Hielscher ultratovush texnologiyasi

C. Elegans namunalarini ultratovush bilan tayyorlash

C. elegans, nematod qurti, biologiyada keng qo'llaniladigan model organizmdir. Tahlildan oldin namunani tayyorlash lizis, oqsil va lipid ekstraktsiyasini hamda sonikatsiyalash orqali ishonchli bajarilishi mumkin bo'lgan RNK parchalanishini talab qiladi. Ultrasonik hujayraning buzilishi - bu C. elegans namunalarini tez tayyorlash uchun ishonchli, murakkab va ishlatish uchun qulay vositalar.

C. Elegans namunalarini ultratovush bilan tayyorlash

C. elegans - bu genomika, rivojlanish biologiyasi va kasalliklarini o'rganish uchun tadqiqot laboratoriyalarida keng qo'llaniladigan dumaloq qurtlar. C. elegans genomidagi ko'plab genlar odamlarda funktsional o'xshashlarga ega. Shunday qilib, nematod qurti inson kasalliklari uchun juda foydali modeldir. C. elegans-dan keng foydalanishning boshqa afzalliklari - bu bakteriyalarni o'z ichiga olgan plitalarda (masalan, E. coli) oson va arzon o'stirish, shaffofligi, qulay ishlov berish, shuningdek qurtlarni muzlatish va uzoqroq saqlash imkoniyati.
Protein va lipidlarni tahlil qilish laboratoriyalarda muntazam ravishda o'tkazib turiladi va ultratovushli namunalarni tayyorlash har qanday rivojlanish bosqichida (ya'ni embrionlar, L1-L4 lichinkalari, kattalar) C. elegans nematodalarini liz qilish usulidir. C. elegans shuningdek, maqsadli oqsillarni haddan tashqari ekspresiya qilish uchun oqsillarni ekspression tizimi sifatida ishlatilganligi sababli, yuqori darajada hosil beradigan ishonchli, takrorlanadigan lizis va oqsillarni ajratib olish usuli talab qilinadi. Ultrasonik hujayraning buzilishi va ekstraktsion tizimlari zond tipidagi gomogenizatorlar va ko'p namunali ultratovush tekshirgichlari sifatida mavjud. Qulay namunalarni tayyorlash va barcha turdagi namunalar o'lchamlari uchun ovqatlanish, Hielscher Ultrasonics sizning laboratoriya protsedurangiz uchun ideal ultratovushli hujayralarni buzuvchiga ega.
C. elegans is a widely used model organism in biological research. Ultrasonic lysis is a sophisticated, reliable, reproducible and rapid technique to prepare high-quality protein extracts from C. elegans.

Ultrasonik C. elegans uchun lizis

  • Qurtlarni bir hil turlarini tayyorlash
  • Protein qazib olish
  • Lipit ekstraktsiyasi
  • Oqsil miqdorini aniqlash
  • Immunoprecipitatsiya
  • G'arbda blotting
  • RNK ekstraktsiyasi
  • Fermentatik tahlillar
Sonotrode MTP-24-8-96 mikrotiter plitalarining quduqlarini ultratovush qilish uchun sakkizta ultratovushli proba mavjud.

Sonotrode MTP-24-8-96 mikrotiter plitalarining quduqlarini ultratovush qilish uchun sakkizta ultratovushli proba mavjud.

Ma'lumot so'rovini




Bizning e'tibor bering Maxfiylik siyosati.


C. Elegansning buzilishi va lizis uchun ultratovushli protokollar

Ultrasonik homogenizatsiya va C. elegans lizisi va undan keyingi oqsil va lipidlarni ekstraktsiyasi turli xil gomogenizatsiya va lizis tamponlaridan foydalangan holda turli xil protseduralar yordamida amalga oshirilishi mumkin. Quyida biz sizga yuqori sifatli oqsil yoki lipid o'z ichiga olgan C. elegans namunalarini tayyorlash uchun ishonchli va tezkor ultratovushli liziz va ekstraktsiya protokollarini taqdim etamiz.

Ultrasonik C. elegans Lysisning afzalliklari

  • ishonchli
  • tekrarlanabilir
  • aniq harorat nazoratida
  • jarayonni ishonchli boshqarish
  • yumshoq usul
  • qo'llash oson
  • xavfsiz

C. elegans namunalaridan ultratovushli oqsil chiqarish

Ultrasonik lizis va C. elegans qurtlarini oqsillarni ekstraktsiyasi har xil protokollar yordamida amalga oshirilishi mumkin. Quyida takrorlanadigan oqsillarni ekstraktsiyalash natijalari uchun sizga ishonchli va tezkor lizis protokollarini taqdim etamiz.

Sonikatsiyalash yo'li bilan C. elegans qurtlaridan sitosolik ekstraktni tez tayyorlash

Quyidagi protokol yordamida siz C. elegans lysates ni 30 daqiqadan kamroq vaqt ichida tayyorlashingiz mumkin.
C. elegans to'plami
Kerakli C. elegans qurtlarini 1,5 ml naychali fosfat tamponli sho'r suvga (PBS) tering yoki ularni 1,5 ml PBS bo'lgan plastinadan yuving. Pelletga qadar 2000 min / min da 1 daqiqa davomida santrifüj qiling. Namunalarni har doim muzda saqlang.
Keyin, PBS bilan qurtlarni ikki marta yuving.
Shundan so'ng qurtlarni ddH bilan ikki marta yuving2O.
Qurtlarni kamida 500ul gomogenizatsiya tamponida (HB) qayta tiklang. Endi qurt namunalari ultratovushli lizizga tayyor.
Protein ekstrakti sifatini oshirish uchun siz qurtlarni PBS va steril, ultra toza suvda (ddH) 5 minut yuvib bakterial ifloslanishni kamaytirishni xohlashingiz mumkin.2O) yoki saxaroza suzishini bajaring. Qurt namunalarini muz ustida doimiy ravishda saqlang.

Ultrasonik C. elegans Lysis Protocol

  • Ultratovushli homogenizatorni ishlatishga tayyor bo'lishi uchun ultrasonikatorni oldindan tayyorlaganingizga ishonch hosil qiling (proba o'rnatilgan, sonikatsiya dasturi oldindan o'rnatilgan).
  • Ultrasonicator UP200Ht (200 watts, 26kHz) with microtip S26d2 for the preparation of biological samplesAgar sizning ultratovush tekshirgichingiz o'rnatilgan bo'lsa, namunali naychalar bilan muzli hammomni ultratovush tekshiruvi ostiga qo'ying va ultratovush probini 1,5 ml naychaga joylashtiring.

  • UP200St yoki UP200Ht bilan C. elegans lizisi uchun ultratovushni mikrotip yordamida bajarish kerak (masalan, 2 mm proba S26d2; chap rasmga qarang) 1 soniya davomida 40% amplituda, 30 sekundlik pauzalar bilan. Har bir 1 soniya uchun 30 soniya pauza bilan 5 sonikatsiya tsikli C. elegans lizisi uchun juda mos keladi. Agar siz lizisni birinchi marta o'tkazsangiz, mikroskop yordamida har bir zarbadan keyin namunaning kichik bo'laklarida lizisning borishini tekshirishingiz mumkin.
  • Lizis qurtlarni buzganda muvaffaqiyatli yakunlanadi. Haddan tashqari sonikatsiya yadrolarning sinishiga olib keladi va namuna yopishqoq yoki ko'piklanganda ko'rinadi. Namuna degradatsiyasini oldini olish uchun, agar kerak bo'lsa, ko'proq impulslardan foydalaning. Yuqori sifatli oqsil ekstraktlarini olish uchun har bir ultratovush puls tsikli vaqtini ko'paytirmang.
  • Ultrasonik ravishda lyslangan qurtlarni 14000 rpm da 10 minut davomida 4ºC da santrifüjlash orqali hujayralarni lysati tozalang.
  • Keyin, supero'tkazgichni yangi naychaga o'tkazing va immunoprecipitatsiya yoki boshqa tahlillarga tayyorlang.

Gomogenizatsiya buferi uchun eslatma: Yuqoridagi ultratovushli liziz protokoli uchun gomogenizatsiya tamponini quyidagicha tayyorlang:

  • 15 mm Hepes pH qiymati 7.6 – 15 ml 0,5 M
  • 10 mm KCl – 2,5 ml 2 M
  • 1,5 mM MgCl2 – 0.75 ml 1 M
  • 0.1 mM EDTA – 100 M 0,5 mil
  • 0.5 mM EGTA – 2,5 ml 0,1 M
  • 44 mM saxaroza – 14,7 ml 50%
  • Ishlatishdan oldin darhol qo'shing: 1 mm DTT – 1000x 1M
  • ortiqcha proteaz inhibitori

Miqdoriy yaqinlikni tozalash bo'yicha tahlillar uchun C. elegans ultratovushli lizisi

C. elegans embrionlari (har bir nusxada ∼2 million) biologik uch nusxada yangi hosil bo'lgan germid hermafroditlarini oqartirish yo'li bilan yangi hosil qilindi va muz ustida sonikatsiya qilindi (tsikl: 0,5 s, amplituda: 40-45%, 5 marta urish / seans, 5 seans, mashg'ulotlar oralig'i : 30 s; UP200S ultratovush protsessori lizis tamponida S26d2 (Hielscher Ultrasonics GmbH) mikro uchi bilan (umumiy hajmi: -600 ml; 50 mm Tris-HCl, pH 7.4, 100 mm KCl, 1 mm MgCl2, 1 mm EGTA, 1 mm DTT, 10% glycerol , proteaz inhibitori aralashmasi, 0,1% Nonidet P-40 o'rnini bosuvchi). Sonikasyondan so'ng, Nonidet P-40 o'rnini bosuvchi 1% gacha qo'shildi va lizatlar quyruq atrofida 4 daqiqa davomida 30 daqiqa davomida burama bilan inkübe qilindi, so'ngra 20000 × g da 20 daqiqa davomida 4 ° C da santrifüj qilindi. Keyin tozalangan lizat yuqori lipid qatlamini bezovta qilmasdan so'rildi va anti-GFP agaroza boncuklarına yoki bloklangan nazorat boncuklarına (40-50 ml) ikkiga bo'lindi. 60-90 daqiqa davomida 4 ° C da dumni aylantirgandan so'ng, boncuklar bir marta 0,1% Nonidet P-40 o'rnini bosuvchi o'z ichiga olgan lizis tamponi bilan yuviladi, so'ngra I (25 mm Tris-HCl, pH) buferida ikki marta yuviladi. 7.4, 300 mm NaCl, 1 mm MgCl2) yoki bufer II (1 mm Tris-HCl, pH 7.4, 150 mm NaCl, 1 mm MgCl2) yoki ikkalasi ham. GFP uchun: MBK-2 tortilishi, har xil yuvish sharoitlari yordamida ikkita alohida tajriba o'tkazildi. Oqsillar xona haroratida 50 mk 6 m karbamid / 2 M tioreviyasida orbital chayqash yo'li bilan elutiya qilindi. MBK-1 :: GFP pastga tushirish tajribalari uchun oqsillar ikki marta 50 mL 8 m guanidiniyum xloridni 90 ° C da silkitib, so'ngra etanol yog'inlari bilan chayqatildi. Keyin eritilgan oqsil namunalari eritmada hazm qilindi.
(qarang Chen va boshq., 2016)

VialTweeter at the ultrasonic processor UP200ST

VialTweeter bir vaqtning o'zida 10 ta sinov naychasini sonikatsiyalash uchun ko'p namunali tayyorgarlik birligi.

Ultrasonik qurtlarni gomogenizatsiyasi va lizisi

C. elegans lizisi va oqsillarni ekstrakti qilish uchun har bir namuna uchun tegishli bosqichdagi 30000 nemotod yig'ilib, muzli S-bazalda yuvilib, 2 minut davomida 1500 rpmda santrifüj bilan konsentratsiyalangan va muzli S- bilan olti marta yuvilgan. qoldiq bakteriyalarni olib tashlash uchun bazal va undan keyin foydalanishga tayyor bo'lguncha muzda saqlanadi. Proteinni ekstraktsiyalash uchun gravid-kattalar qurtlari oxirgi S-bazal yuvishdan keyin ixcham pellet hosil bo'lishiga ruxsat berildi. Keyin qurt pelletlari 1 ml muzli ekstraktsiya tamponida qayta tiklandi [20 mM kaliy fosfat, pH 7.4, 2mM EDTA, 1% Triton-X-100, proteaz inhibitörleri (Sigma P2714)] va darhol qayta ishlandi.
-30,000 gravid-kattalar qurtlari (-100 mg nam vazniga mos keladigan), proba tipidagi ultratovush tekshirgichi yordamida muzda sonikatsiyalangan (masalan, mikrotipli MS2 bilan UP50H) 40 sekundlik amplituda 3 sekund yoqilganda, 30 sek o'chirilgan, ichida 1 ml muzli ekstraktsiya buferi. (qarang: Basxaran va boshq. 2012)

C. elegans dan ultratovushli lipid ekstrakti

Metabolikaning bir bo'lagi bo'lgan lipidomikada biologik tizimlarning lipid komplementi tavsiflanadi va tahlil qilinadi. C. elegans metabolik lipidlarning o'zaro ta'sirini va ularning sog'liq va umr ko'rishga ta'sirini o'rganish uchun lipidomikada keng qo'llaniladi.
Ultrasonik lizis va ekstraktsiya C. elegans embrionlari, lichinkalari va kattalar qurtlaridan sfingolipidlar kabi lipidlarni chiqarish uchun ishlatiladi. Ultrasonikatsiya qurt homogenatlarini tayyorlash va keyinchalik lipidlarni namunadan ajratib olish uchun ishlatiladi.
C. elegans dan ultratovushli lipid ekstrakti uchun protokol
C. elegans pelletini muzda eritib oling va 0,5 ml ultratovushli suv bilan qayta ishlang. C. elegans namunalarini 1,5 ml sinov naychalarida sonikat qiling, shu bilan birga namunalarni doimiy ravishda muzda saqlang.
Sonikatsiyani prob kabi ultratovush vositasi yordamida bajarish mumkin Uf200 ः t, ultratovushli namuna tayyorlash birligi VialTweeter (bir vaqtning o'zida 10 ta namunani sonikatsiya qilish) yoki UIP400MTP (96 quduqli plitalar kabi ko'p quduqli plitalarning sonikatsiyasi uchun). UP200Ht bilan ultratovushli lizis uchun S26d2 mikro uchidan foydalaning. Raqamli menyuda ultratovushli tsikl rejimini oldindan o'rnating. Amplitudani 10% ga sozlang va sonikatsiya tsikli rejimini 30 sekundlik pauza bilan 20 tsikldagi 2 sonli impulslardan foydalaning. har bir ultratovushli pulsatsiya portlashi o'rtasida.
Supernatantlarni vintli qopqoqli shisha naychalarga o'tkazing. Folch ekstraktsiyasini har bir shisha naychaga 1 ml ultrawater qo'shib, so'ngra har bir shisha naychaga 6 ml xloroform / metanol (nisbat = 2: 1) aralashmasi qo'shib bajaring.
Har bir shisha naychani 30 soniya davomida 4 marta aylantiring. Fazalarni ajratishni yanada kuchaytirish uchun naychalarni 1,258 xg da 15 minut (Eppendorf, 5810 R) santrifüj qiling. Pastki hidrofobik fraktsiyani shisha Paster pipetkasi bilan toza shisha naychaga o'tkazing. Azot evaparatorida azot oqimi ostida pastki gidrofobik fraktsiyani quriting. Quritilgan granulani ishlatilguncha -80 ° C muzlatgichda saqlang.

Gijja lizatlarini ultratovush bilan tayyorlash

Qurtlarni lizati: L4 bosqichli qurtlarni yig'ib uch marta M9 tampon bilan yuvib tashladilar (42,26 mM Na2HPO4, 22.04 mM KH2pO4, 85,56 mM NaCl va 0,87 mM MgSO4) barcha bakteriyalarni yo'q qilish uchun. M9 tamponni iloji boricha olib tashlaganidan so'ng, qurtlarni lizis tamponida qayta tikladilar: 50 mM HEPES, 50 mM KCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 5mM fosfat b-glitserol, 0,1% (v / h) Triton X-100, 50 mM natriy ftorid, 1 mM natriy ortovanadat, 5 mM natriy pirofosfat, 0,2 mM fenilmetansülfonilflorid va proteaz inhibitori. Qurtlarni suyuq azotda muzlatib, 37 ° C da uch marta eritdilar, so'ngra qurtlarni quruq muz ustida ultratovushli VialTweeter qurilmasi bilan bir vaqtning o'zida 10 ta namuna tayyorlash uchun sonikatsiyalashdi. Sonikatsiya 50% amplituda 2 sekundlik 10 tsiklda amalga oshirildi. sonikatsiya portlashlari orasida 30 soniya pauza bilan. Keyinchalik, namunalar 12000 rpm da 4 ° C da 15 daqiqa davomida santrifüj qilindi. Supernatant yig'ilib -70 ° C da saqlandi. Bredford tahlili orqali oqsil miqdorini aniqlash uchun alikotot ishlatilgan.
Umumiy glutation, GSH va GSSG ni aniqlash: Glutationni miqdorini aniqlash uchun o'sha kuni lizatlar va aniqlash amalga oshirildi. Glyukoza bilan oziqlanadigan va boshqariladigan L4 lichinkalari yig'ilib M9 tampon bilan uch marta yuvilgan. M9 tamponini iloji boricha olib tashlaganidan so'ng, qurtlar muzli metafosfor kislotasida qayta tiklandi (5% / h / h), so'ngra qurtlar ultratovushli VialTweeter bilan muzda sonikatsiya qilindi va 2 soniyali o'n sonikatsiya tsiklida 50% amplituda. 30 soniya bilan har bir tsikl o'rtasida pauza. Keyin 12000 rpm tezlikda 4 ̊C da 15 daqiqa davomida santrifüj qilindi.
(qarang: Alkantar-Fernández va boshq., 2018)

C. elegans Immunopresipitatsiya va g'arbiy blottingdan oldin namuna tayyorlash

Qisqacha aytganda, embrional ekstraktlar uchun C. elegans L1 lichinkalari katta yoshdagi suyuq S-o'rta madaniyatlarda o'stirildi. Embrionlar standart oqartirish usuli yordamida to'plandi va lizis tamponida to'xtatildi (50 mM Tris, pH 7.5, 100 mM KCl, 1 mM EDTA, 1 mM MgCl2, 8.7% gliserol, 0.05% NP-40, 1􏰅 Proteaza inhibitori kokteyli va 1􏰅 Fosfataza inhibitori kokteyli I va II), suyuq azotda tezda muzlatilgan va ultratovushli hujayraning buzilishi natijasida lysitlangan, masalan, mikrotipli ultratovushli vosita yordamida. Uf200 ः t 30% amplituda 10 soniyadan yuqori 10 ta impuls uchun S26d2 bilan. Agar ko'proq miqdordagi namunalar ultratovushli tayyorlanishi kerak bo'lsa VialTweeter yoki quduq plitalari uchun MultiSample-Ultrasonicator UIP400MTP tavsiya etiladi. Sonikatsiyadan so'ng, ekstraktlar 30.000g da santrifüj bilan 20 daqiqa davomida 4 ° C da oldindan tozalangan. Oldindan tozalangan ekstrakt (300gg umumiy oqsil) A-agaroza oqsili bilan o'zaro bog'liq bo'lgan 40g anti-CDC-25.1 yaqinlik bilan tozalangan antikor (ushbu tadqiqot) bilan inkubatsiya qilingan yoki shunga o'xshash miqdordagi quyon immunoglobulin (Ig) oqsil A-agaroza bilan o'zaro bog'liq G, 200% li 1% NP-40 o'z ichiga olgan lizis tamponining umumiy hajmida ishlatilgan bo'lib, uning tarkibiga oqsillarning matritsaga xos bo'lmagan bog'lanishi kamaygan. Namunalar 1 soat davomida 4 ° C da aylantirildi, boncuklar uch marta lizis tamponu bilan yuvildi va 30µl glisin / HCl va 200 mM NaCl, pH 2.2 bilan elitatsiya qilindi. Immunoprecipitatsiyadan so'ng elyatlar 30SL SDS namuna tamponida suyultirildi, 4 minut davomida 95 ° C gacha qizdirildi va odatda kirish uchun umumiy miqdorning 3% va elyatlar uchun 30% SDS-PAGE-ga tatbiq etildi, so'ngra G'arbda anti-blokirovka -CDC-25.1 (1: 400), anti-LIN-23 (1: 750), anti-ubiquitin (1: 1000), anti-GSK3􏰁 (1: 500) yoki anti-b-aktin (1: 2000) antikorlar. Ekstraktlar immunoprecipitatsiyaga duchor bo'lmaganda, ushbu ekstraktlardan olingan bir xil miqdordagi oqsil miqdori SDS namunaviy tamponida qayta tiklandi, 95 ° C ga qadar qizdirildi va keyin to'g'ridan-to'g'ri SDS-PAGE-ga tatbiq etildi va Western blotting bilan tahlil qilindi. (qarang: Segref va boshq. 2020)

parchalash uchun UP200St insonifier tekshirish-turi

Ultrasonik hujayralarni buzuvchi UP200St lizis va oqsil olish uchun S26d2 mikro uchi bilan

Prescise Temperature Control ostida ultratovushli lizis

The VialTweeter is a MultiSample Ultraonicator that allows for reliable sample preparation under precisely controlled temperature conditions.Biologik namunalar bilan ishlashda haroratni aniq va ishonchli boshqarish juda muhimdir. Yuqori haroratlar namunalarda termal induksiyalangan oqsil parchalanishini boshlaydi.
Barcha mexanik namunalarni tayyorlash texnikasi kabi ultratovush issiqlikni hosil qiladi. Biroq, VialTweeter-dan foydalanganda namunalarning harorati yaxshi nazorat qilinishi mumkin. Namunalaringizni tahlil qilish uchun VialTweeter va VialPress bilan tayyorlayotganda, ular harorati nazorat qilish va boshqarish uchun sizga turli xil variantlarni taqdim etamiz.

  1. Namuna haroratini nazorat qilish: VialTweeter-ni boshqaradigan UP200St ultratovush protsessori aqlli dasturiy ta'minot va ulanadigan harorat sensori bilan jihozlangan. Harorat sensori UP200St-ga ulang va harorat sensori uchini namuna naychalarining biriga joylashtiring. Raqamli rangli sensorli displey orqali UP200St menyusida ultratovush namunasi uchun ma'lum bir harorat oralig'ini o'rnatishingiz mumkin. Ultrasonikator maksimal haroratga yetganda avtomatik ravishda to'xtaydi va namuna harorati belgilangan haroratning pastki qiymatiga tushguncha to'xtaydi. Keyin sonikatsiya yana avtomatik ravishda boshlanadi. Ushbu aqlli xususiyat issiqlik ta'sirida buzilishning oldini oladi.
  2. VialTweeter blokini oldindan sovutish mumkin. Titan blokini oldindan sovutish uchun muzlatgichga yoki muzlatgichga VialTweeter blokini qo'ying (faqat transdusersiz sonotrod!) Namunadagi harorat ko'tarilishini kechiktirishga yordam beradi. Iloji bo'lsa, namunaning o'zi ham oldindan sovutilishi mumkin.
  3. Sonikatsiya paytida sovutish uchun quruq muzdan foydalaning. Quruq muz bilan to'ldirilgan sayoz laganda ishlating va issiqlik tezda tarqalishi uchun VialTweeter-ni quruq muz ustiga qo'ying.

Lysis dasturingiz uchun optimal ultratovushli hujayraning buzilishini toping

Hielscher Ultrasonics laboratoriyalar, dastgoh usti va sanoat miqyosidagi tizimlar uchun yuqori samarali ultratovushli hujayralarni buzuvchi va homogenizatorlar ishlab chiqaradigan uzoq yillik tajribaga ega. Sizning bakterial hujayra madaniy hajmingiz, tadqiqotlaringiz yoki ishlab chiqarish maqsadlaringiz va soatiga yoki kuniga ishlov beradigan hujayraning hajmi sizning qo'llashingiz uchun to'g'ri ultratovushli hujayraning buzilishini topish uchun muhim omillardir.
Hielscher Ultrasonics bir vaqtning o'zida ultratovushli ultratovushli ultratovush tekshiruvi uchun ko'p namunalarni (10 flakongacha), shuningdek ommaviy namunalarni (masalan, mikrotitrli plitalar / 96 quduqli plitalar) ultratovush tekshiruvi uchun turli xil echimlarni taklif etadi. To'liq sanoat ultratovushli protsessorlarga 400 vatt, ishlab chiqarishda tijorat hujayralarini buzish va oqsillarni chiqarib olish uchun birlik uchun 16000 vattgacha. Barcha Hielscher ultrasonikatorlari to'liq yuk ostida 24/7/365 ishlashi uchun qurilgan. Sog'lomlik va ishonchlilik ultratovushli qurilmalarimizning asosiy xususiyatlari.
Barcha raqamli ultratovushli homogenizatorlar aqlli dasturiy ta'minot, rangli sensorli displey va avtomatik ma'lumotlarni protokollash bilan jihozlangan bo'lib, ular ultratovush qurilmasini laboratoriya va ishlab chiqarish binolarida qulay ish vositasiga aylantiradi.
Biologik namunalaringizni qayta ishlash uchun qanday hujayralar, qanday hajmda, qaysi chastotada va qanday maqsad bilan ishlashingiz kerakligini bizga xabar bering. Jarayon talablari uchun sizga eng mos ultratovushli hujayra buzilishini tavsiya etamiz.

Quyidagi jadvalda bizning ultratovush tizimlarimizning ixcham qo'l homogenizatorlari va MultiSample ultratovush tekshirgichlaridan tijorat maqsadlarida foydalanish uchun ultratovushli protsessorlarga ishlov berish hajmi taxminiy ko'rsatkichi berilgan:

Buyurtma miqdori Oqim darajasi Tavsiya Qurilmalar
96 quduq / mikrotitr plitalari ga UIP400MTP
10 flakon 0,5 dan 1,5 ml gacha ga UP200St da VialTweeter
0.01 dan 250 ml gacha 5 dan 100 ml / min UP50H
0.01 dan 500 ml gacha 10 200ml / min uchun UP100H
10 2000mL uchun 20 400ml / min uchun Uf200 ः t, UP400St
0.1 20L 04L / min uchun .2 UIP2000hdT
10 100L uchun 10L 2 / min UIP4000hdT
ga 10 100L / min uchun UIP16000
ga katta Klaster UIP16000

Biz bilan bog'lanish! Bizdan so'rang!

Qo'shimcha ma'lumotni so'rang

Iltimos, ultratovush protsessorlari, ilovalari va narxlari to'g'risida qo'shimcha ma'lumot olish uchun quyidagi shakldan foydalaning. Jarayoningizni siz bilan muhokama qilishdan va sizning talablaringizga javob beradigan ultrasonik tizimni taklif qilishdan mamnun bo'lamiz!









Iltimos, bizning e'tibor bering Maxfiylik siyosati.


Ultrasonic high-shear homogenizers are used in lab, bench-top, pilot and industrial processing.

Hielscher Ultrasonics laboratoriya, uchuvchi va sanoat miqyosida dasturlarni aralashtirish, tarqatish, emulsifikatsiya va ekstraktsiya qilish uchun yuqori samarali ultratovushli homogenizatorlarni ishlab chiqaradi.

Adabiyotlar / Adabiyotlar



Bilishingiz kerak bo'lgan dalillar

Caenorhabditis elegans

C. elegans - uzunligi 1 mm bo'lgan erkin yashovchi shaffof nematod (yumaloq qurt), u bakteriyalar bilan oziqlanadi (masalan, E. coli) va nisbatan qisqa hayot aylanish davriga ega. 20 ° C da, C. elegans (N2) laboratoriya shtammining o'rtacha umri 2-3 hafta atrofida va naslning hosil bo'lish muddati 3-4 kungacha. C. elegans ko'p miqdorda o'stirilganda, uni aniq laboratoriya sharoitida osonlikcha bajarish mumkin, ular yangi dori vositalarining ishlash printsipi, shuningdek ularning inson kasalligidagi murakkab molekulyar jarayonlardagi ta'siri va o'zaro ta'siri uchun osongina tekshirilishi mumkin. Qisqa genom, qisqa umr tsikli va laboratoriya sharoitida oddiy muomala C. elegansni genomika, proteomika, rivojlanish biologiyasi, kasallik tadqiqotlari, dori vositalarini ishlab chiqish va boshqalar kabi tadqiqotlar uchun ideal model organizmga aylantiradi.
Caenorhabditis elegans qurtlari erkak yoki germafrodit bo'lishi mumkin. Germafroditlarning erkak va ayol jinsiy organlari mavjud. Biroq, ayol qurtlari mavjud emas. Germafroditlar o'z-o'zini urug'lantirishi yoki erkak qurtlari bilan ko'payishi mumkin. C. elegans har kuni 1000 dan ortiq tuxum ishlab chiqarishi mumkin.
C. elegans asab tizimiga ega eng sodda organizmlardan biri bo'lganligi sababli, nematod qurti 1963 yildan buyon tadqiqot uchun namuna organizm sifatida ishlatilmoqda. Neyronlar ta'sir potentsialini yoqmaydi va hech qanday kuchlanishli natriy kanallarini ifoda etmaydi. Germafroditda ushbu tizim 302 neyronni o'z ichiga oladi, ularning sxemasi har tomonlama xaritada olingan, bu konnome deb nomlanadi.
C. elegans genomidagi ko'plab genlar odamlarda funktsional o'xshashlarga ega, bu uni inson kasalliklari uchun juda foydali modelga aylantiradi va masalan, rivojlanish biologiyasi, qarishi va uzoq umr ko'rishga ta'sir qiluvchi omillarni o'rganish uchun ishlatiladi. Bundan tashqari, C. elegans mutantlari ko'plab inson kasalliklari, jumladan, nevrologik kasalliklar (masalan, Altsgeymer), tug'ma yurak kasalligi va buyrak kasalliklari uchun namuna beradi.
Ushbu omillar C. elegansni ko'plab tadqiqot sohalari uchun juda qimmatli modelga aylantirdi. Binobarin, C. elegans butun genomini ketma-ket ravishda tuzgan birinchi ko'p hujayrali organizm edi. Genom tarkibida taxminan 20470 ta protein kodlovchi gen mavjud. C. elegans genlarining taxminan 35% inson gomologlariga ega. Shunisi e'tiborga loyiqki, inson genlari C. elegans-ga kiritilganida, ularning C. elegans gomologlarini almashtirishi bir necha bor ko'rsatilgan. Aksincha, ko'plab C. elegans genlari sutemizuvchilar genlariga o'xshash ishlashi mumkin.

C. elegans umrining davomiyligi taxminan. 3 hafta va oltita hayot bosqichidan iborat: embriogenez (tuxum bosqichi), to'rtta lichinka bosqichi (L1 dan L4 gacha) va kattalar bosqichi. Nematodlar tuxumdan chiqadi, chunki L1 lichinkalari 560 hujayradan iborat. Har bir lichinka bosqichida o'sish hujayraning bo'linishi va hujayra gipertrofiyasi bilan sodir bo'ladi. Kutikulyar molting har bir lichinka bosqichini punktuatsiya qiladi. Agar atrof-muhitning og'ir sharoitlari rivojlanayotgan qurtga sharoitlar kattalar unumdorligini qo'llab-quvvatlamasligi to'g'risida signal bersa, C. elegans uning rivojlanishini o'zgartirib, L3 lichinkasining navbatdagi bosqichini hosil qilishi mumkin, bu erda lichinkalar gullash bosqichiga o'tadi. Bunday holatda hayvonlar g'ayrioddiy stressga chidamli va uzoq umr ko'rishadi va uch oydan to'qqiz oygacha yashashlari mumkin. Dauer lichinkalari ikkala bukkal va anal bo'shliqlarini berkitib, ichaklarini qisib, daf-16 / FOXO ga bog'liq genetik dasturni yoqish orqali o'zini qiyinchiliklardan ajratib turadi, bu boshqa narsalar qatori dauerga xos kutikulani ifodalashga olib keladi. (qarang Xenderson va boshq., 2006)

C. elegans Dauer Lichinkalari

Dauer lichinkalari - muqobil rivojlanish bosqichiga o'tgan nematod lichinkalari uchun atama. "Dauer lichinkalari" atamasi, ayniqsa, rabditidlar oilasi qurtlari, shu jumladan Caenorhabditis elegans uchun ishlatiladi. "Dauer" so'zi nemis tilidan kelib chiqqan va "davomiyligi" degan ma'noni anglatadi” ma'nosida “bir muddat ». Dauer lichinkalari staz turiga kiradi va og'ir sharoitlarda omon qolishi mumkin. Agar va qachon lichinka daer bosqichiga kirsa atrof-muhit sharoitiga bog'liq. Dauer lichinkalari biologiyada keng o'rganilgan, chunki lichinkalar qattiq muhitda omon qolish va uzoq vaqt yashash uchun favqulodda qobiliyatni namoyon etadi. Masalan, C. elegans dauer lichinkalari to'rt oygacha yashashi mumkin, bu o'rtacha reproduktiv rivojlanish davrida o'rtacha uch haftalik umridan ancha uzoqroq.