Soluções tampão preparadas com ultrassom
Os tampões de lise podem ser preparados de forma eficiente e rápida usando homogeneizadores de tecidos ultrassônicos. Como os ultrassônicos são uma ferramenta dos sonhos para misturar, dissolver e dispersar, eles permitem uma preparação confiável e fácil de usar de tampões de lise.
Preparação ultrassônica de tampões de lise
Os homogeneizadores ultrassônicos de tecidos são uma ferramenta comum para ruptura, lise e extração celular, portanto, disponíveis na maioria dos laboratórios. Uma aplicação secundária para ultrassonizadores do tipo sonda é a preparação de tampões de lise.
O tampão de lise é uma solução usada para quebrar as células abertas (lisar) e liberar seu conteúdo para análise a jusante. A composição específica do tampão de lise pode variar dependendo do tipo de células que estão sendo lisadas e da aplicação a jusante. No entanto, um tampão de lise típico contém componentes como detergentes, sais e inibidores de protease. Sais tamponantes (por exemplo, Tris-HCl) e sais iônicos (por exemplo, NaCl) são comumente usados para regular o pH e a osmolaridade do lisado.
Para fazer um tampão de lise, os componentes são misturados nas concentrações e pH apropriados. A mistura é geralmente agitada ou agitada até que os componentes estejam dissolvidos e a solução homogênea.
A homogeneização ultrassônica é um método que pode ser usado para ajudar a fazer um bom tampão de lise, melhorando a mistura e a dissolução dos componentes. Neste método, ondas de ultrassom – normalmente na faixa de 20 a 30 kHz – são aplicados à mistura, o que cria bolhas de cavitação que colapsam e geram intensa energia local, levando ao cisalhamento mecânico e à mistura dos componentes.
O processo de homogeneização ultrassônica pode ajudar a separar quaisquer aglomerados ou agregados dos componentes e garantir que a solução seja misturada uniformemente. Consequentemente, esse tampão de lise aprimorado pode levar a uma ruptura celular mais eficiente e maiores rendimentos de material extraído. Além disso, a homogeneização ultrassônica pode reduzir o tempo necessário para fazer um tampão de lise em comparação com os métodos tradicionais de agitação ou agitação.
No geral, a homogeneização ultrassônica é uma ferramenta poderosa para melhorar a qualidade e a eficiência da preparação do tampão de lise.

O homogeneizador de laboratório ultrassônico UP200Ht é popular em laboratórios de pesquisa para preparação de amostras, lise, extração, fragmentação e dissolução de DNA.
Protocolo para preparação de tampão de lise ultrassônica
Este é um protocolo geral para fazer um tampão de lise usando um ultrassonicador do tipo sonda:
Materiais:
- Detergente(s) de sua escolha (por exemplo, Triton X-100, SDS, CHAPS)
- Sal (s) de escolha (por exemplo, NaCl, KCl)
- Inibidores da protease (por exemplo, PMSF, aprotinina, leupeptina)
- ultrassonicador
- Agitador
- Água deionizada
- Medidor de pH ou tiras de pH
Instruções passo a passo:
- Determine a composição do tampão de lise com base nas células ou tecidos que você lidará e nas aplicações a jusante para as quais usará o lisado. Prepare as soluções de estoque de detergentes, sais e inibidores de protease nas concentrações desejadas.
- Adicione as soluções de estoque de detergentes, sais e inibidores de protease a um béquer ou frasco.
- Adicione água deionizada para aumentar o volume até a quantidade desejada de tampão.
- Misture os componentes usando um agitador para obter uma solução de pré-mistura.
- Meça o pH do tampão usando um medidor de pH ou tiras de pH e ajuste o pH conforme necessário com pequenas quantidades de ácido ou base.
- Use o ultrassônico tipo sonda para homogeneizar a solução de pré-mistura para obter uma solução altamente homogênea. Por conseguinte, sonicar a solução durante alguns segundos até que a solução esteja bem misturada e os aglomerados ou agregados se decomponham. A duração e a potência da sonicação podem ser otimizadas com base no tampão de lise específico e no ultrassônico usado.
- Após a ultrassonografia, meça novamente o pH do tampão e ajuste conforme necessário.
- Filtre o tampão através de um filtro de 0,2 mícron para remover quaisquer detritos ou agregados que possam ter se formado durante a sonicação.
- O tampão de lise agora está pronto para uso.
Nota: A composição exata e o pH do tampão de lise podem variar dependendo das células ou tecidos que estão sendo lisados e das aplicações a jusante. O protocolo acima é uma diretriz geral e pode precisar ser otimizado para aplicações específicas.
Os homogeneizadores ultrassônicos são comumente usados para ruptura celular e extração de moléculas intracelulares. Portanto, muitas aplicações de lise usam sonicação do tipo sonda não apenas para a preparação do tampão de lise, mas também para a ruptura mecânica da célula e extração.
Isso torna os homogeneizadores de tecidos ultrassônicos uma ferramenta versátil para laboratórios e explica o amplo uso de ultrassonizadores em microbiologia, biotecnologia e ciências da vida.
Homogeneizadores ultrassônicos do laboratório
A Hielscher Ultrasonics fabrica e fornece homogeneizadores e sondas ultrassônicas (sonotrodos) em várias classificações de potência e volumes de amostra. Isso nos permite oferecer o disruptor ultrassônico mais adequado para a preparação de amostras. Nós nos concentramos na mais alta qualidade, excelente conforto do usuário e resultados confiáveis de sonicação. Todos os ultrassônicos digitais apresentam software inteligente, programação e pré-configuração de protocolos de sonicação, controle remoto do navegador, controle de temperatura, iluminação de amostras, bem como gravação automática de dados em um cartão SD integrado.
Projeto, Fabricação e Consultoria – Qualidade Made in Germany
Os ultrassônicos Hielscher são conhecidos por seus mais altos padrões de qualidade e design. A robustez e a fácil operação permitem a integração suave de nossos ultrasonicadores em instalações industriais. Condições adversas e ambientes exigentes são facilmente manuseados pelos ultrassônicos Hielscher.
A Hielscher Ultrasonics é uma empresa certificada pela ISO e dá ênfase especial aos ultrassônicos de alto desempenho com tecnologia de ponta e facilidade de uso. Obviamente, os ultrassônicos Hielscher são compatíveis com CE e atendem aos requisitos da UL, CSA e RoHs.
A tabela abaixo fornece uma visão geral de nossos vários ultrassonicadores de laboratório:
VialTweeter em UP200St | 200W | 26kHz | ultra-sons de pequenos frascos, por ejemplo Eppendorf de 1,5 ml |
UP50H | 50W | 30kHz | homogeneizador de laboratório portátil ou montado em suporte |
UP100H | 100W | 30kHz | homogeneizador de laboratório portátil ou montado em suporte |
UP200Ht | 200W | 26kHz | homogeneizador de laboratório portátil ou montado em suporte |
UP200St | 200W | 26kHz | homogeneizador de laboratório montado em pé |
UP400St | 400W | 24kHz | homogeneizador de laboratório montado em pé |
SonoStep | 200W | 26kHz | combinação de reator de laboratório, ultrassom, bomba, agitador e vaso |
GDmini2 | 200W | 26kHz | célula de fluxo livre de contaminação |
cuphorn | 200W | 26kHz | banho ultrassônico intenso para frascos e copos |
UIP400MTP | 400W | 24kHz | Sistema ultrassônico para placas de poços múltiplos? placas de microtitulação |

CupHorn ultrassônico para a sonicação intensa de tubos fechados e frascos para homogeneização estéril de amostras.
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Homogeneizador de laboratório ultrassônico UP400St é comumente usado para preparação do tampão de lise e subsequente ruptura celular.
Literatura? Referências
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A Hielscher Ultrasonics fabrica homogeneizadores ultrassônicos de alto desempenho de labrador Para tamanho industrial.