Лізисні буфери можуть бути ефективно і швидко підготовлені за допомогою ультразвукових гомогенізаторів тканин. Оскільки ультразвукові апарати є інструментом мрії для змішування, розчинення та диспергування, вони дозволяють надійно та зручно готувати лізисні буфери.

Ультразвукова підготовка лізисних буферів

Ультразвукові гомогенізатори тканин є загальним інструментом для руйнування клітин, лізису та вилучення, тому доступні в більшості лабораторій. Вторинним застосуванням ультразвукових апаратів зондового типу є підготовка лізисних буферів.

Лізисний буфер - це розчин, який використовується для розриву відкритих (лізе) клітин і вивільнення їх вмісту для подальшого аналізу. Специфічний склад лізисного буфера може змінюватися в залежності від типу клітин, що лізуються, і подальшого застосування. Однак типовий лізисний буфер містить такі компоненти, як миючі засоби, солі та інгібітори протеази. Буферні солі (наприклад, Tris-HCl) та іонні солі (наприклад, NaCl) зазвичай використовуються для регулювання рН та осмолярності лізату.
Щоб зробити лізисний буфер, компоненти змішують між собою у відповідних концентраціях і рН. Суміш зазвичай перемішують або струшують до розчинення компонентів і однорідності розчину.
Ультразвукова гомогенізація - це метод, який може бути використаний, щоб допомогти зробити хороший лізисний буфер шляхом поліпшення змішування та розчинення компонентів. У цьому методі ультразвукові хвилі – в нормі в діапазоні від 20 до 30 кГц – наносяться на суміш, яка створює кавітаційні бульбашки, які руйнуються і генерують інтенсивну місцеву енергію, що призводить до механічного зсуву і змішування компонентів.
Процес ультразвукової гомогенізації може допомогти розбити будь-які грудки або агрегати компонентів і забезпечити рівномірне змішування розчину. Отже, такий вдосконалений лізисний буфер може призвести до більш ефективного порушення клітин і підвищення врожайності екстрагованого матеріалу. Крім того, ультразвукова гомогенізація може скоротити час, необхідний для виготовлення лізисного буфера порівняно з традиційними методами перемішування або струшування.
В цілому, ультразвукова гомогенізація є потужним інструментом для підвищення якості та ефективності підготовки лізисного буфера.

Протокол підготовки ультразвукового лізисного буфера

Це загальний протокол створення лізисного буфера за допомогою ультразвукового пристрою зондового типу:
 
Матеріали:

• Миючі засоби на вибір (наприклад, Triton X-100, SDS, CHAPS)
• Сіль на вибір (наприклад, NaCl, KCl)
• Інгібітори протеази (наприклад, PMSF, апротинін, леупептін)
• Ультразвуковий пристрій
• Мішалкою
• Деіонізована вода
• pH-метр або pH-смужки

 
 
Покрокова інструкція:

1. Визначте склад лізисного буфера на основі клітин або тканин, для яких ви будете лізувати, і додатків, для яких ви будете використовувати лізат. Готуйте запасні розчини миючих засобів, солей і інгібіторів протеази в потрібних концентраціях.
2. Додайте запасні розчини миючих засобів, солей та інгібіторів протеази в мензурку або колбу.
3. Додайте деіонізовану воду, щоб довести об'єм до потрібної кількості буфера.
4. Змішайте компоненти за допомогою мішалки для того, щоб отримати розчин попереднього змішування.
5. Виміряйте рН буфера за допомогою рН-метра або рН-смужок, і відрегулюйте рН у міру необхідності невеликою кількістю кислоти або лузи.
6. Використовуйте ультразвуковий пристрій зондового типу для гомогенізації розчину попереднього змішування, щоб отримати високооднорідний розчин. Тому ультразвукову обробку розчину протягом декількох секунд, поки розчин не буде ретельно перемішаний і будь-які грудочки або агрегати не будуть розбиті. Тривалість і потужність ультразвукової обробки можуть бути оптимізовані на основі конкретного лізисного буфера і використовуваного ультразвукового пристрою.
7. Після ультразвукового дослідження повторно виміряйте рН буфера і відрегулюйте за необхідності.
8. Відфільтруйте буфер через фільтр 0,2 мікрона, щоб видалити будь-яке сміття або агрегати, які могли утворитися під час ультразвукової обробки.
9. Лізисний буфер тепер готовий до використання.

 
Примітка: Точний склад і рН лізисного буфера можуть змінюватися в залежності від клітин або тканин, що лізуються, і додатків нижче. Вищевказаний протокол є загальним керівництвом і, можливо, його доведеться оптимізувати для конкретних додатків.
 
Ультразвукові гомогенізатори зазвичай використовуються для порушення клітин і вилучення внутрішньоклітинних молекул. Тому багато додатків лізису використовують ультразвукову обробку зондового типу не тільки для підготовки лізисного буфера, але й для механічного порушення клітин та вилучення.
Це робить гомогенізатори ультразвукових тканин універсальним інструментом для лабораторій і пояснює широке використання ультразвукових апаратів у мікробіології, біотехнології та науці про життя.

ультразвукові лабораторії гомогенізатори

Hielscher Ultrasonics виробляє та постачає ультразвукові гомогенізатори та зонди (сонотроди) з різними номіналами потужності та обсягами зразків. Це дозволяє нам запропонувати вам найбільш підходящий ультразвуковий руйнівник для підготовки зразків. Ми орієнтуємося на найвищу якість, видатний комфорт користувача та надійні результати ультразвукової обробки. Всі цифрові ультразвукові апарати оснащені інтелектуальним програмним забезпеченням, програмуванням та попереднім налаштуванням протоколів ультразвукової обробки, пультом дистанційного керування браузера, контролем температури, освітленням зразків, а також автоматичним записом даних на вбудовану SD-карту.

Дизайн, виробництво та консалтинг – Якість виробництва Німеччини

Hielscher ультраакукатори добре відомі своїми найвищими стандартами якості та дизайну. Надійність і проста експлуатація дозволяють плавно інтегрувати наші ультразвукові апарати в промислові об'єкти. Грубі умови та вимогливе середовище легко обробляються ультразвуковими апаратами Hielscher.

Hielscher Ultrasonics є сертифікованою ISO компанією і робить особливий акцент на високопродуктивних ультразвукових апаратах, що відрізняються найсучаснішими технологіями та зручністю для користувачів. Звичайно, ультразвукові апарати Hielscher сумісні з CE і відповідають вимогам UL, CSA та RoHs.

The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators: