HPLC ანალიზის გაუმჯობესება სანდო ნიმუშის მომზადებით
მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფია (HPLC) რთულ მატრიცებში ნაერთების იდენტიფიკაციისა და რაოდენობრივი განსაზღვრის ერთ-ერთ უმნიშვნელოვანეს ანალიტიკურ ტექნიკად რჩება. ფარმაცევტული ხარისხის კონტროლიდან დაწყებული, გარემოს მონიტორინგითა და საკვების ანალიზით დამთავრებული, HPLC მეთოდები ფასდება მათი მგრძნობელობის, სელექციურობისა და რეპროდუცირებადობის გამო. თუმცა, ქრომატოგრაფიული მონაცემების სანდოობა მნიშვნელოვნად არის დამოკიდებული ერთ მნიშვნელოვან ეტაპზე: HPLC ნიმუშის მომზადებაზე.
კვლევა და ნიმუშის მომზადების რუტინები აჩვენებს, რომ ულტრაბგერითი ექსტრაქცია და ნიმუშის მომზადება მნიშვნელოვნად აუმჯობესებს HPLC ანალიზის ეფექტურობას, სიზუსტეს და სიჩქარეს. მატრიცების დაშლისა და ანალიტის გამხსნელებში გადატანის გასაძლიერებლად ულტრაბგერითი ენერგიის გამოყენებით, ლაბორატორიებს შეუძლიათ მიიღონ უფრო მაღალი აღდგენა, უფრო მოკლე ექსტრაქციის დრო და უფრო რეპროდუცირებადი ანალიტიკური შედეგები.
რატომ არის ნიმუშის მომზადება მნიშვნელოვანი HPLC-ში
ბევრ ანალიტიკურ სამუშაო პროცესში, ნიმუშის მატრიცა – როგორიცაა მცენარეული მასალა, ბიოლოგიური ქსოვილი, ნიადაგი ან წყალი – შეიცავს ნაერთების რთულ ნარევებს, რომლებსაც შეუძლიათ ხელი შეუშალონ ქრომატოგრაფიულ გამოყოფას. ამიტომ, საჭიროა ნიმუშის ეფექტური მომზადება ანალიტების იზოლირებისთვის, ხელისშემშლელი ნივთიერებების მოსაშორებლად და სამიზნე ნაერთების კონცენტრირებისთვის HPLC სისტემაში შეყვანამდე.
ტრადიციული ექსტრაქციის ტექნიკა ხშირად მოიცავს ხანგრძლივ პროცედურებს, ორგანული გამხსნელების დიდ მოცულობას და გაწმენდის მრავალ ეტაპს. ამ მეთოდებს შეუძლიათ ცვალებადობის შემოტანა, ოპერაციული ხარჯების გაზრდა და ანალიზის საერთო დროის გახანგრძლივება.
ულტრაბგერითი ნიმუშის მომზადება ეფექტურ ალტერნატივას გვთავაზობს. ულტრაბგერითი მეთოდით მაღალი სიხშირის აკუსტიკურ ენერგიას თხევად გარემოში შეჰყავს, რაც მიკროსკოპული კავიტაციის ბუშტებს წარმოქმნის. როდესაც ეს ბუშტები კოლაფსირდება, ისინი წარმოქმნიან ლოკალიზებულ ძვრის ძალებს და მიკროშერევის ეფექტებს, რომლებიც არღვევენ მყარ მატრიცებს და აჩქარებენ მასის გადაცემას. ეს პროცესი მკვეთრად ზრდის ექსტრაქციის ეფექტურობას.
UIP400MTP მაღალი გამტარიანობის sonicator ავტოსემპლერის ფლაკონებისთვის განკუთვნილი მილის თაროთი
სამეცნიერო მტკიცებულება: ულტრაბგერითი გამოსხივება აუმჯობესებს ანალიტიკურ მუშაობას
რამდენიმე რეცენზირებულმა კვლევამ აჩვენა ულტრაბგერითი მოპოვების უპირატესობები HPLC სამუშაო პროცესებში.
მაგალითად, წყლის ნიმუშებში პესტიციდების ნარჩენების მონიტორინგისთვის შემუშავებულ მეთოდში გამოყენებული იყო ულტრაბგერითი მეთოდით (LC-MS/MS) ანალიზთან ერთად ულტრაბგერითი მეთოდით (LC-MS/MS) ანალიზზე მუშაობა კარბარილ პესტიციდების კონცენტრაციის დასადგენად. ამ მიდგომით, ქრომატოგრაფიულ ანალიზამდე წყლის ნიმუშები ექსტრაგირებული იქნა აცეტონიტრილით ულტრაბგერითი დამუშავების ქვეშ. მეთოდმა მიაღწია ძლიერ ანალიტიკურ მაჩვენებლებს, მათ შორის აღდგენას 89.53%-დან 101.72%-მდე, რაც ადასტურებს ულტრაბგერითი ნიმუშის მომზადების პროცედურის სიზუსტესა და სანდოობას.
ულტრაბგერითი ექსტრაქციის საფეხურმა შესაძლებელი გახადა ანალიტების ეფექტურად გადატანა წყლიანი მატრიციდან ორგანულ გამხსნელში, რამაც შეამცირა გამხსნელის მოხმარება და აღმოფხვრა ფართომასშტაბიანი გაწმენდის პროცედურების საჭიროება. ვალიდირებულმა ანალიტიკურმა მეთოდმა აჩვენა შესანიშნავი წრფივობა, სიზუსტე და რაოდენობრივი განსაზღვრის ლიმიტები, რაც ხაზს უსვამს ულტრაბგერითი დამუშავების ეფექტურობას თანამედროვე ქრომატოგრაფიულ სამუშაო პროცესებში. (შდრ. რუდანი და სხვ., 2018)
კიდევ ერთ კვლევაში გამოყენებული იქნა ულტრაბგერითი მატრიცული მყარი ფაზის დისპერსია (UA-MSPD) ზეთისხილის ფოთლებში ოლეუროპეინის დასადგენად HPLC ანალიზის გამოყენებით. ამ ტექნიკის გამოყენებით, მცენარის ფხვნილი და სორბენტის მასალა შერეული იყო და შემდეგ ელუირების ეტაპზე ულტრაბგერითი ტალღების ზემოქმედების ქვეშ იმყოფებოდა. ულტრაბგერითი თერაპია აძლიერებდა ანალიტის დესორბციას სორბენტის ზედაპირიდან და ამავდროულად აუმჯობესებდა ნიმუშის მატრიციდან ექსტრაქციას. (შდრ. რაშიდიპური და ჰეიდარი, 2018)
ოპტიმიზებულმა ულტრაბგერითმა პროცედურამ მნიშვნელოვანი ანალიტიკური გაუმჯობესება გამოიწვია, მათ შორის:
- ხაზოვანი კალიბრაციის მრუდები R² = 0.9979-ით
- აღმოჩენის ზღვრები 0.03 მკგ/მლ⁻¹-მდე დაბალია
- აღდგენის მაჩვენებლები 90.2%-დან 96.7%-მდე
ეს შედეგები ადასტურებს, რომ ულტრაბგერითი დახმარებით ექსტრაქცია არა მხოლოდ აჩქარებს ნიმუშის მომზადებას, არამედ ზრდის ექსტრაქციის მოსავლიანობას კლასიკურ მატრიცულ მყარფაზიან დისპერსიულ ტექნიკასთან შედარებით.
ზონდის ტიპის sonicator UP200St HPLC ნიმუშის მომზადებისთვის
HPLC-სთვის ულტრაბგერითი ნიმუშის მომზადების ძირითადი უპირატესობები
ანალიტიკურ ლაბორატორიებში ულტრაბგერითი მოპოვების მზარდი გამოყენება რამდენიმე გაზომვადი სარგებლით არის განპირობებული.
- უფრო მაღალი ექსტრაქციის ეფექტურობა
აკუსტიკური კავიტაცია შლის მყარ მატრიცებს და აუმჯობესებს გამხსნელის შეღწევადობას. ეს აძლიერებს ანალიტის გამოყოფას და ზრდის აღდგენის მაჩვენებლებს, განსაკუთრებით რთულ ნიმუშებში არსებული კვალის დონის ნაერთებისთვის. - შემცირებული ნიმუშის მომზადების დრო
ულტრაბგერითი ექსტრაქციით ნიმუშის მომზადება ხშირად წამებში ან წუთებში შეიძლება დასრულდეს. მაგალითად, UA-MSPD-ში ოპტიმიზირებული ულტრაბგერითი ექსტრაქციის პარამეტრებით, ანალიტის ეფექტური აღდგენა დაახლოებით 30 წამიან ულტრაბგერით დამუშავებაში მიიღწევა, რაც აჩვენებს, თუ რამდენად მკვეთრად შეიძლება დაჩქარდეს ანალიზის სამუშაო პროცესები. - გამხსნელის დაბალი მოხმარება
რადგან ულტრაბგერა აძლიერებს მასის გადაცემას, როგორც წესი, საჭიროა გამხსნელის მცირე მოცულობები. გამხსნელის გამოყენების შემცირება აუმჯობესებს ლაბორატორიის მდგრადობას და ამცირებს ოპერაციულ ხარჯებს. - გაუმჯობესებული რეპროდუცირებადობა
ულტრაბგერითი ენერგიის ერთგვაროვანი განაწილება უზრუნველყოფს ნიმუშის თანმიმდევრულ დარღვევას და ექსტრაქციას რეპლიკაციებს შორის, რაც იწვევს ანალიტიკური გაზომვების უკეთეს სიზუსტეს. - თავსებადობა თანამედროვე ქრომატოგრაფიულ მეთოდებთან
ულტრაბგერითი ექსტრაქცია ადვილად ინტეგრირდება HPLC, UHPLC და LC-MS სისტემებთან, რაც მას მაღალი გამტარუნარიანობის ანალიტიკურ გარემოში გამოსადეგს ხდის.
ფენოლური ნაერთების HPLC ქრომატოგრამა Annona muricata-ს ფოთლების ულტრაბგერითი იზოლირებული ექსტრაქტიდან ულტრაბგერითი აპარატის UP400S გამოყენებით.
(შესწავლა და გრაფიკა: © Nolasco-González et al., 2022)
HPLC ნიმუშის მომზადების პრაქტიკული სონიკაციის გადაწყვეტილებები
ულტრაბგერითი ექსტრაქციის დანერგვის ლაბორატორიებისთვის, Hielscher-ის სონიკატორები უზრუნველყოფენ პარამეტრების, როგორიცაა ამპლიტუდა, დრო და პულსის რეჟიმი, ზუსტ კონტროლს. ამიტომ, Hielscher-ის ლაბორატორიული სონიკატორები განსაკუთრებით შესაფერისია ანალიტიკური ლაბორატორიებისთვის.
აირჩიეთ ყველაზე შესაფერისი ლაბორატორიული სონიკატორი თქვენი HPLC ნიმუშებისთვის
| სონიკატორის მოდელი | HPLC-ის უპირატესობები | HPLC ნიმუშის მომზადებისას საუკეთესო გამოყენება |
| VialTweeter Multi-Tube Sonicator |
• იდენტური ულტრაბგერითი ენერგიით 10-მდე დალუქული ფლაკონის ერთდროული ულტრაბგერითი დამუშავება • სტერილური: ჯვარედინი დაბინძურება არ ხდება, რადგან ნიმუშები დახურული რჩება • მაღალი რეპროდუცირებადობის ექსტრაქციის პირობები სხვადასხვა პარტიებს შორის • ეფექტური კავიტაცია მცირე მოცულობის ანალიტიკური ნიმუშებისთვის |
• გარემოსდაცვითი, საკვების ან ფარმაცევტული ნიმუშების მაღალი გამტარუნარიანობის მომზადება • ანალიტის კვალის ექსტრაქცია HPLC, UHPLC ან LC-MS ანალიზამდე • სტანდარტიზებული სამუშაო პროცესები, რომლებიც მოითხოვს მრავალი ნიმუშის იდენტურ დამუშავებას |
| მიკროფირფიტის სონიკატორი UIP400MTP |
• მთლიანი მიკროფირფიტების უკონტაქტო ულტრაბგერითი დამუშავება (96-ჭაბურღილის, 384-ჭაბურღილის ფორმატები) • ულტრაბგერითი ენერგიის ერთგვაროვანი განაწილება ყველა ჭაში • ანალიტიკური სამუშაო პროცესებისთვის ავტომატიზაციისა და რობოტული ინტეგრაციის საშუალებას იძლევა • მაღალი გამტარუნარიანობა ამპლიტუდისა და ულტრაბგერითი გამოსხივების დროის ზუსტი კონტროლით |
• მაღალი გამტარუნარიანობის UHPLC სკრინინგის სამუშაო პროცესები • ფარმაცევტული ნაერთების ბიბლიოთეკები და მეტაბოლომიკის ნიმუშების მომზადება • ფირფიტებზე დაფუძნებული ექსტრაქცია LC-MS ან UHPLC ანალიტიკური მილსადენებისთვის |
| ლაბორატორიული სონიკატორები მიკროწვერით (პირდაპირი სონიკაცია) |
• მაქსიმალური ულტრაბგერითი ინტენსივობა მატრიცის ეფექტური დაშლისთვის • ანალიტების ძალიან სწრაფი ექსტრაქცია მყარი, ბლანტი ან ჰეტეროგენული ნიმუშებიდან • რეგულირებადი ამპლიტუდა და პულსის პარამეტრები ოპტიმალური ექსტრაქციის პირობებისთვის • მაღალი კავიტაციის ენერგია აუმჯობესებს ანალიტის აღდგენას და ექსტრაქციის მოსავლიანობას |
• ექსტრაქცია რთული მატრიცებიდან, როგორიცაა მცენარეული ქსოვილი, საკვების ნიმუშები ან პოლიმერები • ჰომოგენიზაცია SPE-მდე, ფილტრაციამდე ან სითხე-სითხის ექსტრაქციამდე • ულტრაბგერითი HPLC ნიმუშის მომზადების მეთოდის შემუშავება |
| ჭიქის რქა (“მაღალი ინტენსივობის აბაზანა” ჭიქებისა და მილებისთვის) |
• არაპირდაპირი ულტრაბგერითი გამოსხივება ხელს უშლის ზონდის დაბინძურებას • ერთგვაროვანი ულტრაბგერითი ველი ერთდროულად რამდენიმე მილისთვის • იდეალურია სტერილური, სახიფათო ან აქროლადი ნიმუშებისთვის, რომლებიც დალუქული უნდა დარჩეს • ამარტივებს მართვას ძლიერი კავიტაციის ენერგიის შენარჩუნებით |
• დალუქულ ცენტრიფუგის მილებში რამდენიმე HPLC ნიმუშის პარალელური ექსტრაქცია • ბიოლოგიური, ფარმაცევტული ან გარემოსდაცვითი ნიმუშების მომზადება • სამუშაო პროცესები, სადაც საჭიროა დაბინძურებისგან თავისუფალი არაპირდაპირი ულტრაბგერითი დამუშავება |
ანალიტიკური ქიმიის სამეცნიერო მნიშვნელობა
რადგან ანალიტიკური ქიმია უფრო სწრაფი და მდგრადი ლაბორატორიული პრაქტიკისკენ მიიწევს, ულტრაბგერითი ნიმუშების მომზადება ძლიერ, ხელშემწყობ ტექნოლოგიად იქცა. ულტრაბგერითი მეთოდით სონიკაცია ხელს უწყობს სწრაფი ანალიტიკური მეთოდების შემუშავებას გამხსნელის დაბალი მოხმარებით, გაუმჯობესებული ექსტრაქციის ეფექტურობით და საიმედო ვალიდაციის პარამეტრებით.
ულტრაბგერითი ექსტრაქციის შესახებ ლიტერატურის მზარდი რაოდენობა აჩვენებს, რომ სონიკაციით დახმარებული HPLC ნიმუშის მომზადება მხოლოდ მოხერხებულობა არ არის. – ეს არის მეცნიერულად დადასტურებული მიდგომა, რომელიც აუმჯობესებს ანალიტიკურ ეფექტურობას. ულტრაბგერითი ექსტრაქციისა და თანამედროვე ქრომატოგრაფიული ტექნიკის შერწყმით, ლაბორატორიებს შეუძლიათ მიაღწიონ ანალიტების კვალის საიმედო აღმოჩენას სულ უფრო რთულ ნიმუშ მატრიცებში.
სონიკაციით გაძლიერებული HPLC სამუშაო პროცესები
ანალიტიკური ინსტრუმენტებისა და ნიმუშების მომზადების ტექნოლოგიების უწყვეტი განვითარების გათვალისწინებით, ულტრაბგერითი ექსტრაქცია, სავარაუდოდ, კიდევ უფრო დიდ როლს შეასრულებს ქრომატოგრაფიულ ლაბორატორიებში. მისი უნარი, გაამარტივოს სამუშაო პროცესები, გააუმჯობესოს მონაცემთა ხარისხი და შეამციროს გარემოზე ზემოქმედება, კარგად შეესაბამება თანამედროვე ანალიტიკური მეცნიერების მზარდ მოთხოვნებს.
ანალიტიკური ქიმიკოსებისა და სამრეწველო ლაბორატორიებისთვის, რომლებიც ცდილობენ HPLC ნიმუშის მომზადების ოპტიმიზაციას, ულტრაბგერითი ექსტრაქცია გთავაზობთ დადასტურებულ, მასშტაბირებად და სამეცნიერო თვალსაზრისით სანდო გადაწყვეტას. ულტრაბგერითი მეთოდის ნიმუშების მომზადების რუტინულ პროტოკოლებში ინტეგრირებით, ლაბორატორიებს შეუძლიათ მნიშვნელოვნად გააუმჯობესონ როგორც ქრომატოგრაფიული ანალიზის ეფექტურობა, ასევე სანდოობა.
დიზაინი, წარმოება და კონსულტაცია – ხარისხი დამზადებულია გერმანიაში
Hielscher ულტრაბგერითები ცნობილია მათი უმაღლესი ხარისხისა და დიზაინის სტანდარტებით. გამძლეობა და მარტივი მუშაობა საშუალებას იძლევა ჩვენი ულტრაბგერითი აპარატების გლუვი ინტეგრაცია სამრეწველო ობიექტებში. უხეში პირობები და მომთხოვნი გარემო ადვილად უმკლავდება Hielscher ულტრაბგერითებს.
Hielscher Ultrasonics არის ISO სერთიფიცირებული კომპანია და განსაკუთრებული აქცენტი კეთდება მაღალი ხარისხის ულტრაბგერაზე, რომელიც აღჭურვილია უახლესი ტექნოლოგიით და მომხმარებლის კეთილგანწყობით. რა თქმა უნდა, Hielscher ულტრაბგერითები შეესაბამება CE და აკმაყოფილებს UL, CSA და RoHs მოთხოვნებს.
ლიტერატურა / ლიტერატურა
- M. Rashidipour and R. Heydari (2018): Ultrasonic-Assisted Matrix Solid-Phase Dispersion and High-Performance Liquid Chromatography as an Improved Methodology for Determination of Oleuropein from Olive Leaves. Analytical and Bioanalytical Chemistry Research 52, 2018. 307-316.
- Roudani, A.; Rachid, Mamouni; Nabil, Saffaj; Laknifli, A.; Gharby, Said; Noureddine, El Baraka; Bakka, Abdelhamid; Abdellah, Faouzi (2018): Method validation in the determination of Carbaryl pesticide in water samples using sonication and liquid chromatography-tandem mass spectrometry. JMES 8 (7), 2017. 2409-2420.
- Bimakr M., Ganjloo A., Zarringhalami S., Ansarian E. (2017): Ultrasound-assisted extraction of bioactive compounds from Malva sylvestris leaves and its comparison with agitated bed extraction technique. Food Science and Biotechnology 2017 Nov 30;26(6):1481-1490.
ხშირად დასმული შეკითხვები
რა არის HPLC?
მაღალეფექტური თხევადი ქრომატოგრაფია (HPLC) არის ანალიტიკური გამოყოფის ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება ნარევში არსებული კომპონენტების იდენტიფიცირების, რაოდენობრივი განსაზღვრისა და გაწმენდისთვის. HPLC-ში, თხევადი მობილური ფაზა გახსნილ ანალიზებს მაღალი წნევის ქვეშ სტაციონარული ფაზით სავსე სვეტის მეშვეობით გადააქვს. ანალიზებს, სტაციონარულ და მოძრავ ფაზას შორის ურთიერთქმედების განსხვავებები იწვევს ნაერთების გამოყოფას სვეტში გავლისას. დეტექტორები, როგორიცაა UV-Vis, ფლუორესცენცია ან მას-სპექტრომეტრია, ზომავენ გამოყოფილ ნაერთებს, რაც საშუალებას იძლევა ზუსტი თვისებრივი და რაოდენობრივი ანალიზის.
თხევადი ქრომატოგრაფიის რა ტიპები არსებობს?
თხევადი ქრომატოგრაფია შეიძლება კლასიფიცირდეს ანალიტს, სტაციონარულ ფაზასა და მობილურ ფაზას შორის გამოყენებული გამოყოფის მექანიზმის მიხედვით. ყველაზე გავრცელებული ტიპებია შებრუნებული ფაზის ქრომატოგრაფია, სადაც არაპოლარული სტაციონარული ფაზა ყოფს ნაერთებს ჰიდროფობიური ურთიერთქმედებების საფუძველზე; ნორმალური ფაზის ქრომატოგრაფია, რომელიც იყენებს პოლარულ სტაციონარულ ფაზას და ყოფს ნაერთებს პოლარობის მიხედვით; იონ-გაცვლითი ქრომატოგრაფია, სადაც დამუხტული სტაციონარული ფაზები ყოფენ ანალიტებს იონური ურთიერთქმედებების საფუძველზე; და ზომის გამორიცხვის ქრომატოგრაფია, რომელიც ყოფს მოლეკულებს მათი ჰიდროდინამიკური ზომისა და მოლეკულური წონის მიხედვით. დამატებითი სპეციალიზებული მეთოდებია აფინური ქრომატოგრაფია და ჰიდროფილური ურთიერთქმედების ქრომატოგრაფია (HILIC), რომლებიც მიზნად ისახავს სპეციფიკურ მოლეკულურ ურთიერთქმედებებს ან პოლარულ ნაერთებს.
რომელი ფლაკონები გამოიყენება HPLC-სთვის?
HPLC ანალიზებში, როგორც წესი, გამოიყენება პატარა მინის ან პოლიმერული ფლაკონები, რომლებიც შექმნილია მომზადებული ნიმუშების შესანახად ქრომატოგრაფიულ სისტემაში შეყვანამდე. ყველაზე გავრცელებული ფორმატია 2 მლ ავტოსემპლერის ფლაკონი, რომელიც თავსებადია HPLC ავტოსემპლერების უმეტესობასთან. ეს ფლაკონები, როგორც წესი, დამზადებულია ბოროსილიკატური მინისგან, რათა უზრუნველყოფილი იყოს ქიმიური წინააღმდეგობა და გამხსნელებთან და ანალიზებთან მინიმალური ურთიერთქმედება. ნიმუშის ტიპის მიხედვით, ფლაკონებს შეიძლება ჰქონდეს ჩანართები დაბალი მოცულობის ნიმუშებისთვის, ხრახნიანი თავსახურით ან დასაკეცი თავსახურით და სეპტები, რომლებიც დამზადებულია ისეთი მასალებისგან, როგორიცაა PTFE/სილიკონი, ნიმუშის მთლიანობის შესანარჩუნებლად.
რა არის ავტოსემპლერის ფლაკონები?
ავტოსემპლერის ფლაკონები წარმოადგენს სპეციალიზებულ ნიმუშის კონტეინერებს, რომლებიც შექმნილია HPLC და UHPLC ინსტრუმენტებში ავტომატური ინექციის სისტემებისთვის. ისინი ინახავენ მომზადებულ ნიმუშის ხსნარს და თავსდება ინსტრუმენტის ავტოსემპლერის უჯრაში, სადაც სისტემა ავტომატურად იღებს განსაზღვრულ მოცულობას ქრომატოგრაფიულ სვეტში ინექციისთვის. ავტოსემპლერის ფლაკონები დამზადებულია ზუსტი ზომებით, რათა უზრუნველყოფილი იყოს რობოტული ნიმუშის ნემსებთან თავსებადობა და მინიმუმამდე იქნას დაყვანილი ნიმუშის აორთქლება, დაბინძურება ან ადსორბცია. მათი დიზაინი საშუალებას იძლევა განმეორებადი, მაღალი გამტარუნარიანობის ანალიზის ჩატარება თანამედროვე ქრომატოგრაფიულ ლაბორატორიებში.
რა არის HPLC-ის ეტაპები?
მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფიის (HPLC) ტიპიური სამუშაო პროცესი შედგება რამდენიმე თანმიმდევრული ნაბიჯისგან, რომლებიც უზრუნველყოფენ ანალიტების საიმედო გამოყოფას და აღმოჩენას.
- პირველ რიგში, ნიმუშის მომზადება ხორციელდება ანალიტის გასახსნელად, ნაწილაკების მოსაშორებლად და ხშირად ნიმუშის მატრიციდან სამიზნე ნაერთების ექსტრაქციის ან კონცენტრირებისთვის. ეს ეტაპი შეიძლება მოიცავდეს ფილტრაციას, განზავებას ან ექსტრაქციის ტექნიკებს, როგორიცაა ულტრაბგერითი ექსტრაქცია, მყარი ფაზის ექსტრაქცია ან სითხე-თხევადი ექსტრაქცია.
- შემდეგ, მომზადებული ნიმუში თავსდება HPLC ფლაკონში და იტვირთება ავტოსემპლერში. ავტოსემპლერი ნიმუშის ზუსტ მოცულობას შეჰყავს მოძრავ მობილურ ფაზაში.
- შემდეგ მობილური ფაზის მიწოდების ეტაპი მაღალი წნევის ტუმბოს გამოყენებით სისტემაში გადააქვს შეყვანილი ნიმუში. მობილური ფაზა ანალიზებს კონტროლირებადი ნაკადის სიჩქარით ატარებს ქრომატოგრაფიული სვეტის მეშვეობით.
- ქრომატოგრაფიული სვეტის შიგნით ხდება გამოყოფა. სვეტი შეიცავს სტაციონარულ ფაზას, რომელიც, როგორც წესი, შეფუთული ნაწილაკებია განსაზღვრული ქიმიური თვისებებით. სვეტში ანალიტების გავლისას, ისინი სხვადასხვაგვარად ურთიერთქმედებენ სტაციონარულ და მოძრავ ფაზასთან, რაც იწვევს მათ სხვადასხვა დროს ელუირებას.
- გამოყოფის შემდეგ, ნაერთები გადის დეტექტორში, როგორიცაა UV-Vis, ფლუორესცენტული ან მას-სპექტრომეტრიული დეტექტორი. დეტექტორი ზომავს ელუირებული ნაერთების არსებობას და კონცენტრაციას და გარდაქმნის სიგნალს ელექტრონულ მონაცემებად.
- და ბოლოს, მონაცემთა შეგროვება და ანალიზი ხორციელდება ქრომატოგრაფიის პროგრამული უზრუნველყოფის გამოყენებით. სისტემა ქმნის ქრომატოგრამას, რომელშიც პიკები შეესაბამება ცალკეულ ნაერთებს. პიკის შეკავების დრო ხელს უწყობს ანალიტების იდენტიფიცირებას, ხოლო პიკის ფართობი ან სიმაღლეები საშუალებას იძლევა მათი კონცენტრაციის რაოდენობრივი განსაზღვრის.
Hielscher Ultrasonics აწარმოებს მაღალი ხარისხის ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორებისგან ლაბორატორია რომ სამრეწველო ზომა.