Ultrasəs toxuma homogenizatorları

• Ultrasəs emalı toxumaların homogenləşdirilməsi üçün təhlükəsiz və səmərəli üsuldur.
• Ultrasəsin tətbiq sahələrinə toxumaların və suspenziyaların hazırlanması, zülalların, DNA/ RNA və aktiv birləşmələrin ekstraksiyası, həmçinin fermentlərin və maya göbələklərinin aktivləşdirilməsi / inaktivləşdirilməsi daxildir.
• Zond tipli ultrasəs homogenizatorlarının dəqiq idarə oluna bilməsi toxuma nümunələrinin etibarlı hazırlanmasını təmin edir.

Ultrasəs zondları ilə toxumaların homogenləşdirilməsi

Toxumaların homogenləşdirilməsi zülallar, DNA və ya RNA kimi hüceyrədaxili maddələrin ekstraksiyasından əvvəl heyvan və bitki hüceyrələrinin və ya mikroorqanizmlərin hazırlandığı nümunə hazırlama prosesidir. Hüceyrə möhtəviyyatını sərbəst buraxmaq üçün hüceyrə membranı parçalanmalıdır. Hüceyrə divarı dağıldıqdan sonra hüceyrədaxili makromolekullar bufer məhlulunda sərbəst üzür və bununla da orqanoidlər, zülallar və DNA/ RNA əlçatan olur. Ultrasəs toxuma homogenizatorları və hüceyrə parçalayıcıları hüceyrələrin parçalanması, lizis və ekstraksiya üçün çox səmərəli vasitələrdir.

Ultrasəs toxuma homogenizatorlarının alternativ lizis üsulları ilə müqayisəsi

Laboratoriyanız üçün hansı hüceyrə parçalama üsulunun və hansı toxuma homogenləşdirmə avadanlığının ən yaxşı seçim olduğunu düşünə bilərsiniz. Aşağıda ultrasəs lizisinin və toxumaların ultrasəslə homogenləşdirilməsinin lehinə bir neçə dəlil tapa bilərsiniz, çünki ultrasəs emalı alternativ homogenləşdirmə üsulları ilə müqayisədə bir sıra üstünlüklərə malikdir:

• Səmərəlilik: Ultrasəslə homogenləşdirmə toxumaların və hüceyrələrin parçalanması üçün sürətli və səmərəli üsuldur. Ultrasəs toxuma homogenizatorları akustik kavitasiya prinsipi ilə işləyir. Bu üsul yüksək səmərəliliyə malikdir və hüceyrələri bir neçə saniyə ərzində parçalaya bilir. İntensivlik zəifdən güclüyə qədər tənzimlənə bildiyindən ultrasəs emalı digər üsullarla homogenləşdirilməsi çətin olan sərt və ya lifli toxumalar üçün xüsusilə effektivdir.



• Çarpaz çirklənmənin qarşısının alınması: Hielscher nümunəni dolayı ultrasəs emalı ilə hazırlayan güclü ultrasəs toxuma homogenizatorları təklif edir. UIP400MTP (mikrotitr və çoxquyulu lövhələr üçün idealdır), həmçinin VialTweeter və CupHorn (flakonlar, sınaq boruları və laboratoriya stəkanları üçün idealdır) ilə Hielscher təmassız homogenləşdirmə üçün ultrasəslə hüceyrə parçalama avadanlığı təklif edir ki, bu da nümunələr arasında çarpaz çirklənmə riskini azaldır. Bu, həmçinin üyütmə səthlərindən və ya digər homogenləşdirmə avadanlığından çirkləndiricilərin daxil olması riskini minimuma endirir.
• Çeviklik: Ultrasəslə homogenləşdirmə kiçik həcmli nümunələrdən iri toxuma nümunələrinə qədər müxtəlif ölçülü və həcmli nümunələr üçün istifadə edilə bilər. Bundan əlavə, ultrasəslə homogenləşdirmə bitki toxumaları, heyvan toxumaları və mikrob kulturları da daxil olmaqla geniş çeşidli nümunə növləri üçün uyğundur. Müxtəlif toxuma növləri üçün parçalanma səviyyəsini optimallaşdırmaq məqsədilə ultrasəs emalının intensivliyi və müddəti tənzimlənə bilər.
• Təkrarlana bilən nəticələr: Ultrasəslə homogenləşdirmə sabit nəticələr verir və çıxış gücü və ultrasəs emalı müddəti kimi homogenləşdirmə parametrlərinə dəqiq nəzarət etməyə imkan yaradır. Bu, eksperimental məlumatların təkrarlana bilməsini və dəqiqliyini təmin etməyə kömək edir.
• Biomolekulların qorunması: Zond tipli ultrasəs emalı qeyri-termik emaldır. Bu o deməkdir ki, onun təsiri istiliyə əsaslanmır. Lakin termodinamikanın ikinci qanununa uyğun olaraq hər bir mexaniki emal istilik yaradır. Bu o deməkdir ki, ultrasəs emalının müddəti uzandıqca nümunə daha çox qızır. Hielscher şirkətinin ən müasir ultrasəs cihazları temperatur sensorları və temperaturun ağıllı monitorinq proqram təminatı ilə təchiz olunub. Təkmil soyutma imkanları istilik nəticəsində parçalanmanın qarşısını almağa imkan verir və fermentlər və zülallar kimi istiliyə həssas biomolekulların aktivliyini qorumağa kömək edir.
• Vaxta qənaət: Zond tipli ultrasəs emalının yüksək səmərəliliyi toxumaların sürətlə homogenləşdirilməsinə imkan verir və toxuma üzərində daha çox fiziki manipulyasiya tələb edən digər üsullarla müqayisədə vaxta qənaət edir.

Toxumaların ultrasəslə homogenləşdirilməsi alternativ homogenləşdirmə üsulları ilə müqayisədə bir sıra üstünlüklər təklif edir. Buna görə ultrasəs toxuma homogenizatorları müxtəlif tədqiqat və sənaye tətbiqlərində üstünlük verilən hüceyrə parçalama üsuludur.

Ultrasəs zondu ilə toxumaların homogenləşdirilməsi protokoluna nümunə:

Ultrasəs cihazları sadə idarəetmə və sürətli homogenləşdirmə proseduru ilə toxumaların homogenləşdirilməsini asanlaşdırır. Eyni zamanda, ultrasəs prosesinin parametrlərinə dəqiq nəzarət etmək və onları izləmək mümkündür ki, bu da nəticələrin etibarlı və təkrarlana bilən olmasını təmin edir.
 
Materiallar:

• Toxuma nümunəsi (məsələn, qaraciyər, beyin, əzələ)
• Bufer (məsələn, PBS, Tris-HCl)
• Proteaza inhibitorları qarışığı
• Ultrasəs homogenizatoru (zond tipli)
• Buz
• Mikrosentrifuqa boruları
• Pipetlər

Toxumaların ultrasəslə homogenləşdirilməsi protokolu:

Qeyd: Toxumanın növündən, yaşından və sağlamlıq vəziyyətindən, həmçinin konkret sonrakı tətbiqlərdən asılı olaraq ultrasəs emalının müddətini və intensivliyini optimallaşdırmaq lazım gələ bilər. Homogenatın çıxımını və keyfiyyətini optimallaşdırmaq üçün buferin, proteaza inhibitorlarının və digər əlavələrin diqqətlə seçilməsi də vacibdir.

Hielscher ultrasəs toxuma homogenizatorlarının əsas üstünlükləri

• güclü ultrasəs kavitasiyası ilə sürətli və səmərəli üyütmə, homogenləşdirmə, lizis və hüceyrələrin parçalanması və ya ekstraksiya
• asan və intuitiv istifadə və idarəetmə (analoq və ya rəqəmsal versiyanı seçin)
• ultrasəs emalı zamanı sonotrodun yuyulması ilə məhsulla təmas edən səthlərin asan təmizlənməsi (CIP yerində təmizləmə/ SIP yerində sterilizasiya)
• səsdən qoruyucu qutu (laboratoriya cihazları üçün səsdən qoruyucu qutu istənilən bucaqdan tam görünüşü təmin etmək məqsədilə bütövlükdə akril şüşədən hazırlanır)
• cihazdakı rəqəmsal toxunma ekranı (rəqəmsal ultrasəs cihazları) və ya gücölçən (analoq cihazlar üçün) vasitəsilə proses parametrlərinə tam nəzarət
• inteqrasiya edilmiş temperatur nəzarəti (istiliyə həssas, labil toxuma nümunələri üçün vacibdir)
• homogenləşdirmə zamanı fasilələr rəqəmsal menyuda fərdi şəkildə müəyyənləşdirilə və əvvəlcədən təyin edilə bilər
• bütün rəqəmsal cihazlar məlumatların avtomatik qeydə alınması sistemi (inteqrasiya edilmiş SD/USB-ComboCard üzərində), qoşula bilən temperatur sensoru və brauzer vasitəsilə uzaqdan idarəetmə ilə təchiz olunub.
• bir neçə nümunənin emalı üçün VialTweeter, CupHorn və ya 4 və ya 8 barmaqlı sonotrodlardan istifadə (məsələn, laboratoriya robotlarının proseslərinə inteqrasiya üçün)
• kiçik və böyük miqyaslı tətbiqlər üçün

Aşağıdakı cədvəl hüceyrələrin parçalanması, lizis və ekstraksiya üçün ultrasəs toxuma homogenizatorlarımızın təxmini emal tutumu barədə məlumat verir:

Tətbiqiniz üçün optimal ultrasəs toxuma homogenizatorunu tapın

Hielscher ultrasəs toxuma homogenizatorları 50W ilə 16.000W (16kW) arasında ultrasəs çıxış gücü diapazonunda mövcuddur.
Laboratoriya işçiləri Hielscher ultrasəs laboratoriya homogenizatorlarının sadə və intuitiv idarə olunmasından məmnundurlar. Konkret tələblərdən asılı olaraq Hielscher cihazları rəqəmsal və ya analoq idarəetmə ilə təklif olunur.

1. VialTweeter 10 flakona və ya sınaq borusuna qədər nümunənin eyni intensivliklə eyni vaxtda ultrasəs emalına imkan verən güclü ultrasəs homogenizatorudur. Dolayı ultrasəs emalı sayəsində çarpaz çirklənmənin və nümunə itkisinin tamamilə qarşısı alınır. Birdəfəlik flakonlardan istifadə edildiyinə görə təmizləmə və sanitar emal minimuma endirilir. Blok sonotrod avtoklavda sterilizasiya oluna bilər.
2. UIP400MTP lövhə sonikatoru 96 quyulu lövhələr kimi mikrotitr və çoxquyulu lövhələrlə işlədiyiniz zaman idealdır. Sadəcə çoxquyulu lövhənizi və ya Petri qabınızı UIP400MTP cihazına yerləşdirin və bütün nümunələr bərabər şəkildə ultrasəslə emal olunur. UIP400MTP Plate-Sonicator ilə nümunələrin yüksək məhsuldarlıqla emalı sadə və səmərəli olur!
3. Zond tipli laboratoriya ultrasəs cihazları çeşidindən 50 vatt, 100 vatt, 200 vatt və 400 vatt gücündə homogenizatorlar seçilə bilər.
   UP50H (50W)
   UP100H (100W)
   UP200Ht / UP200St (200W)
   UP400St (400W)

Ultrasəs toxuma homogenizatorlarının tətbiqi və istifadəsi

Ultrasəs homogenizatorları molekulyar səviyyədə hüceyrədaxili maddələrin ekstraksiyasından əvvəl toxumaların üyüdülməsi, hüceyrələrin parçalanması və lizisi, həmçinin bioloji nümunələrin homogenləşdirilməsi üçün geniş istifadə olunur. Nümunələrin nəzarət altında ultrasəslə emalı ilə lizisdən ekstraksiyaya və homogenləşdirməyə qədər bütün mərhələlər eyni ultrasəs hüceyrə parçalayıcısından istifadə etməklə həyata keçirilə bilər.
Ultrasəs homogenizatorlarının böyük üstünlüyü verilən gücün və ultrasəs emalı intensivliyinin asanlıqla tənzimlənməsidir. Hielscher ultrasəs hüceyrə parçalayıcıları (lizatorlar) amplitudanı 20%-dən 100%-ə qədər tənzimləməklə ultrasəs emalı intensivliyinə nəzarət etməyə imkan verir.
Fasiləsiz işə alternativ olaraq ultrasəs homogenizatoru dövri rejimə, məsələn, istiliyə həssas toxumaların ultrasəs emalı üçün təyin edilə bilər. İmpuls rejimində ultrasəs emalı o deməkdir ki, ultrasəs cihazı dövri tsikllərlə yüksək intensivlikli ultrasəs dalğaları yaradır. Ultrasəs emalı dövrünün müddəti və fasilə müddəti istifadəçi tərəfindən fərdi şəkildə təyin edilə bilər.
İmpulslu ultrasəs emalı zamanı fasilə müddətində ultrasəslə emal olunan material öz sakit vəziyyətinə qayıda və nümunə soyuya bilər (istiliyin yayılması üçün fasilə müddətindən istifadə etməklə). Bununla emal intensivliyi toxumaya uyğun olaraq dəqiq təyin edilə və nümunənin arzuolunmaz qızması azaldıla bilər.
Ultrasəs toxuma homogenizatorları möhkəm və istifadə üçün rahatdır, eyni zamanda bütün vacib proses parametrlərinə tam nəzarət sayəsində təkrarlana bilməni təmin edən etibarlı nəticələr verir.
Toxumaların ultrasəslə üyüdülməsi, hüceyrələrin parçalanması, lizis, ekstraksiya və homogenləşdirmənin geniş yayılmış tətbiq sahələri bioloji və əczaçılıq laboratoriyaları, mikrobiologiya, proteomika və genomika tədqiqatları (məsələn, Western blot və fermentlə əlaqəli immunosorbent analizi ELISA-dan əvvəl zülalların sərbəst buraxılması), həmçinin qida, əczaçılıq və kosmetika sənayeləri üçün bitki ekstraktlarının və bioaktiv birləşmələrin istehsalıdır.

• Nümunələrin hazırlanması, toxumaların homogenləşdirilməsi, lizis və ekstraksiya (məsələn, hüceyrələr, bakteriyalar, sporlar, aktiv birləşmələr) ilə bağlı konkret proses tövsiyələri üçün buraya klikləyin!
• Sonikatorların proteomika tədqiqatları üçün niyə əvəzolunmaz vasitə olduğunu burada oxuyun!
• Ultrasəs emalının genomika tədqiqatlarını necə asanlaşdırdığını öyrənin!

Ədəbiyyat / İstinadlar

• Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
• Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
• Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
• Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.