अल्ट्रासोनिकेशन का उपयोग करके मशरूम से बीटा-ग्लूकन का निष्कर्षण

प्रयोगशाला परीक्षण या उत्पादन उद्देश्यों के लिए मशरूम से बीटा-ग्लूकन निकालने में मशरूम को काटने, पीसने या कुचलने, अल्ट्रासोनिक रूप से सहायता प्राप्त निष्कर्षण और बीटा-ग्लूकन की वर्षा का संयोजन शामिल है। यहाँ बीटा glucan निष्कर्षण प्रक्रिया की एक सरलीकृत रूपरेखा है, उदाहरण मात्रा और एक प्रयोगशाला पैमाने प्रयोग के लिए वजन के साथ. कृपया ध्यान दें, कि मशरूम के प्रकार और बीटा-ग्लूकन शुद्धता के आधार पर विशिष्ट स्थितियां और माप भिन्न हो सकते हैं।

सामग्री और उपकरण

• मशरूम (जैसे, 100 ग्राम कटा हुआ या कटा हुआ मशरूम)
• ठंडा आसुत जल (जैसे, 500mL)
• ब्लेंडर या ग्राइंडर
• ग्लास बीकर या फ्लास्क
• फिल्टर पेपर या वैक्यूम निस्पंदन सेटअप
• अपकेंद्रित्र (वैकल्पिक)
• वर्षा के लिए शराब (जैसे, इथेनॉल)
• फ्रिज
• सुखाने ओवन

बीटा-ग्लूकन निष्कर्षण प्रोटोकॉल

1. मशरूम को पीसें या क्रश करें (जैसे, चागा या शेर)’ माने मशरूम) लगभग 1 से 3 मिलीमीटर के मोटे कणों में। उदाहरण के लिए, 100 ग्राम सूखे मशरूम कणों का उपयोग करें।
2. फिर मशरूम के कणों को एक ग्लास बीकर या फ्लास्क में जोड़ें।
3. अगला, मशरूम कणों युक्त बीकर के लिए आसुत जल के 500mL जोड़ें निकाला जा करने के लिए. विशिष्ट मशरूम प्रकार और कण आकार के आधार पर पानी से मशरूम अनुपात भिन्न हो सकता है।
4. घोल को हिलाने के बाद, अल्ट्रासोनिक लैब होमोजेनाइज़र (उदाहरण के लिए, UP400St 100% आयाम पर 22 मिमी सोनोट्रोड के साथ या 100% आयाम पर 14 मिमी सोनोट्रोड के साथ UP200Ht) का उपयोग करके मिश्रण को सोनिकेट करें और 90 °C से नीचे का तापमान बनाए रखें। कम तापमान गर्मी के प्रति संवेदनशील यौगिकों को संरक्षित करने में मदद करता है, जैसे कि निष्कर्षण के दौरान बीटा-ग्लूकन। Sonicate लगभग के लिए UP5St प्रयोग गर्दा 10 देखि 400 मिनेट र UP10Ht प्रयोग गर्दा 10 देखि मिनेटहरू, क्रमश: कृपया ध्यान दें कि उपयोग की जाने वाली अल्ट्रासोनिक शक्ति के आधार पर तापमान और निष्कर्षण का समय भिन्न हो सकता है। बेशक, बड़ी मात्रा में लंबे समय तक सोनीशन समय की आवश्यकता होगी।
5. फिल्टर पेपर के माध्यम से सोनिकेटेड मिश्रण को फ़िल्टर करें या ठोस मशरूम अवशेषों से तरल (निकाले गए बीटा-ग्लूकन युक्त) को अलग करने के लिए वैक्यूम निस्पंदन सेटअप का उपयोग करें।
6. फिर शराब (जैसे, इथेनॉल) जोड़कर तरल से बीटा-ग्लूकन को अवक्षेपित करें। आमतौर पर, आप वर्षा के लिए 2-3 मात्रा में शराब का उपयोग कर सकते हैं।
7. उसके बाद, बीटा-ग्लूकन को अवक्षेपित करने की अनुमति देने के लिए मिश्रण को कई घंटों तक रेफ्रिजरेटर में स्टोर करें।
8. वर्षा के बाद, आप तरल को सावधानी से छान सकते हैं और बीटा-ग्लूकन अवक्षेप एकत्र कर सकते हैं।
9. अंत में, बीटा-ग्लूकन को ओवन में कम तापमान (जैसे, 40-50 डिग्री सेल्सियस) पर तब तक सुखाएं जब तक कि सभी अल्कोहल हटा न दिए जाएं और आपको सूखा पाउडर न मिल जाए।

मशरूम अपनी विशेषताओं में भिन्नता प्रदर्शित करते हैं। इसलिए, बीटा-ग्लूकन निष्कर्षण प्रक्रिया विशिष्ट मशरूम प्रजातियों, मशरूम की स्थिति (सूखे या ताजा), कण आकार और निष्कर्षण तापमान जैसे कारकों के आधार पर भिन्न हो सकती है। अपनी निष्कर्षण प्रक्रिया को अनुकूलित करने के लिए, विभिन्न मापदंडों के साथ प्रयोग करने पर विचार करें, जिसमें ठोस-से-तरल अनुपात को बदलना, तापमान समायोजित करना, विभिन्न सॉल्वैंट्स की खोज करना और विविध सोनीशन अवधि और आयाम सेटिंग्स का परीक्षण करना शामिल है।

बीटा-ग्लूकन के अल्ट्रासोनिक रूप से सहायता प्राप्त एंजाइमेटिक निष्कर्षण

अल्ट्रासोनिक रूप से सहायता प्राप्त एंजाइमी निष्कर्षण एक विधि है जिसका उपयोग एंजाइम और अल्ट्रासोनिक तरंगों के संयोजन का उपयोग करके मशरूम से बीटा-ग्लूकन निकालने के लिए किया जाता है। यह प्रक्रिया मशरूम की सेल दीवारों को तोड़कर और बीटा-ग्लूकन की रिहाई की सुविधा के द्वारा निष्कर्षण की दक्षता को बढ़ाती है।

मशरूम से बीटा-ग्लूकन निष्कर्षण का स्केल-अप

एक बार जब आप एक बीटा-ग्लूकन निष्कर्षण प्रोटोकॉल स्थापित कर लेते हैं जो आपकी आवश्यकताओं को पूरा करता है, तो निष्कर्षण प्रक्रिया को बढ़ाना एक सीधा प्रयास हो सकता है।

बैच निष्कर्षण स्केल-अप

यदि आप बैच निष्कर्षण विधि का उपयोग करके स्केल अप करने की योजना बना रहे हैं, तो हम ठोस-से-तरल अनुपात और अन्य सभी मापदंडों को स्थिर रखते हुए बैच वॉल्यूम बढ़ाने की सलाह देते हैं। यदि आप एक ही अल्ट्रासोनिक होमोजेनाइज़र का उपयोग करना जारी रखते हैं, तो आनुपातिक रूप से सोनीशन समय बढ़ाना सुनिश्चित करें। 1 लीटर से अधिक के बैचों के लिए, आप कण निलंबन को बनाए रखने और निष्कर्षण एकरूपता में सुधार करने के लिए धीमी गति से स्टिरर को शामिल करने पर विचार कर सकते हैं। नीचे दी गई छवि एक प्रयोगशाला उत्तेजक के साथ संयोजन में UP400St अल्ट्रासोनिक होमोजेनाइज़र का उपयोग करके 8-लीटर बैच निष्कर्षण सेटअप दिखाती है।

इनलाइन मशरूम निष्कर्षण

मशरूम से बीटा-ग्लूकन की बड़ी मात्रा में लगातार निकालने में रुचि रखने वालों के लिए, Hielscher Ultrasonics वनस्पति सामग्री निष्कर्षण के लिए डिज़ाइन किए गए प्रवाह सेल रिएक्टर प्रदान करता है। यदि यह आप पर लागू होता है, तो हम आपको अधिक जानकारी के लिए सीधे हमसे संपर्क करने के लिए प्रोत्साहित करते हैं। हमारी तकनीकी टीम को आपकी विशिष्ट आवश्यकताओं के लिए सबसे उपयुक्त सेटअप निर्धारित करने में सहायता करने में खुशी होगी। हालांकि, आपकी विशिष्ट मशरूम प्रजातियों के साथ पहले उल्लिखित प्रयोगशाला-स्तरीय प्रयोग करना सटीक प्रक्रिया आवश्यकताओं को समझने में अमूल्य हो सकता है। नीचे दी गई छवि प्रति घंटे लगभग 50 से 200 लीटर मशरूम-विलायक घोल पर बीटा-ग्लूकन निकालने के लिए UIP4000hdT अल्ट्रासोनिक होमोजेनाइज़र के साथ एक बड़े प्रवाह सेल रिएक्टर को दिखाती है।

मशरूम प्रजातियों के अनुभवजन्य बीटा-ग्लूकन एकाग्रता

नीचे, आपको अनुभवजन्य बीटा-ग्लूकन एकाग्रता की एक सूची मिलेगी जो विभिन्न मशरूम प्रजातियों से निकाली गई थी।

मशरूम प्रजाति	कुल 1,3-1,6-β-डी-ग्लूकन (जी / 100 ग्राम शुष्क द्रव्यमान)
बोलेटस पिनोफिलस	9,8%
सुइलस ग्रैनुलैटस	13,3%
क्रेटरेलस कॉर्नुकोपिओइड्स	4,5%
सुइलस वेरिगेटस	13,7%
हाइडनम रेपेंडम	4,1%
जाइरोपोरस साइनेसेन्स	14,3%
ट्राइकोलोमोप्सिस रुटिलन्स	10,2%
अगरिकस बिस्पोरस (पोर्टोबेलो)	4%
अगरिकस बिस्पोरस (सेरेमनी)	4%
ऑरिकुलेरिया ऑरिकुलर-जुडे	16,8%

विश्लेषण किए गए जंगली-बढ़ते और खेती वाले मशरूम में 1,3-1,6-β-डी-ग्लूकन सामग्री, स्रोत: Mirończuk-Chodakowska एट अल (2017): "खाद्य पोलिश मशरूम की जंगली-बढ़ती प्रजातियों में 1,3-1,6-β-d-glucan सामग्री का मात्रात्मक मूल्यांकन"। Rocz Panstw Zakl Hig 2017; 68(3):281-290.