Preparación ultrasónica del suero rico en plaquetas

Rico en plaquetas Serum

La sonicación es un método fiable y fácil para lisar las plaquetas en suero de sangre autóloga a fin de liberar los factores de crecimiento. Las fracciones derivados de plaquetas – también conocido como suero autólogo acondicionado (ACS) – se utilizan para la reparación de tejidos o tratamientos estéticos. Para obtener resultados óptimos, el PRP se enriquece antes de la inyección.
A fin de preparar plasma enriquecido con factores de crecimiento celular, sonicación es un método muy eficaz y eficiente para lisar las membranas celulares y para liberar casi las completas factores de crecimiento celular de las plaquetas. Por lisis por ultrasonidos y acondicionado, incluso sangre anticoagulada se puede utilizar.
Acondicionamiento de PRP a través de sonicación es una manera conveniente y rentable para producir en factores de crecimiento concentrados.

Ultrasonic lisis de plasma rico en plaquetas (PRP)

Efectos de lisis por ultrasonidos

El tratamiento ultrasónico de los resultados de suero de la sangre en una lisis homogénea de las plaquetas con el fin de liberar los factores de crecimiento atrapados (factor de crecimiento AB (PDGF-AB), factor de crecimiento AA (PDGF-AA), factor de crecimiento BB (PDGF-BB), vascular factor de crecimiento endotelial (VEGF), factor de crecimiento transformante β (TGF-beta), factor de crecimiento epidérmico (EGF), factor de crecimiento similar a la insulina (IGF), factor de epitelial ECGF crecimiento las células y el factor de crecimiento fibroblástico (FGF)). Las plaquetas y sus gránulos alfa son interrumpidas por sonicación, utilizando el fenómeno de cavitación acústica. El uso de la cavitación ultrasónica para la lisis de las plaquetas disminuye el posible impacto negativo sobre la actividad del factor de crecimiento del método de congelación-descongelación repetidos.

Protocolo para ultrasónica PRP Preparación

Aprox. 16 ml de fresco muestra de sangre autóloga se recogió se invierte suavemente 8-10 veces en un tubo de modo que la sangre y los anticoagulantes son bien mezclado. Después, la muestra se centrifugó a 1800 g durante 20 min a temperatura ambiente. Después de la centrifugación, las plaquetas y las células mononucleares de construir una capa blanquecina en la parte inferior de la capa de plasma, que se conoce como plasma rico en plaquetas (PRP). La capa superior se conoce como plasma pobre en plaquetas (PPP). Las células mononucleares se pueden quitar o permanecen en la muestra. A menudo, las células mononucleares permanecen en la muestra de PRP para evitar pasos adicionales, que llevan el riesgo de contaminación.
Nota: El tratamiento con ultrasonidos de PRP autólogo debe llevarse a cabo en condiciones estériles.
PRP y PPP se separan y recogen. Se añade a la solución de cloruro de calcio PPP, 1,5 ml 10%, mientras que se añade el etanol para PRP 0,5 ml 5%. Ambas suspensiones se agitaron suavemente y se dejaron reposar durante 5 min a temperatura ambiente. Finalmente, 1 mL PPP se añade a la suspensión PRP y se deja reposar hasta que se forma un coágulo de fibrina.
El tratamiento ultrasónico: Como el gel actúa de plaquetas formados como un depósito para los factores de crecimiento liberados, el gel de fibrina debe ser interrumpido con el fin de liberar los factores de crecimiento disponibles. Los parámetros para la lisis por ultrasonidos y la liberación del factor de crecimiento son los siguientes: Someter a ultrasonidos con una UP200Ht o UP200St (200W, 26kHz) con sonotrodo S26d2 la muestra en el tubo. Para evitar el sobrecalentamiento de la muestra de sangre, sonicación se puede realizar en pulsante ciclos (por ejemplo, 10 seg. En, 30 seg. Apagado). La muestra debe ser colocado en hielo para la refrigeración de manera que la temperatura se mantiene de manera óptima entre 2 – 5 ° C. Después de la sonicación, la muestra se centrifugó a 16.000 g durante 5 min. a temperatura ambiente. El sobrenadante se recoge y se puede almacenar a -70 ° C.
La concentración de plaquetas en la fracción de PRP se enriqueció 1,7 – 4,5 veces en el método sonicado cuando se compara con la media del recuento de plaquetas literatura en la sangre entera.

PRP se ha combinado con terapia de células madre derivadas de tejido adiposo (ultrasónicamente liberado células madre autólogas a partir de tejido adiposo, Mezclado con PRP, y se inyecta de nuevo en el tejido del paciente para la reparación).

Equipo ultrasónico

Hielscher ultrasonido es hoy expertos de la tecnología de ultrasonidos sofisticado y confiable. Nuestros dispositivos de ultrasonidos se utilizan en todo el mundo para la lisis, extracción y preparación de muestras – por directa e indirecta. Autoclavable tanto como desechable accesorios garantizan una Libre de contaminación tratamiento de muestras de sangre autólogas. La mayoría de nuestros sistemas se pueden utilizar para la lisis por ultrasonidos de Células madre y PRP, lo que hace que nuestros dispositivos ultrasónicos económicamente aún más eficiente.
Esta tabla a continuación enumera los dispositivos de ultrasonidos, que son adecuados para la preparación de plasma rico en plaquetas, y su volumen de muestra recomendado, respectivamente. ultrasonicators más grandes y sistemas personalizados están disponibles, también.

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