Pufrové roztoky připravené ultrazvuku
Lyzační pufry lze efektivně a rychle připravit pomocí ultrazvukových homogenizátorů tkání. Vzhledem k tomu, ultrasonicators jsou snů nástroj pro míchání, rozpouštění a dispergaci, umožňují spolehlivou a uživatelsky přívětivou přípravu lyzačních pufrů.
Ultrazvuková příprava lyzačních pufrů
Ultrazvukové homogenizátory tkání jsou běžným nástrojem pro narušení buněk, lýzu a extrakci, proto jsou k dispozici ve většině laboratoří. Sekundární aplikací pro ultrazvukové sondy typu je příprava lyzačních pufrů.
Lysis pufr je roztok používaný k rozbití (lyse) buněk a uvolnění jejich obsahu pro následnou analýzu. Specifické složení lyzačního pufru se může lišit v závislosti na typu lyzovaných buněk a následné aplikaci. Typický lyzační pufr však obsahuje složky, jako jsou detergenty, soli a inhibitory proteázy. Pufrační soli (např. Tris-HCl) a iontové soli (např. NaCl) se běžně používají k regulaci pH a osmolarity lyzátu.
Pro vytvoření lyzačního pufru se složky smíchají v příslušných koncentracích a pH. Směs se obvykle míchá nebo protřepává, dokud se složky nerozpustí a roztok není homogenní.
Ultrazvuková homogenizace je metoda, která může být použita k vytvoření dobrého lyzačního pufru zlepšením míchání a rozpouštění složek. Při této metodě ultrazvukové vlny – běžně v rozsahu 20 až 30 kHz – se aplikují na směs, která vytváří kavitační bubliny, které se zhroutí a generují intenzivní místní energii, což vede k mechanickému smyku a míchání složek.
Ultrazvukový homogenizační proces může pomoci rozbít všechny shluky nebo agregáty složek a zajistit, aby byl roztok rovnoměrně promíchán. V důsledku toho může takový vylepšený lyzační pufr vést k účinnějšímu narušení buněk a vyšším výtěžkům extrahovaného materiálu. Navíc ultrazvuková homogenizace může zkrátit čas potřebný k vytvoření lyzačního pufru ve srovnání s tradičními metodami míchání nebo třepání.
Celkově je ultrazvuková homogenizace výkonným nástrojem pro zlepšení kvality a účinnosti přípravy lyzačního pufru.

Ultrazvukový laboratorní homogenizátor UP200Ht je populární ve výzkumných laboratořích pro přípravu vzorků, lýzu, extrakci, fragmentaci DNA a rozpouštění.
Protokol pro přípravu ultrazvukového lyzačního pufru
Toto je obecný protokol pro vytvoření lyzačního pufru pomocí ultrazvuku typu sondy:
Materiály:
- Zvolený detergent (prostředky) (např. Triton X-100, SDS, CHAPS)
- Sůl (soli) dle výběru (např. NaCl, KCl)
- Inhibitory proteáz (např. PMSF, aprotinin, leupeptin)
- ultrazvukovač
- buřič
- Deionizovaná voda
- pH metr nebo pH proužky
Pokyny krok za krokem:
- Určete složení lyzačního pufru na základě buněk nebo tkání, které budete lyzovat, a následných aplikací, pro které budete lyzát používat. Připravte zásobní roztoky detergentů, solí a inhibitorů proteáz v požadovaných koncentracích.
- Zásobní roztoky detergentů, solí a inhibitorů proteáz se přidají do kádinky nebo baňky.
- Přidejte deionizovanou vodu, aby se objem zvýšil na požadované množství pufru.
- Smíchejte složky pomocí míchadla, abyste získali roztok předmíchaného mixu.
- Změřte pH pufru pomocí pH metru nebo pH proužků a upravte pH podle potřeby malým množstvím kyseliny nebo zásady.
- Použijte sondový ultrasonicator k homogenizaci roztoku premixu tak, aby se získal vysoce homogenní roztok. Proto sonikujte roztok na několik sekund, dokud se roztok důkladně nepromíchá a všechny shluky nebo agregáty se nerozloží. Doba trvání a síla sonikace může být optimalizována na základě specifického lyzačního pufru a ultrazvuku použitého.
- Po ultrazvuku znovu změřte pH pufru a podle potřeby upravte.
- Filtrujte pufr přes filtr 0,2 mikronu, abyste odstranili veškeré nečistoty nebo agregáty, které se mohly vytvořit během sonikace.
- Lyzační pufr je nyní připraven k použití.
Poznámka: Přesné složení a pH lyzačního pufru se mohou lišit v závislosti na lyzovaných buňkách nebo tkáních a následných aplikacích. Výše uvedený protokol je obecným vodítkem a může být nutné jej optimalizovat pro konkrétní aplikace.
Ultrazvukové homogenizéry se běžně používají pro narušení buněk a extrakci intracelulárních molekul. Proto mnoho aplikací lýzy používá sonikaci sondy nejen pro přípravu lyzačního pufru, ale také pro mechanické narušení buněk a extrakci.
To dělá ultrazvukové tkáňové homogenizátory všestranným nástrojem pro laboratoře a vysvětluje široké využití ultrasonicators v mikrobiologii, biotechnologii a vědě o životě.
Ultrazvukové laboratorní homogenizátory
Hielscher Ultrasonics vyrábí a dodává ultrazvukové homogenizéry a sondy (sonotrody) při různých výkonech a objemech vzorků. To nám umožňuje nabídnout vám nejvhodnější ultrazvukový disruptor pro přípravu vzorků. Zaměřujeme se na nejvyšší kvalitu, vynikající uživatelský komfort a spolehlivé výsledky sonikace. Všechny digitální ultrasonicators funkce inteligentní software, programování a pre-nastavení protokolů sonikace, dálkové ovládání prohlížeče, regulace teploty, osvětlení vzorků, stejně jako automatické nahrávání dat na vestavěné SD karty.
Návrh, výroba a poradenství – Kvalita Vyrobeno v Německu
Hielscher ultrasonicators jsou dobře známé pro jejich nejvyšší kvalitu a designové standardy. Robustnost a snadná obsluha umožňují hladkou integraci našich ultrasonicators do průmyslových zařízení. Drsné podmínky a náročná prostředí jsou snadno zvládnutelné Hielscher ultrasonicators.
Hielscher Ultrasonics je společnost certifikovaná ISO a klade zvláštní důraz na vysoce výkonné ultrasonicators představovat state-of-the-art technologie a uživatelská přívětivost. Samozřejmě, Hielscher ultrasonicators jsou CE kompatibilní a splňují požadavky UL, CSA a RoHs.
The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators:
VialTweeter na UP200St | 200w | 26kHz | ultrazvuku malých lahviček, např. Eppendorf 1,5 ml |
UP50H | 50W | 30kHz | handheld nebo standmounted laboratoř homogenizátor |
UP100H | 100W | 30kHz | handheld nebo standmounted laboratoř homogenizátor |
Uf200 ः t | 200w | 26kHz | handheld nebo standmounted laboratoř homogenizátor |
UP200St | 200w | 26kHz | standmounted laboratoř homogenizátor |
UP400St | 400w | 24kHz | standmounted laboratoř homogenizátor |
SonoStep | 200w | 26kHz | laboratorní reaktor kombinování, ultrazvuku, čerpadlo, míchadlo a nádoba |
GDmini2 | 200w | 26kHz | bez kontaminace toku buněk |
CupHorn | 200w | 26kHz | intenzivní ultrazvuková lázeň pro lahvičky a kádinky |
UIP400MTP | 400w | 24kHz | Ultrazvukový systém pro vícejamkové desky / mikrotitrační desky |

ultrazvukové cuphorn pro intenzivní sonikaci uzavřených zkumavek a lahviček pro sterilní homogenizaci vzorků.
Kontaktujte nás! / Zeptej se nás!

Ultrazvukový laboratorní homogenizátor UP400St se běžně používá pro přípravu lyzačního pufru a následné narušení buněk.
Literatura / Reference
- Fernandes, Luz; Santos, Hugo; Nunes-Miranda, J.; Lodeiro, Carlos; Capelo, Jose (2011): Ultrasonic Enhanced Applications in Proteomics Workflows: single probe versus multiprobe. Journal of Integrated OMICS 1, 2011.
- Priego-Capote, Feliciano; Castro, María (2004): Analytical uses of ultrasound – I. Sample preparation. TrAC Trends in Analytical Chemistry 23, 2004. 644-653.
- Welna, Maja; Szymczycha-Madeja, Anna; Pohl, Pawel (2011): Quality of the Trace Element Analysis: Sample Preparation Steps. In: Wide Spectra of Quality Control; InTechOpen 2011.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.

Hielscher Ultrasonics vyrábí vysoce výkonné ultrazvukové homogenizátory od Laboratoř na průmyslové velikosti.