Նմուշի պատրաստում ուլտրաձայնային VialTweeter- ի հետ

Վերլուծությունից առաջ նմուշի պատրաստումը կարող է պահանջել տարբեր նախավերլուծական գործընթացներ, ինչպիսիք են հյուսվածքների համասեռացումը, լիզիզացումը, սպիտակուցների արդյունահանումը, ԴՆԹ-ն, ՌՆԹ-ն, օրգանները և ներբջջային այլ նյութերը, լուծարումը և գազազերծումը: VialTweeter- ը եզակի ուլտրաձայնային սարք է, որը միաժամանակ պատրաստում է բազմաթիվ նմուշային խողովակներ `միանգամայն նույն պայմաններում: Փակ փորձանոթների անուղղակի վերամշակման շնորհիվ խուսափում են խաչաձեւ աղտոտումից և նմուշի կորստից:

Ուլտրաձայնային նմուշի պատրաստում

Ուլտրաձայնացումը նմուշի բուժման ընդհանուր տեխնիկա է, որպեսզի նմուշը պատրաստ լինի վերլուծությունների, ինչպիսիք են պոլիմերների շղթայական ռեակցիան (PCR), Western Blots, անալիզներ, մոլեկուլային հաջորդականություն, քրոմատագրություն և այլն: Ուլտրաձայնումը լաբորատորիաներում լայնորեն օգտագործվող տեխնիկա է `նախնական նմուշները բուժելու համար: վերլուծականորեն Sonication- ի հիմնական առավելությունն այն է, որ ուլտրաձայնի աշխատանքի սկզբունքը հիմնված է զուտ մեխանիկական ուժերի վրա: Ուլտրաձայնային լուծույթը և բջիջների խզումը ձեռք են բերվում սոնոմեխանիկական կտրման ուժերի միջոցով, ինչը ուլտրաձայնային առավելություն է տալիս, որ սպիտակուցի արդյունահանման համար օգտագործվող լուծիչները կարող են օգտագործվել նաև լիզի ընթացքում: Ուլտրաձայնային բջիջների խանգարիչները, ինչպիսիք են VialTweeter- ը, կոտրում են բջիջների պատերը / թաղանթները և նպաստում զանգվածի փոխանցմանը բջիջների ներսի և լուծիչի միջև: Դրանով իսկ անալիտը (օրինակ ՝ ԴՆԹ, ՌՆԹ, սպիտակուցներ, օրգաններ և այլն) արդյունավետորեն տեղափոխվում են բջջային մատրիցից լուծիչ: Սա նշանակում է, որ մարման և արդյունահանման քայլերը համընկնում են ուլտրաձայնային բջիջների խափանման գործընթացին, ինչը ուլտրաձայնային քսուկը շատ արդյունավետ է դարձնում: Ավելին, ուլտրաձայնային նմուշի պատրաստումը չի պահանջում լվացող և այլ լիզի ռեակտիվներ, որոնք կարող են փոխել և քայքայել լիզատի կառուցվածքը և հայտնի է մաքրման հետ կապված հետագա խնդիրներով: Լիզի մեկ այլ մեթոդ `ֆերմենտային խանգարումը պահանջում է երկար ինկուբացիոն ժամանակներ և տալիս է հաճախ ոչ վերարտադրվող արդյունքներ: Ուլտրաձայնային նմուշի պատրաստումը հաղթահարում է նմուշի պատրաստման ընդհանուր խնդիրները, ինչպիսիք են հյուսվածքների համասեռացումը, բջիջների խափանումը, լիզիզմը, սպիտակուցների արդյունահանումը և լիզատի լուծումը: Քանի որ ուլտրաձայնային բուժման ինտենսիվությունը կարող է ճշգրտորեն վերահսկվել և ճշգրտվել կենսաբանական նմուշի վրա, խուսափում են դեգրադացիայից և նմուշի կորստից: Ավտոմատ կերպով վերահսկվող և վերահսկվող նմուշի ջերմաստիճանը, զարկերակային ռեժիմը և ձայնազերծման տևողությունը ապահովում են օպտիմալ արդյունքներ:

VialTweeter- ը հատկապես հարմար է լաբորատոր աշխատանքների համար, որոնք պահանջում են միևնույն նմուշների միաժամանակյա պատրաստում նույն պայմաններում: The VialTweeter- ը ուլտրաձայնային բլոկային սոնոտրոդ է, որը կարող է պահել մինչև 10 սրվակ (օրինակ ՝ Eppendorf, centriguge, NUNC խողովակներ, cryo-vials) և դրանք ուժեղ ձայնայնացնում է ճշգրիտ վերահսկվող պայմաններում: Քանի որ ուլտրաձայնային էներգիան զուգակցվում է սրվակների պատերի միջով նմուշային միջավայրի հետ, բուժման ընթացքում սրվակները փակ են մնում: Դրանով լիովին խուսափվում է նմուշի կորստից և խաչաձեւ աղտոտումից:

VialTweeter- ին տեղավորվող սրվակներ և խողովակներ

VialTweeter– ը հարմար է 10 ընդհանուր կոնաձև կամ կլոր հատակով խողովակներ պահելու համար, ինչպիսիք են Eppendorf, ցենտրիֆուգ, կրիո-սրվակներ և տարբեր NUNC սրվակների տեսակներ, բայց անցքերը կարող են հարմարեցվել սրվակի և խողովակի այլ չափսերին ՝ ըստ պահանջի: Տեղեկացրեք մեզ, թե որ տեսակի փորձանոթներն եք ցանկանում օգտագործել, որպեսզի մենք համապատասխանաբար փոխենք ձեր VialTweeter- ը: Ավելի մեծ փորձանոթների համար, ինչպիսիք են Falcon խողովակները և այլ փորձանոթներ, բաժակները և անոթները, VialPress- ը հարմար լուծում է:

VialTweeter- ը VialPress- ով

Չնայած VialTweeter- ն ինքն իր 10 խողովակների անցքերով արդեն իսկ եզակի և բարձր ֆունկցիոնալ ուլտրաձայնային սարք է, բայց VialPress հավելումը VialTweeter- ն էլ ավելի բազմակողմանի և ճկուն է գործելու համար: VialPress- ը VialTweeter- ի աքսեսուար է, որը բաղկացած է սեղմիչի ձողից, որը թույլ է տալիս ամրացնել ավելի մեծ նմուշի խողովակներ, ինչպիսիք են Falcon խողովակները կամ այլ փոքր կամ միջին չափի այլ փորձնական բաժակները VialTweeter- ի ճակատին: Ձախ կողմում գտնվող նկարում պատկերված է, որ VialTweeter- ը բլոկում պահում է 10 Eppendorf սրվակ, մինչդեռ VialPress- ը ամրացնում է մեկ ավելի մեծ փորձանոթը առջևի հատվածի ձայնազերծման համար: VialPress- ը ունակ է պահելու մինչև 5 ավելի մեծ փորձանոթներ ինտենսիվ ձայնազերծման համար:

VialTweeter- ի նմուշի նախապատրաստման արձանագրությունները

VialTweeter- ը լայնորեն օգտագործվում է կենսաբանական նմուշների ձայնազերծման համար: Վերլուծությունից առաջ նմուշները պետք է պատրաստվեն կենսաքիմիական կամ կենսաֆիզիկական վերլուծությունների և վերլուծությունների, օրինակ `լիզի միջոցով, հյուսվածքների հոմոգենացման, սպիտակուցների արդյունահանման, ԴՆԹ / ՌՆԹ խուզման, գազազերծման և այլն: VialTweeter- ի ընդհանուր կիրառումը կաթնասունների (մարդու և կենդանիների) հյուսվածքների, ինչպես նաև բակտերիաների բջիջների և վիրուսային մասնիկների լիզիզմն է / բջիջների խափանումը: VialTweeter- ով հաջողությամբ մշակված կենսաբանական նմուշները ներառում են մարդու թոքերի էպիթելի բջիջներ, արյունաստեղծ ցողունային բջիջներ, միելոիդային լեյկոզ բջիջներ, Escherichia coli,, բացիլ subtilis,, Bacillus anthracis,, Francisella tularensis,, Yersinia pestis,, Streptococcus pyogenes,, Caulobacter crescentus,, Mycoplasma pneumoniae, միկոբակտերիաներ / Mycobacterium tuberculosis համալիր (MTBC) և շատ այլ մանրէային, բուսաբանական և մանրէաբանական բջիջներ:
Ստորև կարող եք գտնել մի քանի ընտրված արձանագրություններ, որոնք ներկայացնում են VialTweeter- ը:

E.Coli Lysis VialTweeter- ի հետ `In-Vivo Glutathione- ի որոշման համար

MG1655 շտամի Escherichia coli մանրէները աճեցվել են MOPS- ի նվազագույն միջավայրում `200 մլ ընդհանուր ծավալով, մինչև A600- ի 0.5 հասնելը: Մշակույթը բաժանվեց 50-ական մլ մշակույթների `սթրեսի բուժման համար: 0.79 մմ ալիցինով, 1 մմ դիամիդով կամ դիմեթիլսուլֆօքսիդով (հսկիչ) 15 րոպե ինկուբացիայից հետո բջիջները հավաքվել են 4000 գ 4 ° C ջերմաստիճանում 10 րոպե: Բջիջները երկու անգամ լվացվեցին KPE բուֆերով, նախքան գնդիկների վերակենդանացումը 700 μl KPE բուֆերում: Ապամոնտաժման համար նախքան ուլտրաձայնացման միջոցով բջիջների խափանումը (3 x 1 ր. Գերհեղեղները հավաքվել են ցենտրիֆուգումից հետո (30 րոպե, 13,000 գ, 4 ° C): Սուլֆոսալիցիլաթթվի կոնցենտրացիաները նվազել են 1% -ով `ավելացնելով 3 ծավալ KPE բուֆեր: Ամբողջ glutathione- ի և GSSG- ի չափումները կատարվել են ինչպես նկարագրված է վերևում: Բջջային գլուտատիոնի կոնցենտրացիաները հաշվարկվել են E. coli բջիջների 6.7 × 10-15 լիտր բջիջների և A600 0.5 բջիջների խտության հիման վրա (համարժեք է 1 × 108 բջիջների ml-1 մշակույթի): GSH- ի կոնցենտրացիաները հաշվարկվել են ընդհանուր glutathione- ից 2 [GSSG] հանումով: (Müller et al. 2016)

Բջջային լիզիզացում VialTweeter- ով `նախքան գրաֆիտային վառարանների ատոմային ներծծման սպեկտրաչափությունը

Bacillus subtilis 168- ը (trpC2) ենթարկվել է 15 րոպե հակաբիոտիկ սթրեսի, այնուհետև բջիջները հավաքվել են 3,320 xg- ով, հինգ անգամ լվացվել 100 մմ Tris / 1 մմ EDTA- ով, pH 7,5-ով, վերակենդանացվել 10 մմ Tris- ով, pH 7,5 և խափանվել է ուլտրաձայնմամբ: Hielscher VialTweeter գործիքի մեջ: (Wenzel et al. 2014)

VialTweeter- ի նմուշի պատրաստում զանգվածային սպեկտրաչափությունից առաջ

Մարդու CD34􏰀 արյունաստեղծ ցողունային / նախաբջջային բջիջների լիոֆիլացված բջիջները վերակոդավորվել են 10 մկմ (200 մկլ. Զանգվածային HEK293 նախապատրաստման համար պեպտիդային նոսրացման շարքի համար) 8 Մ urea 100 մմ ամոնիումի ջրածնի կարբոնատում և լիզացվել են Hielscher VialTweeter- ի օգնությամբ մոնտաժով: 60% ամպլիտուդում, 60% ցիկլ և 20 անգամ տևողություն երեք անգամ սառույցի վրա միջանկյալ սառեցմամբ: (Amon et al. 2019)

VialPress- ի օգտագործմամբ նմուշների պատրաստման արձանագրություններ

Թարմ հազարը (Lactuca sativa) հոմոգենացվեց 0,5 Մ HEPES բուֆերում (pH 8, KOH ճշգրտված) 1 գ բույսի (թարմ քաշ) 200, 100, 50 կամ 20 մլ բուֆերային լուծույթի հարաբերակցությամբ: Բույսի զանգվածի և բուֆերային լուծույթի ծավալի հարաբերակցությունը բազմազան էր `համասեռ համընդհանուր ծավալը 3.5-ից 12 մլ-ի սահմաններում պահելու համար: Բույսի զանգվածի և բուֆերային լուծույթի ծավալի հարաբերակցությունը բազմազան էր `համասեռ համընդհանուր ծավալը 3.5-ից 12 մլ-ի սահմաններում պահելու համար` թույլ տալով զոնդի հետ համասեռացում: Homogenates- ը այնուհետև ենթարկվեց անուղղակի ուլտրաձայնացման `օգտագործելով UP200St VialTweeter- ով, որը հագեցած էր 200xt VialPress- ով (Hielscher Ultrasonics GmbH, Գերմանիա) 3 րոպե (80% զարկերակային և 100% ուժ): Այս սարքի օգտագործումը խուսափեց աղտոտումից: (Laughton et al. 2019)

VialTweeter- ի միջոցով Sonication- ի ընթացքում ջերմաստիճանի հուսալի հսկողություն

Երմաստիճանը գործընթացի վրա ազդող կարևոր գործոն է, որը հատկապես կարևոր է կենսաբանական նմուշների բուժման համար: Նմուշի պատրաստման բոլոր մեխանիկական տեխնիկայում, մթնեցումը ջերմություն է ստեղծում: Այնուամենայնիվ, VialTweeter- ի օգտագործման ժամանակ նմուշների ջերմաստիճանը կարելի է լավ վերահսկել: Մենք ձեզ ներկայացնում ենք տարբեր ընտրանքներ ձեր նմուշների ջերմաստիճանը վերահսկելու և վերահսկելու համար, մինչդեռ դրանք պատրաստում ենք VialTweeter- ի և VialPress- ի հետ վերլուծության համար:

1. Նմուշի ջերմաստիճանի մոնիտորինգ. Ուլտրաձայնային UP200St պրոցեսորը, որը վարում է VialTweeter- ը, հագեցած է խելացի ծրագրակազմով և խցանվող ջերմաստիճանի տվիչով: Միացրեք ջերմաստիճանի տվիչը UP200St- ի մեջ և տեղադրեք ջերմաստիճանի տվիչի ծայրը նմուշի խողովակներից մեկում: Թվային գունավոր սենսորային էկրանով UP200St- ի ընտրացանկում կարող եք տեղադրել ձեր նմուշի ձայնազերծման համար նախատեսված հատուկ ջերմաստիճանի տիրույթ: Ուլտրաձայնագրիչը ավտոմատ կերպով կդադարի, երբ առավելագույն ջերմաստիճանը հասնի և դադարի, մինչև նմուշի ջերմաստիճանը իջնի սահմանված ջերմաստիճանի temperature ցածր արժեքի: Ապա վերամշակումը կրկին ավտոմատ կերպով սկսվում է: Այս խելացի առանձնահատկությունը կանխում է ջերմության պատճառով դեգրադացիան:
2. VialTweeter բլոկը կարող է նախապես հովացվել: Տեղադրեք VialTweeter բլոկը (միայն սոնոտրոդը առանց փոխարկիչի!) Սառնարանի կամ սառցարանի մեջ, որպեսզի տիտանի բլոկը նախապես հովացնի, օգնում է հետաձգել նմուշի ջերմաստիճանի բարձրացումը: Հնարավորության դեպքում նմուշը կարող է նաև նախապես հովացվել:
3. Օգտագործեք չոր սառույց `հովացման ընթացքում սառչելու համար: Օգտագործեք չոր սառույցով լցված մակերեսային սկուտեղ և տեղադրեք VialTweeter- ը չոր սառույցի վրա, որպեսզի ջերմությունն արագ ցրվի:

Աշխարհում հաճախորդները օգտագործում են VialTweeter- ը և VialPress- ը կենսաբանական, կենսաքիմիական, բժշկական և կլինիկական լաբորատորիաներում իրենց ամենօրյա նմուշ պատրաստելու աշխատանքների համար: UP200St պրոցեսորի խելացի ծրագրակազմը և ջերմաստիճանի հսկողությունը, ջերմաստիճանը հուսալիորեն վերահսկվում է և խուսափում ջերմության պատճառով նմուշի դեգրադացիայից: Ուլտրաձայնային նմուշի պատրաստումը VialTweeter- ի և VialPress- ի միջոցով տալիս է բարձր հուսալի և վերարտադրելի արդյունքներ:

VialTweeter- ի տեխնիկական մանրամասները

VialTweeter- ը տիտանիից պատրաստված բլոկային սոնոտրոդ է, որը կարող է մինչև 10 սրվակ պահել բլոկի անցքերի մեջ: Լրացուցիչ, մինչև 5 ավելի մեծ փորձանոթներ կարող են սեղմվել VialTweeter- ի առջևում `օգտագործելով VialPress: VialTweeter- ն այնպես է նախագծված, որ ուլտրաձայնային էներգիան հավասարաչափ բաշխվում է յուրաքանչյուր տեղադրված սրվակի մեջ `ապահովելու հուսալի և միատարր ձայնային արդյունքներ: Փոքր առանցքը կարգավորում է VialTweeter sonotrode- ը անհավասար հիմքի վրա և փորձանոթները ուղղահայաց հարթեցնում:

Առավելությունները VialTweeter մի հայացքից

• Ինտենսիվ sonication մինչեւ 10 vials միաժամանակ
• Անուղղակի sonication բարձր ուլտրաձայնային ինտենսիվության միջոցով նավի պատին մեջ նմուշի
• Անուղղակի sonication խուսափում խաչաձեւ աղտոտումից եւ օրինակելի կորուստ
• Վերարտադրելի արդյունքներ `կարգավորվող եւ վերահսկելի արդիականացման ամպլիտուտի շնորհիվ
• The VialPress- ը ձեզ հնարավորություն է տալիս sonicate ավելի խողովակները
• Կարգավորվող ամպլիտուդը 20-ից 100%
• Կարգավորելի զարկերակային ռեժիմում 0 - ից 100%
• autoclavable

VialTweeter- ը սնուցվում է UP200St, 200 վտ հզոր ուլտրաձայնային պրոցեսոր: UP200St- ը հագեցած է խելացի ծրագրակազմով, որը թույլ է տալիս ճշգրիտ վերահսկել ուլտրաձայնային գործընթացի բոլոր կարևոր պարամետրերը, ինչպիսիք են ամպլիտուդը, ձայնազերծման ժամանակը, պուլսացիան և ջերմաստիճանը: Սա VialTweeter- ը դարձնում է հուսալի գործիք կենսաբանական և կենսաքիմիական լաբորատորիաներում հաջող վերարտադրվող գործընթացի արդյունքների համար:
Ամպլիտուտը կարող է ճշգրտվել 20-ից 100% -ի սահմաններում և թույլ է տալիս դրանով հարմարեցնել ուլտրաձայնային ուժգնությունը ձեր նմուշին: Օրինակ, ԴՆԹ-ի և ՌՆԹ-ի կտրումը և մասնատումը պահանջում են ավելի մեղմ ամպլիտուդ `ԴՆԹ-ի չափազանց փոքր բեկորների արտադրությունը կանխելու համար. UP200St պրոցեսորում խելացի և ինտուիտիվ ընտրացանկով ընտրեք իդեալական ամպլիտուդը, ձայնազերծման ինտենսիվությունը և տևողությունը: Theաշացանկը և կարգավորումները կարելի է հեշտությամբ մուտք գործել և գործել գունավոր սենսորային էկրանով: Պարամետրերում կարող եք նախապես դնել ձայնայնացման պարամետրերը, ինչպիսիք են ամպլիտուդը, պուլսացիան / ցիկլի ռեժիմը, ձայնայնացման տևողությունը, էներգիայի ընդհանուր ներածումը և ջերմաստիճանի սահմանները: Հետազոտության և արտադրության մեջ փորձությունների և փորձարկումների արդյունքների կրկնությունը կարևոր է: Սա նշանակում է, որ գործընթացների պայմանների ճշգրիտ գրանցումը և ձայնազերծման արձանագրությունները խիստ կարևոր են: Տվյալների ավտոմատ պրոտոկոլինգը ձայնագրման բոլոր տվյալները գրում է CSV ֆայլի մեջ ՝ ինտեգրված SD- քարտի վրա, որպեսզի հեշտությամբ կարողանաք ստուգել և համեմատել տարբեր ձայնային աշխատանքներ: Ուլտրաձայնային գործընթացի բոլոր տվյալները հեշտությամբ հասանելի են և կիսվում են որպես CSV ֆայլ:
Hielscher Ultrasonics- ը ձգտում է ձեզ առաջադեմ տեխնոլոգիա տրամադրել `ձեր հետազոտական աշխատանքը հեշտացնելու և բարելավելու համար: