Pufferléisungen, déi mat Ultraschall preparéiert ginn

Lysepuffere kënne mat Ultraschall-Geweebshomogenisatoren effizient a séier preparéiert ginn. Well Ultraschallapparater ideal Geschier fir d’Mëschen, d’Opléisen an d’Dispergéiere sinn, erméigleche si eng zouverlässeg a benotzerfrëndlech Preparatioun vu Lysepufferen.

Preparatioun vu Lysepuffere mat Ultraschall

Ultraschall-Geweebshomogenisatore si verbreet Geschier fir den Zellopbroch, d’Lyse an d’Extraktioun an dofir an de meeschte Laboratoirë verfügbar. Eng weider Uwendung vun Ultraschallapparater mat Sond ass d’Preparatioun vu Lysepufferen.

E Lysepuffer ass eng Léisung, déi benotzt gëtt, fir Zellen opzebriechen (ze lyséieren) an hiren Inhalt fir uschléissend Analysen ze fräizesetzen. Déi spezifesch Zesummesetzung vum Lysepuffer kann ofhängeg vum Typ vun den Zellen, déi lyséiert ginn, a vun der uschléissender Uwendung variéieren. En typesche Lysepuffer enthält awer Bestanddeeler wéi Detergenzien, Salzer a Proteaseinhibitoren. Puffersalzer (z. B. Tris-HCl) an ionesch Salzer (z. B. NaCl) ginn heefeg benotzt, fir de pH an d’Osmolaritéit vum Lysat ze reguléieren.
Fir e Lysepuffer hierzestellen, ginn d’Bestanddeeler an de passenden Konzentratioune a beim passende pH matenee gemëscht. D’Mëschung gëtt normalerweis geréiert oder gerëselt, bis d’Bestanddeeler opgeléist sinn an d’Léisung homogen ass.
D’Ultraschallhomogeniséierung ass eng Method, déi dozou bäidroe kann, e gudde Lysepuffer hierzestellen, andeems si d’Mëschen an d’Opléise vun de Bestanddeeler verbessert. Bei dëser Method ginn Ultraschallwellen – normalerweis am Beräich vun 20 bis 30 kHz – op d’Mëschung applizéiert. Dobäi entstinn Kavitatiounsblosen, déi zesummefalen an intensiv lokal Energie fräisetzen, wat zu mechanescher Scherung an zum Mësche vun de Bestanddeeler féiert.
D’Ultraschallhomogeniséierung kann hëllefen, eventuell Klompen oder Aggregate vun de Bestanddeeler opzebriechen a sécherzestellen, datt d’Léisung gläichméisseg gemëscht ass. Esou e verbesserte Lysepuffer kann dofir zu engem méi effizienten Zellopbroch a méi héijen Ausbeuten un extrahéiertem Material féieren. Ausserdeem kann d’Ultraschallhomogeniséierung d’Zäit, déi fir d’Hierstellung vun engem Lysepuffer néideg ass, am Verglach zu traditionelle Réier- oder Rësselmethoden reduzéieren.
Insgesamt ass d’Ultraschallhomogeniséierung e leeschtungsstaarkt Geschier, fir d’Qualitéit an d’Effizienz vun der Preparatioun vu Lysepufferen ze verbesseren.

Protokoll fir d’Preparatioun vu Lysepuffere mat Ultraschall

Dëst ass en allgemenge Protokoll fir d’Hierstellung vun engem Lysepuffer mat engem Ultraschallapparat mat Sond:
 
Materialien:

• Detergens oder Detergenzien no Wiel (z. B. Triton X-100, SDS, CHAPS)
• Salz oder Salzer no Wiel (z. B. NaCl, KCl)
• Proteaseinhibitoren (z. B. PMSF, Aprotinin, Leupeptin)
• Ultraschallapparat
• Réierapparat
• Deioniséiert Waasser
• pH-Miessapparat oder pH-Sträifen

 
 
Schrëtt-fir-Schrëtt-Uleedung:

1. Bestëmmt d’Zesummesetzung vum Lysepuffer op Basis vun den Zellen oder dem Geweebe, déi Dir lyséiere wäert, an den uschléissenden Uwendungen, fir déi Dir de Lysat benotze wäert. Preparéiert d’Stammléisunge vun den Detergenzien, de Salzer an de Proteaseinhibitoren an de gewënschte Konzentratiounen.
2. Gitt d’Stammléisunge vun den Detergenzien, de Salzer an de Proteaseinhibitoren an e Becherglas oder e Kolben.
3. Gitt deioniséiert Waasser dobäi, fir de Volume op déi gewënschte Quantitéit u Puffer ze bréngen.
4. Mëscht d’Bestanddeeler mat engem Réierapparat, fir eng virgemëschte Léisung ze kréien.
5. Moosst de pH vum Puffer mat engem pH-Miessapparat oder mat pH-Sträifen a passt de pH bei Bedarf mat klenge Quantitéite Seier oder Bas un.
6. Benotzt den Ultraschallapparat mat Sond, fir déi virgemëschte Léisung ze homogeniséieren, sou datt eng héichgradig homogen Léisung entsteet. Beschallt d’Léisung dofir e puer Sekonne laang, bis si grëndlech gemëscht ass an eventuell Klompen oder Aggregate opgebrach sinn. D’Dauer an d’Leeschtung vun der Beschallung kënnen op Basis vum spezifesche Lysepuffer an dem benotzten Ultraschallapparat optiméiert ginn.
7. Moosst no der Ultraschallbehandlung de pH vum Puffer nach eng Kéier a passt en bei Bedarf un.
8. Filtréiert de Puffer duerch e Filter mat enger Poregréisst vun 0,2 Mikrometer, fir eventuell Reschter oder Aggregate ze entfernen, déi sech wärend der Beschallung gebilt hu kënnen.
9. De Lysepuffer ass elo prett fir de Gebrauch.

 
Hiweis: Déi genee Zesummesetzung an de pH vum Lysepuffer kënnen ofhängeg vun den Zellen oder dem Geweebe, déi lyséiert ginn, an den uschléissenden Uwendunge variéieren. De Protokoll hei uewen ass eng allgemeng Richtlinn a muss eventuell fir spezifesch Uwendungen optiméiert ginn.
 
Ultraschallhomogenisatore ginn heefeg fir den Zellopbroch an d’Extraktioun vun intrazelluläre Moleküllen agesat. Dofir benotze vill Lyseuwendungen d’Beschallung mat enger Sond souwuel fir d’Preparatioun vum Lysepuffer wéi och fir de mechaneschen Zellopbroch an d’Extraktioun.
Dëst mécht Ultraschall-Geweebshomogenisatoren zu engem villsäitege Geschier fir Laboratoiren an erkläert de verbreeten Asaz vun Ultraschallapparater an der Mikrobiologie, der Biotechnologie an de Liewenswëssenschaften.

Ultraschall-Labohomogenisatoren

Hielscher Ultrasonics stellt Ultraschallhomogenisatoren a Sonden (Sonotroden) mat verschiddene Leeschtungswäerter a fir verschidde Prouwevolumen hier a liwwert se. Dëst erlaabt eis, Iech den am beschte gëeegenten Ultraschall-Zellopbrochapparat fir Är Prouwepreparatioun unzebidden. Mir leeë Wäert op héchst Qualitéit, aussergewéinleche Bedienkomfort an zouverlässeg Beschallungsresultater. All digital Ultraschallapparater verfüügen iwwer intelligent Software, d’Programméierung an d’Virastellung vu Beschallungsprotokoller, d’Fernsteierung iwwer e Browser, d’Temperaturreegelung, d’Prouwebeleuchtung souwéi d’automatesch Opzeechnung vun Daten op enger agebauter SD-Kaart.

Design, Fabrikatioun a Berodung – Qualitéit aus Däitschland

Hielscher Ultraschallapparater si fir hir héchst Qualitéits- an Designstandarde bekannt. Robustheet an einfach Bedéngung erméiglechen déi reibungslos Integratioun vun eisen Ultraschallapparater an industriell Anlagen. Hielscher Ultraschallapparater gi liicht mat raue Bedéngungen an usprochsvollen Ëmfeld eens.

Hielscher Ultrasonics ass en ISO-zertifizéiert Entreprisen a leet besonnesche Wäert op héichleeschtungsfäeg Ultraschallapparater mat modernster Technologie a Benotzerfrëndlechkeet. Selbstverständlech sinn Hielscher Ultraschallapparater CE-konform an erfëllen d’Ufuerderunge vun UL, CSA a RoHs.

D’Tabell hei ënne gëtt Iech en Iwwerbléck iwwer eis verschidde Labo-Ultraschallapparater: