Hielscher – Tecnología de Ultrasonidos

Preparación ultrasónica del suero rico en plaquetas

  • Plasma rico en plaquetas (PRP) es plasma sanguíneo que ha sido enriquecido con plaquetas, que se utiliza para tratamientos médicos y estethic.
  • Ultrasónico de lisis y acondicionado es un método muy eficaz para preparar plasma rico en plaquetas.
  • Hielscher Ultrasonidos ofrece diversos sistemas ultrasónicos que coinciden con los requisitos de la tratamiento de la sangre (por ejemplo, para interior y exterior preparación de una habitación limpia).

Rico en plaquetas Serum

La sonicación es un método fiable y fácil para lisar las plaquetas en suero de sangre autóloga a fin de liberar los factores de crecimiento. Las fracciones derivados de plaquetas – también conocido como suero autólogo acondicionado (ACS) – se utilizan para la reparación de tejidos o tratamientos estéticos. Para obtener resultados óptimos, el PRP se enriquece antes de la inyección.
A fin de preparar plasma enriquecido con factores de crecimiento celular, sonicación es un método muy eficaz y eficiente para lisar las membranas celulares y para liberar casi las completas factores de crecimiento celular de las plaquetas. Por lisis por ultrasonidos y acondicionado, incluso sangre anticoagulada se puede utilizar.
Acondicionamiento de PRP a través de sonicación es una manera conveniente y rentable para producir en factores de crecimiento concentrados.

preparación ultrasónico de plasma rico en plaquetas (PRP) © Fortunato, T. M. et al. (2016)

Ultrasonic lisis de plasma rico en plaquetas (PRP)

Efectos de lisis por ultrasonidos

El tratamiento ultrasónico de los resultados de suero de la sangre en una lisis homogénea de las plaquetas con el fin de liberar los factores de crecimiento atrapados (factor de crecimiento AB (PDGF-AB), factor de crecimiento AA (PDGF-AA), factor de crecimiento BB (PDGF-BB), vascular factor de crecimiento endotelial (VEGF), factor de crecimiento transformante β (TGF-beta), factor de crecimiento epidérmico (EGF), factor de crecimiento similar a la insulina (IGF), factor de epitelial ECGF crecimiento las células y el factor de crecimiento fibroblástico (FGF)). Las plaquetas y sus gránulos alfa son interrumpidas por sonicación, utilizando el fenómeno de cavitación acústica. El uso de la cavitación ultrasónica para la lisis de las plaquetas disminuye el posible impacto negativo sobre la actividad del factor de crecimiento del método de congelación-descongelación repetidos.

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Protocolo para ultrasónica PRP Preparación

Sonda de tipo insonifier UP200St para la lisisAprox. 16 ml de fresco muestra de sangre autóloga se recogió se invierte suavemente 8-10 veces en un tubo de modo que la sangre y los anticoagulantes son bien mezclado. Después, la muestra se centrifugó a 1800 g durante 20 min a temperatura ambiente. Después de la centrifugación, las plaquetas y las células mononucleares de construir una capa blanquecina en la parte inferior de la capa de plasma, que se conoce como plasma rico en plaquetas (PRP). La capa superior se conoce como plasma pobre en plaquetas (PPP). Las células mononucleares se pueden quitar o permanecen en la muestra. A menudo, las células mononucleares permanecen en la muestra de PRP para evitar pasos adicionales, que llevan el riesgo de contaminación.
Nota: El tratamiento con ultrasonidos de PRP autólogo debe llevarse a cabo en condiciones estériles.
PRP y PPP se separan y recogen. Se añade a la solución de cloruro de calcio PPP, 1,5 ml 10%, mientras que se añade el etanol para PRP 0,5 ml 5%. Ambas suspensiones se agitaron suavemente y se dejaron reposar durante 5 min a temperatura ambiente. Finalmente, 1 mL PPP se añade a la suspensión PRP y se deja reposar hasta que se forma un coágulo de fibrina.
El tratamiento ultrasónico: Como el gel actúa de plaquetas formados como un depósito para los factores de crecimiento liberados, el gel de fibrina debe ser interrumpido con el fin de liberar los factores de crecimiento disponibles. Los parámetros para la lisis por ultrasonidos y la liberación del factor de crecimiento son los siguientes: Someter a ultrasonidos con una UP200Ht o UP200St (200W, 26kHz) con sonotrodo S26d2 la muestra en el tubo. Para evitar el sobrecalentamiento de la muestra de sangre, sonicación se puede realizar en pulsante ciclos (por ejemplo, 10 seg. En, 30 seg. Apagado). La muestra debe ser colocado en hielo para la refrigeración de manera que la temperatura se mantiene de manera óptima entre 2 – 5 ° C. Después de la sonicación, la muestra se centrifugó a 16.000 g durante 5 min. a temperatura ambiente. El sobrenadante se recoge y se puede almacenar a -70 ° C.
La concentración de plaquetas en la fracción de PRP se enriqueció 1,7 – 4,5 veces en el método sonicado cuando se compara con la media del recuento de plaquetas literatura en la sangre entera.

PRP se ha combinado con terapia de células madre derivadas de tejido adiposo (ultrasónicamente liberado células madre autólogas a partir de tejido adiposo, Mezclado con PRP, y se inyecta de nuevo en el tejido del paciente para la reparación).

Equipo ultrasónico

El dispositivo ultrasónico VialTweeter permite preparar simultáneamente muestras con hasta 10 viales bajo las mismas condiciones (haga clic para ampliar).Hielscher ultrasonido es hoy expertos de la tecnología de ultrasonidos sofisticado y confiable. Nuestros dispositivos de ultrasonidos se utilizan en todo el mundo para la lisis, extracción y preparación de muestras – por directa e indirecta. Autoclavable tanto como desechable accesorios garantizan una Libre de contaminación tratamiento de muestras de sangre autólogas. La mayoría de nuestros sistemas se pueden utilizar para la lisis por ultrasonidos de Células madre y PRP, lo que hace que nuestros dispositivos ultrasónicos económicamente aún más eficiente.
Esta tabla a continuación enumera los dispositivos de ultrasonidos, que son adecuados para la preparación de plasma rico en plaquetas, y su volumen de muestra recomendado, respectivamente. ultrasonicators más grandes y sistemas personalizados están disponibles, también.

Dispositivo Potencia [W] Frec. [kHz] Tipo Volumen [mL]
VialTweeter 200 26 autónomo 0,5 1,5
UP50H 50 30 manual o en soporte 0,01 250
UP100H 100 30 manual o en soporte 0,01 500
UP200Ht 200 26 manual o en soporte 0,1 1000
UP200St 200 26 en soporte 0,1 1000
UP400St 400 24 en soporte 5,0 2000
UP200St-SonoStep 200 26 autónomo 30 500
GDmini2 200 26 Celda de flujo estéril

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GDmini2 en Transductor UP200St-TD (200 vatios) para la sonicación libre de contaminación

GDmini2 con transductor UP200St-TD (200 W)

Literatura/Referencias

  • Fortunato, T. M .; Beltrami, Ch .; Emanueli, C .; De bancaria, P.A :; Pula, G. (2016): gel de lisado de plaquetas y células progenitoras endoteliales estimulan la formación de la red microvascular in vitro: implicaciones de ingeniería de tejidos. Sci. Rep. 6, 2016.
  • Hamid, M.S.A .; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Mohamed Razif (2014): Plasma rico en plaquetas (PRP) para Lesión muscular aguda: una revisión sistemática. PLOS ONE Volumen 9, Número 2, 2014.


Información interesante

Plasma rico en plaquetas

plasma rico en plaquetas contiene factor de crecimiento AB (PDGF-AB), derivado de plaquetas factor de crecimiento AA (PDGF-AA), derivado de plaquetas factor de crecimiento BB (PDGF-BB), factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), factor de crecimiento transformante β (TGF -β), factor de crecimiento epidérmico (EGF), factor de crecimiento similar a la insulina (IGF), las células epiteliales del factor de crecimiento ECGF y factor de crecimiento fibroblástico (FGF), que son estimulantes importantes para el crecimiento celular y la renovación.

Suero autólogo acondicionado (ACS)

El plasma condicionado autólogo (ACP) es un plasma rico en plaquetas que se extrae de la sangre autóloga y que se utiliza para apoyar la regeneración en una variedad de condiciones ortopédicas y procedimientos quirúrgicos. El suero acondicionado se prepara separando el plasma de los otros componentes sanguíneos (como los eritrocitos) y concentrándolo. El ACP es un plasma rico en plaquetas (PRP). PRP es un término general para un tipo de plasma que contiene una concentración significativamente mayor de trombocitos en comparación con la sangre entera. Se extrae de la sangre entera. Los principales componentes del ACP incluyen trombocitos (plaquetas) y varios factores de crecimiento que juegan un papel importante en el proceso de curación. A diferencia de otras formulaciones plasmáticas ricas en plaquetas, el ACP se distingue por una baja concentración de glóbulos blancos, como los granulocitos de neutrófilos, que pueden ser perjudiciales para el proceso de curación cuando están presentes en altas concentraciones.

Rico en plaquetas inyecciones de plasma no

plasma rico en plaquetas se utiliza como inyección en la medicina regenerativa, así como en procedimientos cosméticos. La aplicación de PRP promete una aceleración significativa de la curación muscular y la recuperación muscular. Además, se ha utilizado con éxito para tratar la inflamación, la artritis, el dolor, las heridas, curación lenta de heridas abiertas y quemaduras graves en la piel. El PRP contiene un alto nivel de factores de crecimiento, que estimulan y protegen las células de curación AO que se repara el tejido dañado.
Para treaments cosméticos, PRP se ha demostrado eficaz para estimular el crecimiento del cabello, renovación de la piel (también conocido como tratamiento vampiro).

Factores de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF)

El factor de crecimiento derivado de plaquetas plazo (PDGF) se refiere a los factores de PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C y PDGF-D. Es una red de señalización de los cuatro ligandos (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C y PDGF-D), y dos receptores, PDGFR-alfa y PDGFR-beta.
Los factores de crecimiento o proteínas, regulan el crecimiento y la división celular. A medida que el mitógeno principal encontrada en suero de mamífero, que se libera de las plaquetas durante la formación de coágulos, que desempeña un papel significativo en la formación de vasos sanguíneos (angiogénesis), el crecimiento de vasos sanguíneos a partir de tejido de vasos sanguíneos ya existentes.