การสลายเซลล์ยีสต์ในไมโครเพลตด้วยคลื่นอัลตราโซนิกความเข้มสูง

นักจุลชีววิทยาและนักวิจัยด้านวิทยาศาสตร์ชีวภาพที่ทำงานกับ Saccharomyces cerevisiae, Pichia pastoris / Komagataella phaffii, และระบบยีสต์อื่น ๆ ทราบถึงความท้าทายนี้ดี: เซลล์ยีสต์มีความแข็งแรงทนทาน การสลายเซลล์ให้ได้ผลที่ทำซ้ำได้อาจทำได้ยาก และการทำให้ตัวอย่างแตกด้วยมือกลายเป็นคอขวดอย่างรวดเร็วเมื่อต้องคัดกรองสายพันธุ์ โคลน สภาวะการเพาะเลี้ยง หรือคอนสตรักต์สำหรับการแสดงออกของยีนจำนวนมาก

การสลายเซลล์ยีสต์ที่รองรับตัวอย่างจำนวนมากสำหรับจุลชีววิทยา ชีววิทยาระดับโมเลกุล และการวิเคราะห์โปรตีน

เครื่องอัลตราโซนิกสำหรับไมโครเพลตของ Hielscher เช่น UIP400MTP (400 W) และ UIP550MTP (550 W) เป็นโซลูชันที่รองรับตัวอย่างจำนวนมากสำหรับการสลายเซลล์ยีสต์ด้วยวิธีเชิงกลโดยตรงในไมโครเพลต แทนที่จะใช้โพรบจัดการตัวอย่างทีละตัวอย่าง สามารถใช้คลื่นอัลตราโซนิกกับไมโครเพลตทั้งแผ่นภายใต้สภาวะที่สม่ำเสมอได้ วิธีนี้ทำให้การสลายเซลล์ยีสต์ด้วยคลื่นอัลตราโซนิกเร็วขึ้น ให้ผลที่ทำซ้ำได้มากขึ้น และผสานเข้ากับกระบวนการทำงานด้านจุลชีววิทยาสมัยใหม่ การแสดงออกของโปรตีน การคัดกรองเอนไซม์ และโอมิกส์ได้ง่ายขึ้น
ไม่ว่าคุณต้องการปลดปล่อยโปรตีนรีคอมบิแนนท์จาก P. pastoris เตรียมสารสกัดจากการสลายเซลล์ยีสต์สำหรับการทดสอบเอนไซม์ ทำให้ S. cerevisiae แตกเพื่อวิเคราะห์โปรตีน หรือคัดกรองโคลนยีสต์หลายสิบโคลนพร้อมกัน เครื่องอัลตราโซนิกสำหรับไมโครเพลตของ Hielscher ให้การทำให้เซลล์แตกที่ทรงพลังด้วยคาวิเทชัน พร้อมการควบคุมกระบวนการอย่างแม่นยำ

เหตุใดเซลล์ยีสต์จึงต้องใช้การสลายเซลล์ด้วยวิธีเชิงกลที่มีประสิทธิภาพ

เซลล์ยีสต์สลายได้ยากกว่าเซลล์แบคทีเรียหรือเซลล์สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหลายชนิด เพราะมีผนังเซลล์ที่แข็งแกร่งคอยปกป้อง ซึ่งประกอบด้วยพอลิแซ็กคาไรด์ กลูแคน แมนโนโปรตีน และไคตินเป็นหลัก ผนังเซลล์นี้ให้ความมั่นคงเชิงกล แต่ยังจำกัดการปลดปล่อยโปรตีน กรดนิวคลีอิก เมแทบอไลต์ และเอนไซม์ภายในเซลล์ด้วย
วิธีสลายเซลล์ยีสต์แบบดั้งเดิม ได้แก่ การบดด้วยเม็ดบีด การย่อยด้วยเอนไซม์ รอบการแช่แข็งและละลาย การสลายเซลล์ด้วยสารเคมี และการใช้คลื่นอัลตราโซนิกแบบโพรบ วิธีเหล่านี้อาจมีประสิทธิภาพ แต่ก็มีข้อจำกัดเช่นกัน การบดด้วยเม็ดบีดอาจทำให้มีเศษวัสดุและเกิดความร้อน การย่อยด้วยเอนไซม์อาจเพิ่มต้นทุนและความแปรปรวน และการใช้คลื่นอัลตราโซนิกแบบโพรบกับตัวอย่างทีละตัวอย่างใช้เวลานานเมื่อต้องจัดการตัวอย่างจำนวนมาก
คาวิเทชันจากคลื่นอัลตราโซนิกแบบรวมโฟกัสที่มีความเข้มสูงเอาชนะข้อจำกัดเหล่านี้โดยส่งแรงเฉือนเชิงกลที่รุนแรง การผันผวนของความดัน และการไหลระดับจุลภาคไปยังสารแขวนลอยยีสต์ ผลที่ได้คือผนังเซลล์และเยื่อหุ้มเซลล์แตกอย่างรวดเร็ว การปลดปล่อยสารภายในเซลล์ดีขึ้น และการเตรียมตัวอย่างในรูปแบบเพลตให้ผลที่ทำซ้ำได้ในระดับสูง

การใช้คลื่นอัลตราโซนิกกับไมโครเพลตเพื่อเตรียมตัวอย่างยีสต์พร้อมกัน

Hielscher UIP400MTP และ UIP550MTP ออกแบบมาสำหรับการใช้คลื่นอัลตราโซนิกอย่างสม่ำเสมอกับไมโครเพลต เพลตหลายหลุม เพลต PCR และชั้นวางตัวอย่างที่เหมาะสม ต่างจากการใช้คลื่นอัลตราโซนิกแบบโพรบ ตัวอย่างไม่จำเป็นต้องได้รับการจัดการแยกทีละตัวอย่าง เพลตทั้งแผ่นได้รับพลังงานอัลตราโซนิกที่ควบคุมได้ ทำให้กระบวนการทำงานนี้เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการจัดการตัวอย่างพร้อมกัน

วิธีนี้มีประโยชน์เป็นพิเศษสำหรับ:

• การคัดกรอง S. cerevisiae ที่กลายพันธุ์หรือสายพันธุ์สำหรับการแสดงออกของยีน
• การสลายเซลล์ของโคลน P. pastoris / K. phaffii หลังการแสดงออกของโปรตีนรีคอมบิแนนท์
• การเตรียมสารสกัดจากการสลายเซลล์ยีสต์สำหรับการทดสอบเอนไซม์
• การสกัดโปรตีนสำหรับ SDS-PAGE, Western blot, ELISA, LC-MS/MS หรือการทดสอบกิจกรรม
• การปลดปล่อยเมแทบอไลต์ภายในเซลล์สำหรับเมแทบอโลมิกส์
• การเตรียมตัวอย่าง DNA และ RNA หลังผ่านการทำให้บริสุทธิ์ในขั้นตอนปลายทางที่เหมาะสม
• การปรับบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์ สารเติมแต่ง และสภาวะการสกัดให้เหมาะสมโดยรองรับตัวอย่างจำนวนมาก

คาวิเทชันจากคลื่นอัลตราโซนิกทำให้เซลล์ยีสต์แตกได้อย่างไร

ระหว่างการใช้คลื่นอัลตราโซนิก คลื่นอัลตราโซนิกกำลังสูงแบบรวมโฟกัสก่อให้เกิดรอบการอัดและการขยายตัวสลับกันในตัวอย่างของเหลว เมื่อมีความเข้มเพียงพอ การผันผวนของความดันเหล่านี้ก่อให้เกิดคาวิเทชันทางเสียง ฟองคาวิเทชันก่อตัว สั่น และยุบตัว ทำให้เกิดแรงเฉือนเฉพาะจุด ลำเจ็ตขนาดจุลภาค การไหลปั่นป่วน และความชันของความดันที่สูง
ในสารแขวนลอยยีสต์ ผลเชิงกลเหล่านี้ทำให้ผนังเซลล์และเยื่อหุ้มเซลล์อ่อนแอลงและแตกออก โปรตีน เอนไซม์ กรดนิวคลีอิก และเมแทบอไลต์ภายในเซลล์ถูกปลดปล่อยลงในบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์ เนื่องจากเป็นกระบวนการเชิงกล จึงสามารถใช้กับระบบบัฟเฟอร์ที่แตกต่างกันได้หลายชนิด และสามารถใช้ร่วมกับสารยับยั้งโปรตีเอส สารรีดิวซ์ สารซักฟอก เกลือ หรือการปรับสภาพเบื้องต้นด้วยเอนไซม์อย่างอ่อนโยนได้

วิธีปฏิบัติทั่วไป: การสลายเซลล์ยีสต์ในไมโครเพลต

วิธีปฏิบัติต่อไปนี้เป็นจุดเริ่มต้นที่ใช้งานได้จริงสำหรับการสลายเซลล์ยีสต์โดยใช้เครื่องอัลตราโซนิกสำหรับไมโครเพลต Hielscher UIP400MTP หรือ UIP550MTP ควรปรับพารามิเตอร์ให้เหมาะสมตามสายพันธุ์ยีสต์ ความหนาแน่นของเซลล์ โมเลกุลเป้าหมาย องค์ประกอบของบัฟเฟอร์ ชนิดเพลต และการทดสอบในขั้นตอนปลายทาง

1. เก็บเกี่ยวและล้างเซลล์ยีสต์

เพาะเลี้ยง Saccharomyces, Pichia, Hansenula, Debaryomyces หรือยีสต์สายพันธุ์อื่นภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงที่ต้องการ เก็บเกี่ยวเซลล์ด้วยการปั่นเหวี่ยงและนำอาหารเลี้ยงเชื้อออก ล้างตะกอนเซลล์ด้วยน้ำกลั่นเย็น PBS หรือบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์ที่เลือก เพื่อกำจัดองค์ประกอบของอาหารเลี้ยงเชื้อที่ตกค้างซึ่งอาจรบกวนการวิเคราะห์ในขั้นตอนปลายทาง
สำหรับการสกัดโปรตีน ให้รักษาตัวอย่างให้เย็นและทำงานอย่างรวดเร็ว หากมีข้อกังวลเรื่องโปรตีเอส ให้ทำบัฟเฟอร์และวัสดุสิ้นเปลืองทั้งหมดให้เย็นไว้ล่วงหน้า

2. ทำให้ตะกอนเซลล์แขวนลอยอีกครั้ง

ทำให้ตะกอนยีสต์แขวนลอยอีกครั้งในบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์ที่เย็นและเหมาะสม ความหนาแน่นของเซลล์สูงมักเป็นประโยชน์ต่อการปลดปล่อยโปรตีนอย่างมีประสิทธิภาพ ในขั้นเริ่มต้น ให้ใช้ตะกอนเซลล์เปียกประมาณ 10–20% w/v หรือสารแขวนลอยเข้มข้นที่มีค่า OD₆₀₀ > 10 โดยขึ้นอยู่กับการทดสอบ

บัฟเฟอร์ทั่วไปสำหรับสลายเซลล์ยีสต์เพื่อสกัดโปรตีนอาจประกอบด้วย:

• ระบบบัฟเฟอร์ เช่น Tris-HCl บัฟเฟอร์ฟอสเฟต หรือ HEPES
• เกลือ เช่น NaCl หรือ KCl
• สารยับยั้งโปรตีเอสผสม
• สารรีดิวซ์ที่เลือกเติมได้ เช่น DTT หรือ β-mercaptoethanol
• สารซักฟอกที่เลือกเติมได้ เช่น Triton X-100, NP-40, SDS หรือ CHAPS โดยขึ้นอยู่กับความเข้ากันได้กับขั้นตอนปลายทาง
• สารยับยั้งฟอสฟาเทสที่เลือกเติมได้สำหรับการศึกษาฟอสโฟรีเลชัน

สำหรับยีสต์สายพันธุ์ที่สลายได้ยากหรือการสกัดโปรตีนอย่างอ่อนโยนมาก สามารถปรับสภาพเบื้องต้นเป็นเวลาสั้น ๆ ด้วย Zymolyase, Lyticase หรือเอนไซม์ย่อยผนังเซลล์ชนิดอื่นก่อนใช้คลื่นอัลตราโซนิกได้ การปรับสภาพเบื้องต้นด้วยเอนไซม์นี้เป็นทางเลือก แต่อาจเพิ่มประสิทธิภาพการสลายเซลล์หรือลดความเข้มของคลื่นอัลตราโซนิกที่จำเป็น

3. ย้ายตัวอย่างลงในไมโครเพลตที่เหมาะสม

จ่ายสารแขวนลอยยีสต์ลงในไมโครเพลตที่ใช้กับคลื่นอัลตราโซนิกได้ มักนิยมใช้เพลตก้นกลม เพราะช่วยให้เก็บตัวอย่างได้ดีขึ้นและลดบริเวณที่ไม่มีการไหลเวียน ใช้ปริมาตรตัวอย่างเท่ากันในทุกหลุมเพื่อให้ผลที่ทำซ้ำได้ดีขึ้น
ปิดผนึกเพลตด้วยแผ่นปิดผนึกหรือฟิล์มที่เหมาะสมเพื่อป้องกันการระเหย การเกิดละอองลอย และการปนเปื้อนข้าม ตรวจสอบให้แน่ใจว่าวัสดุปิดผนึกเข้ากันได้กับอุณหภูมิและสภาวะการใช้คลื่นอัลตราโซนิกที่เลือก
ปริมาตรใช้งานทั่วไปขึ้นอยู่กับรูปแบบเพลตและการใช้งาน รูปแบบที่ใช้กันทั่วไป ได้แก่ เพลต 96 หลุม เพลตหลุมลึก เพลต PCR หรือชั้นวางหลอดที่เหมาะสม

4. จัดเตรียมการทำความเย็น

การสลายเซลล์ยีสต์ต้องใช้คลื่นอัลตราโซนิกความเข้มสูง และการทำให้เซลล์แตกด้วยวิธีเชิงกลทำให้เกิดความร้อน การควบคุมอุณหภูมิจึงมีความสำคัญอย่างยิ่ง โดยเฉพาะสำหรับการวิเคราะห์โปรตีน เอนไซม์ RNA หรือฟอสโฟรีเลชัน

ใช้วิธีทำความเย็นที่เหมาะสม เช่น:

• บัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์ที่ทำให้เย็นไว้ล่วงหน้า
• ไมโครเพลตที่ทำให้เย็นไว้ล่วงหน้า
• ช่วงพักเพื่อทำความเย็นระหว่างช่วงการใช้คลื่นอัลตราโซนิก
• การทำความเย็นแท่นสำหรับใช้คลื่นอัลตราโซนิกจากภายนอก เมื่อใช้ได้

เป้าหมายคือรักษาตัวอย่างให้เย็นเพียงพอที่จะป้องกันการเสียสภาพของโปรตีน การสูญเสียกิจกรรมของเอนไซม์ การสลายตัวของ RNA และความแปรปรวนของตัวอย่างที่เกิดจากความร้อน

5. ใช้คลื่นอัลตราโซนิกกับสารแขวนลอยยีสต์

วางเพลตที่ปิดผนึกแล้วลงในเครื่องอัลตราโซนิกสำหรับไมโครเพลต Hielscher UIP400MTP หรือ UIP550MTP แล้วเลือกโปรแกรมการใช้คลื่นอัลตราโซนิกแบบพัลส์ แนะนำให้ใช้พัลส์ เพราะช่วยให้เกิดการทำให้เซลล์แตกด้วยวิธีเชิงกลในช่วงเปิด (ON) และระบายความร้อนในช่วงปิด (OFF)
สำหรับจุดเริ่มต้นในการสลายเซลล์ยีสต์:

สำหรับสารแขวนลอยยีสต์ที่ทนทานมาก ชีวมวล P. pastoris ที่หนาแน่น หรือการสกัดโปรตีนรีคอมบิแนนท์ที่ทำได้ยาก ให้เพิ่มระยะเวลาเปิด (ON) สะสมทีละขั้น สำหรับโปรตีนที่ไวต่อความร้อนหรือการทดสอบเอนไซม์ ให้ใช้พัลส์ที่สั้นลง ช่วงพักเพื่อทำความเย็นที่นานขึ้น และแอมพลิจูดเริ่มต้นที่ต่ำลง

การสลายเซลล์ยีสต์ที่รองรับตัวอย่างจำนวนมากในเพลตหลายหลุมด้วย UIP400MTP

6. แยกสารสกัดจากการสลายเซลล์ให้ใส

หลังใช้คลื่นอัลตราโซนิก ให้ปั่นเหวี่ยงไมโครเพลตหรือย้ายตัวอย่างลงในหลอดเพื่อปั่นเหวี่ยง กำจัดเศษเซลล์ด้วยการปั่นเหวี่ยงที่ความเร็วและอุณหภูมิที่เหมาะสม เก็บส่วนใสเหนือตะกอนสำหรับการวิเคราะห์ในขั้นตอนปลายทาง

ขึ้นอยู่กับการใช้งาน สารสกัดจากการสลายเซลล์สามารถใช้สำหรับ:

• การหาปริมาณโปรตีน
• การทดสอบกิจกรรมของเอนไซม์
• SDS-PAGE และการทำ Western blot
• ELISA และการทดสอบทางภูมิคุ้มกัน
• โปรตีโอมิกส์ด้วย LC-MS/MS
• การวิเคราะห์เมแทบอไลต์
• การทำ DNA หรือ RNA ให้บริสุทธิ์

7. ปรับวิธีให้เหมาะสมและบันทึกข้อมูล

เพื่อให้การสลายเซลล์ยีสต์ได้ผลที่ทำซ้ำได้ ให้บันทึกพารามิเตอร์ที่เกี่ยวข้องทั้งหมด รวมถึงสายพันธุ์ สภาวะการเพาะเลี้ยง OD₆₀₀, มวลเซลล์เปียก องค์ประกอบของบัฟเฟอร์ ชนิดเพลต ปริมาตรตัวอย่าง แอมพลิจูด รอบพัลส์ ระยะเวลาเปิด (ON) สะสม วิธีทำความเย็น และอุณหภูมิสุดท้ายของตัวอย่าง
หากเครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher มีระบบบันทึกข้อมูลอัตโนมัติ สามารถใช้ข้อมูลกระบวนการสำหรับการจัดทำเอกสาร การพัฒนาวิธี การขยายขนาด และการควบคุมคุณภาพได้

เคล็ดลับการปรับการสลายเซลล์ยีสต์ให้เหมาะสม

เพื่อให้ปลดปล่อยโปรตีนได้มากที่สุด ให้ใช้สารแขวนลอยยีสต์ที่หนาแน่น คลื่นอัลตราโซนิกความเข้มสูง และระยะเวลาเปิด (ON) สะสมที่เพียงพอ สำหรับโปรตีนที่ไวต่อสภาวะการจัดการ ให้ลดแอมพลิจูด เพิ่มระยะเวลาช่วงพักเพื่อทำความเย็น และรักษาเพลตให้เย็นตลอดการทำงาน
หากการสลายเซลล์ไม่สมบูรณ์ ให้เพิ่มเวลาใช้คลื่นอัลตราโซนิกทีละขั้น ทดสอบการปรับสภาพเบื้องต้นด้วยเอนไซม์ ลดความหนืดของตัวอย่าง หรือปรับบัฟเฟอร์ให้เหมาะสม หากโปรตีนสลายตัวหรือสูญเสียกิจกรรม ให้ปรับปรุงการทำความเย็น ลดระยะเวลาช่วงเปิด (ON) เติมสารยับยั้ง และตรวจสอบว่าระบบสารซักฟอกเข้ากันได้กับโปรตีนเป้าหมาย
เนื่องจากยีสต์แต่ละสายพันธุ์มีความแตกต่างกันอย่างมากในด้านโครงสร้างผนังเซลล์ ระยะการเจริญเติบโต ระบบการแสดงออกของยีน และความหนาแน่นของชีวมวล จึงแนะนำให้ทดสอบชุดสภาวะเพื่อปรับให้เหมาะสมแบบย่อ ตัวอย่างเช่น ทดสอบแอมพลิจูดสามระดับ รอบพัลส์สองแบบ และระยะเวลาเปิด (ON) รวมสองค่า จากนั้นประเมินประสิทธิภาพการสลายเซลล์และความสมบูรณ์ของโปรตีน

ข้อดีของเครื่องอัลตราโซนิกสำหรับไมโครเพลตของ Hielscher สำหรับการสลายเซลล์ยีสต์

เครื่องอัลตราโซนิกสำหรับไมโครเพลตของ Hielscher เหมาะอย่างยิ่งสำหรับห้องปฏิบัติการที่ต้องการสลายเซลล์ในตัวอย่างจำนวนมากให้ได้ผลที่ทำซ้ำได้ เครื่องเหล่านี้ขจัดขั้นตอนการจัดการทีละตัวอย่างที่ช้าของการใช้คลื่นอัลตราโซนิกแบบโพรบ และลดความแปรปรวนที่เกิดจากการวางตำแหน่งโพรบด้วยมือ ความลึกในการจุ่ม และความแตกต่างในการจัดการตัวอย่างแต่ละตัวอย่าง

ข้อดีหลัก ได้แก่:

• การประมวลผลตัวอย่างจำนวนมาก: ใช้คลื่นอัลตราโซนิกกับตัวอย่างยีสต์จำนวนมากพร้อมกันในไมโครเพลตหรือชั้นวางตัวอย่างที่เข้ากันได้
• สภาวะที่ทำซ้ำได้: ใช้สภาวะการใช้คลื่นอัลตราโซนิกเดียวกันในทุกหลุม เพื่อให้ผลการสลายเซลล์สม่ำเสมอและเปรียบเทียบกันได้
• ไม่มีการปนเปื้อนข้ามจากโพรบ: ตัวอย่างยังคงปิดผนึกระหว่างการใช้คลื่นอัลตราโซนิก ช่วยลดการปนเปื้อนตกค้างจากตัวอย่างก่อนหน้าและขั้นตอนการทำความสะอาด
• เหมาะสำหรับเซลล์ที่แข็งแรงทนทาน: คลื่นอัลตราโซนิกความเข้มสูงช่วยให้ผนังเซลล์ยีสต์แตก
• กระบวนการทำงานที่มีประสิทธิภาพ: เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการคัดกรองสายพันธุ์ โคลน สภาวะการแสดงออกของยีน และบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์
• กระบวนการทำงานที่มีประสิทธิภาพ: ตั้งค่าแบบโปรแกรมได้ บันทึกข้อมูลโดยอัตโนมัติ และเหมาะสำหรับระบบอัตโนมัติในห้องปฏิบัติการ

การประยุกต์ใช้ในเทคโนโลยีชีวภาพยีสต์และการวิจัยด้านวิทยาศาสตร์ชีวภาพ

การสลายเซลล์ยีสต์ด้วยคลื่นอัลตราโซนิกในไมโครเพลตรองรับกระบวนการวิจัยและการคัดกรองหลายรูปแบบ ในการแสดงออกของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ สามารถสลายเซลล์ของโคลน P. pastoris และ S. cerevisiae พร้อมกันเพื่อเปรียบเทียบระดับการแสดงออกหรือกิจกรรมของเอนไซม์ ในชีววิทยาระบบและโอมิกส์ การสลายเซลล์ที่เป็นมาตรฐานช่วยให้เปรียบเทียบระหว่างสภาวะได้ดีขึ้น ในจุลชีววิทยา การใช้คลื่นอัลตราโซนิกช่วยให้เตรียมสารสกัดจากการสลายเซลล์จากหลายสายพันธุ์ หลายสภาวะของอาหารเลี้ยงเชื้อ หรือหลายวิธีการกระตุ้นความเครียดได้อย่างรวดเร็ว
ขอบเขตการใช้งานทั่วไป ได้แก่:

• การสกัดโปรตีนจากยีสต์
• การคัดกรองโปรตีนรีคอมบิแนนท์
• การคัดกรองกิจกรรมของเอนไซม์
• การคัดเลือกโคลนหลังการทรานส์ฟอร์เมชัน
• การปรับการหมักให้เหมาะสม
• การเตรียมตัวอย่างสำหรับโปรตีโอมิกส์
• การเตรียมตัวอย่างสำหรับเมแทบอโลมิกส์
• การศึกษาการทำให้ผนังเซลล์แตก
• การทดสอบทางจุลชีววิทยาที่รองรับตัวอย่างจำนวนมาก

การสลายเซลล์ยีสต์ที่เชื่อถือได้เริ่มต้นด้วยการใช้คลื่นอัลตราโซนิกที่ควบคุมได้

การสลายเซลล์ยีสต์อาจทำได้ยากเมื่อจำนวนตัวอย่างเพิ่มขึ้น แต่เครื่องอัลตราโซนิกสำหรับไมโครเพลตของ Hielscher ทำให้กระบวนการเร็วขึ้น สะอาดขึ้น และให้ผลที่ทำซ้ำได้มากขึ้น UIP400MTP และ UIP550MTP ช่วยให้นักวิจัยจัดการเพลตทั้งแผ่นภายใต้สภาวะการใช้คลื่นอัลตราโซนิกที่กำหนดไว้ เพิ่มอัตราการประมวลผลตัวอย่างพร้อมลดการจัดการด้วยมือ
สำหรับนักจุลชีววิทยา นักชีววิทยาระดับโมเลกุล นักวิทยาศาสตร์ด้านโปรตีน และห้องปฏิบัติการเทคโนโลยีชีวภาพ การใช้คลื่นอัลตราโซนิกกับไมโครเพลตเป็นเครื่องมือที่ทรงพลังในการปลดปล่อยองค์ประกอบภายในเซลล์ยีสต์อย่างมีประสิทธิภาพและให้ผลที่ทำซ้ำได้

วรรณกรรม / เอกสารอ้างอิง

• FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
• FactSheet UIP550MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
• Lauren E. Cruchley-Fuge, Martin R. Jones, Ossama Edbali, Gavin R. Lloyd, Ralf J. M. Weber, Andrew D. Southam, Mark R. Viant (2024): Automated extraction of adherent cell lines from 24-well and 96-well plates for multi-omics analysis using the Hielscher UIP400MTP sonicator and Beckman Coulter i7 liquid handling workstation. Metabomeeting 2024, University of Liverpool, 26-28th November 2024.
• Cosenza-Contreras M, Seredynska A, Vogele D, Pinter N, Brombacher E, Cueto RF, Dinh TJ, Bernhard P, Rogg M, Liu J, Willems P, Stael S, Huesgen PF, Kuehn EW, Kreutz C, Schell C, Schilling O. (2024): TermineR: Extracting information on endogenous proteolytic processing from shotgun proteomics data. Proteomics 2024.