Ултразвуково отделяне на клетки

Ултразвуковото клетъчно отделяне е високоефективна и надеждна техника за подготовка на проби, използвана в различни области на клетъчната биология и биотехнология. Използвайки ултразвукови вълни, многоямковият плачен ултразвук UIP400MTP отделя прилепналите клетки от култивационните повърхности и подготвя клетъчните суспензии за приложения надолу по веригата. Соникацията предлага няколко предимства пред традиционните ензимни, химични и механични техники за отделяне, което я прави ценен инструмент за изследователите.

Принцип на ултразвуково отделяне на клетки

Ултразвуковото отделяне на клетките разчита на използването на мощен ултразвук, за да наруши взаимодействията между клетките и субстрата, към който са прикрепени. Ултразвуковите вълни генерират микромехурчета, акустична кавитация и вибрации в хранителната среда, произвеждайки механични сили, които нежно, но ефективно изместват клетките. Този процес обикновено се извършва с помощта на безконтактния UIP400MTP на ултразвука за многоямкови плочи.

По-долу ще намерите примерна инструкция за отделяне на клетки с помощта на многоямковия пластинчатия соникатор UIP400MTP.
 

Оборудване и материали за ултразвуково отделяне на клетки

• Безконтактен соникатор за многоямкови плочи UIP400MTP: Този високопроизводителен ултразвук е ключовият инструмент. Пластинчатият ултразвуков UIP400MTP е подходящ за всякакви стандартни многоямкови и микротитрни плочи, както и за чаши на Петри. Ултразвуковите вълни осигуряват необходимата механична енергия за отделяне на клетките.
• Плочи за клетъчни култури или съд на Петри: Стандартни съдове, използвани за отглеждане на адхезивни клетъчни култури.
• Хранителна среда: Течната среда, в която се отглеждат и поддържат клетките.
• Стерилен PBS (фосфатно-буфериран физиологичен разтвор): Използва се за измиване на клетки преди отделяне.
• Тръби за събиране: За събиране на отделената клетъчна суспензия.

Протокол за ултразвуково отлепване с помощта на Plate Sonicator UIP400MTP

1. Подготовка
   – Уверете се, че цялото оборудване е чисто и стерилно, за да предотвратите замърсяване.
   – Предварително загрейте хранителната среда и PBS до подходящата температура (обикновено 37°C).
2. Измиване на клетки
   – Аспирирайте хранителната среда от колбата или плочата за клетъчна култура.
   – Внимателно измийте клетките със стерилен PBS, за да отстраните остатъчната среда и отделените клетки.
3. ултразвук
   – Добавете малък обем PBS или прясна хранителна среда към колбата или чинията, за да покриете клетъчния монослой.
   – Поставете съда или чинията на Петри в UIP400MTP ултразвука.
   – Соникирайте за определена продължителност, обикновено варираща от няколко секунди до няколко минути, в зависимост от вида на клетката и силата на привързване.
4. Събиране на клетъчна суспензия
   – След ултразвук наблюдавайте клетките под микроскоп, за да осигурите отделяне.
   – Внимателно пипетирайте клетъчната суспензия, за да съберете отделените клетки.
   – Прехвърлете суспензията в тръба за събиране.
5. Обработка след отделяне
   – Центрофугирайте клетъчната суспензия, ако е необходимо, за да се концентрират клетките.
   – Ресуспендирайте клетките в прясна среда за култура или буфер за приложения надолу по веригата.

Бележки: Параметрите (като време и интензивност на ултразвука) трябва да бъдат оптимизирани за различни типове клетки, за да се избегне увреждане на клетките. Някои деликатни типове клетки могат да бъдат по-чувствителни към ултразвукова обработка, което изисква внимателна оптимизация.

Практически приложения на ултразвуковото отделяне на клетки

Ултразвуковото отделяне на клетки се използва в различни изследователски и клинични условия:

1. Поточна цитометрия: Подготовка на едноклетъчни суспензии за анализ.
2. Тестове за броене и жизнеспособност на клетките: Отделяне на клетки за точно броене и оценка на жизнеспособността.
3. Субкултивиране: Прехвърляне на клетки от един съд за култура в друг.
4. Експерименти по молекулярна биология: Изолиране на клетки за извличане на ДНК, РНК и протеини.

Прочетете тук как UIP400MTP-96-ямковият плачени ултразвукораздавател се използва за изместване на биофилм при биофилмови анализи като протокола ASTM E2799!

Защо трябва да заменя клетъчното изстъргване с клетъчно отделяне с UIP400MTP Microplate Sonciator?

Замяната на клетъчното изстъргване с клетъчно отделяне с помощта на ултразвука с микроплоча UIP400MTP предлага на изследователите няколко предимства. За разлика от ръчното изстъргване, прецизно контролираната ултразвук с UIP400MTP осигурява последователно и нежно отделяне на клетките, минимизирайки механичните повреди и запазвайки жизнеспособността на клетката. UIP400MTP осигурява прецизен контрол върху параметрите на ултразвука, позволявайки равномерно третиране във всички кладенци и елиминирайки променливостта между пробите. Този метод е по-бърз, по-ефективен и мащабируем, което го прави идеален за приложения с висока производителност, като същевременно поддържа възпроизводимост и целостта на чувствителните клетъчни култури. Намерете сравнителното проучване тук!