ლიპოსომები უკუფაზური აორთქლების მეთოდით ულტრაბგერითი დამუშავების გამოყენებით
ლიპოსომები არის მრავალმხრივი ნანოგადამტანები, რომლებიც გამოიყენება წამლის მიწოდებაში მათი ბიოთავსებადობისა და ჰიდროფილური და ჰიდროფობური წამლების ჩაკაპსულირების უნარის გამო. უკუფაზური აორთქლების მეთოდი (ასევე ცნობილი, როგორც ემულსიფიკაციის მეთოდი ან გამხსნელის აორთქლების მეთოდი) არის ლიპოსომების მომზადების მნიშვნელოვანი ტექნიკა, რომელიც უზრუნველყოფს ჩაკაპსულირების მაღალ ეფექტურობას. ეს სტატია ეხება ლიპოსომების მომზადებას უკუფაზური აორთქლების მეთოდით, რომელიც გაძლიერებულია პრობის ტიპის ულტრაბგერითი დამუშავებით და ხაზს უსვამს პროცედურულ ნაბიჯებს, სარგებელს და პოტენციურ გამოყენებებს წამლის მიწოდების სისტემებში.
ლიპოსომები არის ვესიკულური სტრუქტურები, რომლებიც შედგება ერთი ან მეტი ლიპიდური ბიშრეისგან, შეუძლიათ ჰიდროფილური და ჰიდროფობური ნაერთების ჩასვლა. მათი უნიკალური სტრუქტურა მათ იდეალურს ხდის მიზნობრივი წამლის მიწოდებისთვის. უკუფაზური აქრობის მეთოდი (ა.კ.ა. ემულსიფიკაცია ან გამხსნელის აქრობის მეთოდი) არის დამკვიდრებული ტექნიკა ლიპოსომების მომზადებისთვის. შემდეგ პარაგრაფებში, ჩვენ გაცნობთ უკუფაზური აქრობის მეთოდის სარგებელს პრობის ტიპის ულტრაბგერითი დამუშავების გამოყენებით, რომელიც ცნობილია, რომ აუმჯობესებს ემულსიფიკაციას, ჩასვლის ეფექტურობას და ლიპოსომების ზომის შემცირებას.
პრობის ტიპის ულტრაბგერითი დამამუშავებელი UP400St ლიპოსომების მომზადებისთვის
ლიპოსომების მომზადების მეთოდოლოგია უკუფაზური აქრობის მეთოდით
ლიპოსომების წარმოქმნა უკუფაზური აორთქლების მეთოდით ულტრაბგერითი დამუშავების გამოყენებით გულისხმობს ლიპიდების გახსნას ქლოროფორმისა და მეთანოლის ორგანული გამხსნელის ნარევში (2:1 v/v), რაც ხელს უწყობს ინვერსიული მიცელების წარმოქმნას. შემდეგ ამ ნარევს ემატება წყალხსნარის ბუფერი. მიღებული ხსნარი დამუშავდება ულტრაბგერით, მაგალითად, პრობის ტიპის ულტრაბგერითი დამამუშავებლის, როგორიცაა UP400ST, გამოყენებით, წყალი-ზეთში მიკროემულსიის შესაქმნელად. შემდეგ ორგანული გამხსნელი აორთქლდება როტაციული ამაორთქლებლის გამოყენებით, რის შედეგადაც მიიღება ბლანტი გელი, რომელიც საბოლოოდ იშლება ლიპოსომების წარმოქმნით. მიკროემულსიის ბუშტების დიდი წყალხსნარის გული ხელს უწყობს ჰიდროფილური მოლეკულების ჩაჭერას, რაც იწვევს ლიპოსომური გელების წარმოქმნას, რომლებიც ავლენენ კონტროლირებად გამოყოფას და კარგ პერმეაციის პროფილს. საბოლოოდ, ლიპოსომები მცირდება ერთგვაროვან ზომამდე ულტრაბგერითი დამამუშავებლის გამოყენებით.
პროტოკოლი / ნაბიჯ-ნაბიჯ ინსტრუქციები:
- ლიპიდების გაზომვა და გახსნა:
ზუსტად გაზომეთ 40 mg L-α-ფოსფატიდილქოლინისა და ქოლესტერინის ჯამური რაოდენობა მასური თანაფარდობით 4:1 ან 7:3.
გახსენით გაზომილი ლიპიდები 10 mL ქლოროფორმის/მეთანოლის ნარევში (4:1 v/v) სფერული ფსკერის მქონე კოლბაში. - ლიპიდური ფენის წარმოქმნა:
მიამაგრეთ სფერული ფსკერის მქონე კოლბა როტაციულ აქრობის აპარატს.
ატრიალეთ კოლბა 8 x g სიჩქარით 40°C-ზე ვაკუუმის პირობებში, სანამ თხელი ლიპიდური ფენა არ წარმოიქმნება კოლბის კედლებზე. - გამხსნელის ორთქლის მოცილება:
გამოიწვიეთ გამხსნელის ნარევის დარჩენილი ორთქლი კოლბის აზოტის გაზით გადარეცხვით. - ლიპიდური ფენის ხელახლა გახსნა:
ხელახლა გახსენით ლიპიდური ფენა 10 mL დიეთილის ეთერში უკუფაზური ვესიკულების წარმოქმნისთვის. - წყალხსნარის ფაზის მომზადება:
შეურიეთ 5 mL PBS ბუფერი (0,1 M, pH 7,4), რომელიც შეიცავს აქტიურ ინგრედიენტს ჩასვლისთვის და 20 mg Tween 80 ორგანულ ფაზასთან (დიეთილის ეთერი გახსნილი ლიპიდებით). - ემულსიის ულტრაბგერითი დამუშავება:
მოათავსეთ w/o ემულსია ყინულის აბაზანაში.
დამუშავეთ ემულსია ულტრაბგერით პრობის ტიპის ულტრაბგერითი დამამუშავებლით UP200Ht 26 kHz-ზე და 50% იმპულსურ რეჟიმში (0,5 ციკლი = 30 წმ ჩართული / 30 წმ გამორთული) და 50% ამპლიტუდით 1 წუთის განმავლობაში. - აქრობა გელის წარმოქმნისთვის:
დააბრუნეთ ულტრაბგერით დამუშავებული ემულსია როტაციულ აქრობის აპარატში.
აქრობეთ ატმოსფერული წნევის პირობებში 40°C-ზე, სანამ გელი არ მიიღება. - ლიპოსომების წარმოქმნა:
გააგრძელეთ გელის აქრობა, დაშალეთ ის ნახევრად გამჭვირვალე სითხედ, რაც მიუთითებს ლიპოსომების წარმოქმნაზე. - საბოლოო ლიპოსომური სუსპენზია:
დაამატეთ კიდევ 5 mL PBS ბუფერი (0,1 M, pH 7,4) ლიპოსომურ სუსპენზიას.
ფრთხილად აურიეთ ნარევი ვორტექსით.
გამოიწვიეთ დიეთილის ეთერის დარჩენილი ორთქლი აზოტის გაზის გამოყენებით. - შენახვა:
შეინახეთ საბოლოო ლიპოსომური სუსპენზია 4°C-ზე მაცივარში საჭიროებამდე.
ეს ინსტრუქციები აღწერს ლიპოსომების მომზადების ეტაპობრივ პროცესს ულტრაბგერითი ჰომოგენიზაციით უკუფაზური აორთქლების მეთოდის გამოყენებით, რაც უზრუნველყოფს მაღალ შიდა წყალხსნარის დატვირთვას და აქტიური ნივთიერების ეფექტურ ჩასვას.
უკუფაზური აორთქლების მეთოდი, განსაკუთრებით პრობის ტიპის ულტრაბგერითი დამუშავების გამოყენებით, არის ლიპოსომების მომზადების ფართოდ გავრცელებული ტექნიკა, განსაკუთრებით მაშინ, როდესაც მიზანია მაღალი შიდა წყალხსნარის დატვირთვა. ეს მეთოდი უფრო ხელსაყრელია, ვიდრე ტრადიციული თხელი ფენის ჰიდრატაციის მეთოდი, რადგან ის საშუალებას იძლევა ლიპოსომებში წყალხსნარის უფრო დიდი რაოდენობა ჩაიდოს.
სამრეწველო ულტრაბგერითი დამუშავების მოწყობილობა UIP2000hdT ლიპოსომების მასშტაბური წარმოებისთვის
პრობის ტიპის ულტრაბგერითი დამუშავების უპირატესობები ლიპოსომების ფორმირებისთვის
- გაუმჯობესებული ერთგვაროვნება: პრობის ტიპის ულტრაბგერითი დამუშავება უზრუნველყოფს მუდმივ ენერგიის შეტანას, რაც იწვევს ლიპოსომების უფრო ერთგვაროვან ზომის განაწილებას.
- გაუმჯობესებული ჩასმა: ულტრაბგერითი დამუშავების დროს მოქმედი მექანიკური ძალები აუმჯობესებენ წამლის ჩასმას, განსაკუთრებით ჰიდროფილური ნაერთებისთვის.
- მასშტაბურობა: მეთოდები მარტივად მასშტაბურდება, რაც მათ შესაფერისს ხდის ლიპოსომების მასშტაბური წარმოებისთვის.
ლიპოსომების გამოყენება წამლის მიწოდებაში
ლიპოსომები, რომლებიც მომზადებულია ემულსიფიკაციის და გამხსნელის აორთქლების მეთოდებით პრობის ტიპის ულტრაბგერითი დამუშავების გამოყენებით, შესაფერისია წამლის მიწოდების სხვადასხვა დანიშნულებისთვის, მათ შორის:
- მიმართული წამლის მიწოდება: ლიპოსომების ფუნქციონალიზაცია სპეციფიკური ლიგანდებით საშუალებას იძლევა მიმართული მიწოდება კონკრეტულ ქსოვილებში ან უჯრედებში.
- კონტროლირებადი გამოყოფა: ლიპიდური ბიშრის სტრუქტურა საშუალებას იძლევა წამლის კონტროლირებადი გამოყოფის, რაც ზრდის თერაპიულ ეფექტურობას.
- მრავალფეროვნება: ეს მეთოდები მოიცავს თერაპიული აგენტების ფართო სპექტრს, მცირე მოლეკულებიდან უფრო დიდ ბიომოლეკულებამდე, როგორიცაა ცილები და ნუკლეინის მჟავები.
უკუფაზური აორთქლების მეთოდი განსაკუთრებით ცნობილია მისი უფრო მაღალი შიდა წყალხსნარის დატვირთვით თხელი ფენის ჰიდრატაციის მეთოდთან შედარებით. ეს მახასიათებელი სასარგებლოა იმ დანიშნულებებისთვის, რომლებიც მოითხოვს ჰიდროფილური წამლების ან სხვა თერაპიული აგენტების მნიშვნელოვან ჩასმას.
უკუფაზური აორთქლების მეთოდი პრობის ტიპის ულტრაბგერითი დამუშავების გამოყენებით არის მდგრადი და ეფექტური ტექნიკა ლიპოსომების მომზადებისთვის. მისი შესაძლებლობა მიაღწიოს უფრო მაღალ შიდა წყალხსნარის დატვირთვას, მას პრეფერირებულ მეთოდად აქცევს ფარმაცევტული დანიშნულებებისთვის, სადაც ჰიდროფილური ნივთიერებების ჩასმის მაქსიმიზაცია კრიტიკულია. გამხსნელის აორთქლების ფრთხილი კონტროლი და ულტრაბგერითი დამუშავების გამოყენება არის ამ მეთოდის წარმატების საწინდარი, რაც იწვევს მაღალი ხარისხის ლიპოსომების წარმოებას, რომლებიც შესაფერისია სხვადასხვა თერაპიული დანიშნულებისთვის.
იპოვეთ სწორი ულტრაბგერითი დამუშავების მოწყობილობა თქვენი ლიპოსომების წარმოებისთვის
Hielscher Ultrasonics გთავაზობთ პრობის ტიპის ულტრაბგერითი დამუშავების მოწყობილობების ფართო პროდუქციულ დიაპაზონს ლიპოსომების ეფექტური წარმოებისთვის, რაც იწვევს ბიოაქტიური მოლეკულების მაღალ ჩასმის ეფექტურობას და მაღალ დატვირთვის ტევადობას.
თქვენ შეგიძლიათ გამოიყენოთ Hielscher-ის ულტრაბგერითი დამუშავების მოწყობილობები ლიპოსომების მომზადების სხვადასხვა გზისთვის, როგორიცაა აქ აღწერილი უკუფაზური აორთქლების ტექნიკა, ემულსიფიკაციის მეთოდი და თხელი ფენის მეთოდი.
გაიგეთ მეტი თხელი ფენის მეთოდით ულტრაბგერითი ლიპოსომების მომზადების შესახებ!
გაიგეთ მეტი ულტრაბგერითად მომზადებული ლიპოსომების შესახებ, რომლებიც ჩასმულია
- მაღალი ეფექტურობა
- თანამედროვე ტექნოლოგია
- საიმედოობა და მდგრადობა
- მორგებადი, ზუსტი პროცესის კონტროლი
- პარტიული და ხაზოვანი
- ნებისმიერი მოცულობისთვის
- ინტელექტუალური პროგრამული უზრუნველყოფა
- მუშა ფუნქციები (მაგ., პროგრამირებადი, მონაცემთა პროტოკოლირება, დისტანციური მართვა)
- მარტივი და უსაფრთხო ექსპლუატაცია
- დაბალი მომსახურება
- CIP (ადგილზე გაწმენდა)
დიზაინი, წარმოება და კონსულტირება – ხარისხი დამზადებულია გერმანიაში
Hielscher-ის ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორები ცნობილია თავისი უმაღლესი ხარისხისა და დიზაინის სტანდარტებით. მდგრადობა და მარტივი ექსპლუატაცია საშუალებას გვაძლევს, ჩვენი ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორები მარტივად ინტეგრირდეს სამრეწველო ობიექტებში. Hielscher-ის ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორები მარტივად ეგუებიან მკაცრ პირობებსა და მოთხოვნად გარემოს.
Hielscher Ultrasonics არის ISO სერტიფიცირებული კომპანია, რომელიც განსაკუთრებულ მნიშვნელობას ანიჭებს მაღალი წარმადობის ულტრაბგერით ჰომოგენიზატორებს, რომლებიც გამოირჩევიან თანამედროვე ტექნოლოგიითა და მოხმარების სიმარტივეთი. რა თქმა უნდა, Hielscher-ის ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორები შეესაბამება CE სტანდარტებს და აკმაყოფილებენ UL, CSA და RoHs მოთხოვნებს.
ქვემოთ მოცემული ცხრილი გიჩვენებთ ჩვენი ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორების დაახლოებითი დამუშავების სიმძლავრის მაჩვენებლებს:
| პარტიის მოცულობა | მოცულობითი ხარჯი | რეკომენდებული მოწყობილობები |
|---|---|---|
| 0,5-დან 1,5mL-მდე | n.a. | VialTweeter |
| 1-დან 500mL-მდე | 10-დან 200mL/min-მდე | UP100H |
| 10-დან 2000mL-მდე | 20-დან 400mL/min-მდე | UP200Ht, UP400St |
| 0,1-დან 20L-მდე | 0,2-დან 4L/min-მდე | UIP2000hdT |
| 10-დან 100L-მდე | 2-დან 10L/min-მდე | UIP4000hdT |
| 15-დან 150L-მდე | 3-დან 15L/min-მდე | UIP6000hdT |
| 15-დან 150L-მდე | 3-დან 15L/min-მდე | UIP6000hdT |
| n.a. | 10-დან 100L/min-მდე | UIP16000 |
| n.a. | მეტი | კლასტერი UIP16000 |
დაგვიკავშირდით! / დაგვისვით შეკითხვა!
ლიტერატურა / რეფერენსები
- Marco Paini, Sean Ryan Daly, Bahar Aliakbarian, Ali Fathi, Elmira Arab Tehrany, Patrizia Perego, Fariba Dehghani, Peter Valtchev (2015): An efficient liposome based method for antioxidants encapsulation. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Volume 136, 2015. 1067-1072.
- Yao, X., Bunt, C., Cornish, J., Quek, S.-Y. and Wen, J. (2014): Preparation, Optimization and Characterization of Bovine Lactoferrin-loaded Liposomes and Solid Lipid Particles Modified by Hydrophilic Polymers Using Factorial Design. Chemical Biology and Drug Design 83, 2014. 560-575.
- Seyedeh Parinaz Akhlaghi, Iris Renata Ribeiro, Ben J. Boyd, Watson Loh (2016): Impact of preparation method and variables on the internal structure, morphology, and presence of liposomes in phytantriol-Pluronic® F127 cubosomes. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Volume 145, 2016. 845-853.
საინტერესო ფაქტები
რა არის ლიპოსომები?
ლიპოსომები არის სფერული ვეზიკულები ლიპიდური ორშრიანი მემბრანით, რომლებიც გამოიყენება ნაერთების ჩასასვამად. ისინი მზადდება ხსნარში, რომელიც შეიცავს ჩასასვამ ნაერთს. ჰიდროფილური ნაერთებისთვის, როგორიცაა ცილები, გამოიყენება წყალხსნარი, ხოლო ჰიდროფობური მოლეკულები ჩასმულია ლიპიდებთან შერეულ ორგანულ გამხსნელებში. ეს მრავალფეროვნება ლიპოსომებს ღირებულს ხდის წამლის მიწოდებისა და სხვა ბიომედიცინური გამოყენებებისთვის.
რა არის უკუფაზური აორთქლების მეთოდი ლიპოსომების მომზადებისთვის?
უკუფაზური აორთქლების მეთოდი ლიპოსომების მომზადებისთვის გულისხმობს ლიპიდების გახსნას ქლოროფორმ/მეთანოლის ნარევში და თხელი ლიპიდური ფენის წარმოქმნას როტაციული აორთქლების გზით. ეს ფენა შემდეგ ხელახლა იხსნება დიეთილის ეთერში უკუფაზური ვეზიკულების შესაქმნელად. აქტიური ნივთიერებისა და Tween 80-ის შემცველი წყალხსნარი ერევა ორგანულ ფაზას, რის შედეგადაც წარმოიქმნება წყალი-ზეთში ტიპის ემულსია. ემულსია მუშავდება ულტრაბგერით ზონდური ტიპის სონიკატორის გამოყენებით, რასაც მოსდევს როტაციული აორთქლება გელის მისაღებად, რომელიც საბოლოოდ ლიპოსომებს წარმოქმნის დამატებითი აორთქლებისას. საბოლოო სუსპენზია მზადდება PBS ბუფერის დამატებით და აზოტის გაზის გამოყენებით ნარჩენი გამხსნელების მოცილებით, რის შედეგადაც მიიღება ლიპოსომები, რომლებიც ინახება 4°C-ზე.
რა გავლენა აქვს ულტრაბგერით დამუშავებას ლიპოსომებზე?
ულტრაბგერითი დამუშავება გავლენას ახდენს ლიპოსომებზე ულტრაბგერითი ტალღების გამოყენებით ლიპიდური და წყალხსნარის ფაზების დასაშლელად და შესარევად, რაც ხელს უწყობს ჰომოგენული დისპერსიის წარმოქმნას. ეს პროცესი ხელს უწყობს ლიპოსომების ზომისა და ერთგვაროვნების კონტროლს და ხელს უშლის გადახურებას ენერგიის ინტერვალური იმპულსების საშუალებით. ულტრაბგერითი დამუშავებით გამოწვეული კონტროლირებადი კავიტაცია უზრუნველყოფს აქტიური ნივთიერებების ეფექტურ ინკაფსულაციას ლიპოსომებში.
რა არის ფაზური გადასვლა ლიპოსომებში?
ფაზური გადასვლა ლიპოსომებში გულისხმობს ტემპერატურით გამოწვეულ ცვლილებას ლიპიდის ფიზიკურ მდგომარეობაში. ფაზური გადასვლის ტემპერატურა არის კონკრეტული ტემპერატურა, რომელზეც ლიპიდები გადადიან მოწესრიგებული გელის ფაზიდან, სადაც ნახშირწყალბადოვანი ჯაჭვები სრულად გაშლილია და მჭიდროდ არის შეკრული, მოუწესრიგებელ თხევად-კრისტალურ ფაზაში, სადაც ნახშირწყალბადოვანი ჯაჭვები ქაოსურად არის ორიენტირებული და ფლუიდური ხდება. ეს გადასვლა გავლენას ახდენს ლიპოსომების სტაბილურობაზე, განვლადობასა და ჩასმულ ნივთიერებებთან ურთიერთქმედებაზე.
რა არის ექსტრუზიის მეთოდი ლიპოსომების მომზადებისთვის?
ზოგჯერ თხელი ფენის ჰიდრატაციის მეთოდს ასევე ექსტრუზიის მეთოდს უწოდებენ, რადგან თხელი ფენის ჰიდრატაციის ეტაპს მოსდევს ექსტრუზიის ეტაპი. ექსტრუზიის დროს ლიპოსომები გაივლიან პოლიკარბონატის მემბრანებში ჰომოგენული მცირე ლიპოსომების მისაღებად. ექსტრუზიის ალტერნატივად, ლიპოსომები ხშირად მცირდება ულტრაბგერითი დამუშავების გზით.
რა არის ლიპოსომების ულტრაბგერითი დამუშავების მეთოდი?
ულტრაბგერითი დამუშავება გამოიყენება ლიპოსომების ფორმირების სხვადასხვა მეთოდში. ულტრაბგერითი დამუშავება გამოიყენება ლიპიდებისა და გამხსნელების ემულსიფიკაციისთვის, ლიპიდური ფენის რეჰიდრატაციისთვის და ლიპოსომების ზომის შემცირებისთვის. უკუფაზური აორთქლების მეთოდისთვის, ლიპიდები ულტრაბგერით ემულსირდება წყლიან ფაზასთან. თხელი ფენის მეთოდისთვის, გამშრალი ლიპიდური ფენა რეჰიდრატირდება სონიკატორის გამოყენებით მრავალშრიანი ვეზიკულების სუსპენზიის შესაქმნელად. ლიპოსომების მომზადების მრავალი მეთოდი იყენებს ულტრაბგერით დამუშავებას ჩამოყალიბებული ლიპოსომების შემდგომი ზომის შემცირებისთვის. აქ, ულტრაბგერითი დამუშავება იძლევა ერთგვაროვნად მცირე და სტაბილურ ლიპოსომებს, რომლებიც შესაფერისია სხვადასხვა გამოყენებისთვის.
Hielscher Ultrasonics აწარმოებს მაღალი წარმადობის ულტრაბგერით ჰომოგენიზატორებს ლაბორატორიული დან სამრეწველო ზომამდე.

