučne obrade: 20-75Ws/ml; okolni tlak.
Preporučeni uređaj:
UIP2000hd
Referenca / istraživački rad:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvučno dobivanje i modifikacija sastojaka hrane. U: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Polifenoli, aminokiselina i kofein iz zelenog čaja
Ultrazvučna primjena:
Ekstrakcija aktivnih spojeva iz zelenog čaja u vodi
Preporučeni uređaj:
UP400S
Ekstrakcija aktivnih spojeva iz zelenog čaja u vodi
Preporučeni uređaj:
UP400S
Svinjetina: salamurenje svinjskog karea
Ultrazvučna primjena:
Za ultrazvukom potpomognuto salamurenje, svinjski fileti (Longissimus dorsi) uronjeni su u salamuru natrijum-hlorida (40 g L−1) i tretirani na 5°C ultrazvukom niske frekvencije (20 kHz) niskog intenziteta (2–4 W/cm−2). Ispitan je učinak ultrazvukom potpomognutog salamurenja na mikrostrukturu svinjskog tkiva, denaturaciju proteina, kapacitet vezanja vode (WBC), kapacitet zadržavanja vode (WHC), koeficijent difuzije natrijum-hlorida (D) i teksturalni profil mesa (TPA). Rezultati su pokazali da je ultrazvučni tretman uzrokovao povoljne mikrostrukturne promjene u tkivu mesa. Kapacitet zadržavanja vode i teksturalna svojstva poboljšani su ultrazvučnim tretmanom u poređenju s uzorcima koji su bili i tumbleni i statički salamureni. Međutim, ti pozitivni učinci bili su u velikoj mjeri ovisni o ultrazvučnom intenzitetu. Veći intenziteti i/ili duža vremena tretmana uzrokovali su denaturaciju proteina. Model konstantnog koeficijenta difuzije mogao je precizno opisati kinetiku difuzije NaCl tokom salamurenja. Ultrazvučni tretman značajno je pojačao difuziju soli u poređenju s uzorcima salamurenim pod statičkim uvjetima, a koeficijent difuzije eksponencijalno je rastao s povećanjem ultrazvučnog intenziteta.
Preporučeni uređaj:
UP200Ht sa sonotrodom S26d40
Referenca / istraživački rad:
Siro, I.; Ven, Cs.; Balla, Cs.; Jonas, G.; Zeke, I.; Friedrich, L. (2009): Primjena tehnike salamurenja potpomognute ultrazvukom za poboljšanje difuzije natrijum-hlorida u svinjskom mesu. Journal of Food Engineering 91/2, 2009. 353–362.
Za ultrazvukom potpomognuto salamurenje, svinjski fileti (Longissimus dorsi) uronjeni su u salamuru natrijum-hlorida (40 g L−1) i tretirani na 5°C ultrazvukom niske frekvencije (20 kHz) niskog intenziteta (2–4 W/cm−2). Ispitan je učinak ultrazvukom potpomognutog salamurenja na mikrostrukturu svinjskog tkiva, denaturaciju proteina, kapacitet vezanja vode (WBC), kapacitet zadržavanja vode (WHC), koeficijent difuzije natrijum-hlorida (D) i teksturalni profil mesa (TPA). Rezultati su pokazali da je ultrazvučni tretman uzrokovao povoljne mikrostrukturne promjene u tkivu mesa. Kapacitet zadržavanja vode i teksturalna svojstva poboljšani su ultrazvučnim tretmanom u poređenju s uzorcima koji su bili i tumbleni i statički salamureni. Međutim, ti pozitivni učinci bili su u velikoj mjeri ovisni o ultrazvučnom intenzitetu. Veći intenziteti i/ili duža vremena tretmana uzrokovali su denaturaciju proteina. Model konstantnog koeficijenta difuzije mogao je precizno opisati kinetiku difuzije NaCl tokom salamurenja. Ultrazvučni tretman značajno je pojačao difuziju soli u poređenju s uzorcima salamurenim pod statičkim uvjetima, a koeficijent difuzije eksponencijalno je rastao s povećanjem ultrazvučnog intenziteta.
Preporučeni uređaj:
UP200Ht sa sonotrodom S26d40
Referenca / istraživački rad:
Siro, I.; Ven, Cs.; Balla, Cs.; Jonas, G.; Zeke, I.; Friedrich, L. (2009): Primjena tehnike salamurenja potpomognute ultrazvukom za poboljšanje difuzije natrijum-hlorida u svinjskom mesu. Journal of Food Engineering 91/2, 2009. 353–362.
Porphyra yezoensis
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna razgradnja polisaharida iz Porphyra yezoensis: 50mL rastvora polisaharida porphyra yezoensis od 1,0 g/100mL (suha masa) ultrazvučno je obrađivano 4 hr uređajem UP400S.
Preporučeni uređaj:
UP400S; pulsni ultrazvuk (ciklusi: 2 sek uključeno/ 2 sek isključeno) na 20°C.
Ultrazvučna razgradnja polisaharida iz Porphyra yezoensis: 50mL rastvora polisaharida porphyra yezoensis od 1,0 g/100mL (suha masa) ultrazvučno je obrađivano 4 hr uređajem UP400S.
Preporučeni uređaj:
UP400S; pulsni ultrazvuk (ciklusi: 2 sek uključeno/ 2 sek isključeno) na 20°C.
Prahovi
Ultrazvučna primjena:
Mljevenje, deaglomeracija i dispergiranje do male, relativno ujednačene veličine čestica.
Preporučeni uređaj:
UP200St
Mljevenje, deaglomeracija i dispergiranje do male, relativno ujednačene veličine čestica.
Preporučeni uređaj:
UP200St
Kosti štakora
Jetra štakora
Ultrazvučna primjena:
Razgradnja i homogenizacija tkiva uređajem UP400S.
Preporučeni uređaj:
UP400S; 3 puta po 30 sek.; na ledu.
Referenca / istraživački rad:
Oh et al. (2003): Gen za acetil-CoA karboksilazu reguliran je proteinom 1 koji veže regulatorni element sterola u jetri. Journal of Biological Chemistry 2003.
Razgradnja i homogenizacija tkiva uređajem UP400S.
Preporučeni uređaj:
UP400S; 3 puta po 30 sek.; na ledu.
Referenca / istraživački rad:
Oh et al. (2003): Gen za acetil-CoA karboksilazu reguliran je proteinom 1 koji veže regulatorni element sterola u jetri. Journal of Biological Chemistry 2003.
Koža štakora
Rauvolfia serpentina
Rebaudiozid A
Ultrazvučna primjena:
Uzorci od 10g suhih i samljevenih listova stevije ekstrahirani su u 100mL vode uz kontinuirano miješanje (magnetnom mješalicom). Vrijednost pH kontrolirana je s 0,01 M natrijum-fosfatom pH 7. Uzorak je stavljen u staklenu čašu od 150 mL i ultrazvučno obrađen ultrazvučnim uređajem sa sondom (UIP500hd, 20kHz, 500W). Vrh sonotrode bio je uronjen oko 1,5 cm u kašu od listova stevije. Ultrazvučni uređaj bio je podešen na izlaznu snagu od 350W. Blagi tretman ultrazvučnom obradom od 350 W tokom 5-10 min. pri konstantnoj temperaturi procesa od 30°C dao je prinos rebaudiozida A od 30-34g na 100g uzorka. Nakon ultrazvučne obrade, rastvor ekstrakta je centrifugiran i filtriran kroz mikroporoznu membranu od 0,45 μm; filtrat je uzet za analizu ukupnog sadržaja rebaudiozida A. Prinos ekstrakcije ukupnog sadržaja rebaudiozida A analiziran je HPLC-om.
Ultrazvukom potpomognutom ekstrakcijom bez otapala dobiven je visok prinos rebaudiozida A u poređenju s tradicionalnim metodama ekstrakcije kao što su ekstrakcija toplinom ili maceracija.
Preporučeni uređaj:
UIP500hd
Uzorci od 10g suhih i samljevenih listova stevije ekstrahirani su u 100mL vode uz kontinuirano miješanje (magnetnom mješalicom). Vrijednost pH kontrolirana je s 0,01 M natrijum-fosfatom pH 7. Uzorak je stavljen u staklenu čašu od 150 mL i ultrazvučno obrađen ultrazvučnim uređajem sa sondom (UIP500hd, 20kHz, 500W). Vrh sonotrode bio je uronjen oko 1,5 cm u kašu od listova stevije. Ultrazvučni uređaj bio je podešen na izlaznu snagu od 350W. Blagi tretman ultrazvučnom obradom od 350 W tokom 5-10 min. pri konstantnoj temperaturi procesa od 30°C dao je prinos rebaudiozida A od 30-34g na 100g uzorka. Nakon ultrazvučne obrade, rastvor ekstrakta je centrifugiran i filtriran kroz mikroporoznu membranu od 0,45 μm; filtrat je uzet za analizu ukupnog sadržaja rebaudiozida A. Prinos ekstrakcije ukupnog sadržaja rebaudiozida A analiziran je HPLC-om.
Ultrazvukom potpomognutom ekstrakcijom bez otapala dobiven je visok prinos rebaudiozida A u poređenju s tradicionalnim metodama ekstrakcije kao što su ekstrakcija toplinom ili maceracija.
Preporučeni uređaj:
UIP500hd
Rižin škrob
Ultrazvučna primjena:
Razgradnja, izolacija škroba i prekid nekovalentnih veza između proteina i škroba u kaši od rižinog brašna (33%) za 20 – 40 min.
Preporučeni uređaj:
UP500hd; 20 – 40 min.
Razgradnja, izolacija škroba i prekid nekovalentnih veza između proteina i škroba u kaši od rižinog brašna (33%) za 20 – 40 min.
Preporučeni uređaj:
UP500hd; 20 – 40 min.
Rotifere
Ultrazvučna primjena:
Razgradnja ćelija mezozooplanktona: ultrazvučnom obradom pri sljedećim uvjetima od četiri protoka (200, 400, 520 i 800lh-1) i četiri amplitude (25, 50, 75 i 100%) postignuta je stopa uništavanja između 58 i 85%.
Preporučeni uređaj:
UP2000 s protočnom ćelijom
Referenca / istraživački rad:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraljubičasto svjetlo, ultrazvuk i vodikov peroksid kao tretmani balastnih voda – eksperimenti s mezozooplanktonom u slabo slanoj bočatoj vodi. Journal of Marine Environmental Engineering, 8(1), 35-55.
Razgradnja ćelija mezozooplanktona: ultrazvučnom obradom pri sljedećim uvjetima od četiri protoka (200, 400, 520 i 800lh-1) i četiri amplitude (25, 50, 75 i 100%) postignuta je stopa uništavanja između 58 i 85%.
Preporučeni uređaj:
UP2000 s protočnom ćelijom
Referenca / istraživački rad:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraljubičasto svjetlo, ultrazvuk i vodikov peroksid kao tretmani balastnih voda – eksperimenti s mezozooplanktonom u slabo slanoj bočatoj vodi. Journal of Marine Environmental Engineering, 8(1), 35-55.
S. fragilis
Saccharomyces cerevisiae
Ultrazvučna primjena:
Razgradnja
Preporučeni uređaj:
UP400S
Referenca / istraživački rad:
Guerrero, S,; López-Malo, A.; Alzamora, S. M. (2001): Učinak ultrazvuka na preživljavanje Saccharomyces cerevisiae: utjecaj temperature, pH i amplitude. Innov. Food Sci. Emerg Technol. 2/2001. pp. 31–39.
Razgradnja
Preporučeni uređaj:
UP400S
Referenca / istraživački rad:
Guerrero, S,; López-Malo, A.; Alzamora, S. M. (2001): Učinak ultrazvuka na preživljavanje Saccharomyces cerevisiae: utjecaj temperature, pH i amplitude. Innov. Food Sci. Emerg Technol. 2/2001. pp. 31–39.
Saccharomyces cerevisiae
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna inaktivacija Saccharomyces cerevisiae u Sabouraudovoj hranjivoj podlozi i u fiziološkom rastvoru.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Referenca / istraživački rad:
Yap, A.; Jiranek, V.; Grbin, P.; Barnes, M.; Bates, D. (2007): Studije o primjeni ultrazvuka velike snage za čišćenje i dezinfekciju bačvi i dasaka. Austr. NZ Wine Indust. J. 22(3)/ 2007. pp. 96–104.
Ultrazvučna inaktivacija Saccharomyces cerevisiae u Sabouraudovoj hranjivoj podlozi i u fiziološkom rastvoru.
Preporučeni uređaj:
UP400S
Referenca / istraživački rad:
Yap, A.; Jiranek, V.; Grbin, P.; Barnes, M.; Bates, D. (2007): Studije o primjeni ultrazvuka velike snage za čišćenje i dezinfekciju bačvi i dasaka. Austr. NZ Wine Indust. J. 22(3)/ 2007. pp. 96–104.
Šafran, Crocus sativus
Ultrazvučna primjena:
Ekstrakcija aktivnih spojeva (aroma i bojila).
Kliknite ovdje da biste saznali više o ekstrakciji iz šafrana!
Preporučeni uređaj:
UP50H
Referenca / istraživački rad:
Kadkhodaee et al. (2007): Ultrazvučna ekstrakcija aktivnih spojeva iz šafrana. Acta Hortic. 739, 2007. 417-425.
Ekstrakcija aktivnih spojeva (aroma i bojila).
Kliknite ovdje da biste saznali više o ekstrakciji iz šafrana!
Preporučeni uređaj:
UP50H
Referenca / istraživački rad:
Kadkhodaee et al. (2007): Ultrazvučna ekstrakcija aktivnih spojeva iz šafrana. Acta Hortic. 739, 2007. 417-425.
Salmonella Senftenberg 775W Gr-
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna inaktivacija Salmonella Senftenberg 775W Gr- u McIlvaineovom citratno-fosfatnom puferu ili hranjivom bujonu.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Álvarez, I.; Manas, P.; Virto, R.; Condón, S. (2006): Inaktivacija Salmonella Senftenberg 775W ultrazvučnim valovima pod tlakom pri različitim aktivitetima vode. Int. J. Food Microbiol. 108/2006. pp. 218–225.
Ultrazvučna inaktivacija Salmonella Senftenberg 775W Gr- u McIlvaineovom citratno-fosfatnom puferu ili hranjivom bujonu.
Preporučeni uređaj:
UP100H
Referenca / istraživački rad:
Álvarez, I.; Manas, P.; Virto, R.; Condón, S. (2006): Inaktivacija Salmonella Senftenberg 775W ultrazvučnim valovima pod tlakom pri različitim aktivitetima vode. Int. J. Food Microbiol. 108/2006. pp. 218–225.
Salvia miltiorrhiza Bunge
Ultrazvučna primjena:
Ekstrakcija biološki aktivnih spojeva: natrijum-danshensu i četiri tanshinona (dihydrotanshione I, tanshinone I, cryptotanshinone i tanshinone IIA).
Preporučeni uređaj:
UP100H
Ekstrakcija biološki aktivnih spojeva: natrijum-danshensu i četiri tanshinona (dihydrotanshione I, tanshinone I, cryptotanshinone i tanshinone IIA).
Preporučeni uređaj:
UP100H
Salvia officinalis
Ultrazvučna primjena:
Ekstrakcija aktivnih spojeva iz Salvia Officinalis (kadulje) za manje od 2hr.
Preporučeni uređaj:
UP50H
Ekstrakcija aktivnih spojeva iz Salvia Officinalis (kadulje) za manje od 2hr.
Preporučeni uređaj:
UP50H
Serum
Jetra i pluća ovaca s cistama te pozitivna krv (antigeni Echinococcus granulosus)
Ultrazvučna primjena:
Cistične jetre, pluća i pozitivna krv ovaca (antigeni Echinococcus granulosus kod janjadi): Uzorak je zatim ultrazvučno obrađivan 2 × 15 sek na ledu dok nisu bili vidljivi netaknuti protoskoleksi.
Preporučeni uređaj:
UP200S; 2 x 15 sek.
Referenca / istraživački rad:
Tabar et al. (2009): Antitijelni odgovor protiv hidatidne tekućine, protoskoleksa i cijelog tijela antigena Echinococcus granulosus kod janjadi. Journal of Veterinary Research, Volume 10, Issue 3; 2009. 283-288.
Cistične jetre, pluća i pozitivna krv ovaca (antigeni Echinococcus granulosus kod janjadi): Uzorak je zatim ultrazvučno obrađivan 2 × 15 sek na ledu dok nisu bili vidljivi netaknuti protoskoleksi.
Preporučeni uređaj:
UP200S; 2 x 15 sek.
Referenca / istraživački rad:
Tabar et al. (2009): Antitijelni odgovor protiv hidatidne tekućine, protoskoleksa i cijelog tijela antigena Echinococcus granulosus kod janjadi. Journal of Veterinary Research, Volume 10, Issue 3; 2009. 283-288.
Sorbitan trioleat, etanol (kao rastvarač) i prah Bi-2212
Ultrazvučna primjena:
Deaglomeracija suspenzije koja sadrži disperzant Sorbitant Trioleate, etanol (kao otapalo) i prah Bi-2212.
Preporučeni uređaj:
UP200S; tokom 3 min.
Referenca / istraživački rad:
Mora et al. (2009): Izrada supravodljivih prevlaka na konstrukcijskim keramičkim pločicama.
Deaglomeracija suspenzije koja sadrži disperzant Sorbitant Trioleate, etanol (kao otapalo) i prah Bi-2212.
Preporučeni uređaj:
UP200S; tokom 3 min.
Referenca / istraživački rad:
Mora et al. (2009): Izrada supravodljivih prevlaka na konstrukcijskim keramičkim pločicama.
Sojini izoflavoni
Ultrazvučna primjena:
ultrazvučna ekstrakcija izoflavona soje u vodi i otapalu. Povećan prinos do 15% u efikasnosti ekstrakcije.
Preporučeni uređaj:
UP200St
Referenca / istraživački rad:
Rostagno et al. (2003), na koje upućuju Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvučno dobivanje i modifikacija sastojaka hrane. U: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
ultrazvučna ekstrakcija izoflavona soje u vodi i otapalu. Povećan prinos do 15% u efikasnosti ekstrakcije.
Preporučeni uređaj:
UP200St
Referenca / istraživački rad:
Rostagno et al. (2003), na koje upućuju Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvučno dobivanje i modifikacija sastojaka hrane. U: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Sojin protein
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna ekstrakcija proteina soje u vodi i alkaliji (natrijum-hidroksid). Povećanje prinosa za 53%. Utvrđeno je da je inline ultrazvučna obrada efikasnija od šaržne ekstrakcije (inline ultrazvučna obrada dala je 23% veći prinos nego šaržna ultrazvučna obrada).
Preporučeni uređaj:
UIP1000hd za šaržni rad / čašu i s reaktorom s protočnom ćelijom za inline ultrazvučnu obradu.
Referenca / istraživački rad:
Moulton and Wang (1982), na koje upućuju Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvučno dobivanje i modifikacija sastojaka hrane. U: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Ultrazvučna ekstrakcija proteina soje u vodi i alkaliji (natrijum-hidroksid). Povećanje prinosa za 53%. Utvrđeno je da je inline ultrazvučna obrada efikasnija od šaržne ekstrakcije (inline ultrazvučna obrada dala je 23% veći prinos nego šaržna ultrazvučna obrada).
Preporučeni uređaj:
UIP1000hd za šaržni rad / čašu i s reaktorom s protočnom ćelijom za inline ultrazvučnu obradu.
Referenca / istraživački rad:
Moulton and Wang (1982), na koje upućuju Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvučno dobivanje i modifikacija sastojaka hrane. U: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Glave spermatozoida (ljudskih)
Repovi spermatozoida (ljudskih)
Stevia rebaudiana Bert.
Ultrazvučna primjena:
Ultrazvučna ekstrakcija steviozidnog glikozida iz uzoraka od 10 g suhih listova Stevia rebaudiana s četiri veličine čestica (0,315 mm, 2 mm, 6,3 mm i zdrobljeni suhi listovi) pomiješanih s različitim otapalima: destiliranom vodom i smjesama vode/etanola (55% i 70%) s različitim omjerima mase uzorka i volumena otapala: 1/10, 1/8, 1/5 (w/v), zatim izloženih ultrazvuku na sobnoj temperaturi. Vrijeme ultrazvučne obrade: < 5 min.
Preporučeni uređaj:
UP200St
Ultrazvučna ekstrakcija steviozidnog glikozida iz uzoraka od 10 g suhih listova Stevia rebaudiana s četiri veličine čestica (0,315 mm, 2 mm, 6,3 mm i zdrobljeni suhi listovi) pomiješanih s različitim otapalima: destiliranom vodom i smjesama vode/etanola (55% i 70%) s različitim omjerima mase uzorka i volumena otapala: 1/10, 1/8, 1/5 (w/v), zatim izloženih ultrazvuku na sobnoj temperaturi. Vrijeme ultrazvučne obrade: < 5 min.
Preporučeni uređaj:
UP200St
Kontaktirajte nas! / Pitajte nas!
Visokoučinkoviti ultrazvučni uređaji svih veličina
Hielscher Ultrasonics uređaji za razgradnju ćelija i homogenizatori tkiva dostupni su u svim veličinama za sve volumene. Bilo da trebate ultrazvučno obraditi male uzorke, masovne uzorke kao što su ploče s 96 jažica, srednje volumene ili količine od više kamiona na sat, naš portfelj nudi idealan ultrazvučni uređaj za vašu primjenu. Kompaktni, ručni ultrazvučni homogenizatori optimalni su za laboratorij i istraživanje, dok naša industrijska serija pokriva sve između 0,5kW do 16kW po ultrazvučnom procesoru. Zahvaljujući mogućnosti ugradnje u klastere, ultrazvučnim uređajima Hielscher možete obraditi praktično bilo koji volumen. Robusnost ultrazvučne opreme tvrtke Hielscher omogućava rad 24/7 pod velikim opterećenjem i u zahtjevnim okruženjima.
Sofisticiran i pametan softver omogućava najviši nivo kontrole procesa i udobnost rukovaoca. Svi podaci o ultrazvučnoj obradi (sonikaciji) automatski se bilježe na ugrađenu SD karticu. Ostale pametne funkcije uključuju prethodno postavljanje i spremanje parametara ultrazvučne obrade, LAN priključak i daljinsko upravljanje putem preglednika.
Tabela u nastavku daje okvirni pregled približnog kapaciteta obrade naših laboratorijskih ultrazvučnih uređaja za homogenizaciju tkiva i druge zadatke pripreme uzoraka:
| Preporučeni uređaji | Volumen šarže | Protok |
|---|---|---|
| UIP400MTP ultrazvučni uređaj za ploče s 96 jažica | ploče s više jažica / mikrotitarske ploče | n.a. |
| Ultrazvučni CupHorn | CupHorn za bočice ili čaše | n.a. |
| GDmini2 | ultrazvučni mikro protočni reaktor | n.a. |
| VialTweeter | 0,5 do 1,5mL | n.a. |
| UP100H | 1 do 500mL | 10 do 200mL/min |
| UP200Ht, UP200St | 10 do 1000mL | 20 do 200mL/min |
| UP400St | 10 do 2000mL | 20 do 400mL/min |
| Ultrazvučna sita-tresilica | n.a. | n.a. |
Ultrazvučni uređaj UP200Ht s mikrovrhom S26d2 od 2mm za ultrazvučnu obradu malih uzoraka