Buffer Léisunge virbereet mat Ultraschall

Lysis Puffer kënnen effizient a séier virbereet ginn mat Ultraschallgewebe Homogenisatoren. Zënter Ultraschaller sinn en Draminstrument fir d'Mëschung, d'Opléisung an d'Verbreedung, si erlaben eng zouverlässeg a userfrëndlech Virbereedung vu Lysispuffer.

Ultrasonic Virbereedung vu Lysis Bufferen

Ultrasonic Tissue Homogenisatoren sinn e gemeinsamt Tool fir Zellstéierung, Lysis an Extraktioun, dofir verfügbar an de meeschte Laboratoiren. Eng sekundär Uwendung fir Sonde-Typ Ultraschaller ass d'Virbereedung vu Lysispuffer.

Lysis-Puffer ass eng Léisung déi benotzt gëtt fir Zellen opzebriechen (lyséieren) an hiren Inhalter fir Downstream Analyse ze befreien. Déi spezifesch Zesummesetzung vum Lysis-Puffer ka variéieren ofhängeg vun der Aart vun Zellen déi lyséiert ginn an der Downstream Uwendung. Wéi och ëmmer, en typesche Lysisbuffer enthält Komponenten wéi Detergenten, Salzer a Protease-Inhibitoren. Buffersalze (zB Tris-HCl) an ionesch Salzer (zB NaCl) ginn allgemeng benotzt fir den pH an d'Osmolaritéit vum Lysat ze regelen.
Fir e Lysispuffer ze maachen, ginn d'Komponente matenee gemëscht an de passenden Konzentratioune a pH. D'Mëschung gëtt normalerweis gerührt oder geschüchtert bis d'Komponente opgeléist sinn an d'Léisung homogen ass.
Ultrasonic Homogeniséierung ass eng Method déi benotzt ka ginn fir e gudde Lysispuffer ze maachen andeems d'Mëschung an d'Opléisung vun de Komponenten verbessert gëtt. An dëser Method, Ultraschallwellen – normalerweis am Beräich vun 20 bis 30 kHz – ginn op d'Mëschung applizéiert, wat Kavitatiounsblasen erstellt, déi zesummeklappen an intensiv lokal Energie generéieren, wat zu mechanesche Schéier a Vermëschung vun de Komponenten féiert.
Den Ultraschallhomogeniséierungsprozess kann hëllefen, all Klumpen oder Aggregater vun de Komponenten auserneen ze trennen, a suergen datt d'Léisung eenheetlech gemëscht gëtt. Dofir kann esou verbesserte Lysispuffer zu méi effizienter Zellstéierung a méi héije Rendementer vun extrahéiertem Material féieren. Zousätzlech kann d'Ultraschallhomogeniséierung d'Zäit reduzéieren déi néideg ass fir e Lysisbuffer ze maachen am Verglach mat traditionelle Rühr- oder Schüttelmethoden.
Insgesamt ass d'Ultraschallhomogeniséierung e mächtegt Tool fir d'Qualitéit an d'Effizienz vun der Lysisbufferpräparatioun ze verbesseren.

Protokoll fir Ultrasonic Lysis Buffer Virbereedung

Dëst ass en allgemenge Protokoll fir e Lysis-Puffer ze maachen mat engem Sonde-Typ Ultraschall:
 
Material:

• Wäschmëttelen vun der Wiel (zB Triton X-100, SDS, CHAPS)
• Salz(e) vun der Wiel (zB NaCl, KCl)
• Protease-Inhibitoren (zB PMSF, Aprotinin, Leupeptin)
• ultrasonicator
• Rührer
• Deioniséiert Waasser
• pH Meter oder pH Sträifen

 
 
Schrëtt-fir-Schrëtt Instruktioune:

1. Bestëmmt d'Zesummesetzung vum Lysis-Puffer baséiert op den Zellen oder Tissue, deen Dir lyséiert, an den Downstream Uwendungen, fir déi Dir de Lysat benotzt. Bereet d'Stammléisungen vu Botzmëttelen, Salzer a Protease-Inhibitoren an de gewënschten Konzentratioune vir.
2. Füügt d'Stammléisungen vu Wäschmëttelen, Salzer a Protease-Inhibitoren an e Becher oder Fläsch.
3. Füügt deioniséiertem Waasser fir de Volume op déi gewënscht Quantitéit vu Puffer ze bréngen.
4. Mix d'Komponente mat engem Rührer fir eng Pre-Mix Léisung ze kréien.
5. Mooss de pH vum Puffer mat engem pH Meter oder pH Sträifen, a passt de pH wéi néideg mat klenge Quantitéiten vu Säure oder Base un.
6. Benotzt den Sonde-Typ Ultraschall fir d'Pre-Mix-Léisung ze homogeniséieren, sou datt eng héich homogen Léisung kritt gëtt. Dofir sonicéiert d'Léisung fir e puer Sekonnen, bis d'Léisung grëndlech gemëscht ass an all Klumpen oder Aggregaten ofgebrach ginn. D'Dauer an d'Kraaft vun der Sonikatioun kënnen optimiséiert ginn op Basis vum spezifesche Lysis-Puffer an Ultrasonicator benotzt.
7. No Ultraschall, moosst de pH vum Puffer erëm a passt wéi néideg un.
8. Filter de Puffer duerch en 0,2 Mikronfilter fir all Debris oder Aggregaten ze entfernen, déi sech während der Sonikatioun geformt hunn.
9. De Lysisbuffer ass elo prett fir ze benotzen.

 
Bemierkung: Déi exakt Zesummesetzung an pH vum Lysis-Puffer kënne variéieren ofhängeg vun den Zellen oder Tissue, déi lyséiert ginn, an den Downstream Uwendungen. Den uewe genannte Protokoll ass eng allgemeng Richtlinn a muss vläicht fir spezifesch Uwendungen optimiséiert ginn.
 
Ultrasonic Homogenisatoren ginn allgemeng benotzt fir Zellstéierung an Extraktioun vun intrazelluläre Molekülen. Dofir benotze vill Lysisapplikatiounen Sonde-Typ Sonikatioun net nëmme fir d'Virbereedung vum Lysisbuffer, awer och fir déi mechanesch Zellstéierung an Extraktioun.
Dëst mécht Ultraschallgewebe Homogenisatoren e versatile Tool fir Laboratoiren an erkläert déi breet Benotzung vun Ultraschaller an der Mikrobiologie, Biotechnologie a Liewenswëssenschaft.

Ultrasonic Lab Homogenisatoren

Hielscher Ultrasonics fabrizéiert a liwwert Ultraschallhomogenisatoren a Sonden (Sonotroden) bei verschiddene Kraaftbewäertungen a Probevolumen. Dëst erlaabt eis Iech de gëeegentste Ultraschallstéierer fir Är Probepräparatioun ze bidden. Mir konzentréieren eis op héchst Qualitéit, aussergewéinlech Benotzerkomfort an zouverlässeg Sonikatiounsresultater. All digital Ultrasonicatoren hunn intelligent Software, Programméierung a Pre-Setting vun Sonikatiounsprotokollen, Browser Fernsteierung, Temperaturkontroll, Probebeleuchtung souwéi automatesch Datenopnam op enger agebauter SD-Kaart.

Design, Fabrikatioun a Berodung – Qualitéit Made in Germany

Hielscher Ultraschaller si bekannt fir hir héchst Qualitéit an Designnormen. Robustheet an einfach Operatioun erlaben déi glat Integratioun vun eisen Ultraschaller an industriellen Ariichtungen. Rau Konditiounen an erfuerderlech Ëmfeld ginn einfach vun Hielscher Ultraschaller gehandhabt.

Hielscher Ultrasonics ass eng ISO zertifizéiert Firma a setzt spezielle Wäert op High-Performance Ultrasonicatoren mat modernste Technologie a Benotzerfrëndlechkeet. Natierlech sinn Hielscher Ultraschaller CE konform an entspriechen d'Ufuerderunge vun UL, CSA a RoHs.

D'Tabell hei drënner gëtt Iech en Iwwerbléck iwwer eis verschidde Labo Ultraschaller: