MonkeyPox Virusunda Ultrasəs Tətbiqləri

Ultrasəsləmə meymun çiçəyi virusunun (MPXV) analitik nümunələrdən təcrid edilməsi, virus DNT-nin parçalanması, eləcə də meymun çiçəyi vaksinin istehsalında mühüm emal üsuludur. Diaqnostika və analizdən əvvəl nümunənin hazırlanması üçün (PCR, ELISA və s.) ultrasəsləmə meymun çiçəyi virusunu hüceyrə daxilindən azad etmək və/yaxud DNT-ni parçalamaq üçün hüceyrələri lizis etmək üçün istifadə olunur. Peyvənd istehsalında tətbiqlər virus hissəciklərinin/DNT-nin hazırlanmasından, dərman daşıyıcılarında inkapsulyasiyadan və aşının formalaşdırılmasından ibarətdir.
Aşağıda siz ultrasəs meymun çiçəyi virusu nümunəsinin hazırlanması, eləcə də ultrasəs köməyi ilə MPXV peyvəndi istehsalı haqqında ətraflı məlumat tapa bilərsiniz.

 

Bu səhifədə nə tapa bilərsiniz:

İnformasiya tələbi




Bizimlə əlaqə saxlayın Gizlilik Siyasəti.


Yüksək performanslı ultrasəs cihazları bir çox peyvəndin istehsalında mühüm emal alətidir.

Davamlı axın əməliyyatı üçün 2x 1 kVt-lıq ultrasəs cihazından ibarət bu sistem vaksin istehsalı müəssisəsində quraşdırılmışdır.

Polimeraza Zəncirvari Reaksiyadan (PCR) əvvəl ultrasəs lizis və DNT fraqmentasiyası

Meymun çiçəyi virusu infeksiyası, virus DNT-nin unikal ardıcıllığını aşkar etmək üçün real vaxt rejimində və ya ənənəvi polimeraza zəncirvari reaksiyadan (PZR) istifadə edərək, nuklein turşusunun gücləndirilməsi testi (NAAT) ilə aşkar edilir. Nümunə (məsələn, nazofarengeal dəyişdirmə və ya dəri biopsiyalarından) hüceyrələrdə virus ehtiva edir.
Təhlil üçün virus hüceyrələrdən buraxılmalı və virus DNT-si PCR üçün parçalanmalıdır.

Ultrasəs lizisi:

Bioloji nümunələrin ultrasəs lizisi üçün mikrotipli S26d2 ilə Ultrasonicator UP200HtHüceyrələrin ultrasəs pozulması/lizisi virusları hüceyrə nümunələrindən təcrid etmək üçün etibarlı və səmərəli üsuldur və bununla da hüceyrə lizisi və DNT-nin sərbəst buraxılmasına nail olmaq üçün alternativ olaraq istifadə edilən lizozim, proteinaz K və müxtəlif yuyucu vasitələr kimi kimyəvi agentlərə nisbətən üstünlük verilən üsuldur.
Bununla belə, bu cür kimyəvi reagentlərin istifadəsi PCR reaksiyasının qarşısını almaq üçün PCR analizindən əvvəl bir neçə mərhələdə vaxt aparan nümunənin hazırlanmasını tələb edir. PCR inhibitorları gücləndirmənin effektivliyinə təsir göstərdiyindən, çıxarılmayan inhibitorların miqdarının kiçik dəyişiklikləri PCR məhsulunun gücləndirilməsində böyük dəyişikliklərə səbəb ola bilər (Diaco, 1995).
Lizis üçün ultrasəsləşdirmənin üstünlüyü ondan ibarətdir ki, hüceyrə strukturlarının tam pozulması və lizinq reagentlərinə və vaxt aparan nümunənin hazırlanmasına ehtiyac olmadan DNT-nin sərbəst buraxılması arzu edilir. (bax. Fykse və başqaları, 2003)

Ultrasonik DNT fraqmentasiyası:

Ultrasəs DNT fraqmentasiyası sadə və etibarlıdır, çünki uzunluğu tənzimlənə bilən DNT fraqmentləri yaradır (basepairs, bp). Ultrasəsdən istifadə edərək, DNT hədəflənmiş DNT uzunluğuna effektiv şəkildə parçalana bilər. Ultrasəs parametrləri üzərində dəqiq nəzarət və mürəkkəb soyutma variantları DNT deqradasiyasının qarşısını alır.
Ultrasəs DNT fraqmentasiyası haqqında daha çox oxuyun!

 

Videoda UIP400MTP ultrasəs nümunəsi hazırlama sistemi göstərilir ki, bu da yüksək intensivlikli ultrasəsdən istifadə etməklə istənilən standart çoxquyulu lövhələrdən etibarlı nümunə hazırlamağa imkan verir. UIP400MTP-nin tipik tətbiqlərinə hüceyrə lizisi, DNT, RNT və xromatinin kəsilməsi, həmçinin zülal çıxarılması daxildir.

Çox yaxşı boşqablı sonikasiya üçün UIP400MTP Ultrasonicator

İnformasiya tələbi




Bizimlə əlaqə saxlayın Gizlilik Siyasəti.


Monkeypox Virus Peyvəndində Ultrasəs Tətbiqləri

Ultrasonikasiya meymun çiçəyi vaksinləri kimi peyvəndlər istehsal etmək üçün istifadə olunur. Meymun çiçəyi virusuna qarşı istifadə edilən vaksinlər hazırda canlı virus peyvəndləridir. Yeni hazırlanmış peyvəndlər DNT əsaslı kimi digər platformalardan istifadə edə bilər. Hal-hazırda dəyişdirilmiş Vaccinia Ankara viurs, zəifləmiş, təkrarlanmayan ortopoksvirus var. Tərkibində həmçinin Tris (tris-aminometan) və natrium xlorid var. Peyvənd həmçinin vaksin virusunu, benzonazı və gentamisin və siprofloksasin kimi antibiotik birləşmələrini yetişdirmək üçün istifadə edilən Toyuq Embrionunun Fibroblast hüceyrələrindən az miqdarda DNT və protein ehtiva edə bilər.

Ultrasəs homojenləşdirmə canlı zəifləmiş virus peyvəndlərinin, DNT vaksinlərinin, çoxvalentli DNT kokteyllərinin, mRNA vaksinlərinin, rekombinant zülal vaksinlərinin, virusa bənzər hissəciklərin vaksinlərinin və s. istehsalında istifadə olunur.

Vaksin istehsalında ultrasəs tətbiqləri arasında dəyişir

  • virus hissəciklərinin və agentlərinin yayılması
  • emulsiya əmələgətirmə
  • virusların inaktivasiyası
  • narkotik daşıyıcı formul (NLC, SLN)
  • Kapsülləşdirmə
  • agentlərin həlli
  • köməkçi maddələrin hazırlanması
  • Degassing / De-Aeration

 

Təkmilləşdirilmiş vaksin istehsalı üçün ultrasəs tətbiqləri haqqında daha ətraflı məlumat tapa bilərsiniz!

Monkeypox Virusunun Ultrasonik İzolyasiyası Protokolu

Stittelaarın (2005) tədqiqat qrupu meymun çiçəyi virusunu böyüməyə sahib olan hüceyrə mədəniyyətindən, həmçinin yoluxmuş primatlardan boğaz dəyişdirmə yolu ilə əldə edilən hüceyrələrdən azad etmək üçün ultrasəs lizisindən istifadə etdi.

Meymun çiçəyi peyvəndinin hazırlanması:

Monkeypox virusları spesifik patogensiz toyuq embrionunun fibroblast hüceyrələrində yetişdirilmişdir. 1-2 gün inkubasiyadan sonra virus-hüceyrə süspansiyonu bir dövrə dondurma-ərimə yolu ilə yığıldı və sonra sentrifuqa ilə konsentrasiya edildi. Pelet yenidən dayandırıldı və bir neçə tur ultrasəs homogenləşdirməyə məruz qaldı.

Peyvənd edilmiş makakalardan meymun çiçəyi virusunun təcrid edilməsi:

Nümunələr üç dəfə dondurularaq əridildi və ultrasəs kubokunda ultrasəs edildi. Vero hüceyrə monolaylarını altı quyu boşqablara aşılamaq üçün 1% fetal iribuynuzlu zərdab ilə əlavə edilmiş nəqliyyat mühitində iki seyreltmə (1:10 və 1:100) istifadə edilmişdir. 37°C-də 1 saat inkubasiyadan sonra peyvənd çıxarıldı və 1% fetal iribuynuzlu zərdab əlavə edilmiş mədəniyyət mühiti ilə əvəz edildi. Tək qatlar 5 gün ərzində 37°C-də becərilmiş və kristal bənövşəyi məhlulu ilə boyanmışdır.
(müq. Stittelaar və başqaları, 2005)

Bu videoda biz sizə təmizlənə bilən kabinetdə daxili əməliyyat üçün 2 kilovatlıq ultrasəs sistemini göstəririk. Hielscher, kimya sənayesi, əczaçılıq, kosmetika, neft-kimya prosesləri, eləcə də həlledici əsaslı ekstraksiya prosesləri kimi demək olar ki, bütün sənaye sahələrinə ultrasəs avadanlıqları təqdim edir. Bu təmizlənə bilən paslanmayan polad şkaf təhlükəli ərazilərdə işləmək üçün nəzərdə tutulmuşdur. Bu məqsədlə, alışan qazların və ya buxarların kabinetə daxil olmasının qarşısını almaq üçün möhürlənmiş şkaf müştəri tərəfindən azot və ya təmiz hava ilə təmizlənə bilər.

Təhlükəli ərazilərdə quraşdırma üçün təmizlənə bilən şkafda 2x 1000 vatt ultrasəs cihazı

Virus Təhlili və Peyvənd İstehsalı üçün Ultrasonikatorlar

Hielscher Ultrasonics geniş məhsul portfeli tədqiqat və analitik laboratoriyalar, eləcə də sənaye vaksin istehsalı üçün ideal ultrasəs cihazı təklif edir.
Hielscher Ultrasonics elmi-tədqiqat və analitik laboratoriyalarda istifadə üçün, eləcə də sənaye vaksin istehsalında tətbiq etmək üçün yüksək performanslı ultrasəs cihazları və sono-bioreaktorların layihələndirilməsi, istehsalı və paylanması üzrə ixtisaslaşmışdır (məs. vaksinlər, API'lar).
Hielscher Ultrasonics tərəfindən ultrasəs prosesi parametrlərinə dəqiq nəzarət' ağıllı proqramSonication açıq gəmilərə, qapalı davamlı qarışdırılan reaktorlara və davamlı axın reaktorlarına tətbiq edilə bilər. Ultrasəs sistemlərinin maye mühitlə təmasda olan bütün hissələri paslanmayan poladdan, titandan və ya şüşədən hazırlanır. Avtoklavlanan hissələr və sanitar armaturlar altında istehsalı təmin edir əczaçılıq səviyyəli şərtlər.
Avtomatik məlumat qeydi: Ağıllı proqram, vahid SD yaddaş kartında avtomatik olaraq sonication prosesinin parametrlərini qeyd edir. Bütün proses parametrlərinin dəqiq nəzarəti təmin edir reproducibility, istehsalatın standartlaşdırılması, və əczaçılıq məhsullarının təhlükəsizlik standartlarının yerinə yetirilməsini asanlaşdırır.
Hielscher ultrason’ ultrasəs prosessorları yüksək etibarlıdır və dəqiq idarə oluna bilər. Bütün sənaye ultrasəs cihazları aşağıdan çox yüksək amplitüdlərə qədər tam diapazonu çatdırmaq üçün tənzimlənə bilər. Hielscher-in ultrasəs sistemlərinin möhkəmliyi ağır yük altında və tələbkar mühitlərdə 24/7 işləməyə imkan verir.

Aşağıdakı cədvəldə bizim ultrasonicators təxmini emal gücü bir göstəriş verir:

Partiyanın həcmi Axın tövsiyə Cihazlar
çox quyulu / mikrotitr plitələr yox UIP400MTP
1 500ml 10 200ml / dəq UP100H
10 2000ml üçün 20 400ml / dəq Uf200 ः t, UP400St
0.1 20L üçün 04L / min .2 UIP2000hdT
10 100L üçün 10L 2 / dəq UIP4000hdT
yox 10 100L / dəq UIP16000
yox daha böyük çoxluq UIP16000

Bizimlə əlaqə saxlayın! Bizdən soruşun!

Daha ətraflı məlumat üçün müraciət edin

Zəhmət olmasa, ultrasəs prosessorları, tətbiqetmələr və qiymətlər haqqında əlavə məlumat tələb etmək üçün aşağıdakı formadan istifadə edin. Prosesinizi sizinlə müzakirə etməkdən və tələblərinizə cavab verən bir ultrasəs sistemini təklif etməkdən məmnun olarıq!









Xahiş edirik unutmayın Gizlilik Siyasəti.


Ultrasonik homojenizatorlar DNT kəsilməsi üçün etibarlıdır

Ultrasonik DNA Shearing
CC-BY-SA.03 altında Jkwchui-dən uyğunlaşdırılmışdır



Ədəbiyyat / İstinadlar

  • Stittelaar, Koert; Amerongen, Geert; Kondova, Ivanela; Kuiken, Thijs; Lavieren, Rob; Pistoor, Frank; Niesters, Hubert; Doornum, Gerard; Van der Zeijst, Bernard; Mateo, Luis; Chaplin, Paul; Osterhaus, Albert (2005): Modified Vaccinia Virus Ankara Protects Macaques against Respiratory Challenge with Monkeypox Virus. Journal of Virology 79, 2005. 7845-51.
  • Shah Purvin, Parameswara Rao Vuddanda, Sanjay Kumar Singh, Achint Jain, and Sanjay Singh (2014): Pharmacokinetic and Tissue Distribution Study of Solid Lipid Nanoparticles of Zidovudine in Rats. Journal of Nanotechnology, Volume 2014.
  • J. Robin Harris, Andrei Soliakova, Richard J. Lewis, Frank Depoix, Allan Watkinson, Jeremy H. Lakeya (2012): Alhydrogel® adjuvant, ultrasonic dispersion and protein binding: a TEM and analytical study. Micron Volume 43, Issues 2–3, February 2012, 192-200.
  • Doron Melamed, Gabriel Leitner, E. Dan Heller (1991): A Vaccine against Avian Colibacillosis Based on Ultrasonic Inactivation of Escherichia coli. Avian Diseases Vol. 35, No. 1 (Jan. – Mar., 1991), 17-22.
  • Huang C-F, Wu T-C, Wu C-C, Lee C-C, Lo W-T, Hwang K-S, Hsu M-L, Peng H-J. (2011): Sublingual vaccination with sonicated Salmonella proteins and mucosal adjuvant induces mucosal and systemic immunity and protects mice from lethal enteritis. APMIS 119, 2011. 468–78.

Bilmək lazımdır

Meymun çiçəyi virusu

Monkeypox (MPV, MPXV və ya hMPXV) viral zoonoz xəstəliyə səbəb olan ikiqat zəncirli DNT virusunun bir növüdür. Bu xəstəlik meymun infeksiyası kimi tanınır və insanlarda və heyvanlarda baş verə bilər. Poxviridae ailəsinin Orthopoxvirus cinsinə aiddir. Meymun çiçəyi virusu variola (VARV), inək çiçəyi (CPX) və vaccinia (VACV) virusları ilə birlikdə insan orthopoxviruslarından biridir. Ortopoksviruslar, təxminən 200.000 bp olan ikiqat zəncirli DNT genomunu ehtiva edən iri kərpic formalı virus hissəcikləri ilə xarakterizə olunur.

ELISA Təhlili

ELISA, Fermentlə Bağlı İmmunoSorbent Təhlili deməkdir və immunoassayların qızıl standartı hesab edilən etiketli immunoanalizdir. ELISA yüksək diaqnostik həssaslığına görə qiymətləndirilən immunoloji testdir, antikorlar, antigenlər, zülallar, qlikoproteinlər və hormonlar daxil olmaqla molekulları aşkar etmək və kəmiyyətini müəyyən etmək üçün istifadə olunur. ELISA prinsipi antigen-antikor qarşılıqlı təsirinə əsaslanır. Bu antigen-antikor qarşılıqlı təsiri ilə spesifik antikorlar onun hədəf antigeninə bağlanır. Yalnız qarşılıqlı təsir baş verdikdə, substrat fermentə bağlana bilər və sonradan substratın çevrilməsi müşahidə edilə bilər, bu da müsbət nəticənin əldə edilməsi deməkdir.


Yüksək performanslı ultrasəs! Hielscher-in məhsul çeşidi kompakt laboratoriya ultrasəs cihazından tutmuş tam sənaye ultrasəs sistemlərinə qədər tam spektri əhatə edir.

Hielscher Ultrasonics, yüksək performanslı ultrasəs homogenizatorları istehsal edir Laboratoriya qədər sənaye ölçüsü.