ASTM E2799-22 Protokoll fir Antimikrobial Evaluatioun

Den Hielscher UIP400MTP ass e mächtegen an effiziente Multi-Well Platte-Sonicator entwéckelt fir d'Sonication Schrëtt am ASTM E2799-22 Protokoll ze streamline. Andeems Dir eenheetlech Ultraschallenergie iwwer d'ganz Mikrotiterplack liwwert, garantéiert d'UIP400MTP konsequent an zouverlässeg Oflehnung vu Biofilme vu Pegdeckelen ouni d'Zellen ze beschiedegen oder d'Probeintegritéit ze kompromittéieren. Seng High-Throughput-Kapazitéit an d'Benotzerfrëndlech Operatioun reduzéieren d'Veraarbechtungszäit wesentlech wärend d'Reproduzibilitéit verbessert, sou datt et eng ideal Léisung fir Laboratoiren mécht, déi Biofilm Viabilitéitsassays an antimikrobiellen Effizienz Tester maachen.

ASTM E2799

ASTM E2799 ass eng standardiséierte Testmethod entwéckelt fir d'Effizienz vun antimikrobiellen Agenten géint Biofilmen ze evaluéieren, speziell op Pseudomonas aeruginosa fokusséiert. Biofilme si komplexe mikrobielle Gemeinschaften, déi sech un Surfaces hänken an eng verstäerkte Resistenz géint antimikrobiellen Behandlungen weisen, wat se zu enger bedeitender Erausfuerderung an der Gesondheetsariichtung, Industrie an Ëmweltkontexter mécht. Dës Method benotzt de Minimum Biofilm Eradication Konzentratioun (MBEC) Assay fir en zouverlässeg a reproduzéierbare Kader ze bidden fir Desinfektiounsmëttelen ënner realistesche Biofilmbedéngungen ze testen.

Wéi dréit Sonication zu ASTM E2799 bäi?

Sonication spillt eng kritesch Roll am ASTM E2799 Protokoll andeems d'Ofschnëtt vu Biofilme vun Testoberflächen erliichtert gëtt, fir eng korrekt Bewäertung vun der mikrobieller Viabilitéit no der Behandlung ze garantéieren. Andeems Dir kontrolléiert Ultraschallenergie benotzt, erreecht de Protokoll effizient a konsequent Biofilm Stéierung ouni d'Zellen ze beschiedegen, wat präzis a reproduzéierbar Resultater erméiglecht. Dëst mécht ASTM E2799 e wesentlecht Tool fir Biofilmfuerschung ze förderen an effektiv antimikrobial Strategien z'entwéckelen.

Wéi lafen de MBEC Assay am Aklang mat ASTM E2799-22

Den ASTM E2799-22 Protokoll skizzéiert d'Schrëtt fir d'Effizienz vun antimikrobiellen Agenten géint Biofilmen ze evaluéieren. Wann Dir den Hielscher UIP400MTP Mikrotiter Platte-Sonicator benotzt, kann de Protokoll adaptéiert ginn fir dës fortgeschratt Sonikatiounsmethod fir Biofilm-Entloossung ze integréieren. Drënner ass eng Beschreiwung vun de Schrëtt ugepasst fir de Mikroplate Sonicator UIP400MTP ze benotzen:

1. Virbereedung vun Biofilms
   Bereet eng steril 96-Well Mikrotiterplack mat eraushuelbare Pegdeckelen.
   Inokuléiert d'Brunnen mat enger standardiséierter bakterieller Suspension an engem passenden Wuesstumsmedium.
   Setzt de Pegdeckel op d'Plack, suergt dofir datt d'Pegs voll an d'bakteriell Suspension ënnergeet sinn.
   Inkubéiert d'Plack ënner kontrolléierte Bedéngungen (zB Temperatur an Zäit) fir Biofilmbildung op de Pegs z'erméiglechen.
2. Behandlung mat antimikrobiellen Agenten
   No der Bildung vun der Biofilm, ersetzt de Medium mat frëschem Medium, deen den Test antimikrobiellen Agenten a verschiddene Konzentratioune enthält.
   Befestegt de Peg Deckel erëm an inkubéiert ënner de Bedéngungen, déi am Testdesign spezifizéiert sinn.
3. Virbereedung fir Biofilm Detachement
   No der Behandlung, spülen de Peg Deckel andeems en an enger steriler Spülléisung taucht fir d'Iwwerreschter vun antimikrobiellen Agenten a locker ageklemmt Planktonzellen ze entfernen.
4. Biofilm Détachement Mat UIP400MTP Sonicator
   Bereet eng frësch 96-Well Mikrotiterplack mat engem Erhuelungsmedium (zB neutraliséiere Bouillon).
   Trennt d'Biofilmen of, andeems de Pegdeckel an d'Bunnen vun der Erhuelungsmëttelplack plazéiert.
   Füügt d'Plack an den UIP400MTP Sonicator, a garantéiert datt den Deckel an d'Plack richteg ausgeriicht sinn.
   Setzt de Sonicator op 70% -80% Amplitude a sonicate fir 3-4 Minutten am Zyklusmodus, fir eng konsequent Biofilm-Ofschafung ouni Zelllysis ze garantéieren.
5. Bewäertung vu Biofilm Viabilitéit
   No der Sonikatioun veraarbecht d'Erhuelungsmedium mat ofgebaute Biofilmzellen mat Standard mikrobiologeschen oder analyteschen Techniken, wéi:
   • Koloniebildende Eenheet (CFU) zielt: Maacht Serienverdünnungen a Plack op Agar fir viabel Zellenumeratioun.
   • Optesch Dicht (OD) Miessunge: Benotzt spektrofotometresch Analyse fir d'Zelldicht ze bewäerten.
   • Fluoreszenz-baséiert Viabilitéitsassays: Quantifizéiert lieweg an dout Zellen mat fluoreszenter Faarfstoffer.
6. Daten Analyse
   Vergläicht d'Viabilitéitsdaten vu behandelten an onbehandelte Biofilmen fir d'Effizienz vun den antimikrobiellen Agenten ze bestëmmen.
   Berechent déi Minimum Biofilm Eradikatiounskonzentratioun (MBEC) baséiert op der Konzentratioun déi néideg ass fir viabel Biofilmzellen ze eliminéieren.
7. Qualitéitskontroll
   Vergewëssert konsequent Sonikatiounsbedéngungen andeems Dir den UIP400MTP reegelméisseg kalibréiert a verifizéiere datt de Biofilm-Entfernungsprozess net zu bedeitende Zell-Lyse oder Zerstéierung resultéiert.
   Entspriechend Kontrollen enthalen, sou wéi onbehandelt Biofilmen a mëttel-nëmme Blanken, fir d'Resultater ze validéieren.

D'Biofilmzellen, déi op de Pins geformt goufen, goufen duerch Sonikatioun (Hielscher Ultraschall Technologie, Teltow, Däitschland, UIP250MTP) fir 5 min an 96-Well Placke mat frësche Kulturmedium fir d'Erhuelung vun den Zellen entlooss.
(Bild a Studie: ©de Oliveira et al., 2016)

Andeems Dir den UIP400MTP an den ASTM E2799-22 Workflow integréiert, gëtt de Prozess vum Biofilm-Entloossung fir Konsistenz, Effizienz an High-Throughput Uwendungen optimiséiert.