Ersetzen Zell Scraping mam UIP400MTP High-Throughput Sonicator

D'Ofdreiwung an Extraktioun vun adherent Zelllinnen aus Multi-Well Placke fir Multi-Omics Analyse ass eng alldeeglech Aufgab an de Laboe. High-Throughput Zell Detachement mat der Multi-Well Platte Sonicator UIP400MTP ersetzt manuell Zellschrauwen, déi zu méi héije Rendementer vun RNA, total Lipiden a total polare Metaboliten féieren. Eng nei Method integréiert den Hielscher UIP400MTP Sonicator mat der Beckman Coulter i7 Liquid Handling Workstation, déi High-Throughput, reproduzéierbar an effizient Veraarbechtung vun Zellen fir RNA, Metabolit a Lipidextraktioun erméiglecht. Déi präsentéiert Method exceléiert traditionell manuell Zellschrauwenmethoden andeems se super Reproduzibilitéit an Ausbezuelung iwwer verschidden Zellarten an experimentell Bedéngungen erreechen.

Streamline Zell Detachement mam Microplate Sonicator UIP400MTP

Adherent Zellkultursystemer spillen eng kritesch Roll an der toxikologescher a biomedizinescher Fuerschung. An dësem Kontext, Cruchley-Fuge et al. (2024) adresséiert eng bedeitend Erausfuerderung am PrecisionTox-Projet konzentréiert sech op d'Uwendung vun Omics Technologien fir chemesch Geforevaluatioun. De Projet zielt fir eng High-Throughput Analyse vun Dausende vu Proben behandelt mat diverse Chemikalien. Fir dës Demande z'erreechen, hunn d'Fuerscher en automatiséierte Workflow entwéckelt, deen den UIP400MTP Sonicator kombinéiert mat etabléierten biphasesche Extraktiounsprotokoller fir Flëssegchromatographie-Massspektrometrie (LC-MS) Analyse. Hir Etude evaluéiert d'Effizienz vum UIP400MTP Multi-Well Plate Sonicator bei der Ofdreiwung vun adherent Zellen am Verglach zum manuelle Schrauwen an aner traditionell Methoden.

Streamlining Multi-Omics: Automatiséiert Adherent Zell Extraktioun mam UIP400MTP

D'Fuerscherteam vu Laura Cruchley-Fuge vun der University of Birmingham huet dräi mënschlech Zelllinnen benotzt: HepG2 (Leberkrebszellen), HepaRG (differenzéiert hepatocytähnlech Zellen), an H295R (Adrenal Kriibszellen). Dës Zelle goufen an 24-Well an 96-Well Placke kultivéiert an op Testchemikalien wéi Aflatoxin B1 a Forskolin ausgesat.

Experimentell Design:

• Phase 1: Optimiséierung vun den UIP400MTP Sonicator's Power Astellungen a Verglach mat manuelle Zellschrauwen a sonic Waasserbäder. HepG2 Zellen goufen agestallt fir RNS, Metabolit a Lipid Erhuelung ze bewäerten.
• Phase 2: Integratioun vum UIP400MTP an e biphasesche Extraktioun Workflow mam Beckman Coulter i7 System. D'Validatioun gouf mat HepaRG an H295R Zellen duerchgefouert.

Extraktioun Workflow: De Workflow ëmfaasst chemesch Belaaschtungen a Multi-Well Placken, Zellentscheedung mam UIP400MTP, a biphasesch Extraktioun iwwer de Bligh & Deier (B&D) Method. LC-MS Analyse gouf mat engem Thermo Scientific Orbitrap Exploris 120 fir lipophil a polare Verbindungen gemaach. Den B&D Method, e Goldstandard fir Lipidquantifikatioun, beinhalt eng zwee-Schrëtt Extraktioun mat Methanol, Chloroform a Waasser, gefollegt vun der Lipidquantifikatioun an der Chloroformphase.

UIP400MTP Mikroplate Sonicator erliichtert d'Ofdreiwung vun adherent Zelllinne vu Multi-Well Placken a Petri Platen

Resultater:

• Phase 1: Optimal Sonikatiounsbedingunge goufen bei 60% Kraaft identifizéiert.
  D'UIP400MTP huet déi héchst RNA Erhuelung mat aussergewéinlecher Reproduzibilitéit am Verglach zum manuelle Schrauwen a Klangbäder geliwwert.
  Polar Metabolit Erhuelung war konsequent iwwer Methoden, während d'Lipid Erhuelung besonnesch super war mat der UIP400MTP.
• Phase 2: Validatioun op HepaRG an H295R Zellen bewisen héich Reproduzibilitéit a Lipidomik a Metabolomik Daten, wéi ugewisen duerch enk clusteréiert PCA Scores.
  Aflatoxin B1 a Forskolin Behandlungen goufen effektiv vu Kontrollen ënnerscheet, wat d'Sensibilitéit an d'Zouverlässegkeet vun der Method ënnersträicht.

“Den Hielscher UIP400MTP Sonication-Apparat bitt eng héichqualitativ a reproduzéierbar Alternativ Approche zum "Goldstandard" vum manuelle Zellschrauwen, wat zu méi héije Rendementer vu RNA, total Lipiden a total polare Metaboliten féiert.” (Cruchley-Fuge et al., 2024)

Cruchley-Fuge et al. Highlight d'Virdeeler vum UIP400MTP Sonicator fir adherent Zellveraarbechtung. Andeems Dir manuell Schrauwen ersetzt, verbessert dës Method d'Reproduktioun, d'Duerchschnëtt an d'Ausbezuelung, sou datt et e wäertvollt Tool fir grouss Studien wéi PrecisionTox mécht. D'Integratioun vum UIP400MTP an automatiséierte Workflows reduzéiert net nëmmen d'Variabilitéit, awer och rationaliséiert Aarbechtsintensiv Prozesser, wat qualitativ héichwäerteg Multi-Omics Datenacquisitioun erméiglecht.

D'Aarbecht vum Cruchley-Fuge et al. (2024) erliichtert a streamlines d'Veraarbechtung vun adherent Zellkulturen fir Multi-Omics Analyse. D'Integratioun vum UIP400MTP Sonicator mat automatiséierte Workflows suergt fir konsequent an effizient Probepräparatioun, sou datt et ideal ass fir toxikologesch Fuerschung mat héijer Duerchmiesser.
 

Design, Fabrikatioun a Berodung – Qualitéit Made in Germany

Hielscher Ultraschaller si bekannt fir hir héchst Qualitéit an Designnormen. Robustheet an einfach Operatioun erlaben déi glat Integratioun vun eisen Ultraschaller an industriellen Ariichtungen. Rau Konditiounen an erfuerderlech Ëmfeld ginn einfach vun Hielscher Ultraschaller gehandhabt.

Hielscher Ultrasonics ass eng ISO zertifizéiert Firma a setzt spezielle Wäert op High-Performance-Sonicatoren mat modernsten Technologie a Benotzerfrëndlechkeet. Natierlech sinn Hielscher Ultraschaller CE konform an entspriechen d'Ufuerderunge vun UL, CSA a RoHs.