Ултразвуково стволови клетки Изолиране
- Ултразвукова кавитация е високо ефективен механичен метод за изолиране на стволови клетки от човешки мастната тъкан.
- Ултразвуково изолиран стромален съдовата част (SVF) показват висока регенеративен потенциал за медицински приложения.
- Hielscher Ultrasonics предлага различни възможности за пряка и непряка звукообработка почистващи стволови клетки.
Ултразвуково изолиране на стволови клетки
От човешкото тяло екстрахира мастната тъкан (чрез липосукция) се обработва с ултразвук за отстраняване на тъкан от стволови клетки и други растежни клетки. Това отделя част от клетките е известен като стромални съдова фракция клетки (SVF).
ултразвукова техника изолиране на стволови клетки от мастна тъкан се основава единствено на работния принцип на ултразвукова получен от кавитация, която е механично срязване. Cavitational сили на срязване нарушават мастната тъкан, така че стволовите клетки се освобождават от структурата на мастната тъкан. Изолирането на ултразвукова стволови клетки е процедура за несъдържащ ензим, като се избягва използването на колагеназа, трипсин, или диспаза.
За да се разделят извлечени стволови клетки, мезенхимни стволови клетки, ендотелни прекурсори и други видове клетъчен растеж, се обработва с ултразвук в мастната тъкан се центрофугира.
Отделените стволовите клетки се събират и се анализират за тяхното качество включително броя на клетките, жизнеспособност, ендотоксин, и грам петно преди използва веднага за автоложна трансплантация или се съхраняват в крио-съхранение.
Защо се избегне ензими?
Тъй като ензимно разграждане за изолиране на стволови клетки е придружено с високи разходи и възможни рискове за безопасността, както и липса на ефикасност [Обербауер сътр. 2015], са предпочитани не-ензимни методи за изолиране като ултразвукова кавитация. Етапът на ултразвукова изолация замества ензимно разграждане чрез отделяне на клетките и клетъчните агрегати механично от мастната тъкан.
GDmini2 в UP200St-TD Transducer (200 вата)
- бърз
- ефикасен
- възпроизводим
- сейф
- Свободен от ензим
- рентабилен
- стерилни Опции
Мастната получени от стволови клетки
Стволови клетки Добив
От SVF метод изолация се използва ултразвукова добив кавитация в 1.67-2.24 х 107 клетки с жизнеспособност на 97.1 – 98.9% [Victor, S., 2014]. Клетъчни добиви от около 2 – 4 милиона клетки/грам мастната тъкан са получени чрез ултразвукова лизис на зрели адипоцити в дисоциирана мастна тъкан [Bright et al., 2014].
Ултразвуково получава клетки притежават еднакво висока адипогенен и остеогенен потенциал диференциация, в сравнение със стандартен метод ензимно изолиране [Обербауер и сътр. 2015].
Ултразвукови системи за изолиране на стволови клетки
За да се гарантира най-висока безопасност и най-добро качество, надеждна ултразвукова техника, която дава възможност за прецизен контрол върху лечението на стволови клетки, е ключов фактор за успешното лечение на пациентите. Hielscher Ultrasonics предлага различни възможности за автоложна процес на отделяне на ултразвукова кавитация за изолиране и стебло на реколтата и ендотелните прекурсорни клетки.
Директен звукообработка
За процеса на изолиране на стволови клетки чрез директна обработка с ултразвук, ултразвуков накрайник (издатина, ултразвуков накрайник / проба) се потапя в мастната мастната тъкан. Via издатината, ултразвуковите вълни се свързват директно в автоложна мазнини, така че ултразвукова кавитация освобождава стволови и стромални клетки от остатъчна тъкан. Hielscher ултразвукови процесори Uf200 ः т и UP200St с издатина S26d14 обикновено се използват системи за лечение на автоложни стволови клетки. В SVF изолация от пряк звукообработка е най-вече подходящ за използване в чисти помещения съоръжения.
Косвено за озвучаване
Тъй като стволовите клетки се използват за автоложни приложения, стерилност на процеса е много важно. Ето защо, Hielscher е разработила няколко варианта на косвено звукообработка като GDmini2, VialTweeter и други по поръчка системи. Чрез непряко ултразвук, ултразвукови вълни са свързани чрез контейнер стена в мастната тъкан. фракция стромален съдова (SVF) е отделена от мастната тъкан от ултразвукова кавитация като същото като по време на директен ултразвук.
индиректен процес на обработка с ултразвук предлага предимството за обработка на клетките в затворен съд под замърсяване без условия тъй като рискът от кръстосано замърсяване чрез вкарване на ултразвук рог (издатина), се елиминира. изолацията на клетките се извършва в затворена система, която осигурява стерилни условия на процеса.
цифрови ултразвукови устройства Hielscher могат да бъдат точно контролирани чрез докосване на дисплея или контрол браузър. процедури за обработка с ултразвук може да бъде предварително определени чрез интуитивен меню. Ултразвуковите устройства са оборудвани с устройство за запис на данни автоматични (всички данни за обработка с ултразвук процес скоростта се съхраняват на интегрирана SD-Card). ултразвукова Количеството на енергията може да бъде точно регулира на протокола за единична килия.
Позоваването литература /
- Обербауер, "елени"; Щефанхаген, Каролин; Вурцер, Христоф; Габриел, Крисчън; Редл, Хайнц; Wolbank, Susanne (2015): ензимни и неензимни изолационни системи за клетки, производни на мастната тъкан: Настоящо състояние на техниката. Регенерация на клетките (2015) 4:7.
Факти заслужава да се знае
стволови клетки
Стволовите клетки са недиференцирани клетки от многоклетъчен организъм, които имат способността да произвеждат неопределено повече клетки от същия тип. Те се характеризират с забележителния потенциал да се развие много различни видове клетки в организма по време на началото на състоянието на живот и растеж. Най-отличителната черта на стволови клетки са способността им да се поднови с деленето на клетките и тяхната способност да се превърне в тъканно или орган-специфични клетки със специални функции. Плурипотентни стволови клетки имат потенциала да се диференцират във всяка от трите зародишните клетки: ендодермата (интериор стомашната лигавица, стомашно-чревния тракт, белите дробове), ме-зодермалните (мускулите, костите, кръв, урогенитална), или ектодерма (епидермални тъкани и нервна система).
В някои органи, като червата и костния мозък, стволови клетки редовно разделят на ремонт и заменят износени или повредени тъкани. В други органи като панкреаса и сърцето, стволовите клетки се делят само при специални условия.
Мезенхимни стромален / стволови клетки (MSC), които предлагат висок потенциал за разнообразни терапевтични приложения в регенеративен и естетична медицина, се намират главно в костния мозък, но те могат да бъдат изолирани от други тъкани (например хрущялни, мазнини, мускулни клетки), също. Мезенхимни стволови клетки се считат за прототипния възрастни стволови клетки, които се характеризират с техния капацитет за самообновяване.
Стволови изследвания и лечения клетка се използват да се култивира тъкани и органи с цел трансплантация (тъканно инженерство). Други медицински области за приложение на стволови клетки могат да бъдат намерени в лечението на болест на мозъка (например, Паркинсон и болестта на Алцхаймер), дефицит на клетъчна терапия, кръв заболяване (например, левкемия), ставите и хрущяла дегенерация (например остеоартрит), както и козметични лечения (например процедури за подмладяване). Като цяло, стволови клетки имат размер на прибл. 15-25 микрона в диаметър.
Мезенхимни стволови клетки (MSC) са мултипотентни стромални клетки, които имат способността да се диференцират в различни клетъчни типове, включително остеобласти (костни клетки), хондроцити (хрущялните клетки), миоцити (мускулни клетки), и адипоцитите (мастните клетки).
Строма съдова фракция (SVF)
Строма съдова фракция (SVF) е компонент на lipoaspirate който може да бъде извлечен чрез липосукция от мастна тъкан в човешкото тяло. В lipoaspirate състои в хетерогенна смес на клетки и има високо съдържание на стволови клетки, известни като мастните извлечени стволови клетки (ASC или ADSC), които показват прилики с костен мозък стволови клетки, като тяхната способност да се диференцират в мултилинейно клетки.
Хетерогенната населението на SVF включва ендотелни клетки, еритроцити, фибробласти, лимфоцити, моноцити / макрофаги и перицити и др, както и важна част от мастните извлечени стволови клетки.
Мастната-Derived строма / стволови клетки (ASC)
(FGF), кератиноцитен растежен фактор (KGF), клетъчен растежен фактор (bFGF), клетъчен растежен фактор (KGF) (PDGF), хепатоцитен растежен фактор (HGF), трансформиращ растежен фактор-бета (TGF-p), инсулинов растежен фактор (IGF) и получен от мозък невротрофичен фактор (BDNF). АСС не само освобождават растежни фактори, но също така секретират цитокини, включващи fms-свързана тирозин киназа 3 (Flt-3) лиганд, гранулоцит-колонио стимулиращ фактор (G-CSF), гранулоцит макрофаг- колония стимулиращ фактор (GM-CSF) (IL-6), IL-7, IL-8, IL-11 и IL-12, инхибиторен фактор за левкемия (LIF) и фактор на тумор некрозис-алфа (TNF-α).
Екстракция на стволови клетъчни типове
Автоложни възрастни кръвни клетки от хора могат да бъдат извлечени от следните източници:
- Костния мозък, което изисква екстракция от реколтата, което е пробиване в костите.
- Мастна тъкан (липидни клетки), което изисква екстракция с липосукция.
- Кръвта, която изисква екстракция чрез афереза, където кръвта от донора преминава през “диализа” машина, където стволовите клетки се екстрахира докато другите кръвни компоненти се връща обратно към донор.