Ultrasonikasyon ile Hazırlanan Tampon Çözeltileri

Lizis tamponları, ultrasonik doku homojenizatörleri kullanılarak verimli ve hızlı bir şekilde hazırlanabilir. Ultrasonicators karıştırma, çözme ve dağıtma için bir rüya aracı olduğundan, lizis tamponlarının güvenilir ve kullanıcı dostu bir şekilde hazırlanmasına izin verirler.

Lizis Tamponlarının Ultrasonik Hazırlanması

Ultrasonik doku homojenizatörleri, hücre bozulması, parçalanması ve ekstraksiyonu için yaygın bir araçtır, bu nedenle çoğu laboratuvarda mevcuttur. Prob tipi ultrasonikatörler için ikincil bir uygulama, lizis tamponlarının hazırlanmasıdır.

Lizis tamponu, hücreleri açmak (parçalamak) ve içeriklerini aşağı akış analizi için serbest bırakmak için kullanılan bir çözeltidir. Lizis tamponunun spesifik bileşimi, parçalanan hücrelerin tipine ve aşağı akış uygulamasına bağlı olarak değişebilir. Bununla birlikte, tipik bir lizis tamponu, deterjanlar, tuzlar ve proteaz inhibitörleri gibi bileşenler içerir. Tamponlama tuzları (örneğin Tris-HCl) ve iyonik tuzlar (örneğin NaCl), lizatın pH'ını ve ozmolaritesini düzenlemek için yaygın olarak kullanılır.
Bir lizis tamponu yapmak için, bileşenler uygun konsantrasyonlarda ve pH'da karıştırılır. Karışım genellikle bileşenler çözülene ve çözelti homojen olana kadar karıştırılır veya çalkalanır.
Ultrasonik homojenizasyon, bileşenlerin karıştırılmasını ve çözünmesini iyileştirerek iyi bir lizis tamponu oluşturmaya yardımcı olmak için kullanılabilecek bir yöntemdir. Bu yöntemde ultrason dalgaları – normalde 20 ila 30 kHz aralığında – çöken ve yoğun yerel enerji üreten kavitasyon kabarcıkları oluşturan, bileşenlerin mekanik olarak kesilmesine ve karıştırılmasına yol açan karışıma uygulanır.
Ultrasonik homojenizasyon işlemi, bileşenlerin herhangi bir kümesini veya agregasını parçalamaya yardımcı olabilir ve çözeltinin düzgün bir şekilde karıştırılmasını sağlayabilir. Sonuç olarak, bu tür geliştirilmiş lizis tamponu, daha verimli hücre bozulmasına ve ekstrakte edilen materyalin daha yüksek verimine yol açabilir. Ek olarak, ultrasonik homojenizasyon, geleneksel karıştırma veya çalkalama yöntemlerine kıyasla bir lizis tamponu yapmak için gereken süreyi azaltabilir.
Genel olarak, ultrasonik homojenizasyon, lizis tamponu hazırlığının kalitesini ve verimliliğini artırmak için güçlü bir araçtır.

Ultrasonik Lizis Tamponu Hazırlama Protokolü

Bu, bir prob tipi ultrasonicator kullanarak bir lizis tamponu yapmak için genel bir protokoldür:
 
Malzeme:

• Tercih edilen deterjan(lar) (ör. Triton X-100, SDS, CHAPS)
• Tercih edilen tuz(lar) (örneğin NaCl, KCl)
• Proteaz inhibitörleri (ör. PMSF, aprotinin, leupeptin)
• ultrasonikatör
• Karıştırıcı
• Deiyonize su
• pH metre veya pH şeritleri

 
 
Adım Adım Talimatlar:

1. Parçalama tamponunun bileşimini, parçalayacağınız hücrelere veya dokuya ve lizatı kullanacağınız aşağı akış uygulamalarına göre belirleyin. Deterjanların, tuzların ve proteaz inhibitörlerinin stok çözeltilerini istenen konsantrasyonlarda hazırlayın.
2. Deterjanların, tuzların ve proteaz inhibitörlerinin stok çözeltilerini bir behere veya şişeye ekleyin.
3. Hacmi istenen tampon miktarına getirmek için deiyonize su ekleyin.
4. Ön karışım çözeltisi elde etmek için bileşenleri bir karıştırıcı kullanarak karıştırın.
5. Bir pH metre veya pH şeritleri kullanarak tamponun pH'ını ölçün ve pH'ı az miktarda asit veya baz ile gerektiği gibi ayarlayın.
6. Ön karışım çözeltisini homojenize etmek için prob tipi ultrasonicator kullanın, böylece oldukça homojen bir çözelti elde edilir. Bu nedenle, çözelti iyice karışana ve herhangi bir küme veya agrega parçalanana kadar çözeltiyi birkaç saniye sonikleştirin. Sonikasyonun süresi ve gücü, kullanılan spesifik lizis tamponu ve ultrasonikatöre göre optimize edilebilir.
7. Ultrasonikasyondan sonra, tamponun pH'ını yeniden ölçün ve gerektiği gibi ayarlayın.
8. Sonikasyon sırasında oluşmuş olabilecek herhangi bir kalıntı veya agregayı temizlemek için tamponu 0.2 mikronluk bir filtreden süzün.
9. Lizis tamponu artık kullanıma hazırdır.

 
Not: Lizis tamponunun tam bileşimi ve pH'ı, parçalanan hücrelere veya dokuya ve sonraki uygulamalara bağlı olarak değişebilir. Yukarıdaki protokol genel bir kılavuzdur ve belirli uygulamalar için optimize edilmesi gerekebilir.
 
Ultrasonik homojenizatörler, hücre bozulması ve hücre içi moleküllerin ekstraksiyonu için yaygın olarak kullanılır. Bu nedenle, birçok lizis uygulaması, sadece lizis tamponunun hazırlanması için değil, aynı zamanda mekanik hücre bozulması ve ekstraksiyonu için de prob tipi sonikasyon kullanır.
Bu, ultrasonik doku homojenizatörlerini laboratuvarlar için çok yönlü bir araç haline getirir ve ultrasonicators'ın mikrobiyoloji, biyoteknoloji ve yaşam bilimlerinde geniş kullanımını açıklar.

ultrasonik laboratuvar homojenizatörleri

Hielscher Ultrasonics, çeşitli güç derecelerinde ve örnek hacimlerinde ultrasonik homojenizatörler ve problar (sonotrodlar) üretir ve tedarik eder. Bu, numune hazırlığınız için size en uygun ultrasonik bozucuyu sunmamızı sağlar. En yüksek kaliteye, olağanüstü kullanıcı konforuna ve güvenilir sonikasyon sonuçlarına odaklanıyoruz. Tüm dijital ultrasonicators, akıllı yazılım, sonikasyon protokollerinin programlanması ve ön ayarı, tarayıcı uzaktan kumandası, sıcaklık kontrolü, örnek aydınlatması ve dahili bir SD kartta otomatik veri kaydı özelliklerine sahiptir.

Tasarım, İmalat ve Danışmanlık – Almanya'da Üretilen Kalite

Hielscher ultrasonicators en yüksek kalite ve tasarım standartları için iyi bilinir. Sağlamlık ve kolay kullanım, ultrasonicators'ımızın endüstriyel tesislere sorunsuz bir şekilde entegre edilmesini sağlar. Zorlu koşullar ve zorlu ortamlar Hielscher ultrasonicators tarafından kolayca ele alınır.

Hielscher Ultrasonics, ISO sertifikalı bir şirkettir ve en son teknoloji ve kullanıcı dostu özelliklere sahip yüksek performanslı ultrasonicators'a özel önem vermektedir. Tabii ki, Hielscher ultrasonicators CE uyumludur ve UL, CSA ve RoHs gereksinimlerini karşılar.

Aşağıdaki tablo size çeşitli laboratuvar ultrasonicators hakkında genel bir bakış sunar: