ultratovush to'qimalarining gomogenizatorlari
- Ultrasonikatsiya xavfsizdir & to'qimalarni homogenlashning samarali usuli.
- Ultrasonik dasturlarga preparat to'qimalari va suspenziyalari, oqsillar, DNK / RNK va faol birikmalar ekstraktsiyasi, shuningdek fermentlar va xamirturushlarni faollashtirish / inaktivatsiya qilish kiradi.
- Prob tipidagi ultratovushli gomogenizatorlarning aniq nazorat qilinishi to'qimalar namunalarini ishonchli tayyorlash imkonini beradi.
Ultrasonik problar yordamida to'qimalarni homogenlash
To'qimalarni homogenlashtirish - bu oqsillar, DNK yoki RNK kabi hujayra ichidagi moddalarni olishdan oldin hayvon va o'simlik hujayralari yoki mikroorganizmlar tayyorlanadigan namuna tayyorlash jarayoni. Hujayra tarkibini chiqarish uchun hujayra membranasi yorilishi kerak. Hujayra devorini sindirgandan so'ng, hujayra ichidagi makromolekulalar bufer eritmasida suzadi, shunda organellalar, oqsillar va DNK / RNK mavjud bo'ladi. Ultrasonik to'qimalarni homogenizatorlari va hujayra disruptorlari hujayra buzilishi, lizis va ekstraktsiya uchun juda samarali vositalardir.
Zond tipidagi ultratovush apparatlari (masalan, 200 vatt kuchli UP200St) ishonchli to'qimalar gomogenizatorlari bo'lib, namuna tayyorlash uchun keng qo'llaniladi.
Ultrasonik to'qimalarni homogenizatorlari va alternativ liziz usullari
Siz o'zingizdan hujayralarni buzishning qaysi texnikasi va qaysi to'qimalarni homogenlash uskunasi laboratoriyangiz uchun eng yaxshi variant ekanligini so'rashingiz mumkin. Quyida ultratovushli liziz va to'qimalarning gomogenizatsiyasi haqida gapiradigan bir nechta dalillarni topishingiz mumkin, chunki ultrasonikatsiya muqobil gomogenizatsiya usullariga nisbatan bir qator afzalliklarga ega:
- Samaradorlik: Ultrasonik gomogenizatsiya to'qimalar va hujayralarni buzish uchun tez va samarali usuldir. Ultrasonik to'qimalarni homogenizatorlari akustik kavitatsiyaning ishlash printsipidan foydalanadilar. Bu usul juda samarali va bir necha soniya ichida hujayralarni buzishi mumkin. Intensivlik darajasi engildan qizg'ingacha sozlanishi mumkinligi sababli, sonikatsiya boshqa usullar yordamida homogenlash qiyin bo'lgan qattiq yoki tolali to'qimalar uchun ayniqsa samaralidir.
- O'zaro kontaminatsiyadan saqlaning: Hielscher bilvosita sonikatsiya bilan davolashda namunani tayyorlaydigan kuchli ultratovushli to'qimalar homogenizatorlarini taklif qiladi. UIP400MTP (mikrotitr va ko'p quduqli plitalar uchun ideal), shuningdek, VialTweeter va CupHorn (flakonlar, naychalar va stakanlar uchun ideal) bilan Hielscher kontaktsiz homogenlash uchun ultratovushli hujayralarni buzish uskunasini taklif qiladi, bu esa o'zaro kontaminatsiya xavfini kamaytiradi. namunalar orasida. Bundan tashqari, silliqlash yuzalaridan yoki boshqa gomogenizatsiya uskunalaridan ifloslantiruvchi moddalarni kiritish xavfini kamaytiradi.
- Moslashuvchanlik: Ultrasonik gomogenizatsiya turli xil namuna o'lchamlari va hajmlari bilan, kichik hajmlardan katta to'qimalar namunalarigacha ishlatilishi mumkin. Bundan tashqari, ultratovushli gomogenizatsiya o'simlik to'qimalari, hayvon to'qimalari va mikrobial madaniyatlarni o'z ichiga olgan keng turdagi namunalar uchun ham javob beradi. Ultrasonikatsiyaning intensivligi va davomiyligi har xil turdagi to'qimalar uchun buzilish darajasini optimallashtirish uchun sozlanishi mumkin.
- Qayta ishlab chiqarish qobiliyati: Ultrasonik gomogenizatsiya izchil natijalarni beradi va quvvat chiqishi va sonikatsiya vaqti kabi gomogenizatsiya parametrlarini aniq nazorat qilish imkonini beradi. Bu eksperimental ma'lumotlarning takrorlanishi va aniqligini ta'minlashga yordam beradi.
- Biomolekulalarni saqlash: Prob tipidagi ultratovush - bu termal bo'lmagan ishlov berish. Bu uning ta'siri issiqlikka asoslanmaganligini anglatadi. Biroq, har bir mexanik ishlov berish termodinamikaning ikkinchi qonuniga muvofiq issiqlik hosil qiladi. Bu shuni anglatadiki, namuna uzoqroq sonikatsiya vaqtlarida issiqroq bo'ladi. Hielscher zamonaviy ultrasonikatorlari harorat sensorlari va aqlli harorat monitoringi dasturi bilan jihozlangan. Murakkab sovutish imkoniyatlari issiqlik degradatsiyasini oldini olishga imkon beradi va fermentlar va oqsillar kabi issiqlikka sezgir biomolekulalarning faolligini saqlashga yordam beradi.
- Vaqtni tejash: Prob tipidagi ultratovushning yuqori samaradorligi to'qimalarni tez homogenlashtirishga imkon beradi, bu esa to'qimalarni yanada kengroq jismoniy manipulyatsiya qilishni talab qiladigan boshqa usullarga nisbatan vaqtni tejaydi.
Ultrasonik to'qimalarni homogenlashtirish muqobil homogenlash usullariga nisbatan bir qancha afzalliklarni beradi. Shuning uchun ultratovushli to'qimalarni homogenizatorlari turli xil tadqiqot va sanoat ilovalarida afzal qilingan hujayralarni buzish usuli hisoblanadi.
Ultrasonik zond yordamida to'qimalarni homogenlash protokoliga misol:
Ultrasonikatorlar oddiy operatsiya va tez gomogenizatsiya protsedurasi orqali to'qimalarni homogenlashtirishni osonlashtiradi. Shu bilan birga, ultratovushli jarayon parametrlari aniq nazorat qilinishi va kuzatilishi mumkin, natijada natijalar ishonchli va takrorlanadi.
Materiallar:
- To'qimalar namunasi (masalan, jigar, miya, mushak)
- Bufer (masalan, PBS, Tris-HCl)
- proteaz inhibitori kokteyli
- Ultrasonik gomogenizator (zond turi)
- Muz
- mikrosentrifuga naychalari
- Pipetkalar
Ultrasonik to'qimalarni homogenlashtirish protokoli:
Eslatma: Sonikatsiyaning davomiyligi va intensivligi to'qimalarning turiga, yoshiga va sog'lig'iga, shuningdek, quyi oqimning o'ziga xos ilovalariga qarab optimallashtirilishi kerak bo'lishi mumkin. Gomogenatning hosildorligi va sifatini optimallashtirish uchun bufer, proteaz inhibitörleri va boshqa qo'shimchalarni diqqat bilan tanlash ham muhimdir.
Ultrasonik to'qimalarni gomogenizatori UP200Ht Hujayra buzilishi, lizis, hujayra gomogenizatsiyasi va eruvchanligi, shuningdek, oqsillarni ekstraktsiya qilish uchun 2 mm shoxli / zond bilan.
Hielscher ultratovushli to'qimalarni homogenizatorlarining asosiy afzalliklari
- tez va samarali silliqlash, gomogenlash, lizis & hujayra buzilishi yoki kuchli ultratovushli kavitatsiya orqali ekstraktsiya
- oson va intuitiv foydalanish va ishlatish (analog yoki raqamli versiyani tanlang)
- Sonotrodni sonikatsiya ostida yuvish orqali mahsulot bilan aloqa qiladigan yuzalarni oson tozalash (CIP toza joyida / SIP sterilizatsiya joyida)
- ovoz himoyasi qutisi (laboratoriya asboblari uchun ovoz himoyasi qutisi har qanday burchakdan to'liq ko'rish uchun butunlay akril shishadan qilingan)
- qurilmadagi raqamli sensorli displey (raqamli ultrasonikatorlar) yoki quvvat o'lchagich (analog qurilmalar uchun) orqali jarayon parametrlarini to'liq nazorat qilish.
- integratsiyalashgan harorat nazorati (issiqlikka sezgir, labil to'qimalar namunalari uchun muhim)
- homogenizatsiya jarayonidagi pauzalar alohida belgilanishi va raqamli menyuda oldindan belgilanishi mumkin
- barcha raqamli qurilmalar avtomatik ma'lumotlarni yozib olish (o'rnatilgan SD/USB-ComboCard-da), ulanadigan harorat sensori va brauzerning masofadan boshqarish pulti bilan jihozlangan.
- bilan ko'p namunali davolash VialTweeter, chashka yoki 4 yoki 8 barmoqli sonotrodlar yordamida (masalan, laboratoriya robot jarayonlariga integratsiya qilish uchun)
- kichik va katta hajmdagi ilovalar uchun
Namuna tayyorlash bilan ultratovushli probi UP100H.
Quyidagi jadval sizga hujayra parchalanishi, lizis va ekstraktsiya uchun ultratovushli to'qimalarni gomogenizatorlarining taxminiy qayta ishlash qobiliyatini ko'rsatadi:
| To'plam hajmi | Oqim darajasi | Tavsiya etilgan qurilmalar |
|---|---|---|
| ko'p quduqli plitalar | yo'q | UIP400MTP |
| flakonlar, kichik stakan | yo'q | Ultrasonik kubok |
| 10 flakongacha | yo'q | VialTweeter |
| 1 dan 500 ml gacha | 10 dan 200 ml / min | UP100H |
| 10 dan 2000 ml gacha | 20 dan 400 ml / min | UP200Ht, UP400St |
| 0.1 dan 20 L gacha | 0.2 dan 4L/min gacha | UIP2000hdT |
Biz bilan bog'lanish! / Bizdan so'rang!
Ultrasonik kubok namunalarni steril homogenlash uchun yopiq naychalar va flakonlarni intensiv sonikatsiya qilish uchun.
Ilovangiz uchun optimal ultratovushli to'qimalarni homogenizatorini toping
Hielscher ultratovushli to'qima gomogenizatorlari 50 Vt dan 16 000 Vt (16 kVt) gacha bo'lgan ultratovush chiqish diapazoni bilan mavjud.
Laboratoriya xodimlari Hielscher ultratovushli laboratoriya homogenizatorlarining oddiy va intuitiv ishlashidan mamnun. Maxsus talablarga qarab, Hielscher qurilmalari raqamli yoki analog boshqaruv bilan birga keladi.
- VialTweeter kuchli ultratovushli gomogenizator bo'lib, bir vaqtning o'zida 10 ta flakon yoki probirkani bir xil intensivlikda sonikatsiya qilish imkonini beradi. Bilvosita sonikatsiya tufayli o'zaro kontaminatsiya va namunani yo'qotish butunlay oldini oladi. Bir martalik flakonlardan foydalanish tufayli tozalash va tozalash minimal darajaga tushiriladi. Blok sonotrodi avtoklavlanishi mumkin.
- UIP400MTP plastinka-sonikator mikrotitrli va 96 quduqli plitalar kabi ko'p quduqli plitalar bilan ishlaganingizda ideal. UIP400MTP ga ko'p quduqli plastinka yoki petri kosasini qo'ying va barcha namunalar bir xilda tovush chiqaradi. UIP400MTP Plate-Sonicator yordamida yuqori o'tkazuvchanlikdagi namunani qayta ishlash oddiy va samarali bo'ladi!
- Prob tipidagi laboratoriya ultrasonikatorlari oralig'ida gomogenizatorlar 50 vatt, 100 vatt, 200 vatt va 400 vatt bilan tanlanishi mumkin.
UP50H (50W)
UP100H (100W)
UP200Ht / UP200St (200W)
UP400St (400W)
Ultrasonik to'qimalarni homogenizatorlarini qo'llash va ulardan foydalanish
Ultrasonik gomogenizatorlar odatda to'qimalarni silliqlash, hujayra buzilishi uchun ishlatiladi & molekulyar diapazonda hujayra ichidagi moddalarni olishdan oldin biologik namunalarni liziz va homogenlash. Namunalarni nazorat qilinadigan sonikatsiya yordamida lizisdan tortib olish va gomogenizatsiya qilishgacha bo'lgan barcha bosqichlar bir xil ultratovushli hujayra buzuvchisi yordamida amalga oshirilishi mumkin.
Ultrasonik gomogenizatorlarning katta afzalligi osongina sozlanishi quvvat kiritish va sonikatsiya intensivligidadir. Hielscher ultratovushli hujayra buzilishlari (liserlar) amplitudani 20% dan 100% gacha sozlash orqali sonikatsiya intensivligini nazorat qilish imkonini beradi.
Uzluksiz ishlashga alternativa sifatida ultratovushli gomogenizatorni sikl rejimiga o'rnatish mumkin, masalan, issiqlikka sezgir to'qimalarni sonikatsiya qilish uchun. Puls rejimida sonikatsiya ultrasonikator davriy tsikllarda yuqori intensiv ultratovush to'lqinlarini hosil qilishini anglatadi. Sonikatsiya davrining davomiyligi va dam olish vaqti foydalanuvchi tomonidan individual ravishda o'rnatilishi mumkin.
da impulsli sonikatsiya, dam olish davrida soniklangan material dam olish holatiga qaytishi mumkin va namuna sovishi mumkin (issiqlik tarqalishi uchun dam olish vaqtidan foydalanish). Shunday qilib, ishlov berish intensivligi to'qimalarga mos ravishda aniq belgilanishi mumkin va istalmagan namunaning isishi kamayadi.
Ultrasonik to'qimalarning gomogenizatorlari mustahkam va foydalanuvchilar uchun qulay bo'lib, barcha muhim jarayon parametrlarini to'liq nazorat qilish tufayli qayta ishlab chiqarishni ta'minlaydigan ishonchli natijalarni beradi.
Ultrasonik to'qimalarni maydalash, hujayralarni buzish, liziz, ekstraktsiya va gomogenizatsiyaning umumiy qo'llanilishi biologik va farmatsevtika laboratoriyalarida, mikrobiologiyada, proteomik va genomik tadqiqotlarda (masalan, Western blotting va ferment bilan bog'liq immunosorbent tahlili ELISAdan oldin oqsillarni chiqarish) topilgan. oziq-ovqat, farmatsevtika va kosmetika uchun botanika ekstraktlari va bioaktiv birikmalar ishlab chiqarish tarmoqlar.
- Namuna tayyorlash, to'qimalarni homogenlashtirish, lizis va ekstraktsiya (masalan, hujayralar, bakteriyalar, sporlar, faol birikmalar) bo'yicha maxsus jarayon tavsiyalari uchun bu yerni bosing!
- Nega sonikatorlar proteomik tadqiqotlar uchun ajralmas vosita ekanligini bu erda o'qing!
- Sonikatsiya genomik tadqiqot ishlarini qanday osonlashtirishini bilib oling!
Adabiyot / Adabiyotlar
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
Bilishga arziydigan faktlar
Ultrasonik to'qimalarni homogenizatorlari ko'pincha prob sonikatori, sonik liser, ultratovushni buzuvchi, ultratovushli maydalagich, sono-ruptor, sonifier, ovozli dismembrator, hujayra buzuvchi, ultrasonik disperser yoki erituvchi deb ataladi. Turli xil atamalar sonication orqali bajarilishi mumkin bo'lgan turli xil ilovalardan kelib chiqadi.





