ულტრაბგერითი ლიზისი: ნაბიჯ-ნაბიჯ სახელმძღვანელო უჯრედების დარღვევის სრულყოფისთვის
გსურთ დაეუფლოთ უჯრედების ლიზისის მეცნიერებას? Აღარ იყურო უფრო შორს! ამ ნაბიჯ-ნაბიჯ სახელმძღვანელოში ჩვენ გაგაცნობთ უჯრედების ულტრაბგერითი დაშლის პროცესს და დავრწმუნდებით, რომ თქვენი უჯრედების ლიზისის ტექნიკა მოგცემთ ოპტიმალურ შედეგებს. ხართ თუ არა გამოცდილი მკვლევარი თუ დამწყები მეცნიერი, ეს სახელმძღვანელო მოგცემთ ცოდნას და უნარებს გამოიყენოთ ზონდის ტიპის სონიკატორი, რათა მიაღწიოთ უჯრედების წარმატებულ რღვევას და ლიზისს.
ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორები არის უჯრედების ძლიერი დამრღვევები
Sonication, ტექნიკა, რომელიც იყენებს ზონდის ტიპის sonicator, არის ფართოდ გამოყენებული მეთოდი ღია უჯრედების გასატეხად, რაც წარმოადგენს ნიმუშის მომზადების კრიტიკულ საფეხურს მრავალ ბიოლოგიურ, ბიოქიმიურ და ანალიტიკურ ექსპერიმენტებსა და ანალიზებში. სონიკაციის ეფექტურობა დამოკიდებულია სხვადასხვა ფაქტორზე, მათ შორის ამპლიტუდაზე, სიმძლავრეზე, გაჟონვის ხანგრძლივობაზე და ნიმუშის მომზადებაზე.
ბგერითი მუშაობის პრინციპების გაცნობიერებით და სწორი ტექნიკის გამოყენებით, შეგიძლიათ მაქსიმალურად გაზარდოთ უჯრედების რღვევა, ხოლო მგრძნობიარე მოლეკულების დაზიანება მინიმუმამდე დაიყვანოთ.
ამ სახელმძღვანელოს განმავლობაში, ჩვენ მოგაწვდით დეტალურ ინსტრუქციებს და პრაქტიკულ რჩევებს, რომლებიც დაგეხმარებათ სონიკაციის პროცესის მარტივად ნავიგაციაში. ეს მოიცავს შესაბამისი სონიკატორისა და ულტრაბგერითი პარამეტრების შერჩევას უჯრედების კონკრეტული ტიპებისთვის პირობების ოპტიმიზაციისთვის.
უჯრედის ლიზისის მნიშვნელობა სამეცნიერო კვლევებში
უჯრედის რღვევა ან ლიზისი არის ერთ-ერთი ძირითადი ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება სამეცნიერო კვლევის სხვადასხვა სფეროში, მათ შორის მოლეკულურ ბიოლოგიაში, უჯრედული ბიოლოგიაში, ბიოქიმიასა და სიცოცხლის მეცნიერებაში. უჯრედის დაშლის პროცესი გულისხმობს უჯრედის მემბრანის ან უჯრედის კედლის გახსნას მისი უჯრედშიდა მოლეკულების გასათავისუფლებლად. ლიზისის სამიზნე მოლეკულები შეიძლება იყოს ცილები, ნუკლეინის მჟავები და სხვა უჯრედული კომპონენტები. ეს ნიშნავს, რომ ლიზისი მეცნიერებს საშუალებას აძლევს ამოიღონ შიდა კომპონენტები და ბიომოლეკულები უჯრედებიდან ანალიზისთვის.
უჯრედების ლიზისის პრინციპების გაგება აუცილებელია ზუსტი და რეპროდუქციული შედეგების მისაღებად. უჯრედების ეფექტურად გახსნით, მკვლევარებს შეუძლიათ წვდომა იმ უჯრედშიდა მოლეკულებზე, რომლებიც მათ შესასწავლად სჭირდებათ, როგორიცაა ფერმენტები, დნმ, რნმ და ცილები. სხვადასხვა ტიპის უჯრედები საჭიროებენ ლიზისის განსხვავებულ მეთოდებს, ხოლო სონიკირება პოპულარული ტექნიკა გახდა მისი მრავალფეროვნებისა და ეფექტურობის გამო.
Sonication არის ფიზიკური მეთოდი, რომელიც იყენებს მაღალი სიხშირის ხმის ტალღებს უჯრედის მემბრანების დასაშლელად. იმის გამო, რომ ბგერითი პროცესის ინტენსივობა შეიძლება ზუსტად იყოს მორგებული, სონიკატორები სასარგებლოა ღია რბილი და ხისტი უჯრედის კედლების გასატეხად და უჯრედშიდა კომპონენტების მოპოვებისთვის. სონიკაციის პირობების ოპტიმიზაციის გზით, მკვლევარებს შეუძლიათ მიაღწიონ უჯრედების ეფექტურ ლიზისს, მოპოვებული მოლეკულების მთლიანობის შენარჩუნებით.
Sonication-ის პრინციპების გაგება
სანამ სონიკაციის პროცესს დავიწყებთ, გადამწყვეტი მნიშვნელობა აქვს უჯრედის ლიზატის სწორად მომზადებას. აქ არის ნაბიჯ-ნაბიჯ სახელმძღვანელო, რომელიც დაგეხმარებათ დაწყებაში:
- უჯრედის კულტურის მომზადება: დაიწყეთ საინტერესო უჯრედების გაზრდით შესაბამისი კულტურის გარემოში და პირობებში. სანამ გააგრძელებთ, დარწმუნდით, რომ უჯრედები ჯანმრთელია და ზრდის სასურველ ფაზაში.
- უჯრედების აღება: მას შემდეგ, რაც უჯრედები მიაღწევენ სასურველ შერწყმას ან ზრდის ფაზას, აიღეთ ისინი შესაფერისი მეთოდით, როგორიცაა ტრიფსინიზაცია ან სკრაპი. უჯრედები გადაიტანეთ სტერილურ ცენტრიფუგა მილში და გააფუჭეთ ცენტრიფუგირებით.
- უჯრედების რეცხვა: ამოიღეთ კულტურის მედია და გარეცხეთ უჯრედის მარცვლები შესაბამისი ბუფერული ხსნარით, როგორიცაა ფოსფატ-ბუფერული ფიზიოლოგიური ხსნარი (PBS). ეს ნაბიჯი ხელს უწყობს ნებისმიერი ნარჩენი მედიისა და დამაბინძურებლების ამოღებას.
- უჯრედის რეზუსპენზია: ხელახლა შეაჩერეთ უჯრედის მარცვლები ლიზის ბუფერში, რომელიც შეესაბამება თქვენს ექსპერიმენტს. ლიზისის ბუფერი უნდა შეიცავდეს სარეცხი საშუალებებს ან ფერმენტებს უჯრედის მემბრანის დასარღვევად და უჯრედშიდა შიგთავსის გასათავისუფლებლად.
- უჯრედის ლიზისი: მოახდინე უჯრედის სუსპენზიის ჰომოგენიზაცია ზონდის ტიპის სონიკატორის გამოყენებით სრული ლიზის უზრუნველსაყოფად. უჯრედის ტიპისა და ექსპერიმენტული მოთხოვნებიდან გამომდინარე, შეიძლება დაგჭირდეთ უჯრედის ლიზატის ინკუბაცია კონკრეტულ ტემპერატურაზე ან დამატებითი რეაგენტების დამატება ლიზის გასაძლიერებლად.
- უჯრედის ნამსხვრევების მოცილება: მოახდინე უჯრედის ლიზატის ცენტრიფუგა მაღალი სიჩქარით, რათა მოხდეს უჯრედის ნამსხვრევები, ორგანელები და სხვა უხსნადი მასალები. გადაიტანეთ სუპერნატანტი, რომელიც შეიცავს სასურველ უჯრედშიდა კომპონენტებს ახალ მილში.
- ცილების რაოდენობრივი მაჩვენებელი: გაზომეთ უჯრედის ლიზატის ცილის კონცენტრაცია შესაფერისი მეთოდის გამოყენებით, როგორიცაა ბრედფორდის ან BCA ანალიზი. ეს ნაბიჯი ხელს უწყობს შესაბამისი განზავების დადგენას ქვედა დინების აპლიკაციებისთვის.
- ნიმუშის ალიკოტირება: თქვენი ექსპერიმენტული დიზაინიდან გამომდინარე, ანაწილეთ უჯრედის ლიზატი შესაფერის მოცულობებში და შეინახეთ ისინი შესაბამის ტემპერატურაზე მომავალი გამოყენებისთვის.
ამ ნაბიჯების დაცვით, თქვენ ამზადებთ უჯრედის ლიზატს სწორად და მზად სონიკაციისთვის, რათა მიაღწიოთ ოპტიმალურ შედეგებს.
ნაბიჯ-ნაბიჯ გზამკვლევი უჯრედის ლიზატის მომზადებისთვის
ახლა, როდესაც თქვენ წაიკითხეთ უჯრედის ლიზატის მომზადების სრული პროცესის შესახებ, გვინდა ფოკუსირება მოახდინოთ სონიკაციის საფეხურზე. ბგერითი პირობები მნიშვნელოვანია უჯრედების ეფექტური ლიზის მისაღწევად. ძირითადი პარამეტრები, რომლებიც გასათვალისწინებელია ზონირების ოპტიმიზაციისას მოიცავს ხანგრძლივობას, სიმძლავრეს და ნიმუშის მომზადებას. აქ მოცემულია რამდენიმე სახელმძღვანელო მითითება, რომელიც დაგეხმარებათ ამ პარამეტრების ოპტიმიზაციაში:
- ხანგრძლივობა: სონიკაციის ხანგრძლივობა დამოკიდებულია უჯრედის ტიპზე და უჯრედის დარღვევის სასურველ დონეზე. დაიწყეთ ხანმოკლე ხანგრძლივობით და თანდათან გაზარდეთ საჭიროების შემთხვევაში. მოერიდეთ ზედმეტად გაჟღენთვას, რადგან ამან შეიძლება გამოიწვიოს გადაჭარბებული სითბოს წარმოქმნა და მგრძნობიარე მოლეკულების დენატურაცია.
- Ძალა: ხმოვანი მოწყობილობის სიმძლავრის პარამეტრი უნდა იყოს ოპტიმიზირებული უჯრედის ტიპისა და უჯრედის დარღვევის სასურველი დონის მიხედვით. ენერგიის უფრო მაღალმა პარამეტრებმა შეიძლება გამოიწვიოს უჯრედების უფრო ეფექტური ლიზისი, მაგრამ ასევე შეიძლება გამოიწვიოს სითბოს გადაჭარბებული გამომუშავება. აუცილებელია უჯრედის დარღვევის დაბალანსება ნიმუშის მთლიანობასთან.
- ნიმუშის მომზადება: ნიმუშის სათანადო მომზადება გადამწყვეტია ეფექტური სონიკაციისთვის. დარწმუნდით, რომ უჯრედის ლიზატი თავისუფალია ნამსხვრევებისა და უხსნადი მასალებისგან, რამაც შეიძლება ხელი შეუშალოს გაჟონვის ეფექტურობას. აუცილებლობის შემთხვევაში ლიზატის ცენტრიფუგა გაჟონვამდე.
- Ტემპერატურის კონტროლი: Sonication წარმოქმნის სითბოს, რომელიც შეიძლება საზიანო იყოს მგრძნობიარე მოლეკულებისთვის. სითბური დაზიანების შესამცირებლად, განიხილეთ სონიკაციური მოწყობილობის გამოყენება ტემპერატურის კონტროლის შესაძლებლობებით ან შეასრულეთ სონიფიკაცია ცივ ოთახში ან ყინულზე.
- Sonicator ზონდის პოზიციონირება: სონიკატორის ზონდის სწორად განლაგება გადამწყვეტია ეფექტური სონიკაციისთვის. ზონდი უნდა ჩაიძიროს უჯრედის ლიზატში, მაგრამ არ შეეხოს კონტეინერის კედლებს, რათა თავიდან იქნას აცილებული ზედმეტი ვიბრაცია და ნიმუშის კონტეინერის პოტენციური დაზიანება.
ამ პარამეტრების გულდასმით გათვალისწინებით და ბგერითი პირობების ოპტიმიზაციის გზით, თქვენ მიაღწევთ უჯრედების ეფექტურ ლიზას, მოპოვებული მოლეკულების მთლიანობის შენარჩუნებით.
Sonication პირობების ოპტიმიზაცია უჯრედების ეფექტური ლიზისისთვის
რეკომენდირებული მითითებების დაცვით, მკვლევარებმა შეიძლება წააწყდნენ გამოწვევებს უჯრედების ლიზისისა და სონიკაციის პროცესში. ამ გამოწვევების გააზრება და პრობლემების მოგვარების სტრატეგიების განხორციელება დაგეხმარებათ მათ გადალახვაში. აქ მოცემულია რამდენიმე საერთო გამოწვევა და მათი შესაბამისი პრობლემების მოგვარების რჩევები:
- უჯრედის არასაკმარისი ლიზისი: თუ უჯრედის ლიზატი არ იძლევა უჯრედების დარღვევის სასურველ დონეს, განიხილეთ სონიკაციის ხანგრძლივობის ან სიმძლავრის გაზრდა. გარდა ამისა, დარწმუნდით, რომ უჯრედის ლიზატი ადეკვატურად არის მომზადებული და თავისუფალი ნამსხვრევებისგან ან უხსნადი მასალებისგან, რამაც შეიძლება ხელი შეუშალოს სონიკაციის ეფექტურობას.
- გადაჭარბებული ქაფის წარმოქმნა: ზედმეტმა ქაფმა გაჟონვის დროს შეიძლება შეაფერხოს უჯრედების ეფექტური ლიზისი. ქაფის წარმოქმნის შესამცირებლად გამოიყენეთ ლიზისის ბუფერი სარეცხი საშუალებების შესაბამისი კონცენტრაციით და თავიდან აიცილეთ ზედმეტი შერევა ან აჟიოტაჟი ბგერითი პროცესის დროს.
- გათბობის ნიმუში: ზედმეტად სითბოს წარმოქმნას სონიკაციის დროს შეუძლია მგრძნობიარე მოლეკულების დენატურაცია და უჯრედის ლიზატის მთლიანობის დარღვევა. ნიმუშის გაცხელების შესამცირებლად, განიხილეთ სონიკაციური მოწყობილობის გამოყენება ტემპერატურის კონტროლის შესაძლებლობებით ან შეასრულეთ სონიფიკაცია ცივ ოთახში ან ყინულზე.
- ნიმუშის დაბინძურება: დაბინძურება შეიძლება მოხდეს უჯრედების ლიზისისა და სონიკაციის დროს, რაც იწვევს არაზუსტ შედეგებს. დაბინძურების შესამცირებლად, დარწმუნდით, რომ გამოყენებული ყველა მოწყობილობა და რეაგენტი არის სტერილური და თავისუფალი დამაბინძურებლებისგან. გამოიყენეთ სათანადო ასეპტიკური ტექნიკა ნიმუშის მომზადებისა და დამუშავების დროს.
ამ გამოწვევების გაცნობიერებით და პრობლემების აღმოფხვრის შესაბამისი სტრატეგიების განხორციელებით, თქვენ შეგიძლიათ გადალახოთ დაბრკოლებები და მიაღწიოთ უჯრედების წარმატებულ ლიზისს ზონდის ტიპის სონიკატორის გამოყენებით.
საერთო გამოწვევები უჯრედების ლიზისისა და პრობლემების მოგვარების რჩევები
მას შემდეგ, რაც წარმატებით დაასრულეთ თქვენი უჯრედის ლიზატი, აუცილებელია გაჟღენთილი ნიმუშების სწორად დამუშავება მოპოვებული მოლეკულების მთლიანობის შესანარჩუნებლად. აქ მოცემულია რამდენიმე საუკეთესო პრაქტიკა ხმოვანი ნიმუშების დამუშავებისთვის:
- მოერიდეთ გაყინვა-დათბობის განმეორებით ციკლებს: გაყინვა-დათბობის ციკლებმა შეიძლება გამოიწვიოს მგრძნობიარე მოლეკულების დეგრადაცია. უმჯობესია, გაჟღენთილი ნიმუშები გადანაწილდეს შესაბამის მოცულობებად და შეინახოთ ისინი შესაბამის ტემპერატურაზე, რათა თავიდან იქნას აცილებული გაყინვა-დათბობის განმეორებითი ციკლები.
- სათანადო შენახვა: შეინახეთ გაჟღენთილი ნიმუშები შესაბამის ტემპერატურაზე და საჭიროების შემთხვევაში დაიცავით ისინი სინათლისგან. დაიცავით რეკომენდირებული შენახვის პირობები კონკრეტული მოლეკულებისთვის ან საინტერესო პროგრამებისთვის.
- მარკირება და დოკუმენტაცია: სათანადოდ მონიშნეთ სონიკირებულ ნიმუშებზე შესაბამისი ინფორმაცია, მათ შორის თარიღი, ნიმუშის დასახელება და გაჟღერების პირობები. შეინახეთ ბგერითი პროცესის დეტალური დოკუმენტაცია და შესრულებული ცვლილებების ან პრობლემების აღმოფხვრის ნაბიჯები. თუ იყენებთ Hielscher ციფრულ სონიკატორს, შეგიძლიათ იპოვოთ ხმოვანი მონაცემები, როგორიცაა თარიღი, დრო, ამპლიტუდა, სიმძლავრე და ციკლები ინტეგრირებულ SD ბარათზე. იმისათვის, რომ შეესაბამებოდეს ხმოვანი მონაცემების თქვენს ნიმუშს, დარწმუნდით, რომ თქვენს ნიმუშს მიანიშნეთ თარიღი და დრო.
- მოერიდეთ ჯვარედინი დაბინძურებას: ნიმუშებს შორის ჯვარედინი დაბინძურების თავიდან ასაცილებლად, გამოიყენეთ ცალკე მილები, წვერები და სხვა ლაბორატორიული ჭურჭელი სონიკირებული ნიმუშების დამუშავებისას. ულტრაბგერითი ზონდი სწორად გაწმინდეთ ალკოჰოლით. საჭიროების შემთხვევაში, შეგიძლიათ ულტრაბგერითი ზონდის ავტოკლავირება. გაწმინდეთ და გაასტერილეთ ნებისმიერი მოწყობილობა, რომელიც ნიმუშებთან კონტაქტშია, რათა მინიმუმამდე დაიყვანოთ დაბინძურების რისკი.
თუ დაიცავთ ამ საუკეთესო პრაქტიკის რჩევებს, თქვენ უზრუნველყოფთ თქვენი ხმოვანი ნიმუშების მთლიანობასა და გამოყენებადობას ქვედა დინების აპლიკაციებისთვის.
როგორ ადარებს Sonication სხვა ლიზის ტექნიკას?
Sonication, მეთოდი, რომელიც იყენებს მაღალი სიხშირის ხმის ტალღებს უჯრედის მემბრანების დასაშლელად, გთავაზობთ რამდენიმე უპირატესობას უჯრედების ლიზისის სხვა მეთოდებთან შედარებით. ის განსაკუთრებით ეფექტურია ღია მყარი უჯრედის კედლების გასატეხად და უჯრედშიდა კომპონენტების ამოღების მიზნით. ხმოვანი პირობების ოპტიმიზაციის გზით, მკვლევარები აღწევენ უჯრედების ეფექტურ ლიზას და იღებენ სამიზნე მოლეკულების მაღალ მოსავლიანობას. ამავდროულად, მოპოვებული მოლეკულების მთლიანობა შენარჩუნებულია, რაც უზრუნველყოფს ნიმუშის შესანიშნავ ხარისხს შემდგომი ანალიზისთვის. ამის საპირისპიროდ, სხვა მეთოდები, როგორიცაა მექანიკური შეფერხება ან ქიმიური ლიზისი, შეიძლება არ იყოს ისეთი ნაზი და შეიძლება გამოიწვიოს სამიზნე მოლეკულების დეგრადაცია.
Sonication ასევე უზრუნველყოფს მაღალი დონის კონტროლს დარღვევის ინტენსივობასა და ხანგრძლივობაზე, რაც მას მრავალმხრივ და ეფექტურ ტექნიკად აქცევს სხვადასხვა ტიპის უჯრედებისა და მოლეკულებისთვის. ამიტომ, სონიკას სულ უფრო მეტად ანიჭებენ უპირატესობას სამეცნიერო კვლევებში მისი ეფექტურობისა და მოპოვებული კომპონენტების ხარისხის შენარჩუნების უნარის გამო.
მაღალი ხარისხის სონიკატორები ლიზისისა და უჯრედების დაშლისთვის
Hielscher Ultrasonics დგას საინჟინრო, წარმოების და უახლესი ზონდ-სონიკატორების მოწინავე პოზიციაზე, რომლებიც მორგებულია მრავალფეროვან აპლიკაციებზე, როგორიცაა ნიმუშის მომზადება, უჯრედის ლიზიზი, დნმ-ის ფრაგმენტაცია და უჯრედის ხსნადი. ყოვლისმომცველი პორტფოლიო მოიცავს ზონდ-სონიკატორებს, მაღალი გამტარიანობის სონიკატორებს, რომლებიც განკუთვნილია 96 ჭაბურღილიანი ფირფიტებისთვის და მიკრო ფირფიტებისთვის, ულტრაბგერითი ჭიქის რქებთან ერთად. გამორჩეული სონიკაციის პარამეტრებზე ზუსტი კონტროლით, Hielscher სონიკატორები გვთავაზობენ შეუდარებელ ადაპტირებას სხვადასხვა უჯრედების, ქსოვილებისა და მოლეკულების მკაფიო მოთხოვნებთან. დამუშავების საიმედოობა უზრუნველყოფს ექსპერიმენტების თანმიმდევრულ განმეორებადობას, რაც ხელს უწყობს მაღალი ხარისხის შედეგების მიღწევას ყოველი გამეორებით.
- მაღალი ეფექტურობის
- უახლესი ტექნოლოგია
- საიმედოობა & სიმტკიცე
- რეგულირებადი, ზუსტი პროცესის კონტროლი
- პარტია & ხაზში
- ნებისმიერი მოცულობისთვის
- ინტელექტუალური პროგრამული უზრუნველყოფა
- ჭკვიანი ფუნქციები (მაგ., პროგრამირებადი, მონაცემთა პროტოკოლირება, დისტანციური მართვა)
- მარტივი და უსაფრთხო ფუნქციონირება
- დაბალი მოვლა
- CIP (სუფთა ადგილზე)
დიზაინი, წარმოება და კონსულტაცია – ხარისხი დამზადებულია გერმანიაში
Hielscher ულტრაბგერითები ცნობილია მათი უმაღლესი ხარისხისა და დიზაინის სტანდარტებით. გამძლეობა და მარტივი მუშაობა საშუალებას იძლევა ჩვენი ულტრაბგერითი აპარატების გლუვი ინტეგრაცია სამრეწველო ობიექტებში. უხეში პირობები და მომთხოვნი გარემო ადვილად უმკლავდება Hielscher ულტრაბგერითებს.
Hielscher Ultrasonics არის ISO სერთიფიცირებული კომპანია და განსაკუთრებული აქცენტი კეთდება მაღალი ხარისხის ულტრაბგერაზე, რომელიც აღჭურვილია უახლესი ტექნოლოგიით და მომხმარებლის კეთილგანწყობით. რა თქმა უნდა, Hielscher ულტრაბგერითები შეესაბამება CE და აკმაყოფილებს UL, CSA და RoHs მოთხოვნებს.
ქვემოთ მოყვანილი ცხრილი გაძლევთ მითითებას ჩვენი ლაბორატორიის ზომის ულტრაბგერითი აპარატების სავარაუდო დამუშავების შესაძლებლობის შესახებ:
რეკომენდებული მოწყობილობები | სურათების მოცულობა | Დინების სიჩქარე |
---|---|---|
UIP400MTP 96 ჭაბურღილის ფირფიტა Sonicator | მრავალ ჭაბურღილის / მიკროტიტრული ფირფიტები | na |
ულტრაბგერითი CupHorn | ჭიქა ფლაკონისთვის ან ჭიქისთვის | na |
GDmini2 | ულტრაბგერითი მიკრო ნაკადის რეაქტორი | na |
VialTweeter | 0.5-დან 1.5მლ-მდე | na |
UP100H | 1-დან 500 მლ-მდე | 10-დან 200 მლ/წთ-მდე |
UP200Ht, UP200 ქ | 10-დან 1000 მლ-მდე | 20-დან 200 მლ/წთ-მდე |
UP400 ქ | 10-დან 2000 მლ-მდე | 20-დან 400 მლ/წთ-მდე |
UIP500hdT | 100-დან 5000 მლ-მდე | 0.1-დან 4ლ/წთ-მდე |
ულტრაბგერითი საცრის შეკერი | na | na |
Დაგვიკავშირდით! / Გვკითხე ჩვენ!
უჯრედების ლიზისისა და სონიკაციის გამოყენება სხვადასხვა სფეროში
უჯრედების წარმატებული ლიზის მისაღწევად აუცილებელია სწორი იარაღები და აღჭურვილობა. აქ მოცემულია რამდენიმე ძირითადი ინსტრუმენტი, რომელიც ჩვეულებრივ გამოიყენება უჯრედების ლიზისა და სონიკაციის დროს:
- აირჩიეთ სწორი Sonicator: Sonicators ან ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორები არის პირველადი ინსტრუმენტები, რომლებიც გამოიყენება უჯრედების ლიზისისთვის გახმოვანების გზით. დარწმუნდით, რომ იყენებთ ზუსტად კონტროლირებად ზონდის ტიპის სონიკატორს, რადგან შედეგები შეიძლება საიმედოდ განმეორდეს. მოერიდეთ ულტრაბგერითი აბაზანებს ლიზისის, ექსტრაქციისა და დნმ-ის ფრაგმენტაციისთვის. ულტრაბგერითი აბაზანები ძირითადად დასუფთავებისთვისაა განკუთვნილი. ისინი არ იძლევიან განმეორებად შედეგებს. ამ პუნქტების გათვალისწინებით, აირჩიეთ მოწყობილობა, რომელიც გთავაზობთ ენერგიის შესაბამის პარამეტრებს, ზონდის ცვალებადი ზომის და ტემპერატურის კონტროლის შესაძლებლობებს თქვენი კონკრეტული ექსპერიმენტისთვის. ისეთი ფუნქციები, როგორიცაა ნიმუშის განათება და მონაცემთა ავტომატური პროტოკოლირება, ხელს უწყობს თქვენს მუშაობას.
- ცენტრიფუგები: ცენტრიფუგები გამოიყენება უჯრედების პელეტისთვის, ნარჩენების მოსაშორებლად და უჯრედული კომპონენტების განცალკევებისთვის უჯრედის ლიზისის დროს. აირჩიეთ ცენტრიფუგები შესაბამისი როტორის ტიპებითა და სიჩქარით თქვენი ექსპერიმენტული მოთხოვნების დასაკმაყოფილებლად.
- პიპეტებისა და პიპეტების რჩევები: ზუსტი და ზუსტი პიპეტინგი გადამწყვეტია უჯრედის ლიზისისა და ნიმუშის დამუშავების დროს. დარწმუნდით, რომ გაქვთ პიპეტებისა და რჩევების სპექტრი, რომელიც შესაფერისია თქვენს ექსპერიმენტში გამოყენებული მოცულობებისთვის.
- ლიზისის ბუფერები: აირჩიეთ ლიზის ბუფერები, რომლებიც ოპტიმიზებულია თქვენი კონკრეტული უჯრედების ტიპებისა და ექსპერიმენტული აპლიკაციებისთვის. განვიხილოთ ბუფერები, რომლებიც შეიცავს სარეცხი საშუალებებს ან ფერმენტებს უჯრედის მემბრანების ეფექტურად დასაშლელად.
- ნიმუშის კონტეინერები: გამოიყენეთ შესაბამისი ნიმუშის კონტეინერები, როგორიცაა მიკროცენტრიფუგის მილები ან ფლაკონები, რათა შეინარჩუნონ უჯრედის ლიზატი სონიკაციის დროს. დარწმუნდით, რომ კონტეინერები თავსებადია სონიკთან და არ უშლის ხელს ულტრაბგერითი ტალღებს.
- ტემპერატურის კონტროლის მოწყობილობა: თუ მუშაობთ ტემპერატურაზე მგრძნობიარე ნიმუშებთან, განიხილეთ ხმოვანი მოწყობილობის გამოყენება ჩაშენებული ტემპერატურის კონტროლის შესაძლებლობებით, ან ინვესტიცია ჩადეთ ტემპერატურის კონტროლირებად წყლის აბაზანებში ან ჩილერებში, ნიმუშის მთლიანობის შესანარჩუნებლად.
თქვენს განკარგულებაში სწორი ხელსაწყოებისა და აღჭურვილობის არსებობით, შეგიძლიათ უზრუნველყოთ უჯრედების წარმატებული ლიზისი და მიაღწიოთ ოპტიმალურ შედეგებს თქვენს ექსპერიმენტებში.
ლიტერატურა / ლიტერატურა
- Giricz Z., Varga Z.V., Koncsos G., Nagy C.T., Görbe A., Mentzer R.M. Jr, Gottlieb R.A., Ferdinandy P. (2017): Autophagosome formation is required for cardioprotection by chloramphenicol. Life Science Oct 2017. 11-16.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.