Soluções tampão preparadas com ultrassom
Os tampões de lise podem ser preparados de forma eficiente e rápida usando homogeneizadores de tecido ultrassônicos. Uma vez que os ultra-sonicators são uma ferramenta de sonho para misturar, dissolver e dispersar, eles permitem uma preparação confiável e fácil de usar de buffers de lise.
Preparação ultra-sônica de tampões de lise
Homogeneizadores de tecido ultra-sônicos são uma ferramenta comum para ruptura celular, lise e extração, portanto, disponível na maioria dos laboratórios. Uma aplicação secundária para ultrasonicators do tipo sonda é a preparação de buffers de lise.
O tampão de lise é uma solução usada para quebrar células abertas (lise) e liberar seu conteúdo para análise a jusante. A composição específica do tampão de lise pode variar dependendo do tipo de células lisadas e da aplicação a jusante. No entanto, um tampão de lise típico contém componentes como detergentes, sais e inibidores de protease. Sais tamponantes (por exemplo, Tris-HCl) e sais iônicos (por exemplo, NaCl) são comumente usados para regular o pH e a osmolaridade do lisado.
Para fazer um tampão de lise, os componentes são misturados nas concentrações e pH apropriados. A mistura é geralmente agitada ou agitada até que os componentes sejam dissolvidos e a solução seja homogênea.
A homogeneização ultra-sônica é um método que pode ser usado para ajudar a fazer um bom tampão de lise, melhorando a mistura e dissolução dos componentes. Neste método, ondas de ultrassom – normalmente na faixa de 20 a 30 kHz – são aplicados à mistura, o que cria bolhas de cavitação que colapsam e geram intensa energia local, levando ao cisalhamento mecânico e mistura dos componentes.
O processo de homogeneização ultra-sônica pode ajudar a quebrar quaisquer aglomerados ou agregados dos componentes e garantir que a solução seja uniformemente misturada. Consequentemente, esse tampão de lise melhorado pode levar a uma ruptura celular mais eficiente e maiores rendimentos do material extraído. Além disso, a homogeneização ultra-sônica pode reduzir o tempo necessário para fazer um tampão de lise em comparação com os métodos tradicionais de agitação ou agitação.
No geral, a homogeneização ultra-sônica é uma ferramenta poderosa para melhorar a qualidade e a eficiência da preparação do tampão de lise.

O homogeneizador de laboratório ultra-sônico UP200Ht é popular em laboratórios de pesquisa para preparação de amostras, lise, extração, fragmentação e dissolução de DNA.
Protocolo para preparação de tampão de lise ultra-sônica
Este é um protocolo geral para fazer um buffer de lise usando um ultrasonicator do tipo sonda:
Materiais:
- Detergente(s) de escolha (por exemplo, Triton X-100, SDS, CHAPS)
- Sal(es) de escolha (por exemplo, NaCl, KCl)
- Inibidores de protease (por exemplo, PMSF, aprotinina, leupeptina)
- ultrasonicator
- Agitador
- Água deionizada
- Medidor de pH ou tiras de pH
Instruções passo a passo:
- Determine a composição do tampão de lise com base nas células ou tecido para as quais você estará lisando e as aplicações a jusante para as quais você usará o lisado. Preparar as soluções estoque de detergentes, sais e inibidores de protease nas concentrações desejadas.
- Adicione as soluções-mãe de detergentes, sais e inibidores de protease a um copo ou frasco.
- Adicione água deionizada para elevar o volume até a quantidade desejada de tampão.
- Misture os componentes usando um agitador para obter uma solução de pré-mistura.
- Meça o pH do tampão usando um medidor de pH ou tiras de pH e ajuste o pH conforme necessário com pequenas quantidades de ácido ou base.
- Use o ultrasonicator do tipo sonda para homogeneizar a solução de pré-mistura para que uma solução altamente homogênea seja obtida. Portanto, sonice a solução por alguns segundos até que a solução seja completamente misturada e quaisquer aglomerados ou agregados sejam quebrados. A duração e o poder da sonicação podem ser otimizados com base no buffer de lise específico e no ultrasonicator usado.
- Após a ultrassonografia, volte a medir o pH do tampão e ajuste conforme necessário.
- Filtre o tampão através de um filtro de 0,2 mícron para remover quaisquer detritos ou agregados que possam ter se formado durante a sonicação.
- O buffer de lise agora está pronto para uso.
Nota: A composição exata e o pH do tampão de lise podem variar dependendo das células ou tecidos lisados e das aplicações a jusante. O protocolo acima é uma diretriz geral e pode precisar ser otimizado para aplicações específicas.
Homogeneizadores ultra-sônicos são comumente usados para ruptura celular e extração de moléculas intracelulares. Portanto, muitas aplicações de lise usam sonicação do tipo sonda não apenas para a preparação do tampão de lise, mas também para a ruptura mecânica da célula e extração.
Isso torna os homogeneizadores de tecido ultrassônicos uma ferramenta versátil para laboratórios e explica o amplo uso de ultrasonicators em microbiologia, biotecnologia e ciências da vida.
homogeneizadores de laboratório de ultra-som
Hielscher Ultrasonics fabrica e fornece homogeneizadores ultra-sônicos e sondas (sonotrodos) em várias classificações de potência e volumes de amostra. Isto permite-nos oferecer-lhe o disruptor ultra-sónico mais adequado para a sua preparação de amostras. Nós nos concentramos na mais alta qualidade, excelente conforto do usuário e resultados de sonicação confiáveis. Todos os ultrasonicators digitais possuem software inteligente, programação e pré-configuração de protocolos de sonicação, controle remoto do navegador, controle de temperatura, iluminação de amostras, bem como gravação automática de dados em um cartão SD integrado.
Design, Fabricação e Consultoria – Qualidade Made in Germany
Os ultrasonicators Hielscher são bem conhecidos por seus mais altos padrões de qualidade e design. A robustez e a fácil operação permitem a integração suave de nossos ultrasonicators em instalações industriais. Condições adversas e ambientes exigentes são facilmente manuseados por ultrassonicators Hielscher.
A Hielscher Ultrasonics é uma empresa certificada ISO e coloca ênfase especial em ultrasonicators de alto desempenho com tecnologia de ponta e facilidade de uso. Naturalmente, os ultrasonicators Hielscher são compatíveis com CE e atendem aos requisitos da UL, CSA e RoHs.
The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators:
VialTweeter em UP200St | 200w | 26kHz | ultra-sons de pequenos frascos, por ejemplo Eppendorf de 1,5 ml |
UP50H | 50w | 30kHz | homogeneizador de laboratório portátil ou standmounted |
UP100H | 100w | 30kHz | homogeneizador de laboratório portátil ou standmounted |
UP200Ht | 200w | 26kHz | homogeneizador de laboratório portátil ou standmounted |
UP200St | 200w | 26kHz | homogeneizador de laboratório standmounted |
UP400St | 400w | 24kHz | homogeneizador de laboratório standmounted |
SonoStep | 200w | 26kHz | reactor de laboratório combinando, ultra-sons, bomba, agitador e recipiente |
GDmini2 | 200w | 26kHz | célula de fluxo livre de contaminação |
Cuphorn | 200w | 26kHz | Banho ultra-sônico intenso para frascos e copos |
UIP400MTP | 400w | 24kHz | Sistema ultra-sônico para placas multi-poço / placas de microtitulação |

cuphorn ultra-sônica para a sonicação intensa de tubos fechados e frascos para homogeneização estéril de amostras.
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Homogeneizador de laboratório ultra-sônico UP400St é comumente usado para preparação de tampão de lise e subsequente ruptura celular.
Literatura / Referências
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Hielscher Ultrasonics fabrica homogeneizadores ultrassônicos de alto desempenho de Laboratório para tamanho industrial.