Ultrasonik Doku Homojenizatörleri
- Ultrasonication güvenlidir & Doku homojenizasyonu için etkili bir yöntem.
- Ultrasonik uygulamalar, hazırlık dokusu ve süspansiyonları, proteinlerin, DNA / RNA'nın ve aktif bileşiklerin ekstraksiyonunu ve ayrıca enzimlerin ve mayaların aktivasyonunu / inaktivasyonunu içerir.
- Prob tipi ultrasonik homojenizatörlerin hassas kontrol edilebilirliği, doku örneklerinin güvenilir bir şekilde hazırlanmasını sağlar.
Ultrasonik Problar ile Doku Homojenizasyonu
Doku homojenizasyonu, proteinler, DNA veya RNA gibi hücre içi maddelerin ekstraksiyonundan önce hayvan ve bitki hücrelerinin veya mikroorganizmaların hazırlandığı bir numune hazırlama işlemidir. Hücre içeriğini serbest bırakmak için hücre zarının yırtılması gerekir. Hücre duvarını kırdıktan sonra, hücre içi makromoleküller tampon çözelti içinde yüzer, böylece organeller, proteinler ve DNA / RNA kullanılabilir hale gelir. Ultrasonik doku homojenizatörleri ve hücre bozucular, hücre bozulması, parçalanması ve ekstraksiyonu için çok etkili araçlardır.
Prob tipi ultrasonicators (örn. 200 watt gücünde UP200St) güvenilir doku homojenizatörleridir ve numune hazırlama için yaygın olarak kullanılır.
Ultrasonik Doku Homojenizatörleri ve Alternatif Lizis Teknikleri
Laboratuvarınız için hangi hücre parçalama tekniğinin ve hangi doku homojenizasyon ekipmanının en iyi seçenek olduğunu kendinize sorabilirsiniz. Aşağıda, ultrasonik lizis ve doku homojenizasyonu için konuşan birkaç argüman bulabilirsiniz, çünkü ultrasonikasyonun alternatif homojenizasyon yöntemlerine göre çeşitli avantajları vardır:
- Randıman: Ultrasonik homojenizasyon, dokuları ve hücreleri bozmak için hızlı ve etkili bir yöntemdir. Ultrasonik doku homojenizatörleri, akustik kavitasyonun çalışma prensibini kullanır. Bu yöntem oldukça verimlidir ve hücreleri birkaç saniye içinde bozabilir. Yoğunluk seviyesi hafiften yoğuna ayarlanabildiğinden, sonikasyon, diğer yöntemler kullanılarak homojenize edilmesi zor olan sert veya lifli dokular için özellikle etkilidir.
- Çapraz Kontaminasyondan Kaçının: Hielscher, numuneyi dolaylı bir sonikasyon tedavisinde hazırlayan güçlü ultrasonik doku homojenizatörleri sunar. UIP400MTP (mikrotitre ve çok kuyulu plakalar için ideal), ayrıca VialTweeter ve CupHorn (şişeler, tüpler ve beherler için ideal) ile Hielscher, temassız homojenizasyon için ultrasonik hücre bozulma ekipmanı sunar, bu da numuneler arasında çapraz kontaminasyon riskini azaltır. Ayrıca, öğütme yüzeylerinden veya diğer homojenizasyon ekipmanlarından kirletici maddelerin girme riskini de en aza indirir.
- Esneklik: Ultrasonik homojenizasyon, küçük hacimlerden büyük doku örneklerine kadar çeşitli örnek boyutları ve hacimleri ile kullanılabilir. Ayrıca, ultrasonik homojenizasyon, bitki dokuları, hayvan dokuları ve mikrobiyal kültürler dahil olmak üzere çok çeşitli numune türleri için de uygundur. Ultrasonication'ın yoğunluğu ve süresi, farklı doku türleri için bozulma seviyesini optimize etmek için ayarlanabilir.
- Tekrarlanabilirlik: Ultrasonik homojenizasyon tutarlı sonuçlar sağlar ve güç çıkışı ve sonikasyon süresi gibi homojenizasyon parametrelerinin hassas kontrolüne izin verir. Bu, deneysel verilerin tekrarlanabilirliğini ve doğruluğunu sağlamaya yardımcı olur.
- Biyomoleküllerin korunması: Prob tipi ultrasonikasyon termal olmayan bir işlemdir. Bu, etkisinin ısıya dayalı olmadığı anlamına gelir. Bununla birlikte, her mekanik işlem, termodinamiğin ikinci yasasına uygun olarak ısı üretir. Bu, numunenin daha uzun sonikasyon sürelerinde ısındığı anlamına gelir. Hielscher son teknoloji Ultrasonicators sıcaklık sensörleri ve akıllı sıcaklık izleme yazılımı ile donatılmıştır. Gelişmiş soğutma seçenekleri, ısının bozulmasını önlemeye izin verir ve enzimler ve proteinler gibi ısıya duyarlı biyomoleküllerin aktivitesinin korunmasına yardımcı olur.
- Zaman Tasarrufu: Prob tipi ultrasonikasyonun yüksek verimliliği, dokunun daha kapsamlı fiziksel manipülasyonunu gerektiren diğer yöntemlere kıyasla zaman kazandıran hızlı doku homojenizasyonuna izin verir.
Ultrasonik doku homojenizasyonu, alternatif homojenizasyon yöntemlerine göre çeşitli avantajlar sunar. Bu nedenle ultrasonik doku homojenizatörleri, çeşitli araştırma ve endüstriyel uygulamalarda tercih edilen hücre parçalama tekniğidir.
Ultrasonik Prob kullanan bir Doku Homojenizasyon Protokolü örneği:
Ultrasonikatörler, basit bir işlem ve hızlı bir homojenizasyon prosedürü ile doku homojenizasyonunu kolaylaştırır. Aynı zamanda, ultrasonik işlem parametreleri, sonuçların güvenilir ve tekrarlanabilir olması için tekrar kontrol edilebilir ve izlenebilir.
Malzeme:
- Doku örneği (örn. karaciğer, beyin, kas)
- Tampon (ör. PBS, Tris-HCl)
- proteaz inhibitörü kokteyli
- Ultrasonik homojenizatör (prob tipi)
- Buz
- mikrosantrifüj tüpleri
- Pipetler
Ultrasonik Doku Homojenizasyonu için Protokol:
Not: Sonikasyonun süresi ve yoğunluğunun, doku tipine, yaşa ve sağlık durumuna ve ayrıca belirli aşağı akış uygulamalarına bağlı olarak optimize edilmesi gerekebilir. Homojenatın verimini ve kalitesini optimize etmek için tamponun, proteaz inhibitörlerinin ve diğer katkı maddelerinin dikkatli bir şekilde seçilmesi de önemlidir.
Ultrasonik doku homojenizatör UP200Ht hücre bozulması, parçalanması, hücre homojenizasyonu ve çözündürülmesinin yanı sıra protein ekstraksiyonu için 2 mm'lik bir boynuz / prob ile.
Hielscher Ultrasonik Doku Homojenizatörlerinin Başlıca Avantajları
- hızlı ve verimli öğütme, homojenizasyon, parçalama & hücre bozulması veya güçlü ultrasonik kavitasyon ile ekstraksiyon
- Kolay ve sezgisel kullanım ve çalıştırma (analog veya dijital versiyonu seçin)
- Sonotrotu sonikasyon altında yıkayarak ürünle temas eden yüzeylerin kolay temizlenmesi (CIP yerinde temizlik / SIP yerinde sterilizasyon)
- Ses koruma kutusu (laboratuvar cihazları için ses koruma kutusu, her açıdan tam görünürlük için tamamen akrilik camdan yapılmıştır)
- Cihazdaki dijital dokunmatik ekran (dijital ultrasonicators) veya powermeter (analog cihazlar için) aracılığıyla proses parametreleri üzerinde tam kontrol
- Entegre sıcaklık kontrolü (ısıya duyarlı, kararsız doku örnekleri için önemlidir)
- Homojenizasyon çalışmasındaki duraklamalar ayrı ayrı tanımlanabilir ve dijital menüde önceden ayarlanabilir
- tüm dijital cihazlar otomatik veri kaydı (entegre bir SD/USB-ComboCard üzerinde), takılabilir sıcaklık sensörü ve tarayıcı uzaktan kumandası ile donatılmıştır.
- ile çoklu numune tedavisi VialTweeter, Kupa boynuzu veya 4 veya 8 parmaklı sonotrodların kullanılmasıyla (örn. laboratuvar robot süreçlerine entegrasyon için)
- küçük ölçekli ve büyük ölçekli uygulamalar için
ile numune hazırlama ultrasonik prob UP100H.
Aşağıdaki tablo, hücre parçalanması, parçalanması ve ekstraksiyonu için ultrasonik doku homojenizatörlerimizin yaklaşık işleme kapasitesinin bir göstergesini vermektedir:
| Numune Hacmi | Akış Oranı | Önerilen Cihaz |
|---|---|---|
| çok kuyulu plakalar | Yok | UIP400MTP |
| şişeler, küçük beher | Yok | Ultrasonik CupHorn |
| 10 şişeye kadar | Yok | VialTweeter |
| 1 - 500mL | 10 - 200mL/min | UP100H |
| 10 - 2000mL | 20 - 400mL/min | UP200Ht, UP400St |
| 0,1 - 20L | 0,2 - 4L/min | UIP2000hdT |
Bizimle İletişime Geçin! / Bize Sor!
Ultrasonik CupHorn Numunelerin steril homojenizasyonu için kapalı tüplerin ve şişelerin yoğun sonikasyonu için.
Uygulamanız için en uygun ultrasonik doku homojenizatörünü bulun
Hielscher ultrasonik doku homojenizatörleri 50W ila 16.000W (16kW) arasında bir ultrason çıkış aralığı ile mevcuttur.
Laboratuvar çalışanları, Hielscher ultrasonik laboratuvar homojenizatörlerinin basit ve sezgisel çalışmasından memnunlar. Özel gereksinimlere bağlı olarak, Hielscher cihazları dijital veya analog kontrol ile birlikte gelir.
- VialTweeter (ŞişeTweeter) aynı yoğunlukta 10 flakon veya test tüpünün aynı anda sonikasyonuna izin veren güçlü bir ultrasonik homojenizatördür. Dolaylı sonikasyon nedeniyle, çapraz kontaminasyon ve numune kaybı tamamen önlenir. Tek kullanımlık şişelerin kullanılması nedeniyle temizlik ve sanitasyon minimuma indirilir. Blok sonotrot otoklavlanabilir.
- UIP400MTP Plaka-Sonikatör mikrotitre ve 96 oyuklu plakalar gibi çok kuyulu plakalarla çalışırken idealdir. Çok kuyulu plakanızı veya petri kabınızı UIP400MTP yerleştirin ve tüm örnekler eşit şekilde sonikasyona tabi tutulur. UIP400MTP Plaka-Sonikatör ile yüksek verimli numune işleme basit ve verimli hale gelir!
- Prob tipi laboratuvar ultrasonicators aralığında, homojenizatörler 50 watt, 100 watt, 200 watt ve 400 watt ile seçilebilir.
UP50H (50W)
UP100H (100W)
UP200Ht / UP200St (200W)
UP400St (400W)
Ultrasonik Doku Homojenizatörlerinin Uygulaması ve Kullanımı
Ultrasonik homojenizatörler genellikle doku öğütme, hücre bozulması için kullanılır & moleküler aralıkta hücre içi maddenin ekstraksiyonundan önce biyolojik numunelerin parçalanması ve homojenizasyonu. Numunelerin kontrollü sonikasyonu ile, lizisten ekstraksiyona ve homojenizasyona kadar tüm adımlar aynı ultrasonik hücre bozucu kullanılarak gerçekleştirilebilir.
Ultrasonik homojenizatörlerin en büyük avantajı, kolayca ayarlanabilen güç girişi ve sonikasyon yoğunluğunda yatmaktadır. Hielscher ultrasonik hücre bozucular (lysers), genliği% 20'den% 100'e ayarlayarak sonikasyon yoğunluğunu kontrol etmeye izin verir.
Sürekli çalışmaya alternatif olarak, ultrasonik homojenizatör, örneğin ısıya duyarlı dokunun sonikasyonu için döngü moduna ayarlanabilir. Nabız modunda sonikasyon, ultrasonicator'ın periyodik döngülerde yüksek yoğunluklu ultrasonik dalgalar ürettiği anlamına gelir. Sonikasyon süresinin süresi ve dinlenme süresi kullanıcı tarafından ayrı ayrı ayarlanabilir.
da darbeli sonikasyon, dinlenme süresi boyunca, sonikasyonlu malzeme dinlenme durumuna geri dönebilir ve numune soğuyabilir (ısı dağılımı için dinlenme süresini kullanarak). Böylece işlem yoğunluğu dokuya göre doğru bir şekilde ayarlanabilir ve istenmeyen numune ısıtması azaltılır.
Ultrasonik doku homojenizatörleri sağlam ve kullanıcı dostudur ve tüm önemli proses parametreleri üzerinde tam kontrol sayesinde tekrarlanabilirliği garanti eden güvenilir sonuçlar üretir.
Ultrasonik doku öğütme, hücre parçalanması, lizis, ekstraksiyon ve homojenizasyonun yaygın uygulama alanları biyolojik ve farmasötik laboratuvarlarda, mikrobiyolojide, proteomik ve genomik araştırmalarda (örneğin, Western blotting öncesi protein salınımı ve enzime bağlı immünosorbent testi ELISA), aynı zamanda gıda, ilaç ve kozmetik endüstrileri için botanik özler ve biyoaktif bileşiklerin üretiminde bulunur.
- Numune hazırlama, doku homojenizasyonu, lizis ve ekstraksiyon (örn. hücreler, bakteriler, sporlar, aktif bileşikler) ile ilgili özel proses önerileri için buraya tıklayın!
- Sonikatörlerin proteomik araştırmalar için neden vazgeçilmez bir araç olduğunu buradan okuyun!
- Sonikasyonun genomik araştırma çalışmalarını nasıl kolaylaştırdığını öğrenin!
Literatür / Referanslar
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
Bilmeye Değer Gerçekler
Ultrasonik doku homojenizatörleri genellikle prob sonikatörü, sonik lizör, ultrason bozucu, ultrasonik öğütücü, sono-ruptor, sonifiyeci, sonik dismembrator, hücre bozucu, ultrasonik dağıtıcı veya çözücü olarak adlandırılır. Farklı terimler, sonikasyon ile yerine getirilebilecek çeşitli uygulamalardan kaynaklanır.
Hielscher Ultrasonics, laboratuvar, pilot ve endüstriyel ölçekte karıştırma uygulamaları, dispersiyon, emülsifikasyon ve ekstraksiyon için yüksek performanslı ultrasonik homojenizatörler üretmektedir.