ულტრაბგერითი ნიმუშების მომზადება THC-ის ანალიზისთვის
- ულტრაბგერითი ექსტრაქცია არის THC-ის წარმოების დადასტურებული მეთოდი, მაგრამ ის ასევე შეიძლება გამოყენებულ იქნას ანალიტიკური მიზნებისთვის.
- ულტრაბგერითი დამუშავება არის ნიმუშების მომზადების საერთო მეთოდი, რომელიც გამოიყენება კანაფის პროდუქტებში THC-ის ჯამური შემცველობის ანალიზისთვის.
- ულტრაბგერითი ექსტრაქცია გამოიყენება ნიმუშებზე TLC, GC და HPLC ანალიზამდე.
ულტრაბგერითი THC-ის ექსტრაქცია
THC, ანუ ტეტრაჰიდროკანაბინოლი (დელტა-9-ტეტრაჰიდროკანაბინოლი), არის ქიმიური ნივთიერება, რომელიც იწვევს მარიხუანას ფსიქოლოგიური ეფექტების უმეტესობას. კანაფის სახეობისთვის ცნობილია 400-ზე მეტი სხვადასხვა ჯიში. კონკრეტული კანაფის ჯიშიდან გამომდინარე, კანაფს შეიძლება ჰქონდეს მხოლოდ 0,3 wt% THC. სხვა ჯიშებში, THC-ის შემცველობა შეიძლება მიაღწიოს 20 wt%-მდე.
ასევე, სხვადასხვა კანაფის პროდუქტები მნიშვნელოვნად განსხვავდება: მარიხუანაში THC-ის საშუალო კონცენტრაცია მერყეობს 1-დან 5%-მდე; ჰაშიშში, THC-ის შემცველობა მერყეობს 5-დან 15%-მდე, ხოლო ჰაშიშის ზეთში ის საშუალოდ 20%-ია. THC რეკრეაციულ დოზებში მარიხუანაში ძალიან ცვალებადია და რაც უფრო დაბალია THC-ის შემცველობა მარიხუანაში, იმდენად მეტი უნდა მოიხმაროს მომხმარებელმა სასურველი ეფექტების განსაცდელად.
ულტრაბგერითი ნიმუშების მომზადება გამოიყენება THC-ის შემცველობის ანალიზისთვის
- რეკრეაციული THC პროდუქტების ხარისხის კონტროლისთვის,
- ფარმაცევტული THC პროდუქტების ხარისხის დადგენისთვის,
- ნარკოტიკული და ბოჭკოვანი კანაფის გარჩევისთვის.
THC-ის ანალიზისთვის, ჩვეულებრივ გამოიყენება შემდეგი ქრომატოგრაფიული მეთოდები: თხელფენოვანი ქრომატოგრაფია (TLC), აირქრომატოგრაფია (GC) და მაღალი ეფექტურობის სითხის ქრომატოგრაფია (HPLC)
ულტრაბგერითი ნიმუშების მომზადების პროტოკოლი TLC ანალიზისთვის
ნიმუშების მომზადება: ნიმუშების მოსამზადებლად გამხმარი მცენარეული მასალა უნდა დაექვემდებაროს მაცერაციას და დაიფქვას ერთგვაროვან ფხვნილად. ულტრაბგერითი ექსტრაქციისთვის ფლაკონში ურევენ კანაფის მცენარის 500mg ფხვნილს და 5mL მეთანოლ-ქლოროფორმის ნარევს (9 : 1 თანაფარდობით). ულტრაბგერითი დამუშავება შეიძლება განხორციელდეს ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორის გამოყენებით მიკრო წვერით, VialTweeter ან ულტრაბგერითი CupHorn. ულტრაბგერითი დამუშავების დრო არის დაახლოებით 5 წთ. შემდეგ, დატოვეთ ნიმუში მინიმუმ 5 წთ. განაზავეთ გამჭვირვალე სუპერნატანტი ექსტრაქციის ნარევით (v/v: 1 : 10). თავისუფალი THC: 1μL TLC-ფილაზე
დეკარბოქსილირება: 100μL ექსტრაქტი აორთქლდება სიმშრალემდე. ნაშთი ცხელდება 180℃-ზე 4 წთ. დაამატეთ 500μL მეთანოლ-ქლოროფორმი (v/v 9 : 1). ულტრაბგერითი დამუშავება 5 წთ. განაზავეთ გამჭვირვალე სუპერნატანტი ექსტრაქციის ნარევით (v/v: 1 : 10).
კალიბრაცია: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC სილიკა გელი F-254, Merck 5729
TLC სკანერი II, პროგრამული უზრუნველყოფა CATS3, Camag Muttenz ელუენტი:
ეთილაცეტატი : ტოლუოლი : ქლოროფორმი = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
პოსტქრომატოგრაფიული დერივატიზაცია: Fast Blue Salt 0,1% 0,1 M NaOH-ში
დენსიტომეტრია 550 nm-ზე
ტეტრაჰიდროკანაბინოლი (Δ9-THC) ანალიზისა და ექსტრაქციისთვის
ულტრაბგერითი ნიმუშების მომზადების პროტოკოლი GC ანალიზისთვის
ნიმუშების მომზადება: გამხმარი მცენარეული მასალა ექვემდებარება მაცერაციას და იფქვება ერთგვაროვან ფხვნილად. ექსტრაქციისთვის ფლაკონში ურევენ კანაფის მცენარის 500mg ფხვნილს და 10mL მეთანოლ-ჰექსანის ნარევს (9 : 1 თანაფარდობით). ულტრაბგერითი დამუშავება შეიძლება განხორციელდეს ზონდური ტიპის ულტრაბგერითი მოწყობილობის გამოყენებით მიკრო წვერით, VialTweeter ან ულტრაბგერითი CupHorn. დაამუშავეთ ნიმუში ულტრაბგერით 15–20 წთ. შეანჯღრიეთ ნიმუში და დატოვეთ მინიმუმ 5 წთ. განაზავეთ გამჭვირვალე სუპერნატანტი ექსტრაქციის ნარევით (v/v 1: 20).
დეკარბოქსილირება: ინსერტში
ინჟექტორის ტემპერატურა 250℃
კალიბრაცია: 5 ng/μL-დან 250 ng/μL-მდე
GC: HP 6890 5973 MSD-ით და 7683 ავტოსამპლერით; ინჟექცია: 1μL, ნაკადის გაყოფის გარეშე მუშაობის დრო: 2 წთ.
კოლონკა: HP-5 MS, 30m, დიამეტრი 250 μm, ფენის სისქე 0,25 μm
აირმატარებელი: He, 35 psi, მუდმივი ხარჯი: 4 mL/min.
ღუმელი: 100℃ 1 წთ.; ტემპერატურის მატება 15℃ /min. 280℃-მდე; 280℃ 5 წთ. MSD: SCAN: m/e 35 – 550
ულტრაბგერითი ნიმუშების მომზადების პროტოკოლი HPLC ანალიზისთვის
ნიმუშების მომზადება (GC ანალიზისთვის მომზადების ანალოგიურად): გამხმარი მცენარეული მასალა ექვემდებარება მაცერაციას და იფქვება ერთგვაროვან ფხვნილად. ექსტრაქციისთვის ფლაკონში ურევენ კანაფის მცენარის 500mg ფხვნილს და 10mL მეთანოლ-ჰექსანის ნარევს (9 : 1 თანაფარდობით). ულტრაბგერითი დამუშავება შეიძლება განხორციელდეს ზონდური ტიპის ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორის გამოყენებით მიკრო წვერით, VialTweeter ან ულტრაბგერითი CupHorn. დაამუშავეთ ნიმუში ულტრაბგერით 15–20 წთ. შეანჯღრიეთ ნიმუში და დატოვეთ მინიმუმ 5 წთ. განაზავეთ გამჭვირვალე სუპერნატანტი ექსტრაქციის ნარევით (v/v 1: 20).
VialTweeter ულტრაბგერითი ნიმუშების მომზადებისთვის
პრეკოლონკა: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
კოლონკა: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
ელუენტი: იზოკრატიული 36% TEAP 25 mmol/L, 64% აცეტონიტრილი კვანტიფიკაცია 210nm-ზე
კალიბრაცია: 0,001 – 0,10 μg/μL
კალიბრაცია: 0,01 – 0,50 μg/μL
რეტენციის დრო: CBD-სთვის: 6,2 წთ.; CBN-სთვის: 8,0 წთ.; THC-სთვის: 9,4 წთ.; THC-A-სთვის: 11,0 წთ
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St მიკრო წვერით ნიმუშის ულტრაბგერითი დამუშავებისთვის
ლიტერატურა/გამოყენებული წყაროები
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Forensisch chemische Analysen von THC haltigem Hanfkraut. Von der DC via GC zur HPLC-Methode. Applica 2006.
ფაქტები, რომელთა ცოდნაც ღირს
მარიხუანა შედგება კანაფის მდედრობითი მცენარის გამხმარი ყვავილებისა და მათ ქვემოთ განლაგებული ფოთლებისა და ღეროებისგან. ეს არის ყველაზე ფართოდ მოხმარებული ფორმა და შეიცავს დაახლოებით 3%-დან 20%-მდე THC-ს. მარიხუანას სპეციალური, ინტენსიური სელექციით მიღებული ფორმების THC-ის შემცველობა 30%-ს აღემატება. მარიხუანა არის საწყისი მასალა THC-ის შემცველი კანაფის პროდუქტების ყველა სხვა სახეობისთვის. ყველაზე უხვად წარმოდგენილი კანაბინოიდის, ტეტრაჰიდროკანაბინოლის მჟავას (THCA), ფსიქოაქტიურ THC-ად გადასაყვანად საჭიროა დეკარბოქსილირების პროცესის დაწყება. ამიტომ კანაფი და მისი ექსტრაქტები უნდა გაცხელდეს ან გაუწყლოვდეს დეკარბოქსილირების გამოსაწვევად.
კიფი გულისხმობს ტრიქომებით მდიდარ ფხვნილს, რომელიც კანაფის ფოთლებისა და ყვავილების გაცრით მიიღება. მას მოიხმარენ ფხვნილის სახით ან წნეხავენ და ჰაშიშის ბრიკეტების დასამზადებლად იყენებენ.
ჰაშიში ან ჰაში არის კონცენტრირებული ფისის ბრიკეტი ან ბურთულა, რომელიც მზადდება ან დაწნეხილი კიფისგან, ან მცენარის ზედაპირიდან ჩამოფხეკილი და ბურთულებად დამრგვალებული ფისისგან. სისუფთავისა და წყაროს მიხედვით მისი ფერი შავიდან ოქროსფერ-ყავისფრამდე მერყეობს. მისი მიღება შეიძლება პერორალურად ან მოწევით, მაგალითად ჩიბუხით, ნარგილით, ბონგით, ბაბლერით, ვაპორაიზერით, ცხელი დანის გამოყენებით, ჯოინთის სახით, კანაფის ყვავილედებთან ან თამბაქოსთან შერევით, ბოთლის საშუალებით კვამლის შესუნთქვით, ან საკვების ინგრედიენტად გამოყენებით.
კანაფის ნაყენი გულისხმობს კანაბინოიდების ექსტრაქტს სპირტში. კანაბინოიდები ექსტრაქტირდება კანაფის მცენარიდან მაღალალკოჰოლური სპირტების (უმეტესად მარცვლეულის სპირტი) გამოყენებით ნაყენის შესაქმნელად.
ჰაშიშის ზეთი არის გამხსნელით ექსტრაქციის შედეგად მიღებული კანაბინოიდების ფისოვანი მატრიცა, რომელსაც გამაგრებული ან ბლანტი მასის ფორმა აქვს. ჰაშიშის ზეთი კანაფის ერთ-ერთი ყველაზე ძლიერი პროდუქტია ფსიქოაქტიური ნაერთის მაღალი შემცველობის გამო. ბოლო დროს სულ უფრო პოპულარული ხდება ბუტანითა და სუპერკრიტიკული ნახშირბადის დიოქსიდით ექსტრაქტირებული ჰაშიშის ზეთის გამოყენება.
ინფუზიები გულისხმობს კანაფის ინფუზიების სხვადასხვა სახეობას, რომლებიც ერთმანეთისგან განსხვავდება მათ მოსამზადებლად გამოყენებული არაქროლადი გამხსნელების ფართო მრავალფეროვნებით. ასეთი ინფუზიის მოსამზადებლად კანაფის მცენარეულ მასალას ურევენ გამხსნელს, შემდეგ წნეხავენ და ფილტრავენ, რათა ზეთები მცენარიდან გამხსნელში გადავიდეს. გამხსნელებად ჩვეულებრივ გამოიყენება კაკაოს კარაქი, რძის კარაქი, საკვები ზეთი, გლიცერინი და კანის დამატენიანებელი საშუალებები.
სამედიცინო მარიხუანა გულისხმობს კანაფის მცენარის გამოყენებას ექიმის მიერ რეკომენდებული მცენარეული თერაპიის სახით, აგრეთვე სინთეზური THC-ისა და კანაბინოიდების გამოყენებას. ასეთი გამოყენება, როგორც წესი, რეცეპტს მოითხოვს, ხოლო გავრცელება ჩვეულებრივ ადგილობრივი კანონებით განსაზღვრულ ჩარჩოებში ხდება. რამდენიმე სამეცნიერო კვლევამ აჩვენა, რომ კანაფის ან მისი წარმოებულების გამოყენება მოქმედებს, მაგალითად, ქიმიოთერაპიით გამოწვეული გულისრევისა და ღებინების, ნეიროპათიური ტკივილისა და გაფანტული სკლეროზის წინააღმდეგ.