Ultrasonic Lysis: คําแนะนําทีละขั้นตอนเพื่อทําให้เซลล์หยุดชะงักสมบูรณ์แบบ
คุณต้องการที่จะเชี่ยวชาญวิทยาศาสตร์ของการสลายเซลล์หรือไม่? ไม่ต้องมองหาที่ไหนอีกแล้ว! ในคําแนะนําทีละขั้นตอนนี้ เราจะแนะนําคุณตลอดกระบวนการหยุดชะงักของเซลล์อัลตราโซนิก และทําให้แน่ใจว่าเทคนิคการสลายเซลล์ของคุณให้ผลลัพธ์ที่ดีที่สุด ไม่ว่าคุณจะเป็นนักวิจัยที่มีประสบการณ์หรือนักวิทยาศาสตร์มือใหม่คู่มือนี้จะให้ความรู้และทักษะในการใช้เครื่องสะท้อนเสียงชนิดโพรบเพื่อให้เกิดการหยุดชะงักของเซลล์และการสลายที่ประสบความสําเร็จ
Homogenizers อัลตราโซนิกเป็น Cell Disrupters ที่มีประสิทธิภาพ
Sonication ซึ่งเป็นเทคนิคที่ใช้เครื่อง sonicator ชนิดโพรบเป็นวิธีการที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการทําลายเซลล์เปิดซึ่งเป็นขั้นตอนสําคัญของการเตรียมตัวอย่างในการทดลองและการทดสอบทางชีวภาพชีวเคมีและการวิเคราะห์จํานวนมาก ประสิทธิผลของ sonication ขึ้นอยู่กับปัจจัยต่างๆรวมถึงแอมพลิจูดพลังงานระยะเวลา sonication และการเตรียมตัวอย่าง
ด้วยการทําความเข้าใจหลักการทํางานที่อยู่เบื้องหลังการ sonication และใช้เทคนิคที่เหมาะสมคุณสามารถเพิ่มการหยุดชะงักของเซลล์ได้สูงสุดในขณะที่ลดความเสียหายต่อโมเลกุลที่บอบบาง
ตลอดคู่มือนี้เราจะให้คําแนะนําโดยละเอียดและเคล็ดลับที่เป็นประโยชน์เพื่อช่วยให้คุณนําทางกระบวนการ sonication ได้อย่างง่ายดาย ซึ่งรวมถึงการเลือกเครื่องโซนิกและการตั้งค่าอัลตราโซนิกที่เหมาะสมเพื่อปรับเงื่อนไขสําหรับเซลล์ประเภทเฉพาะ
ความสําคัญของการสลายเซลล์ในการวิจัยทางวิทยาศาสตร์
การหยุดชะงักของเซลล์หรือการสลายตัวเป็นหนึ่งในเทคนิคพื้นฐานที่ใช้ในการวิจัยทางวิทยาศาสตร์ด้านต่างๆ รวมถึงชีววิทยาโมเลกุล ชีววิทยาเซลล์ ชีวเคมี และวิทยาศาสตร์เพื่อชีวิต กระบวนการหยุดชะงักของเซลล์เกี่ยวข้องกับการเปิดเยื่อหุ้มเซลล์หรือผนังเซลล์เพื่อปล่อยโมเลกุลภายในเซลล์ โมเลกุลเป้าหมายของการสลายอาจเป็นโปรตีนกรดนิวคลีอิกและส่วนประกอบของเซลล์อื่น ๆ ซึ่งหมายความว่าการสลายช่วยให้นักวิทยาศาสตร์สามารถแยกส่วนประกอบภายในและชีวโมเลกุลออกจากเซลล์เพื่อวิเคราะห์ได้
การทําความเข้าใจหลักการของการสลายเซลล์เป็นสิ่งสําคัญสําหรับการสร้างผลลัพธ์ที่แม่นยําและทําซ้ําได้ นักวิจัยสามารถเข้าถึงโมเลกุลภายในเซลล์ที่พวกเขาต้องศึกษา เช่น เอนไซม์ ดีเอ็นเอ อาร์เอ็นเอ และโปรตีน เซลล์ประเภทต่างๆ ต้องการวิธีการสลายที่แตกต่างกัน และ sonication ได้กลายเป็นเทคนิคที่ได้รับความนิยมเนื่องจากความเก่งกาจและประสิทธิภาพ
Sonication เป็นวิธีทางกายภาพที่ใช้คลื่นเสียงความถี่สูงเพื่อทําลายเยื่อหุ้มเซลล์ เนื่องจากความเข้มของกระบวนการ sonication สามารถปรับได้อย่างแม่นยํา sonicators จึงมีประโยชน์สําหรับการทําลายผนังเซลล์ที่อ่อนนุ่มและแข็งและสกัดส่วนประกอบภายในเซลล์ ด้วยการเพิ่มประสิทธิภาพเงื่อนไขการ sonication นักวิจัยสามารถบรรลุการสลายเซลล์ที่มีประสิทธิภาพในขณะที่รักษาความสมบูรณ์ของโมเลกุลที่สกัดออกมา
ทําความเข้าใจหลักการของ Sonication
ก่อนที่เราจะเริ่มกระบวนการ sonication สิ่งสําคัญคือต้องเตรียมเซลล์ไลเซตอย่างเหมาะสม นี่คือคําแนะนําทีละขั้นตอนที่ช่วยให้คุณเริ่มต้น:
- การเตรียมการเพาะเลี้ยงเซลล์: เริ่มต้นด้วยการปลูกเซลล์ที่สนใจในอาหารเลี้ยงเชื้อและเงื่อนไขที่เหมาะสม ตรวจสอบให้แน่ใจว่าเซลล์แข็งแรงและอยู่ในระยะการเจริญเติบโตที่ต้องการก่อนดําเนินการต่อ
- การเก็บเกี่ยวเซลล์: เมื่อเซลล์ถึงระยะการบรรจบกันหรือการเจริญเติบโตที่ต้องการแล้ว ให้เก็บเกี่ยวโดยใช้วิธีการที่เหมาะสม เช่น การทําทริปซิไนเซชันหรือการขูด ถ่ายโอนเซลล์ไปยังหลอดหมุนเหวี่ยงที่ปราศจากเชื้อและอัดเม็ดโดยการหมุนเหวี่ยง
- ล้างเซลล์: นําอาหารเลี้ยงเชื้อออกและล้างเม็ดเซลล์ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่เหมาะสม เช่น น้ําเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (PBS) ขั้นตอนนี้ช่วยขจัดสารที่ตกค้างและสิ่งปนเปื้อน
- การระงับเซลล์: ระงับเม็ดเซลล์อีกครั้งในบัฟเฟอร์การสลายที่เหมาะสมสําหรับการทดลองของคุณ บัฟเฟอร์การสลายควรมีผงซักฟอกหรือเอนไซม์เพื่อทําลายเยื่อหุ้มเซลล์และปล่อยเนื้อหาภายในเซลล์
- การสลายเซลล์: ทําให้เซลล์แขวนลอยเป็นเนื้อเดียวกันโดยใช้เครื่องสะท้อนเสียงแบบโพรบเพื่อให้แน่ใจว่ามีการสลายอย่างสมบูรณ์ คุณอาจต้องบ่มไลเซตของเซลล์ที่อุณหภูมิเฉพาะหรือเพิ่มรีเอเจนต์เพิ่มเติมเพื่อเพิ่มการสลาย ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับประเภทของเซลล์และข้อกําหนดในการทดลอง
- การกําจัดเศษเซลล์: หมุนเหวี่ยงไลเสตของเซลล์ด้วยความเร็วสูงเพื่ออัดเม็ดเศษเซลล์ ออร์แกเนลล์ และวัสดุที่ไม่ละลายน้ําอื่นๆ ถ่ายโอนสารน้ําชั้นบนที่มีส่วนประกอบภายในเซลล์ที่ต้องการไปยังหลอดใหม่
- การหาปริมาณโปรตีน: วัดความเข้มข้นของโปรตีนของไลเสทเซลล์โดยใช้วิธีที่เหมาะสม เช่น การทดสอบแบรดฟอร์ดหรือ BCA ขั้นตอนนี้ช่วยกําหนดการเจือจางที่เหมาะสมสําหรับการใช้งานปลายน้ํา
- ตัวอย่างการอ้างถึง: ขึ้นอยู่กับการออกแบบการทดลองของคุณ ให้แบ่งไลเสทของเซลล์ให้อยู่ในปริมาตรที่เหมาะสมและเก็บไว้ที่อุณหภูมิที่เหมาะสมเพื่อใช้ในอนาคต
เมื่อทําตามขั้นตอนเหล่านี้คุณจะเตรียมเซลล์ไลเสทอย่างถูกต้องและพร้อมสําหรับการ sonication เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่ดีที่สุด
คําแนะนําทีละขั้นตอนในการเตรียม Cell Lysate
ตอนนี้คุณได้อ่านเกี่ยวกับกระบวนการที่สมบูรณ์ของการเตรียมเซลล์ไลเสทแล้วเราต้องการมุ่งเน้นไปที่ขั้นตอนการ sonication เงื่อนไขการสลายเซลล์มีความสําคัญเพื่อให้เกิดการสลายเซลล์ที่มีประสิทธิภาพ พารามิเตอร์สําคัญที่ต้องพิจารณาเมื่อเพิ่มประสิทธิภาพการ sonication ได้แก่ ระยะเวลากําลังและการเตรียมตัวอย่าง ต่อไปนี้เป็นแนวทางบางประการที่จะช่วยคุณเพิ่มประสิทธิภาพพารามิเตอร์เหล่านี้:
- ระยะเวลา: ระยะเวลาของ sonication ขึ้นอยู่กับประเภทของเซลล์และระดับที่ต้องการของการหยุดชะงักของเซลล์ เริ่มต้นด้วยระยะเวลาที่สั้นลงและค่อยๆ เพิ่มหากจําเป็น หลีกเลี่ยงการใช้เวลา sonication มากเกินไปเนื่องจากอาจนําไปสู่การสร้างความร้อนมากเกินไปและการเปลี่ยนสภาพของโมเลกุลที่บอบบาง
- พลัง: การตั้งค่าพลังงานของอุปกรณ์ sonication ควรได้รับการปรับให้เหมาะสมตามประเภทของเซลล์และระดับการหยุดชะงักของเซลล์ที่ต้องการ การตั้งค่าพลังงานที่สูงขึ้นอาจส่งผลให้การสลายเซลล์มีประสิทธิภาพมากขึ้น แต่ก็อาจทําให้เกิดความร้อนมากเกินไปได้เช่นกัน สิ่งสําคัญคือต้องสร้างสมดุลระหว่างการหยุดชะงักของเซลล์กับความสมบูรณ์ของตัวอย่าง
- การเตรียมตัวอย่าง: การเตรียมตัวอย่างที่เหมาะสมเป็นสิ่งสําคัญสําหรับการ sonication ที่มีประสิทธิภาพ ตรวจสอบให้แน่ใจว่าเซลล์ไลเสทปราศจากเศษขยะและวัสดุที่ไม่ละลายน้ําซึ่งอาจรบกวนประสิทธิภาพการ sonication หมุนเหวี่ยงไลเสทหากจําเป็นก่อนการ sonication
- การควบคุมอุณหภูมิ: Sonication สร้างความร้อนซึ่งอาจเป็นอันตรายต่อโมเลกุลที่ละเอียดอ่อน เพื่อลดความเสียหายจากความร้อนให้พิจารณาใช้อุปกรณ์ sonication ที่มีความสามารถในการควบคุมอุณหภูมิหรือทําการ sonication ในห้องเย็นหรือบนน้ําแข็ง
- ตําแหน่งโพรบ Sonicator: การวางตําแหน่งที่เหมาะสมของโพรบ sonicator เป็นสิ่งสําคัญสําหรับการ sonication ที่มีประสิทธิภาพ ควรแช่โพรบในไลเสทของเซลล์ แต่ไม่สัมผัสกับผนังภาชนะเพื่อหลีกเลี่ยงการสั่นสะเทือนที่ไม่จําเป็นและความเสียหายที่อาจเกิดขึ้นกับภาชนะตัวอย่าง
โดยการพิจารณาพารามิเตอร์เหล่านี้อย่างรอบคอบและปรับเงื่อนไขการโซนิเคชั่นให้เหมาะสมคุณจะบรรลุการสลายเซลล์ที่มีประสิทธิภาพในขณะที่รักษาความสมบูรณ์ของโมเลกุลที่สกัดออกมา
การเพิ่มประสิทธิภาพเงื่อนไข Sonication เพื่อการสลายเซลล์ที่มีประสิทธิภาพ
แม้จะปฏิบัติตามแนวทางที่แนะนํา แต่นักวิจัยอาจเผชิญกับความท้าทายในระหว่างกระบวนการสลายเซลล์และ sonication การทําความเข้าใจความท้าทายเหล่านี้และการใช้กลยุทธ์การแก้ไขปัญหาสามารถช่วยเอาชนะความท้าทายเหล่านี้ได้ ต่อไปนี้คือความท้าทายทั่วไปและเคล็ดลับการแก้ไขปัญหาที่เกี่ยวข้อง:
- การสลายเซลล์ไม่เพียงพอ: หากเซลล์ไลเสทไม่ให้การหยุดชะงักของเซลล์ในระดับที่ต้องการให้พิจารณาเพิ่มระยะเวลาหรือกําลัง sonication นอกจากนี้ตรวจสอบให้แน่ใจว่าเซลล์ไลเสทได้รับการเตรียมอย่างเพียงพอและปราศจากเศษขยะหรือวัสดุที่ไม่ละลายน้ําที่อาจรบกวนประสิทธิภาพการ sonication
- การสร้างโฟมมากเกินไป: โฟมที่มากเกินไปในระหว่างการ sonication สามารถขัดขวางการสลายเซลล์ที่มีประสิทธิภาพ เพื่อลดการสร้างโฟมให้ใช้บัฟเฟอร์สไลซิสที่มีความเข้มข้นของผงซักฟอกที่เหมาะสมและหลีกเลี่ยงการผสมหรือการกวนมากเกินไปในระหว่างกระบวนการ sonication
- ความร้อนตัวอย่าง: การสร้างความร้อนที่มากเกินไปในระหว่างการ sonication อาจทําให้โมเลกุลที่บอบบางเสียสภาพและส่งผลต่อความสมบูรณ์ของเซลล์ไลเสท เพื่อลดความร้อนของตัวอย่างให้พิจารณาใช้อุปกรณ์ sonication ที่มีความสามารถในการควบคุมอุณหภูมิหรือทําการ sonication ในห้องเย็นหรือบนน้ําแข็ง
- การปนเปื้อนตัวอย่าง: การปนเปื้อนอาจเกิดขึ้นได้ในระหว่างการสลายเซลล์และการสะท้อนเสียงซึ่งนําไปสู่ผลลัพธ์ที่ไม่ถูกต้อง ตรวจสอบให้แน่ใจว่าอุปกรณ์และรีเอเจนต์ทั้งหมดที่ใช้นั้นปลอดเชื้อและปราศจากสารปนเปื้อน ใช้เทคนิคปลอดเชื้อที่เหมาะสมระหว่างการเตรียมและการจัดการตัวอย่าง
เมื่อตระหนักถึงความท้าทายเหล่านี้และใช้กลยุทธ์การแก้ไขปัญหาที่เหมาะสมคุณสามารถเอาชนะอุปสรรคและบรรลุการสลายเซลล์ที่ประสบความสําเร็จโดยใช้เครื่องสะท้อนเสียงชนิดโพรบ
ความท้าทายทั่วไปในการสลายเซลล์และเคล็ดลับการแก้ไขปัญหา
เมื่อคุณประสบความสําเร็จในการ sonicated เซลล์ไลเสทของคุณแล้วจําเป็นต้องจัดการกับตัวอย่างที่โซนิคอย่างถูกต้องเพื่อรักษาความสมบูรณ์ของโมเลกุลที่สกัดออกมา ต่อไปนี้เป็นแนวทางปฏิบัติที่ดีที่สุดสําหรับการจัดการตัวอย่างที่โซนิค:
- หลีกเลี่ยงรอบการแช่แข็ง-ละลายซ้ํา: วงจรการแช่แข็ง-ละลายสามารถนําไปสู่การเสื่อมสภาพของโมเลกุลที่ละเอียดอ่อน ทางที่ดีควรแยกตัวอย่างที่โซนิคออกเป็นปริมาตรที่เหมาะสมและเก็บไว้ที่อุณหภูมิที่เหมาะสมเพื่อหลีกเลี่ยงรอบการแช่แข็ง - ละลายซ้ํา
- การจัดเก็บที่เหมาะสม: เก็บตัวอย่างที่โซนิคที่อุณหภูมิที่เหมาะสมและป้องกันแสงหากจําเป็น ปฏิบัติตามเงื่อนไขการจัดเก็บที่แนะนําสําหรับโมเลกุลเฉพาะหรือการใช้งานปลายน้ําที่น่าสนใจ
- การติดฉลากและเอกสารประกอบ: ติดฉลากตัวอย่างที่โซนิคอย่างถูกต้องด้วยข้อมูลที่เกี่ยวข้อง รวมถึงวันที่ ชื่อตัวอย่าง และเงื่อนไขการสะท้อนเสียง เก็บรักษาเอกสารโดยละเอียดของกระบวนการ sonication และการปรับเปลี่ยนหรือขั้นตอนการแก้ไขปัญหาใด ๆ ที่ดําเนินการ หากคุณใช้เครื่องสะท้อนเสียงดิจิตอล Hielscher คุณจะพบข้อมูล sonication เช่นวันที่เวลาแอมพลิจูดกําลังไฟและรอบบนการ์ด SD ในตัว เพื่อให้ตรงกับข้อมูล sonication กับตัวอย่างของคุณตรวจสอบให้แน่ใจว่าคุณติดฉลากตัวอย่างของคุณด้วยวันที่และเวลา
- หลีกเลี่ยงการปนเปื้อนข้าม: เพื่อป้องกันการปนเปื้อนข้ามระหว่างตัวอย่างให้ใช้หลอดทิปและเครื่องใช้ในห้องปฏิบัติการอื่น ๆ แยกต่างหากเมื่อจัดการกับตัวอย่างที่โซนิค ทําความสะอาดโพรบอัลตราโซนิกอย่างถูกต้องด้วยแอลกอฮอล์ หากจําเป็นคุณสามารถนึ่งความดันโพรบอัลตราโซนิกได้ ทําความสะอาดและฆ่าเชื้ออุปกรณ์ใดๆ ที่สัมผัสกับตัวอย่างเพื่อลดความเสี่ยงของการปนเปื้อน
หากคุณปฏิบัติตามคําแนะนําแนวทางปฏิบัติที่ดีที่สุดเหล่านี้คุณจะมั่นใจได้ถึงความสมบูรณ์และการใช้งานของตัวอย่างที่โซนิคของคุณสําหรับการใช้งานปลายน้ํา
Sonication เปรียบเทียบกับเทคนิค Lysis อื่น ๆ อย่างไร?
Sonication ซึ่งเป็นวิธีการที่ใช้คลื่นเสียงความถี่สูงเพื่อทําลายเยื่อหุ้มเซลล์มีข้อดีหลายประการเมื่อเทียบกับวิธีการสลายเซลล์อื่น ๆ มีประสิทธิภาพโดยเฉพาะอย่างยิ่งในการทําลายผนังเซลล์ที่แข็งและสกัดส่วนประกอบภายในเซลล์ ด้วยการเพิ่มประสิทธิภาพเงื่อนไขการ sonication นักวิจัยจะบรรลุการสลายเซลล์ที่มีประสิทธิภาพและได้รับผลผลิตสูงของโมเลกุลเป้าหมาย ในขณะเดียวกันความสมบูรณ์ของโมเลกุลที่สกัดจะถูกรักษาไว้ให้คุณภาพตัวอย่างที่ยอดเยี่ยมสําหรับการวิเคราะห์ในภายหลัง ในทางตรงกันข้ามวิธีการอื่น ๆ เช่นการหยุดชะงักทางกลหรือการสลายทางเคมีอาจไม่อ่อนโยนและอาจนําไปสู่การย่อยสลายของโมเลกุลเป้าหมาย
Sonication ยังให้การควบคุมระดับสูงเกี่ยวกับความเข้มและระยะเวลาของการหยุดชะงักทําให้เป็นเทคนิคที่หลากหลายและมีประสิทธิภาพสําหรับเซลล์และโมเลกุลประเภทต่างๆ ดังนั้นการ sonication จึงเป็นที่ต้องการมากขึ้นในการวิจัยทางวิทยาศาสตร์เพื่อประสิทธิภาพและความสามารถในการรักษาคุณภาพของส่วนประกอบที่สกัด
เครื่องโซนิคเตอร์ประสิทธิภาพสูงสําหรับการสลายตัวและการสลายตัวของเซลล์
Hielscher Ultrasonics ยืนอยู่ในระดับแนวหน้าของวิศวกรรมการผลิตและการจัดหาโพรบโซนิคเตอร์ที่ทันสมัยซึ่งปรับให้เหมาะกับการใช้งานที่หลากหลายเช่นการเตรียมตัวอย่างการสลายเซลล์การกระจายตัวของดีเอ็นเอและการละลายของเซลล์ พอร์ตโฟลิโอที่ครอบคลุมครอบคลุม probe-sonicators เครื่อง sonicators ปริมาณงานสูงที่ออกแบบมาสําหรับแผ่น 96 หลุมและไมโครเพลทพร้อมกับอัลตราโซนิก cuphorns โดดเด่นด้วยการควบคุมพารามิเตอร์ sonication ที่แม่นยํา Hielscher sonicators ให้การปรับตัวที่ไม่มีใครเทียบได้กับความต้องการที่แตกต่างกันของเซลล์เนื้อเยื่อและโมเลกุลต่างๆ ความน่าเชื่อถือของการประมวลผลช่วยให้มั่นใจได้ถึงความสามารถในการทําซ้ําของการทดลองที่สม่ําเสมออํานวยความสะดวกในการบรรลุผลลัพธ์คุณภาพสูงในการทําซ้ําแต่ละครั้ง
- ประสิทธิภาพสูง
- เทคโนโลยีล้ําสมัย
- ความน่าเชื่อถือ & กําลังกาย
- การควบคุมกระบวนการที่ปรับได้และแม่นยํา
- ชุด & แบบ อิน ไลน์
- สําหรับทุกโวลุ่ม
- ซอฟต์แวร์อัจฉริยะ
- คุณสมบัติอัจฉริยะ (เช่น ตั้งโปรแกรมได้ โปรโตคอลข้อมูล รีโมทคอนโทรล)
- ใช้งานง่ายและปลอดภัย
- การบํารุงรักษาต่ํา
- CIP (ทําความสะอาดในสถานที่)
การออกแบบ การผลิต และการให้คําปรึกษา – คุณภาพ ผลิตในประเทศเยอรมนี
เครื่องอัลตราโซนิก Hielscher เป็นที่รู้จักกันดีในด้านคุณภาพและมาตรฐานการออกแบบสูงสุด ความทนทานและใช้งานง่ายช่วยให้สามารถรวมเครื่องอัลตราโซนิกของเราเข้ากับโรงงานอุตสาหกรรมได้อย่างราบรื่น สภาพที่ขรุขระและสภาพแวดล้อมที่ต้องการสามารถจัดการได้ง่ายโดยเครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher
Hielscher Ultrasonics เป็น บริษัท ที่ได้รับการรับรองมาตรฐาน ISO และให้ความสําคัญเป็นพิเศษกับเครื่องอัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูงที่มีเทคโนโลยีล้ําสมัยและเป็นมิตรกับผู้ใช้ แน่นอนว่าเครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher เป็นไปตามมาตรฐาน CE และตรงตามข้อกําหนดของ UL, CSA และ RoHs
ตารางด้านล่างให้ข้อบ่งชี้เกี่ยวกับความสามารถในการประมวลผลโดยประมาณของเครื่องอัลตราโซนิกขนาดห้องปฏิบัติการของเรา:
อุปกรณ์ที่แนะนํา | ปริมาณแบทช์ | อัตราการไหล |
---|---|---|
UIP400MTP เครื่องโซนิคเตอร์แผ่น 96 หลุม | แผ่นมัลติเวล / ไมโครไทเตอร์ | ไม่ |
อัลตราโซนิก CupHorn | CupHorn สําหรับขวดหรือบีกเกอร์ | ไม่ |
จีดีมินิ 2 | เครื่องปฏิกรณ์ไมโครโฟลว์อัลตราโซนิก | ไม่ |
ไวอัลทวีตเตอร์ | 0.5 ถึง 1.5 มล. | ไม่ |
UP100H | 1 ถึง 500 มล. | 10 ถึง 200 มล. / นาที |
UP200 ฮิต, UP200 เซนต์ | 10 ถึง 1000 มล. | 20 ถึง 200 มล. / นาที |
UP400ST | 10 ถึง 2000 มล. | 20 ถึง 400 มล. / นาที |
UIP500hdT | 100 ถึง 5000 มล. | 0.1 ถึง 4L / นาที |
เครื่องปั่นตะแกรงอัลตราโซนิก | ไม่ | ไม่ |
ติดต่อเรา! / ถามเรา!
การประยุกต์ใช้การสลายเซลล์และ sonication ในสาขาต่างๆ
เพื่อให้เกิดการสลายเซลล์ที่ประสบความสําเร็จจําเป็นต้องมีเครื่องมือและอุปกรณ์ที่เหมาะสม ต่อไปนี้เป็นเครื่องมือสําคัญที่ใช้กันทั่วไปในการสลายเซลล์และ sonication:
- เลือกเครื่องโซนิคเตอร์ที่เหมาะสม: เครื่องโซนิคเตอร์หรือโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกเป็นเครื่องมือหลักที่ใช้สําหรับการสลายเซลล์ผ่านการ sonication ตรวจสอบให้แน่ใจว่าคุณใช้เครื่องสะท้อนเสียงแบบโพรบที่ควบคุมได้อย่างแม่นยําเนื่องจากผลลัพธ์สามารถทําซ้ําได้อย่างน่าเชื่อถือ หลีกเลี่ยงการอาบน้ําอัลตราโซนิกสําหรับการสลายการสกัดและการกระจายตัวของดีเอ็นเอ อ่างอัลตราโซนิกส่วนใหญ่ใช้สําหรับทําความสะอาด พวกเขาไม่ได้ให้ผลลัพธ์ที่ทําซ้ําได้ เมื่อคํานึงถึงประเด็นเหล่านี้ ให้เลือกอุปกรณ์ที่มีการตั้งค่าพลังงานที่เหมาะสม ขนาดโพรบที่เปลี่ยนแปลงได้ และความสามารถในการควบคุมอุณหภูมิสําหรับการทดลองเฉพาะของคุณ คุณสมบัติต่างๆ เช่น การส่องสว่างตัวอย่างและโปรโตคอลข้อมูลอัตโนมัติช่วยอํานวยความสะดวกในการทํางานของคุณ
- เครื่องหมุนเหวี่ยง: เครื่องหมุนเหวี่ยงใช้เพื่ออัดเม็ดเซลล์ ขจัดเศษขยะ และแยกส่วนประกอบของเซลล์ระหว่างการสลายเซลล์ เลือกใช้เครื่องหมุนเหวี่ยงที่มีประเภทโรเตอร์และความเร็วที่เหมาะสมเพื่อตอบสนองความต้องการในการทดลองของคุณ
- ปิเปตและทิปปิเปต: การปิเปตที่แม่นยําและแม่นยําเป็นสิ่งสําคัญในระหว่างการสลายเซลล์และการจัดการตัวอย่าง ตรวจสอบให้แน่ใจว่าคุณมีปิเปตและทิปที่หลากหลายที่เหมาะสมกับปริมาณที่ใช้ในการทดลองของคุณ
- บัฟเฟอร์ Lysis: เลือกบัฟเฟอร์การสลายตัวที่ปรับให้เหมาะกับประเภทเซลล์เฉพาะและการใช้งานทดลองของคุณ พิจารณาบัฟเฟอร์ที่มีผงซักฟอกหรือเอนไซม์เพื่อทําลายเยื่อหุ้มเซลล์อย่างมีประสิทธิภาพ
- ภาชนะตัวอย่าง: ใช้ภาชนะบรรจุตัวอย่างที่เหมาะสม เช่น หลอด microcentrifuge หรือขวด เพื่อเก็บเซลล์ไลเซตระหว่างการ sonication ตรวจสอบให้แน่ใจว่าภาชนะเข้ากันได้กับการ sonication และไม่รบกวนคลื่นอัลตราซาวนด์
- อุปกรณ์ควบคุมอุณหภูมิ: หากทํางานกับตัวอย่างที่ไวต่ออุณหภูมิให้พิจารณาใช้อุปกรณ์ sonication ที่มีความสามารถในการควบคุมอุณหภูมิในตัวหรือลงทุนในอ่างน้ําหรือเครื่องทําความเย็นที่ควบคุมอุณหภูมิเพื่อรักษาความสมบูรณ์ของตัวอย่าง
การมีเครื่องมือและอุปกรณ์ที่เหมาะสมจะช่วยให้คุณมั่นใจได้ว่าการสลายเซลล์จะประสบความสําเร็จและได้ผลลัพธ์ที่ดีที่สุดในการทดลองของคุณ
วรรณกรรม / อ้างอิง
- Giricz Z., Varga Z.V., Koncsos G., Nagy C.T., Görbe A., Mentzer R.M. Jr, Gottlieb R.A., Ferdinandy P. (2017): Autophagosome formation is required for cardioprotection by chloramphenicol. Life Science Oct 2017. 11-16.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.