Ултразвуково приготвяне на богат на тромбоцити серум

• Богатата на тромбоцити плазма (PRP) е кръвна плазма, обогатена с тромбоцити, която се използва за медицински и естетични процедури.
• Ултразвуковият лизис и кондиционирането са много ефективен метод за приготвяне на богата на тромбоцити плазма.
• Hielscher Ultrasonics предлага различни ултразвукови системи, които отговарят на изискванията за обработка на кръвта (напр. за приготвяне в чисто помещение и извън него).

Богат на тромбоцити серум

Ултразвуковата обработка е надежден и лесен метод за лизиране на тромбоцитите в автоложен кръвен серум с цел освобождаване на растежните фактори. Фракциите, получени от тромбоцити – известни също като автоложен кондициониран серум (ACS) – се използват за възстановяване на тъкани или за естетични процедури. За постигане на оптимални резултати PRP се обогатява преди инжектиране.
За приготвяне на плазма, обогатена с фактори на клетъчния растеж, ултразвуковата обработка е много ефективен и ефикасен метод за лизиране на клетъчните мембрани и освобождаване на почти всички фактори на клетъчния растеж от тромбоцитите. Чрез ултразвуков лизис и кондициониране може да се използва дори кръв, обработена с антикоагуланти.
Кондиционирането на PRP чрез ултразвукова обработка е удобен и икономически изгоден начин за получаване на концентрирани растежни фактори.

Ултразвуков лизис на богата на тромбоцити плазма (PRP)

Ефекти на ултразвуковия лизис

Ултразвуковата обработка на кръвен серум води до хомогенен лизис на тромбоцитите с цел освобождаване на съдържащите се в тях растежни фактори (растежен фактор AB (PDGF-AB), растежен фактор AA (PDGF-AA), растежен фактор BB (PDGF-BB), съдов ендотелен растежен фактор (VEGF), трансформиращ растежен фактор β (TGF-β), епидермален растежен фактор (EGF), инсулиноподобен растежен фактор (IGF), растежен фактор на епителните клетки ECGF и фибробластен растежен фактор (FGF)). Тромбоцитите и техните алфа-гранули се разрушават чрез ултразвукова обработка, като се използва явлението акустична кавитация. Използването на ултразвукова кавитация за лизис на тромбоцитите намалява възможното отрицателно въздействие на метода с многократно замразяване и размразяване върху активността на растежните фактори.

Протокол за ултразвуково приготвяне на PRP

Приблизително 16mL прясно взета автоложна кръвна проба се обръща внимателно 8–10 пъти в епруветка, за да се смесят добре кръвта и антикоагулантите. След това пробата се центрофугира при 1800 g за 20 min при стайна температура. След центрофугирането тромбоцитите и мононуклеарните клетки образуват белезникав слой в долната част на плазмения слой, който е известен като богата на тромбоцити плазма (PRP). Горният слой е известен като бедна на тромбоцити плазма (PPP). Мононуклеарните клетки могат да бъдат отстранени или да останат в пробата. Често мононуклеарните клетки остават в PRP пробата, за да се избегнат допълнителни стъпки, които носят риск от замърсяване.
Забележка: Ултразвуковата обработка на автоложна PRP трябва да се извършва при стерилни условия.
PRP и PPP се разделят и събират. Към PPP се добавят 1,5mL 10% разтвор на калциев хлорид, а към PRP се добавят 0,5mL 5% етанол. Двете суспензии се разклащат внимателно и се оставят да престоят 5 min при стайна температура. Накрая към PRP суспензията се добавя 1mL PPP и тя се оставя да престои до образуването на фибринов съсирек.
Ултразвукова обработка: Тъй като образуваният тромбоцитен гел служи като резервоар за освободените растежни фактори, фибриновият гел трябва да бъде разрушен, за да се освободят наличните растежни фактори. Параметрите за ултразвуковия лизис и освобождаването на растежните фактори са следните: Подложете на ултразвукова обработка с UP200Ht или UP200St (200W, 26kHz) със сонотрод S26d2 пробата в епруветката. За да се избегне прегряване на кръвната проба, ултразвуковата обработка може да се извършва в импулсни цикли (напр. 10 сек. включено, 30 сек. изключено). Пробата трябва да се постави върху лед за охлаждане, така че температурата да се поддържа оптимално между 2 – 5°C. След ултразвуковата обработка пробата се центрофугира при 16 000 g за 5 min. при стайна температура. Супернатантът се събира и може да се съхранява при -70°C.
При метода с ултразвукова обработка концентрацията на тромбоцити в PRP фракцията е увеличена 1,7 – 4,5 пъти в сравнение със средния брой тромбоцити в цяла кръв, посочен в литературата.

PRP е комбинирана с терапия със стволови клетки, получени от мастна тъкан (автоложни стволови клетки, освободени чрез ултразвук от мастна тъкан, смесени с PRP и инжектирани обратно в тъканта на пациента за възстановяването ѝ).

Ултразвуково оборудване

Hielscher Ultrasonics е експерт в усъвършенстваната и надеждна ултразвукова технология. Нашите ултразвукови апарати се използват по целия свят за лизис, екстракция и подготовка на проби – чрез пряка и непряка обработка. Подлежащите на автоклавиране както и еднократните принадлежности осигуряват свободна от замърсяване обработка на автоложни кръвни проби. Повечето от нашите системи могат да се използват за ултразвуков лизис на стволови клетки и PRP, което прави нашите ултразвукови апарати още по-ефективни от икономическа гледна точка.
Таблицата по-долу представя нашите ултразвукови апарати, подходящи за приготвяне на богата на тромбоцити плазма, и съответния препоръчителен обем на пробата. Предлагат се също по-големи ултразвукови апарати и системи по индивидуална поръчка.

Свържете се с нас още днес! С удоволствие ще ви помогнем да намерите оптималния ултразвуков апарат!