Ультразвукове приготування збагаченого тромбоцитами сироватки

• Збагачена тромбоцитами плазма (ЗТП) – це кров’яна плазма, збагачена тромбоцитами, яка використовується для медичних та естетичних процедур.
• Ультразвуковий лізис та кондиціонування є дуже ефективним методом приготування збагаченої тромбоцитами плазми.
• Hielscher Ultrasonics пропонує різноманітні ультразвукові системи, що відповідають вимогам обробки крові (наприклад, для підготовки всередині та поза межами чистого приміщення).

Збагачена тромбоцитами сироватка

Ультразвукова обробка є надійним і простим методом лізису тромбоцитів в аутологічній кров’яній сироватці для вивільнення факторів росту. Фракції, отримані з тромбоцитів – також відомі як аутологічна кондиціонована сироватка (ACS) – використовуються для відновлення тканин або естетичних процедур. Для отримання оптимальних результатів ЗТП збагачується перед ін’єкцією.
Для приготування збагаченої плазми з факторами росту клітин ультразвукова обробка є дуже ефективним і дієвим методом руйнування клітинних мембран і вивільнення майже повного спектру факторів росту клітин з тромбоцитів. Завдяки ультразвуковому лізису та кондиціонуванню можна використовувати навіть антикоагульовану кров.
Кондиціонування ЗТП за допомогою ультразвукової обробки є зручним і економічно вигідним способом отримання концентрованих факторів росту.

Ультразвуковий лізис збагаченої тромбоцитами плазми (ЗТП)

Ефекти ультразвукового лізису

Ультразвукова обробка кров’яної сироватки призводить до однорідного лізису тромбоцитів для вивільнення захоплених факторів росту (фактор росту AB (PDGF-AB), фактор росту AA (PDGF-AA), фактор росту BB (PDGF-BB), фактор росту судинного ендотелію (VEGF), трансформуючий фактор росту β (TGF-β), фактор росту епідермісу (EGF), інсуліноподібний фактор росту (IGF), фактор росту епітеліальних клітин ECGF та фактор росту фібробластів (FGF)). Тромбоцити та їхні альфа-гранули руйнуються внаслідок ультразвукової обробки, що використовує явище акустичної кавітації. Використання ультразвукової кавітації для лізису тромбоцитів зменшує можливий негативний вплив на активність факторів росту, пов’язаний із методом повторного заморожування-розморожування.

Протокол ультразвукового приготування ЗТП

Приблизно 16mL свіжої зібраної аутологічної крові обережно перевертають 8–10 разів у пробірці, щоб кров і антикоагулянти добре перемішалися. Після цього зразок центрифугують при 1800 g протягом 20 хв при кімнатній температурі. Після центрифугування тромбоцити та мононуклеарні клітини утворюють білуватий шар на дні шару плазми, який називається збагаченою тромбоцитами плазмою (ЗТП). Верхній шар називається збідненою тромбоцитами плазмою (ЗТП). Мононуклеарні клітини можна видалити або залишити у зразку. Часто мононуклеарні клітини залишають у зразку ЗТП, щоб уникнути додаткових етапів, які несуть ризик забруднення.
Примітка: Ультразвукову обробку аутологічної ЗТП необхідно проводити в стерильних умовах.
ЗТП та ЗТП розділяють і збирають. До ЗТП додають 1,5mL 10% розчину хлориду кальцію, тоді як до ЗТП додають 0,5mL 5% етанолу. Обидві суспензії обережно перемішують і дають їм настоятися протягом 5 хв при кімнатній температурі. Нарешті, 1mL ЗТП додають до суспензії ЗТП і дають їй настоятися до утворення згустку фібрину.
Ультразвукова обробка: Оскільки утворений тромбоцитарний гель діє як резервуар для вивільнених факторів росту, гель фібрину необхідно зруйнувати, щоб вивільнити доступні фактори росту. Параметри для ультразвукового лізису та вивільнення факторів росту є наступними: Проведіть ультразвукову обробку за допомогою UP200Ht або UP200St (200W, 26kHz) із сонотродом S26d2 у пробірці. Щоб уникнути перегрівання зразка крові, ультразвукову обробку можна проводити в імпульсних циклах (наприклад, 10 сек. увімкнено, 30 сек. вимкнено). Зразок слід помістити на лід для охолодження, щоб температура оптимально підтримувалася в межах 2 – 5°C. Після ультразвукової обробки зразок центрифугують при 16 000 g протягом 5 хв при кімнатній температурі. Надосадову рідину збирають і можна зберігати при -70°C.
Концентрація тромбоцитів у фракції ЗТП була збагачена в 1,7 – 4,5 рази за допомогою методу ультразвукової обробки порівняно зі середнім показником кількості тромбоцитів у цілій крові з літератури.

ЗТП була поєднана з терапією стовбуровими клітинами, отриманими з жирової тканини (автологічні стовбурові клітини, вивільнені з жирової тканини за допомогою ультразвуку, змішані з ЗТП, та ін’єктовані назад у тканину пацієнта для відновлення).

Ультразвукове обладнання

Hielscher Ultrasonics є експертом у складних і надійних ультразвукових технологіях. Наші ультразвукові пристрої використовуються у всьому світі для лізису, екстракції та підготовки зразків – безпосередньо та опосередковано. Автоклавувані а також одноразові аксесуари забезпечують обробку без забруднення аутологічних зразків крові. Більшість наших систем можна використовувати для ультразвукового лізису стовбурових клітин та ЗТП, що робить наші ультразвукові пристрої економічно ще більш ефективними.
У таблиці нижче перелічені наші ультразвукові пристрої, які підходять для приготування збагаченої тромбоцитами плазми, та рекомендований об’єм зразка для кожного з них. Більші ультразвукові гомогенізатори та індивідуальні системи також доступні.

Зв’яжіться з нами сьогодні! Ми будемо раді допомогти вам знайти оптимальний ультразвуковий пристрій!