İnatçı Biyofilmleri Kırmak için Yeni Mikroplaka Sonikatörleri
, Kathrin Hielscher, Hielscher News'de yayınlandı
Biyofilmler – yüzeylere yapışan yoğun mikrobiyal topluluklar – mikrobiyoloji ve klinik teşhis alanındaki en zorlu görevler arasındadır. Yeni UIP400MTP mikroplaka sonikatörü, yüksek verimli numune hazırlamayı kolaylaştırır. Hakemli çalışmaların analizleri, Hielscher'in çok kuyulu plaka sonikatörleri gibi yüksek performanslı ultrasonik sistemlerin, bu inatçı yapıları MBEC™ plakalarından çıkarmak için temel laboratuvar araçları olarak ortaya çıktığını ve daha doğru antimikrobiyal testlere ve daha hızlı araştırma iş akışlarına olanak sağladığını göstermektedir.
Sonikasyon ile Biyofilm Ayrıştırma
Staphylococcus aureus, koagülaz-negatif stafilokoklar ve Staphylococcus saprophyticus biyofilmleri üzerine yapılan iki önemli çalışmaya göre, biyofilmler antibiyotiklere karşı serbest yüzen planktonik bakterilerden yüzlerce kat daha dirençli olabildiği için bilim insanları çok kuyucuklu plaka sonikasyonuna giderek daha fazla güvenmektedir. Bir biyofilm matrisine gömüldüklerinde, bu mikroplar, genellikle klinik olarak ulaşılabilir ilaç seviyelerinin ötesinde, önemli ölçüde yüksek minimum inhibitör konsantrasyonlar (MIC'ler) ve minimum bakterisidal konsantrasyonlar (MBC'ler) göstermektedir.
Ancak etkili testler, biyofilm hücrelerinin etkili ve güvenilir bir şekilde ayrılmasıyla başlar – UIP400MTP'nin öne çıktığı nokta da burasıdır.
Yapışık hücre kültürlerini herhangi bir standart mikroplakadan ayırma: UIP400MTP sonikatör ile yüksek verimli numune hazırlama
Biyofilmler: Antibiyotiklere Karşı Gizli Bir Kalkan
Atıfta bulunulan her iki çalışmada da araştırmacılar, bakteriler biyofilm formunda test edildiğinde antimikrobiyal dirençte dramatik artışlar olduğunu belgelemiştir:
MİK değerleri planktonik hücrelere kıyasla 2 ila 32 kat ve bazen daha fazla artmıştır.
Bazı izolatlar biyofilm haline geçtikten sonra antibiyotiğe duyarlı durumdan tamamen dirençli duruma geçmiştir.
Bazı biyofilmler, test edilen en yüksek konsantrasyonların ötesinde MBC seviyelerine ihtiyaç duyarak aşırı toleranslarını vurgulamıştır.
Bu bulgular, biyofilmleri parçalamanın neden kritik olduğunun altını çizmektedir: doğru ilaç direnci profili, hücrelerin koruyucu matristen ayrılarak tek tek test edilebilmesine bağlıdır.
Çözüm: Mikroplaka Sonikatörü UIP400MTP
Her iki çalışmada da özel MBEC™ pin-lid cihazlarında yetiştirilen biyofilmleri ayırmak için Hielscher'in UIP250MTP çok kuyulu plaka sonikatörü kullanılmıştır. Çok kuyucuklu plakanın 5 dakika boyunca sonikasyonu, biyofilm hücrelerini taze ortama başarılı bir şekilde dağıtarak araştırmacıların MICB ve MBCB'yi yüksek tekrarlanabilirlikle ölçmesini sağlamıştır.
Bu teknik yaygın olarak benimsenmiştir çünkü:
- Karşılaştırmalı antimikrobiyal testler için gerekli olan tüm kuyuları aynı anda ve eşit şekilde işler.
- Akustik kavitasyon, hücreleri yok etmeden ekstraselüler matrisi etkili bir şekilde parçalar.
- Biyofilm direnci araştırmalarında kullanılan MBEC pin-lid platformları ile sorunsuz çalışır.
Araştırmacıları Hemen İkna Edecek Temel Özellikler
- 400 watt ultrasonik güç (20 kHz) ile hızlı ve kapsamlı biyofilm ayrıştırma
- Enerji girişi (Ws/mL), genlik, sıcaklık ve zaman dahil olmak üzere tam parametre kontrolü
- Sonikasyon sırasında plakaları serin tutmak için devridaim pompalı dahili ısı eşanjörü
- Tekrarlanabilir, otomatikleştirilmiş iş akışları için programlanabilir modlar
- Tüm plakalar boyunca eşit sonikasyon. Aşağıdaki videoyu izleyin!
Homojenlik testi, standartlaştırılmış biyofilm bozulması için gereken homojen kavitasyon alanını görsel olarak doğrular – Düşük güçlü ultrasonik banyolarda bilinen bir zorluktur.
Çok kuyulu plaka sonikatör UIP400MTP verimli MBEC deneyleri için
Bu Durum Hastaneler, Laboratuvarlar ve Antibiyotik Geliştirilmesi İçin Neden Önemli?
Biyofilm ile ilişkili enfeksiyonlar – idrar yolu enfeksiyonlarından kateterle ilişkili kan dolaşımı enfeksiyonlarına kadar – tedavi edilmesinin zor olduğu bilinmektedir. Çalışmalar gösteriyor ki:
- Planktonik hücreler üzerinde yapılan geleneksel antibiyotik testleri gerçek dünya direncini hafife almaktadır.
- Yüksek kaliteli sonikasyon, doğru biyofilm türevli numuneler hazırlamak için hayati önem taşır.
- UIP400MTP gibi araçlar, laboratuvar testleri ile klinik gerçeklik arasındaki boşluğu doldurmaya yardımcı olur.
Antimikrobiyal direnç artmaya devam ederken, biyofilm araştırmalarında tekrarlanabilirliği ve güvenilirliği artıran teknolojiler yeni tedavilerin geliştirilmesinde belirleyici bir rol oynayabilir.
Ekteki çalışmalar bir sonucu açıkça ortaya koymaktadır: biyofilm oluşturan bakteriler yeni test yaklaşımları gerektirmektedir ve çok kuyulu plaka sonikasyonu – özellikle Hielscher UIP400MTP gibi ultra güçlü, eşit dağılımlı ultrasonik sistemlerle – MBEC plakalarından biyofilmlerin çıkarılması için hızla altın standart haline gelmektedir.
Mikrobiyoloji laboratuvarları, ilaç geliştiricileri ve klinik araştırmacılar için bu cihazlar artık sadece birer kolaylık değil – biyofilm içine gömülü patojenlerin gerçek antibiyotik direncini doğru bir şekilde ölçmede vazgeçilmez araçlar haline gelmektedirler.
Çok kuyulu plaka sonikatörü UIP400MTP hakkında bilgileri burada bulabilirsiniz!
Diğer Referanslar
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
- Lauren E. Cruchley-Fuge, Martin R. Jones, Ossama Edbali, Gavin R. Lloyd, Ralf J. M. Weber, Andrew D. Southam, Mark R. Viant (2024): Automated extraction of adherent cell lines from 24-well and 96-well plates for multi-omics analysis using the Hielscher UIP400MTP sonicator and Beckman Coulter i7 liquid handling workstation. Metabomeeting 2024, University of Liverpool, 26-28th November 2024.


