Ультразвукова підготовка тромбоцитарної сироватки
- Багата тромбоцитів плазма (PRP) - це плазма крові, яка збагачена тромбоцитами, яка використовується для медичних і естетичних процедур.
- Ультразвуковий лізис та кондиціонування є дуже ефективним способом отримання плазми, багата на тромбоцити.
- Hielscher Ultrasonics пропонує різні ультразвукові системи, що відповідають вимогам аналізу крові (наприклад, для внутрішньої та зовнішньої підготовки чистої кімнати).
Тромбоцитарна сироватка
Захворювання є надійним та простим способом лізування тромбоцитів у сироватці аутологічної крові з метою вивільнення факторів росту. Фракції, одержувані тромбоцитами – також відомий як аутологічна кондиціонована сироватка (АКС) – використовуються для ремонту тканин або естетичних процедур. Для отримання оптимальних результатів PRP збагачується перед введенням.
Для підготовки збагаченої плазми з факторами росту клітин, ультразвуком є дуже ефективним та ефективним способом лізування клітинних мембран та вивільнення практично повних факторів росту клітин від тромбоцитів. За допомогою ультразвукового лізису та кондиціонування, може використовуватися навіть антикоагуляція крові.
Кондиціонування ПРП за допомогою ультразвукової обробки - це зручний та економічно ефективний спосіб отримання концентраційних факторів росту.
Ультразвукові ефекти лізису
Ультразвукове лікування сироватки крові призводить до однорідного лізису тромбоцитів з метою вивільнення захоплених факторів росту (фактор росту AB (PDGF-AB), фактора росту AA (PDGF-AA), фактора росту BB (PDGF-BB), судинної ендотеліальний фактор росту (VEGF), трансформуючий фактор росту β (TGF-β), епідермальний фактор росту (EGF), інсуліноподібний фактор росту (IGF), фактор росту епітеліальних клітин ECGF та фібробластичний фактор росту (FGF)). Тромбоцити та їх альфа-гранули руйнуються ультразвуком, використовуючи феномен акустична кавітація. Використання ультразвукової кавітації для лізису тромбоцитів зменшує можливий негативний вплив на активність фактору росту повторного методу заморожування-відливання.
Протокол підготовки до ультразвукової PRP
Приблизно 16мл свіжого зібраного зразка аутологічної крові обережно перевертають в 8-10 разів у пробірці так, щоб кров і антикоагулянти добре змішували. Після цього пробу центрифугували при 1800 г протягом 20 хв при кімнатній температурі. Після центрифугування тромбоцити та мононуклеарні клітини утворюють білястий шар у нижній частині плазмового шару, який називається плазмою, багата на тромбоцити (PRP). Верхній шар відомий як бруньок-бідна плазма (PPP). Моноядерні клітини можуть бути видалені або залишені у зразку. Часто мононуклеарні клітини залишаються у зразку PRP, щоб уникнути додаткових стадій, які несуть ризик зараження.
Примітка: Ультразвукове лікування аутологічної ПРП повинно проводитися у стерильних умовах.
PRP та PPP відділяються та збираються. До ДПП додають 1,5мл 10% -ного розчину хлориду кальцію, додавши PRP 0.5мл 5% етанолу. Обидва суспензії обережно перемішують і дають змогу стояти протягом 5 хв при кімнатній температурі. Нарешті, 1мл ДПП додають до суспензії ПРР та дозволяють залишатись до утворення фібринового згустку.
Ультразвукова обробка: Оскільки утворений тромбоцитарний гель діє як резервуар для вивільнених факторів росту, фібриновий гель повинен бути порушений, щоб вивільнити наявні фактори росту. Параметри для ультразвукового лізису та вивільнення фактора росту є такими: Sonicate with UP200Ht або UP200St (200 Вт, 26 кГц) з сонотрода S26d2 зразка в трубці. Щоб уникнути перегрівання зразка крові, ультразвукове дослідження може виконуватися в пульсових циклах (наприклад, 10 сек., 30 сек.). Зразок слід розмістити на льоді для охолодження, щоб температура оптимально зберігалася між 2 – 5 ° C. Після ультразвукової обробки зразок центрифугували при 16000 г протягом 5 хв. при кімнатній температурі. Супернатант збирають і можуть зберігатись при -70 ° С.
Концентрація тромбоцитів у фракції PRP була збагачена 1,7 – 4,5 рази в методі ультразвукового дослідження при порівнянні з літературним середнім показником тромбоцитів у цільній крові.
PRP поєднується з терапією стовбурових клітин, отриманої з використанням жирової тканини (ультразвукові вивільнені аутологічні стовбурові клітини з жировій тканини, змішаний з PRP і ін'єкційний назад у тканину пацієнта для ремонту).
Ультразвукове обладнання
Hielscher Ultrasonics є експертом із вишуканими та надійними ультразвуковими технологіями. Наші ультразвукові пристрої використовуються в усьому світі для лізису, екстракції та підготовки зразків – прямим і непрямим. автоклавний так добре як одноразовий аксесуари забезпечують a без забруднення лікування зразків аутологічної крові. Більшість наших систем можна використовувати для ультразвукового лізису стовбурові клітини і PRP, що робить наші ультразвукові пристрої економічно більш ефективними.
У наведеній нижче таблиці перераховані наші ультразвукові пристрої, які підходять для підготовки плазми, багатих тромбоцитами, та їх рекомендованого обсягу відповідно. Також доступні великі ультразвукові та спеціальні системи.
Пристрій | Потужність [Вт] | Частота [кГц] | Тип | Об'єм [мл] | ||
---|---|---|---|---|---|---|
VialTweeter | 200 | 26 | самостійний | 0.5 | – | 1.5 |
UP50H | 50 | 30 | КПК або витривалість | 0.01 | – | 250 |
UP100H | 100 | 30 | КПК або витривалість | 0.01 | – | 500 |
UP200Ht | 200 | 26 | КПК або витривалість | 0.1 | – | 1000 |
UP200St | 200 | 26 | стоячи | 0.1 | – | 1000 |
UP400St | 400 | 24 | стоячи | 5.0 | – | 2000 |
UP200St-SonoStep | 200 | 26 | самостійний | 30 | – | 500 |
GDmini2 | 200 | 26 | без забруднення проточною осередки |
Будь ласка, зв'яжіться з нами сьогодні! Будемо раді допомогти вам знайти оптимальний ультразвуковий пристрій!
Зв'яжіться з нами! / Запитати нас!
Література / Довідники
- Фортунато, ТМ; Beltrami, Ch .; Емануелі, C .; De Bank, PA :; Пула Г. (2016): Тілатцевий лізатний гель і ендотеліальні попередники стимулюють формування мікросудинної мережі in vitro: наслідки тканинної інженерії. Наука 6 квітня 2016 р.
- Хамід, MSA; Юсуф, Ашріл; Алі, Мохамед Разіф Мохамед (2014): Пластина, багата на тромбоцити (PRP) для гострих м'язових травм: системний огляд. PLOS ONE Том 9, випуск 2, 2014.
Факти варті знати
Тромбоцитів багата плазма
Плазма, багата на тромбоцитоз, містить фактор росту AB (PDGF-AB), фактор росту тромбоцитів AA (PDGF-AA), фактор росту тромбоцитів BB (PDGF-BB), фактор росту ендотелію судин (VEGF), трансформуючий фактор росту β (TGF -β), фактор росту епідермісу (EGF), інсуліноподібний фактор росту (IGF), фактор росту епітеліальних клітин ECGF та фібробластичний фактор росту (FGF), які є важливими стимуляторами росту і відновлення клітин.
Автономна кондисована сироватка (ACS)
Autoлогічних з кондиціонером плазми (ACP) є багатою тромбоцитів плазми, який видобувається з аутологічних крові, який використовується для підтримки регенерації в різних ортопедичних умов і хірургічних процедур. Кондиційованих сироватки готують шляхом поділу плазми від інших компонентів крові (таких, як еритроцити), і концентрувати його. ACP є багатою тромбоцитів плазми (PRP). ПРП є загальним терміном для типу плазми, що містить значно вищу концентрацію тромбоцитів у порівнянні з усією кров'ю. Видобувається з цільної крові. Основними складовими ACP є тромбоцитів (тромбоцити), а також кілька факторів росту, які відіграють важливу роль у процесі загоєння. На відміну від інших багатих на тромбоцитів плазми формулювань, акт відрізняється низькою концентрацією білих кров'яних клітин, таких як нейтрофіл granulоцитів, які можуть бути згубними для процесу загоєння, коли присутній у високих концентраціях.
Пластикові ін'єкції, що містять тромбоцитів
Плазма, багата на тромбоцит, використовується як ін'єкція у регенеративній медицині, так і в косметичних процедурах. Застосування PRP обіцяє значне прискорення загоєння м'язів та відновлення м'язів. Крім того, він успішно використовується для лікування запалення, артриту, болю, ран, повільного загоєння відкритих ран та серйозних опіків шкіри. PRP містить високий рівень факторів росту, який стимулює та захищає цілющі клітини так само, як пошкоджена тканина ремонтується.
Для косметичних трав, PRP був показаний ефективним для стимуляції росту волосся, оновлення шкіри (також відомий як лікування вампіром).
Фактори росту тромбоцитів (PDGF)
Термін тромбоцитарний фактор росту (PDGF) стосується факторів PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C і PDGF-D. Це сигнальна мережа з чотирьох лігандів (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C і PDGF-D) та двох рецепторів, PDGFR-альфа та PDGFR-бета.
Фактори росту, або білки, регулюють ріст і розподіл клітин. Як основний мітоген, виявлений у сироватці ссавців, який виділяється з тромбоцитів під час утворення згустків, воно відіграє значну роль у формуванні кровоносних судин (ангіогенез), зростання кровоносних судин із вже існуючої тканини кровоносних судин.