Hujayra lizisi uchun sonikatsiya: hujayraning buzilishi va ekstraktsiyasi
Ultrasonik hujayra lizisi zamonaviy biotexnologik laboratoriyalarda keng qo'llaniladigan namuna tayyorlash usuli hisoblanadi. Uning asosiy maqsadi oqsillar, nuklein kislotalar yoki organellalar kabi hujayra ichidagi tarkibiy qismlarni chiqarish uchun hujayra membranalarini yoki butun hujayralarni buzishdir. Kundalik laboratoriya ishlarida bu sonikatsiya nazorat qilinadigan hujayra buzilishi va biomolekulalarning samarali ekstraktsiyasi uchun standart usul ekanligini anglatadi. Sonikatorlarning asosiy afzalligi ultratovush intensivligi, pulsatsiya va haroratni nazorat qilish kabi muhim jarayon parametrlarini aniq modulyatsiya qilish qobiliyatidadir. Ushbu nazorat tadqiqotchilarga ishonchli lizizga erishishga imkon beradi, shu bilan birga sezgir biomolekulalarga termal yoki mexanik zararni kamaytiradi, bu esa yumshoq, ammo yuqori samarali ekstraksiya jarayoniga olib keladi.
Sonikatorlar yordamida hujayra lizisi
Ultrasonik hujayra lizisi hujayra membranalarini buzish va hujayra ichidagi molekulalarni chiqarish uchun akustik kavitatsiyadan foydalanadi. Hielscher Ultrasonics klassik prob tipidagi sonikatorni, shuningdek, steril ishlov berish uchun ko'p namunali sonikatorlarni taklif qiladi: bir nechta naychalar va flakonlar uchun VialTweeter va standart mikroplatalar uchun 96-quduqli plastinka Sonicator UIP400MTP.
Hielscher Ultrasonics namuna tayyorlash va klinik tahlil qilish uchun kuchli kontaktsiz sonikatorlarni taqdim etadi. Ko'p quduqli plastinka sonikatori UIP400MTP, VialTweeter, CupHorn va GDmini2 oqim sonikatori namunalarni steril sharoitda qayta ishlash.
Ultrasonik gomogenizatorlar UP100H (100 vatt) va UP400St (400 vatt): Hujayra lizisi va ekstraktsiyasi uchun sonikatsiya.
Hujayra lizisi va ekstraktsiyasi uchun ultratovushli homogenizatorlar
| Ultrasonik qurilma turi | Ilova fokus | Namuna hajmi | Oddiy foydalanish holati | Afzalliklar | Misol modellari |
|---|---|---|---|---|---|
| Zond tipidagi sonikatorlar | Bitta namunali sonikatsiya | 0,1 ml dan ~1000 ml gacha | Hujayra lizisi, oqsillarni ajratib olish, DNK/RNK parchalanishi | Aniq energiya nazorati; turli xil sonotrodlar; kichik va o'rta namunalar uchun optimal | UP100H, UP200St, UP400St |
| VialTweeter / CupHorn | Bir nechta muhrlangan flakonlarni parallel qayta ishlash | 8–10 flakon (har biri ~1–20 ml) | Bir nechta hujayra suspenziyalarining standartlashtirilgan lizisi | Yagona sonikatsiya; o'zaro kontaminatsiyani oldini oladi; takrorlanadigan natijalar | VialTweeter, chashka |
| 96-quduqli plastinka sonikatori | Ko'p o'tkazgichli va mikrotitrli plitalarning sonikatsiyasi | Mikroplastinka formati | Yuqori o'tkazuvchanlik skrining, proteomika, hujayra tahlillari | Quduqlar bo'ylab bir vaqtning o'zida, hatto sonikatsiya; ko'p namunali ish oqimlari uchun ideal | UIP400MTP |
| oqim hujayralari reaktorlari | Yuqori hajmlar uchun doimiy sonikatsiya | >1 L, kengaytirilishi mumkin | Sanoat miqyosidagi hujayra buzilishi, ekstrakt ishlab chiqarish | Uzluksiz ishlov berish; kengaytiriladigan; to'liq jarayon nazorati (amplituda, bosim, harorat) | UIP1000hdT, UIP2000hdT + oqim xujayrasi |
| Steril / bilvosita sonication tizimlari | Kontaminatsiyasiz namunani qayta ishlash | Flakon/naycha/mikroplataga bog'liq | Nozik namunalar, steril muhitlar, tartibga solish sozlamalari | Prob bilan aloqa yo'q; o'tkazishni oldini oladi; minimal tozalash harakati | VialTweeter, chashka, UIP400MTP |
Hujayra lizisi uchun sonikatsiyadan foydalanishning afzalliklari
Boshqa hujayra lizizi va ekstraktsiya usullari bilan solishtirganda, ultratovushli hujayra lizisi bir qator afzalliklarga ega:
- Tezlik: Ultrasonik hujayra lizis va ekstraktsiyasi bir necha soniya ichida ochiq hujayralarni buzishi mumkin bo'lgan tezkor usuldir. Bu gomogenizatsiya, muzdan eritish yoki boncuklarni maydalash kabi boshqa usullarga qaraganda ancha tezroq.
- Samaradorlik: Ultrasonik hujayra lizisi va ekstraktsiyasi kichik, katta yoki bir nechta namunalarni bir vaqtning o'zida davolash uchun ishlatilishi mumkin, bu kichik namunalarni individual qayta ishlashni talab qiladigan boshqa usullarga qaraganda samaraliroq bo'ladi.
- Kimyoviy moddalarsiz: Ultrasonik hujayra lizisi va ekstraktsiyasi invaziv bo'lmagan usul bo'lib, qattiq kimyoviy moddalar yoki fermentlardan foydalanishni talab qilmaydi. Bu uni hujayra tarkibining yaxlitligi saqlanishi kerak bo'lgan ilovalar uchun ideal qiladi. Namunalarning kiruvchi ifloslanishining oldini olish mumkin.
- Yuqori hosil: Ultrasonik hujayra lizisi va ekstraktsiyasi DNK, RNK va oqsillarni o'z ichiga olgan hujayra tarkibining yuqori hosilini olishi mumkin. Buning sababi shundaki, yuqori chastotali tovush to'lqinlari hujayra devorlarini buzadi va tarkibini atrofdagi eritma ichiga chiqaradi.
- Harorat nazorati: Murakkab ultratovush apparatlari namunaning haroratini aniq nazorat qilish imkonini beradi. Hielscher raqamli sonikatorlari ulanadigan harorat sensori va haroratni kuzatish dasturi bilan jihozlangan.
- Qayta ishlab chiqarish: Ultrasonik hujayra lizisining protokollari osongina ko'paytirilishi va hatto oddiy chiziqli o'lchov orqali turli kattaroq yoki kichikroq namuna hajmlariga mos kelishi mumkin.
- Ko'p qirrali: Ultrasonik hujayra lizisi va ekstraktsiyasi bakteriyalar, xamirturush, zamburug'lar, o'simlik va sutemizuvchilar hujayralarini o'z ichiga olgan keng turdagi hujayra turlarini olish uchun ishlatilishi mumkin. Bundan tashqari, oqsillar, DNK, RNK va lipidlarni o'z ichiga olgan har xil turdagi molekulalarni olish uchun ham foydalanish mumkin.
- Bir vaqtning o'zida bir nechta namunalarni tayyorlash: Hielscher Ultrasonics bir xil jarayon sharoitida ko'plab namunalarni qulay tarzda qayta ishlash uchun bir nechta echimlarni taklif qiladi. Bu lizis va ekstraktsiyaning namunani tayyorlash bosqichini yuqori samarali va vaqtni tejaydi.
- Foydalanish oson: Ultrasonik hujayra lizis va ekstraktsiya uskunasidan foydalanish oson va minimal tayyorgarlikni talab qiladi. Uskuna ham tejamkor, chunki u bitta investitsiya bo'lib, utilizatsiyani qayta sotib olishni talab qilmaydi. Bu uni keng doiradagi tadqiqotchilar va laboratoriyalar uchun jozibador qiladi.
Umuman olganda, ultratovushli hujayra lizisi va ekstraktsiyasi uyali tarkibni olishning tez, samarali, aniq boshqariladigan va ko'p qirrali usuli hisoblanadi. Uning muqobil usullarga nisbatan afzalliklari uni keng ko'lamli tadqiqot va sanoat ilovalari uchun jozibador tanlovga aylantiradi.
Ultrasonik hujayra lizisining ishlash printsipi
Ultrasonik hujayra lizisi va ekstraktsiyasi hujayralarni buzish va ularning tarkibini olish uchun yuqori chastotali tovush to'lqinlaridan foydalanadi. Ovoz to'lqinlari atrofdagi suyuqlikda bosim o'zgarishini keltirib chiqaradi, bu esa kavitatsiya deb nomlanuvchi jarayonda kichik pufakchalar paydo bo'lishiga va qulashiga olib keladi. Ushbu pufakchalar ochiq hujayralarni sindirishi va ularning tarkibini atrofdagi eritma ichiga chiqarishi mumkin bo'lgan mahalliylashtirilgan yuqori intensiv mexanik kuchlarni hosil qiladi.
Ultrasonikator yordamida hujayra lizisi odatda quyidagi bosqichlarni o'z ichiga oladi:
- Namuna suyuqlik buferi bo'lgan naycha yoki idishga joylashtiriladi.
- Namunaga ultratovushli zond va taxminan 200 ga yaqin yuqori chastotali tovush to'lqinlari kiritiladi. 20-30 kHz qo'llaniladi.
- Ultratovush to'lqinlari atrofdagi suyuqlikda tebranish va kavitatsiyani keltirib chiqaradi, bu esa ochiq hujayralarni buzadigan va ularning tarkibini chiqaradigan mahalliy kuchlarni hosil qiladi.
- Namuna har qanday uyali qoldiqlarni olib tashlash uchun santrifüj qilinadi yoki filtrlanadi va olingan tarkib quyi oqim tahlili uchun yig'iladi.
Umumiy lizis usullarining kamchiliklari
Laboratoriyalarda ishlaganingizda, an'anaviy mexanik yoki kimyoviy liziz protokollaridan foydalangan holda hujayra lizisini allaqachon boshdan kechirgan bo'lishingiz mumkin.
- Mexanik lizis: Mexanik lizis usullari, masalan, ohak va pestle bilan silliqlash yoki frantsuz pressi, boncuk tegirmoni yoki rotor-stator tizimi yordamida homogenlash ko'pincha aniq nazorat qilish va sozlash imkoniyatlariga ega emas. Bu shuni anglatadiki, frezalash va maydalashdan foydalanish tezda namunaga zarar etkazishi va oqsillarni denatüratsiya qilishi mumkin bo'lgan issiqlik va kesish kuchlarini keltirib chiqarishi mumkin. Ular, shuningdek, ko'p vaqt talab qilishi mumkin va katta miqdorda boshlang'ich materialni talab qiladi.
- Kimyoviy lizis: Kimyoviy lizis usullari, masalan, yuvish vositalariga asoslangan lizis, lipid ikki qatlamini buzish va oqsillarni denaturatsiya qilish orqali namunaga zarar etkazishi mumkin. Ular, shuningdek, bir nechta qadamlarni talab qilishi mumkin va quyi oqim ilovalariga xalaqit beradigan qoldiq ifloslantiruvchi moddalarni qoldirishi mumkin. Detarjanning optimal dozasini topish qo'shimcha muammodir.
- Muzlatish-eritish davrlari: Muzlatish-eritish davrlari hujayra membranalarining yorilishiga olib kelishi mumkin, ammo takroriy tsikllar oqsilning denaturatsiyasi va degradatsiyasiga ham olib kelishi mumkin. Bu usul, shuningdek, ko'p davrlarni talab qilishi mumkin, bu ko'p vaqt talab qilishi va ko'pincha past rentabellikka olib kelishi mumkin.
- Enzimatik liziz: Enzimatik lizis usullari ma'lum hujayra turlariga xos bo'lishi mumkin va bir necha bosqichlarni talab qiladi, bu ularni ko'p vaqt talab qiladi. Ular, shuningdek, chiqindilarni hosil qiladi va namunaning degradatsiyasini oldini olish uchun ehtiyotkorlik bilan optimallashtirishni talab qiladi. Enzimatik lizis to'plamlari ko'pincha qimmat. Agar joriy enzimatik lizis protsedurangiz etarli natija bermasa, hujayra buzilishini kuchaytirish uchun sinergik usul sifatida sonikatsiya qo'llanilishi mumkin.
An'anaviy mexanik va kimyoviy hujayra lizis usullaridan farqli o'laroq, sonikatsiya sonikatsiya parametrlarini to'liq nazorat qilish imkonini beruvchi hujayra parchalanishi uchun juda samarali va ishonchli vositadir. Bu materiallarning chiqarilishi va mahsulot tozaligi bo'yicha yuqori selektivlikni ta'minlaydi. [qarang. Balasundaram va boshqalar, 2009]
U barcha hujayra turlariga mos keladi va kichik va katta hajmda osongina qo'llaniladi – har doim boshqariladigan sharoitlarda. Ultrasonikatorlarni tozalash oson. Ultrasonik gomogenizator har doim joyida tozalash (CIP) va joyida sterilizatsiya qilish (SIP) funksiyalariga ega. Sonotrod katta titan shoxidan iborat bo'lib, uni artib yoki suvda yoki erituvchida (ishchi muhitga qarab) yuvish mumkin. Ultrasonikatorlarga texnik xizmat ko'rsatish ularning mustahkamligi tufayli deyarli e'tiborga olinmaydi.
Ultrasonik liziz va hujayra buzilishi
Odatda, laboratoriyada namunalarni parchalash 15 soniyadan 2 daqiqagacha davom etadi. Sonikatsiya intensivligini amplitudani sonikatsiya vaqtini o'rnatish va to'g'ri jihozni tanlash orqali sozlash juda oson bo'lgani uchun, hujayra tuzilishi va lizis maqsadiga qarab hujayra membranalarini juda yumshoq yoki juda keskin ravishda buzish mumkin. masalan, DNK ekstraktsiyasi yumshoqroq sonikatsiyani talab qiladi, bakteriyalarning to'liq protein ekstraktsiyasi yanada qizg'in ultratovush bilan davolashni talab qiladi). Jarayon davomida harorat o'rnatilgan harorat sensori tomonidan kuzatilishi mumkin va sovutish (muzli hammom yoki sovutish ko'ylagi bo'lgan oqim xujayralari) yoki impulsli rejimda sonikatsiya orqali osongina boshqarilishi mumkin. Darbeli sonikatsiya paytida, 1-15 soniya davom etadigan qisqa sonication portlash davrlari uzoqroq intervalgacha vaqtlarda issiqlik tarqalishi va sovutish imkonini beradi.
Ultratovush bilan boshqariladigan barcha jarayonlar to'liq takrorlanadi va chiziqli ravishda kengaytiriladi.
VialTweeter ko'p sonli namunalarni bir vaqtning o'zida, bir xil va tez steril tayyorlash uchun ultratovushli gomogenizatordir.
- Hujayra suspenziyasini tayyorlash: Hujayra granulalari gomogenlash yo'li bilan to'liq tampon eritmasida to'xtatilishi kerak (quyidagi tahlilga mos keladigan bufer eritmasini tanlang, masalan, maxsus xromatografiya usuli). Agar kerak bo'lsa, lizozimlar va/yoki boshqa qo'shimchalarni qo'shing (ular ajratish/tozalash vositalariga ham mos kelishi kerak). To'liq suspenziyaga erishilgunga qadar eritmani yumshoq sonikatsiya ostida yaxshilab aralashtiring / bir hil holga keltiring.
Lizozimlarning sonikatsiya bilan birlashtirilgan sinergiyalari haqida ko'proq o'qing! - Ultrasonik lizis: namunani muzli hammomga joylashtiring. Hujayra buzilishi uchun suspenziyani 60-90 soniyada sonikatsiya qiling (sonikatoringizning impuls rejimidan foydalangan holda).
- Ajratish: Lizatni santrifüj qiling (masalan, 10 min. 10000 xg; 4degC da). Supernatantni hujayra pelletidan ehtiyotkorlik bilan ajratib oling. Supernatant umumiy hujayra lizatidir. Supernatantni filtrlashdan so'ng siz eruvchan hujayra oqsilining tozalangan suyuqligini olasiz.
Biologiya va biotexnologiyada ultrasonikatorlar uchun eng keng tarqalgan ilovalar:
- Hujayra ekstrakti tayyorlash
- Xamirturush, bakteriyalar, o'simlik hujayralari, yumshoq yoki qattiq hujayra to'qimalari, nuklein moddasining buzilishi
- protein ekstraktsiyasi
- Fermentlarni tayyorlash va ajratish
- Antigenlarni ishlab chiqarish
- DNK ekstraktsiyasi va/yoki maqsadli parchalanish
- lipozoma tayyorlash
Prob tipidagi ultrasonikator yordamida hujayra buzilishi namunani tayyorlashning samarali usuli hisoblanadi.
Ultratovushning ko'p qirrali qo'llanilishi biotexnologiya, bioinjeneriya, mikrobiologiya, molekulyar biologiya, biokimyo, immunologiya, bakteriologiya, virusologiya, proteomika, genetika, fiziologiya, hujayra biologiyasi, gematologiya va botanika sohalarida mavjud.
Lizis: hujayra tuzilmalarini buzish
Hujayralar yarim o'tkazuvchan plazma membranasi bilan himoyalangan bo'lib, u fosfo-lipid ikki qavatidan iborat (shuningdek, oqsil-lipid ikki qavati; hidrofobik lipidlar va gidrofil fosfor molekulalari o'rnatilgan oqsil molekulalari tomonidan hosil qilingan) va hujayraning ichki qismlari (sitoplazma) o'rtasida to'siq hosil qiladi. hujayradan tashqari muhit. O'simlik hujayralari va prokaryotik hujayralar hujayra devori bilan o'ralgan. Tsellyulozaning ko'p qatlamli qalin hujayra devori tufayli o'simlik hujayralari hayvonlar hujayralariga qaraganda lizitsiya qilish qiyinroq. Hujayraning ichki qismi, masalan, organellalar, yadro, mitoxondriya sitoskeleton tomonidan barqarorlashadi.
Hujayralarni parchalash orqali u organellalar, oqsillar, DNK, mRNK yoki boshqa biomolekulalarni ajratib olish va ajratishga qaratilgan.
Hujayra lizisining an'anaviy usullari va ularning kamchiliklari
Hujayralarni lizatlashning bir necha usullari mavjud bo'lib, ular mexanik va kimyoviy usullarga bo'linishi mumkin, ular yuvish vositalarini yoki erituvchilarni qo'llash, yuqori bosimni qo'llash yoki boncuk tegirmoni yoki frantsuz pressidan foydalanishni o'z ichiga oladi. Ushbu usullarning eng muammoli kamchiliklari jarayon parametrlarini nazorat qilish va sozlashning qiyinligi va shu bilan ta'sir qilishdir.
Quyidagi jadvalda umumiy liziz usullarining asosiy kamchiliklari ko'rsatilgan:
Jadval: Hujayra parchalanishining an'anaviy usullari katta kamchiliklarga ega
Lizis jarayoni
Lizis sezgir jarayondir. Lizis jarayonida hujayra membranasining himoyasi buziladi, ammo ekstraktlangan oqsillarni nofiziologik muhit (pH qiymatidan og'ish) ta'sirida inaktivatsiya, denatürasyon va degradatsiyaga yo'l qo'ymaslik kerak. Shuning uchun, umuman lizis bufer eritmasida amalga oshiriladi. Ko'pgina qiyinchiliklar hujayra ichidagi barcha moddalarning maqsadsiz ravishda chiqarilishi yoki/ va maqsadli mahsulotning denatüratsiyasiga olib keladigan nazoratsiz hujayra buzilishidan kelib chiqadi.
Sonication va hujayra lizisi haqida tez-tez so'raladigan savollar
- Hujayralarni sonikatsiya yordamida lize qila olasizmi? Ha, sonikatsiya kavitatsiyani keltirib chiqaradigan yuqori chastotali ultratovush to'lqinlari yordamida hujayralarni samarali ravishda lizlaydi, bu hodisa hujayra suspenziyasida mayda bug' pufakchalari hosil bo'ladi va kuchli qulab tushadi. Olingan mexanik kuchlar hujayra membranalarini buzadi va hujayra ichidagi tarkibiy qismlarni suyuqlikka chiqarishni osonlashtiradi.
- Hujayra lizisi uchun sonikatordan qanday foydalanish kerak? Hujayra lizisi uchun sonikatordan foydalanish sonikator probini hujayra suspenziyasiga botirish va amplituda va puls davomiyligi kabi parametrlarni sozlashni o'z ichiga oladi. Protein denatüratsiyasi va ferment inaktivatsiyasini minimallashtirish bilan birga hujayra buzilishini optimallashtirish uchun jarayonni diqqat bilan kuzatib borish kerak.
- Hujayra lizisi uchun sonikatsiya printsipi nima? Sonication akustik kavitatsiya printsipi asosida ishlaydi. Ultrasonik energiya suyuq muhitga uzatiladi, bu esa mikropufakchalarning paydo bo'lishiga va portlashiga olib keladigan bosimning tez o'zgarishiga olib keladi. Ushbu portlashlar kuchli kesish kuchlarini va mahalliy yuqori haroratni keltirib chiqaradi, hujayra tuzilmalarini buzadi va lizatlarning bir xilligini oshiradi.
- Hujayra lizisi sonication qancha vaqt oladi? Hujayra lizisi uchun sonikatsiyaning davomiyligi hujayra turi, hujayra zichligi, sonikator kuchi va ishlatiladigan maxsus protokol kabi omillarga qarab sezilarli darajada farq qilishi mumkin. Odatiy protseduralar bir necha soniyadan bir necha daqiqagacha bo'lishi mumkin, ko'pincha issiqlik ishlab chiqarishni boshqarish va hujayraning bir xil buzilishini ta'minlash uchun tsikllarda amalga oshiriladi.
- Protein ekstraktsiyasida sonikatsiyaning maqsadi nima? Protein ekstraktsiyasida sonikatsiya hujayra membranalarini samarali ravishda yorib yuborish va oqsillarni eritish uchun xizmat qiladi. Bu usul, ayniqsa, hujayra bo'linmalari ichidan oqsillarni chiqarish uchun foydalidir, bu oqsillarni tozalash yoki tahlil qilish kerak bo'lgan lizatlarni tayyorlash uchun zarurdir.
- Nima uchun sonikatsiya ekstraktsiya uchun ishlatiladi? Sonication o'zining tezkor ta'siri va maqsadli energiyani qo'llash qobiliyati tufayli ekstraksiya uchun ma'qul keladi, qattiq kimyoviy ishlov berishdan foydalanmasdan bioaktiv molekulalarni chiqarish uchun hujayra tuzilmalarini parchalaydi va shu bilan ekstraksiya qilingan birikmalarning funktsional yaxlitligini saqlaydi.
- Sonikatsiya oqsil-oqsil o'zaro ta'sirini buzadimi? Sonikatsiya hujayra membranalarini samarali ravishda buzishi mumkin bo'lsa-da, u oqsil-oqsil o'zaro ta'sirini ham buzishi mumkin. Buzilish darajasi sonikatsiya intensivligi va ta'sir qilish muddatiga bog'liq bo'lib, potentsial ravishda oqsil komplekslarining denatürasyonu yoki dissotsiatsiyasiga olib keladi, bu keyingi tahliliy yoki funktsional tadqiqotlarga ta'sir qilishi mumkin.
- E. coli lizis uchun sonikatsiyadan foydalanish mumkinmi? Hielscher sonikatorlari mustahkam hujayra devorlariga ega bo'lgan E. coli kabi bakterial hujayralarni lizinglash uchun ayniqsa samaralidir. Texnika hujayra devori va membranasini kesishning fizik usulini ta'minlaydi, bu uni molekulyar biologiya va biokimyo laboratoriyalarida bakterial lizatlarni tayyorlash uchun afzal qilingan usulga aylantiradi.
- Sonikatsiya bosqichidan keyingi keyingi jarayonlar qanday?
Ultrasonik lizisdan keyingi bosqichlar odatda lizatning fraksiyasini, organellalarning maqsadli izolyatsiyasini va oqsillarni ekstraktsiyalash yoki tozalashni o'z ichiga oladi.
Keyin qayta ishlangan lizat ajratiladi va yuqori aniqlikdagi proteomika, transkriptomika yoki retseptorlarni bog'lovchi tadqiqotlar kabi analitik yoki funktsional ilovalar uchun tayyorlanadi.
Adabiyot/Adabiyotlar
- Balasundaram, B.; Harrison, S.; Bracewell, D. G. (2009): Advances in product release strategies and impact on bioprocess design. Trends in Biotechnology 27/8, 2009. pp. 477-485.
- Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrasonic Recovery and Modification of Food ingredients. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.