Điều chế huyết thanh giàu tiểu cầu bằng siêu âm
- Huyết tương giàu tiểu cầu (PRP) là huyết tương được làm giàu tiểu cầu, được sử dụng trong điều trị y khoa và thẩm mỹ.
- Ly giải và điều hòa bằng siêu âm là phương pháp rất hiệu quả để điều chế huyết tương giàu tiểu cầu.
- Hielscher Ultrasonics cung cấp nhiều hệ thống siêu âm đáp ứng các yêu cầu xử lý máu (ví dụ: để điều chế bên trong và bên ngoài phòng sạch).
Huyết thanh giàu tiểu cầu
Xử lý bằng siêu âm là phương pháp đáng tin cậy và dễ thực hiện để ly giải tiểu cầu trong huyết thanh tự thân nhằm giải phóng các yếu tố tăng trưởng. Các phân đoạn có nguồn gốc từ tiểu cầu – còn được gọi là huyết thanh tự thân đã điều hòa (ACS) – được sử dụng để phục hồi mô hoặc điều trị thẩm mỹ. Để đạt kết quả tối ưu, PRP được làm giàu trước khi tiêm.
Để điều chế huyết tương được làm giàu các yếu tố tăng trưởng tế bào, xử lý bằng siêu âm là phương pháp rất hiệu quả và hiệu suất cao để ly giải màng tế bào và giải phóng gần như toàn bộ các yếu tố tăng trưởng tế bào từ tiểu cầu. Với phương pháp ly giải và điều hòa bằng siêu âm, ngay cả máu đã được chống đông cũng có thể được sử dụng.
Điều hòa PRP bằng siêu âm là cách thuận tiện và tiết kiệm chi phí để thu được các yếu tố tăng trưởng ở dạng cô đặc.
Ly giải huyết tương giàu tiểu cầu (PRP) bằng siêu âm
Tác động của quá trình ly giải bằng siêu âm
Xử lý huyết thanh bằng siêu âm giúp ly giải đồng đều các tiểu cầu nhằm giải phóng các yếu tố tăng trưởng bị giữ bên trong (yếu tố tăng trưởng AB (PDGF-AB), yếu tố tăng trưởng AA (PDGF-AA), yếu tố tăng trưởng BB (PDGF-BB), yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu (VEGF), yếu tố tăng trưởng chuyển dạng β (TGF-β), yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF), yếu tố tăng trưởng giống insulin (IGF), yếu tố tăng trưởng tế bào biểu mô ECGF và yếu tố tăng trưởng nguyên bào sợi (FGF)). Tiểu cầu và các hạt alpha của chúng bị phá vỡ bằng siêu âm, nhờ hiện tượng xâm thực âm. Sử dụng hiện tượng xâm thực siêu âm để ly giải tiểu cầu làm giảm tác động tiêu cực có thể có của phương pháp đông lạnh–rã đông lặp lại đối với hoạt tính của các yếu tố tăng trưởng.
Quy trình điều chế PRP bằng siêu âm
Khoảng 16mL mẫu máu tự thân mới lấy được đảo nhẹ 8–10 lần trong ống để máu và chất chống đông được trộn đều. Sau đó, mẫu được ly tâm ở 1800 g trong 20 phút ở nhiệt độ phòng. Sau khi ly tâm, tiểu cầu và các tế bào đơn nhân tạo thành một lớp trắng nhạt ở đáy lớp huyết tương, được gọi là huyết tương giàu tiểu cầu (PRP). Lớp phía trên được gọi là huyết tương nghèo tiểu cầu (PPP). Các tế bào đơn nhân có thể được loại bỏ hoặc giữ lại trong mẫu. Thông thường, các tế bào đơn nhân được giữ lại trong mẫu PRP để tránh các bước bổ sung có nguy cơ gây nhiễm bẩn.
Lưu ý: Việc xử lý PRP tự thân bằng siêu âm phải được thực hiện trong điều kiện vô trùng.
PRP và PPP được tách riêng và thu lấy. Thêm 1,5mL dung dịch canxi clorua 10% vào PPP, còn PRP được bổ sung 0,5mL etanol 5%. Cả hai huyền phù được lắc nhẹ và để yên trong 5 phút ở nhiệt độ phòng. Cuối cùng, thêm 1mL PPP vào huyền phù PRP và để yên cho đến khi hình thành cục đông fibrin.
Xử lý bằng siêu âm: Vì gel tiểu cầu được tạo thành đóng vai trò là nơi lưu giữ các yếu tố tăng trưởng đã giải phóng, gel fibrin phải được phá vỡ để giải phóng các yếu tố tăng trưởng sẵn có. Các thông số ly giải bằng siêu âm và giải phóng yếu tố tăng trưởng như sau: Xử lý mẫu trong ống bằng siêu âm với thiết bị UP200Ht hoặc UP200St (200W, 26kHz) cùng đầu siêu âm S26d2. Để tránh làm mẫu máu quá nóng, có thể xử lý siêu âm theo chu kỳ xung (ví dụ: bật 10 giây, tắt 30 giây). Mẫu nên được đặt trên đá để làm mát sao cho nhiệt độ được duy trì tối ưu trong khoảng 2–5°C. Sau khi xử lý siêu âm, mẫu được ly tâm ở 16.000 g trong 5 phút ở nhiệt độ phòng. Dịch nổi được thu lấy và có thể bảo quản ở -70°C.
Nồng độ tiểu cầu trong phân đoạn PRP được làm giàu gấp 1,7–4,5 lần bằng phương pháp siêu âm so với số lượng tiểu cầu trung bình trong máu toàn phần được ghi nhận trong tài liệu.
PRP đã được kết hợp với liệu pháp tế bào gốc có nguồn gốc từ mô mỡ (các tế bào gốc tự thân được giải phóng khỏi mô mỡ bằng siêu âm, trộn với PRP và tiêm trở lại mô của bệnh nhân để phục hồi).
Thiết bị siêu âm
Hielscher Ultrasonics là chuyên gia về công nghệ siêu âm tinh vi và đáng tin cậy. Các thiết bị siêu âm của chúng tôi được sử dụng trên toàn thế giới để ly giải, chiết xuất và chuẩn bị mẫu – bằng phương pháp trực tiếp và gián tiếp. Các phụ kiện có thể tiệt trùng bằng nồi hấp cũng như các phụ kiện dùng một lần bảo đảm việc xử lý không nhiễm bẩn các mẫu máu tự thân. Hầu hết các hệ thống của chúng tôi có thể được sử dụng để ly giải bằng siêu âm tế bào gốc và PRP, giúp các thiết bị siêu âm của chúng tôi đạt hiệu quả kinh tế cao hơn nữa.
Bảng dưới đây liệt kê các thiết bị siêu âm của chúng tôi phù hợp để điều chế huyết tương giàu tiểu cầu cùng với thể tích mẫu khuyến nghị tương ứng. Chúng tôi cũng cung cấp các thiết bị siêu âm lớn hơn và các hệ thống tùy chỉnh.
| Thiết bị | Công suất [W] | Tần số [kHz] | Loại | Thể tích [mL] | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| VialTweeter | 200 | 26 | độc lập | 0,5 | – | 1,5 |
| UP50H | 50 | 30 | cầm tay hoặc gắn trên giá đỡ | 0,01 | – | 250 |
| UP100H | 100 | 30 | cầm tay hoặc gắn trên giá đỡ | 0,01 | – | 500 |
| UP200Ht | 200 | 26 | cầm tay hoặc gắn trên giá đỡ | 0,1 | – | 1000 |
| UP200St | 200 | 26 | gắn trên giá đỡ | 0,1 | – | 1000 |
| UP400St | 400 | 24 | gắn trên giá đỡ | 5,0 | – | 2000 |
| UP200St-SonoStep | 200 | 26 | độc lập | 30 | – | 500 |
| GDmini2 | 200 | 26 | buồng dòng chảy không nhiễm bẩn | |||
Hãy liên hệ với chúng tôi ngay hôm nay! Chúng tôi rất sẵn lòng giúp bạn tìm thiết bị siêu âm tối ưu!
Liên hệ với chúng tôi! / Hãy hỏi chúng tôi!
GDmini2 trên bộ chuyển đổi siêu âm UP200St-TD (200 oát)
Tài liệu/Tài liệu tham khảo
- Fortunato, T. M.; Beltrami, Ch.; Emanueli, C.; De Bank, P.A:; Pula, G. (2016): Gel dịch ly giải tiểu cầu và các tế bào tiền thân nội mô kích thích hình thành mạng vi mạch in vitro: ý nghĩa đối với kỹ thuật mô. Sci. Rep. 6, 2016.
- Hamid, M.S.A.; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): Huyết tương giàu tiểu cầu (PRP) cho tổn thương cơ cấp tính: Tổng quan hệ thống. PLOS ONE Tập 9, Số 2, 2014.
Những điều cần biết
Huyết tương giàu tiểu cầu
Huyết tương giàu tiểu cầu chứa yếu tố tăng trưởng AB (PDGF-AB), yếu tố tăng trưởng AA có nguồn gốc từ tiểu cầu (PDGF-AA), yếu tố tăng trưởng BB có nguồn gốc từ tiểu cầu (PDGF-BB), yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu (VEGF), yếu tố tăng trưởng chuyển dạng β (TGF-β), yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF), yếu tố tăng trưởng giống insulin (IGF), yếu tố tăng trưởng tế bào biểu mô ECGF và yếu tố tăng trưởng nguyên bào sợi (FGF), là những chất kích thích quan trọng đối với sự tăng trưởng và tái tạo tế bào.
Huyết thanh tự thân đã điều hòa (ACS)
Huyết tương tự thân đã điều hòa (ACP) là huyết tương giàu tiểu cầu được chiết tách từ máu tự thân, được sử dụng để hỗ trợ tái tạo trong nhiều tình trạng bệnh lý chỉnh hình và thủ thuật phẫu thuật. Huyết thanh đã điều hòa được điều chế bằng cách tách huyết tương khỏi các thành phần khác của máu (chẳng hạn như hồng cầu) rồi cô đặc huyết tương. ACP là huyết tương giàu tiểu cầu (PRP). PRP là thuật ngữ chung chỉ một loại huyết tương có nồng độ tiểu cầu cao hơn đáng kể so với máu toàn phần. PRP được chiết tách từ máu toàn phần. Các thành phần chính của ACP bao gồm tiểu cầu và một số yếu tố tăng trưởng đóng vai trò then chốt trong các quá trình lành thương. Khác với các chế phẩm huyết tương giàu tiểu cầu khác, ACP có đặc điểm là nồng độ thấp các bạch cầu như bạch cầu hạt trung tính, vốn có thể gây bất lợi cho quá trình lành thương khi hiện diện ở nồng độ cao.
Tiêm huyết tương giàu tiểu cầu
Huyết tương giàu tiểu cầu được sử dụng dưới dạng tiêm trong y học tái tạo cũng như trong các thủ thuật thẩm mỹ. Việc ứng dụng PRP hứa hẹn đẩy nhanh đáng kể quá trình lành tổn thương cơ và phục hồi cơ. Ngoài ra, PRP được sử dụng thành công để điều trị viêm, viêm khớp, đau, vết thương, vết thương hở chậm lành và bỏng da nghiêm trọng. PRP chứa hàm lượng cao các yếu tố tăng trưởng, giúp kích thích và bảo vệ các tế bào tham gia quá trình lành thương để mô bị tổn thương được phục hồi.
Trong điều trị thẩm mỹ, PRP đã được chứng minh có hiệu quả kích thích mọc tóc và tái tạo da (còn được gọi là liệu pháp ma cà rồng).
Các yếu tố tăng trưởng có nguồn gốc từ tiểu cầu (PDGF)
Thuật ngữ yếu tố tăng trưởng có nguồn gốc từ tiểu cầu (PDGF) chỉ các yếu tố PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C và PDGF-D. Đây là một mạng lưới truyền tín hiệu gồm bốn phối tử (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C và PDGF-D) và hai thụ thể, PDGFR-alpha và PDGFR-beta.
Các yếu tố tăng trưởng, hay các protein, điều hòa sự tăng trưởng và phân chia tế bào. Là chất kích thích phân bào chủ yếu có trong huyết thanh động vật có vú, được giải phóng từ tiểu cầu trong quá trình hình thành cục máu đông, yếu tố này đóng vai trò đáng kể trong sự hình thành mạch máu (tân sinh mạch), tức sự phát triển của mạch máu từ mô mạch máu đã có sẵn.