การสกัดคอลลาเจนด้วยอัลตราโซนิก
- คอลลาเจนอุดมไปด้วยโปรตีนและมีการใช้อย่างแพร่หลายในงานอุตสาหกรรมหลากหลายประเภท เช่น อาหาร เภสัชภัณฑ์ สารเติมแต่ง เป็นต้น
- การใช้คลื่นอัลตราโซนิกสามารถผสานเข้ากับการสกัดคอลลาเจนด้วยเอนไซม์หรือกรดได้อย่างง่ายดาย
- การนำอัลตราโซนิกมาใช้ในกระบวนการสกัดคอลลาเจนทำให้ได้ผลผลิตสูงขึ้นและสกัดได้รวดเร็วขึ้น
ผลของอัลตราโซนิกต่อการสกัดคอลลาเจน
มีการใช้คลื่นอัลตราโซนิกความเข้มสูงอย่างแพร่หลายเพื่อปรับปรุงการถ่ายเทมวลในกระบวนการแบบเปียก เช่น การสกัด โซโนเคมี เป็นต้น การสกัดคอลลาเจน ซึ่งเรียกอีกอย่างว่าการแยกคอลลาเจน สามารถปรับปรุงให้ดีขึ้นได้อย่างมีนัยสำคัญด้วยการใช้อัลตราโซนิก การใช้คลื่นอัลตราโซนิกช่วยในการตัดแยกสารตั้งต้นคอลลาเจนและเปิดโครงสร้างเส้นใยย่อยของคอลลาเจน จึงเอื้อต่อการไฮโดรไลซิสด้วยเอนไซม์หรือการบำบัดด้วยกรด
การสกัดด้วยเอนไซม์โดยใช้อัลตราโซนิกช่วย
การใช้คลื่นอัลตราโซนิกเป็นที่รู้จักในด้านความสามารถในการเพิ่มกิจกรรมของเอนไซม์ ผลดังกล่าวเกิดจากการกระจายตัวและการสลายกลุ่มก้อนของเพปซินด้วยอัลตราโซนิก เอนไซม์ที่กระจายตัวอย่างสม่ำเสมอมีพื้นที่ผิวสำหรับการถ่ายเทมวลเพิ่มขึ้น ซึ่งสัมพันธ์กับกิจกรรมของเอนไซม์ที่สูงขึ้น นอกจากนี้ คลื่นอัลตราโซนิกที่ทรงพลังยังเปิดโครงสร้างเส้นใยย่อยของคอลลาเจน ทำให้คอลลาเจนถูกปลดปล่อยออกมา
การสกัดด้วยเพปซินร่วมกับอัลตราโซนิก: เพปซินที่ใช้ร่วมกับอัลตราโซนิกเพิ่มผลผลิตคอลลาเจนได้สูงถึงประมาณ 124% และลดระยะเวลาการสกัดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับการไฮโดรไลซิสด้วยเพปซินแบบดั้งเดิม การวิเคราะห์ไดโครอิซึมแบบวงกลม กล้องจุลทรรศน์แรงอะตอม และ FTIR พิสูจน์ว่าโครงสร้างเกลียวสามสายของคอลลาเจนที่สกัดได้ไม่ได้รับผลกระทบจากการใช้คลื่นอัลตราโซนิกและยังคงสมบูรณ์ (Li et al. 2009) จึงทำให้การสกัดด้วยเพปซินโดยใช้อัลตราโซนิกช่วยเหมาะสมอย่างยิ่งสำหรับการใช้งานจริงในอุตสาหกรรมอาหาร โดยให้อัตราการกู้คืนโปรตีนที่สูงขึ้นในระยะเวลาการแปรรูปที่สั้นลงอย่างมีนัยสำคัญ
ในการศึกษาเปรียบเทียบการสกัดคอลลาเจนจากเอ็นโคด้วยอัลตราโซนิกกับการสกัดโดยไม่ใช้อัลตราโซนิก การใช้อัลตราโซนิก (20kHz, โหมดพัลส์ 20/20 วินาที) แสดงให้เห็นถึงผลผลิตและประสิทธิภาพที่สูงกว่า การสกัดแบบดั้งเดิมดำเนินการโดยใช้เพปซินในกรดแอซีติกเป็นเวลา 48 ชั่วโมง การสกัดด้วยอัลตราโซนิกดำเนินการภายใต้สภาวะเดียวกัน แต่ปรับระยะเวลาการสัมผัสคลื่นอัลตราโซนิก (3 ถึง 24 h) และเพปซิน (24 ถึง 45 ชั่วโมง) โดยมีระยะเวลาการบำบัดรวม 48 ชั่วโมง การสกัดด้วยอัลตราโซนิกร่วมกับเพปซินแสดงประสิทธิภาพในการสกัดคอลลาเจนที่เหนือกว่า โดยได้ผลผลิต 6.2% ขณะที่การสกัดแบบดั้งเดิมได้ผลผลิต 2.4% ผลลัพธ์ที่ดีที่สุดได้จากการใช้ระยะเวลาการสกัดด้วยอัลตราโซนิก 18 h คอลลาเจนที่สกัดได้มีโครงสร้างเกลียวต่อเนื่องที่ไม่เสียหาย มีความสามารถในการละลายที่ดี และมีความคงตัวทางความร้อนค่อนข้างสูง ซึ่งหมายความว่าการสกัดด้วยอัลตราโซนิกร่วมกับเพปซินช่วยเพิ่มประสิทธิภาพการสกัดคอลลาเจนธรรมชาติโดยไม่ทำให้คุณภาพของคอลลาเจนที่ได้เสียหาย (Ran and Wang 2014)
การสกัดด้วยกรดโดยใช้อัลตราโซนิกช่วย
ในการศึกษาของ Kim et al. (2012) การสกัดคอลลาเจนที่ละลายในกรดจากหนังปลากะพงญี่ปุ่น (Lateolabrax japonicus) ให้ผลผลิตเพิ่มขึ้นและใช้ระยะเวลาการสกัดลดลงหลังจากใช้อัลตราโซนิกที่ความถี่ 20 kHz ในกรดแอซีติก 0.5 M การสกัดด้วยอัลตราโซนิกไม่ได้เปลี่ยนแปลงองค์ประกอบหลักของคอลลาเจน โดยเฉพาะสาย α1, α2 และ β
การสกัดโปรตีนจากเปลือกไข่ด้วยอัลตราโซนิก
ไฮโดรไลเสตที่ได้จากเอนไซม์และผ่านการปรับสภาพเบื้องต้นด้วยอัลตราโซนิกมีสมบัติเชิงหน้าที่ที่ดีขึ้น การสกัดโปรตีนไฮโดรไลเสตที่มีสมบัติเชิงหน้าที่จากเปลือกไข่ไก่ด้วยอัลตราโซนิกช่วยปรับปรุงสมบัติด้านการละลาย การเกิดอิมัลชัน การเกิดฟอง และการอุ้มน้ำ
เยื่อเปลือกไข่เป็นทรัพยากรธรรมชาติที่มีอยู่มากและประกอบด้วยโปรตีนประมาณ 64 ชนิด รวมถึงคอลลาเจนชนิด I, V และ X ไลโซไซม์ ออสทีโอพอนติน และไซอะโลโปรตีน จึงทำให้เปลือกไข่เป็นวัตถุดิบที่น่าสนใจสำหรับการสกัดโปรตีน การสกัดด้วยอัลตราโซนิกสามารถเพิ่มการปลดปล่อยโปรตีนและปรับปรุงสมบัติเชิงหน้าที่ได้อย่างมีนัยสำคัญ ส่งผลให้กระบวนการรวดเร็ว มีประสิทธิภาพ และประหยัด
กระบวนการอัลตราโซนิก: จากระดับ ห้องปฏิบัติการ ถึง ระดับ อุตสาหกรรม
การสกัดด้วยด่างโดยใช้อัลตราโซนิกช่วย
เพื่อสกัดและทำให้โปรตีนเหล่านี้ละลาย
สำหรับการสกัดโปรตีนจากเยื่อเปลือกไข่ การใช้อัลตราโซนิกร่วมกับด่างให้ผลผลิตโปรตีนที่ละลายได้ใกล้เคียง 100% ของโปรตีนทั้งหมดในเยื่อเปลือกไข่ คาวิเทชันจากอัลตราโซนิกทำให้กลุ่มก้อนโปรตีนขนาดใหญ่หลุดออกจากเยื่อเปลือกไข่และช่วยให้สารประกอบในเยื่อเปลือกไข่ละลายได้ง่ายขึ้น โครงสร้างและสมบัติของโปรตีนไม่ได้รับความเสียหายจากการใช้คลื่นอัลตราโซนิกและยังคงสมบูรณ์ สมบัติการต้านอนุมูลอิสระของโปรตีนเหมือนกันทั้งในการบำบัดด้วยด่างโดยใช้อัลตราโซนิกช่วยและการสกัดแบบดั้งเดิม
การสกัดเจลาตินด้วยอัลตราโซนิก
หนังปลาพอลล็อกที่แช่แข็งและที่ทำให้แห้งด้วยอากาศได้รับการบำบัดด้วยสารละลายเกลือเย็น สารละลายด่าง และสารละลายกรด เพื่อแยกเนื้อเยื่อคอลลาเจนและสกัดเจลาตินโดยทำให้คอลลาเจนเสียสภาพที่ 45°C เป็นเวลาสี่ชั่วโมง โดยใช้อัลตราโซนิกกำลังสูงเป็นตัวช่วยในกระบวนการ มีการประเมินผลผลิตเจลาติน ค่า pH ความใส ความแข็งแรงของเจล และสมบัติหนืดหยุ่น รวมทั้งการกระจายน้ำหนักโมเลกุลที่ตรวจวัดด้วยวิธี PAGE-SDS เจลาตินที่สกัดในอ่างน้ำที่ 45°C เป็นเวลาสี่ชั่วโมงถูกใช้เป็นตัวอย่างควบคุม การใช้อัลตราโซนิกกำลังสูงเพิ่มผลผลิตการสกัดขึ้น 11.1% เมื่อเทียบกับตัวอย่างควบคุม ขณะที่ความแข็งแรงของเจลลดลง 7% อุณหภูมิการเกิดเจลของเจลาตินที่สกัดด้วยอัลตราโซนิกก็ต่ำกว่าเช่นกัน (4.2°C) พฤติกรรมนี้สัมพันธ์กับความแตกต่างของการกระจายน้ำหนักโมเลกุลของสายพอลิเพปไทด์ที่ขดตัวในเจลาติน การสกัดด้วยอัลตราโซนิกกำลังสูงสามารถใช้เพื่อเพิ่มการสกัดเจลาตินจากหนังปลาที่แช่แข็งและที่ทำให้แห้งด้วยอากาศได้ (Olson et al. 2005)
ระบบอัลตราโซนิกระดับอุตสาหกรรม
Hielscher Ultrasonics จัดหาระบบอัลตราโซนิกที่ทรงพลังตั้งแต่ระดับห้องปฏิบัติการและแบบตั้งโต๊ะไปจนถึงระดับอุตสาหกรรม เพื่อให้มั่นใจว่าได้ผลผลิตการสกัดที่เหมาะสมที่สุด สามารถดำเนินการใช้คลื่นอัลตราโซนิกอย่างเชื่อถือได้ภายใต้สภาวะที่ท้าทายอย่างต่อเนื่อง เครื่องประมวลผลอัลตราโซนิกระดับอุตสาหกรรมทุกรุ่นสามารถให้แอมพลิจูดสูงมาก แอมพลิจูดสูงถึง 200µm สามารถใช้งานต่อเนื่องแบบ 24/7 ได้อย่างง่ายดาย สำหรับแอมพลิจูดที่สูงยิ่งขึ้น มีโซโนโทรดอัลตราโซนิกที่ผลิตตามความต้องการให้เลือกใช้ ความแข็งแกร่งทนทานของอุปกรณ์อัลตราโซนิกของ Hielscher ทำให้สามารถใช้งานแบบ 24/7 สำหรับงานหนักและในสภาพแวดล้อมที่ท้าทายได้
โปรดติดต่อเราวันนี้พร้อมแจ้งข้อกำหนดของกระบวนการของคุณ! เรายินดีแนะนำระบบอัลตราโซนิกที่เหมาะสมกับกระบวนการของคุณ!
เครื่องโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกกำลังสูงของ Hielscher มีให้เลือกสำหรับกระบวนการทุกขนาด – ตั้งแต่ห้องปฏิบัติการไปจนถึงการผลิต
วรรณกรรม/เอกสารอ้างอิง
- Álvarez, Carlos; Lélu, Pauline; Lynch, Sarah A.; Tiwari, Brijesh K. (2018): การกู้คืนโปรตีนจากปลาแมกเคอเรลทั้งตัวที่ปรับให้เหมาะสมที่สุด โดยใช้การสกัดด้วยการทำให้ละลายและการตกตะกอนที่จุดไอโซอิเล็กทริก (ISP) ด้วยกรด/ด่างตามลำดับโดยใช้อัลตราโซนิกช่วย LWT – Food Science and Technology เล่ม 88, กุมภาพันธ์ 2018. 210–216.
- Jain, Surangna; Kumar Anal, Anil (2016): การปรับการสกัดโปรตีนไฮโดรไลเสตที่มีสมบัติเชิงหน้าที่จากเยื่อเปลือกไข่ไก่ (ESM) ให้เหมาะสมที่สุดด้วยการสกัดโดยใช้อัลตราโซนิกช่วย (UAE) และการไฮโดรไลซิสด้วยเอนไซม์ LWT – Food Science and Technology เล่ม 69, มิถุนายน 2016. 295–302.
- Kim, H.K.; Kim, Y.H.; Kim, Y.J.; Park, H.J.; Lee, N.H. (2012): ผลของการใช้อัลตราโซนิกต่อการสกัดคอลลาเจนจากหนังปลากะพง Lateolabrax japonicus. Fisheries Science เล่ม 78, ฉบับ 78; 2013. 485–490.
- Li, Defu; Mu, Changdao; Cai, Sumei; Lin, Wei (2016): การฉายคลื่นอัลตราโซนิกในการสกัดคอลลาเจนด้วยเอนไซม์ Ultrasonics Sonochemistry เล่ม 16, ฉบับ 5; 2009. 605–609.
- Olson, D.A., Avena Bustillos, R.D., Olsen, C.W., Chiou, B., Yee, E., Bower, C.K., Bechtel, P.J., Pan, Z., Mc Hugh, T.H. (2005): การประเมินอัลตราโซนิกกำลังสูงในฐานะตัวช่วยในกระบวนการสกัดเจลาตินจากปลา บทคัดย่อการประชุมหมายเลข 71C-26. การประชุมประจำปี IFT. กรกฎาคม 2005. นิวออร์ลีนส์, LA.
- Ran, X.G.; Wang, L.Y. (2014): การใช้อัลตราโซนิกและเพปซินควบคู่กันเพื่อสกัดคอลลาเจนจากผลพลอยได้ของอุตสาหกรรมเนื้อสัตว์ Journal of the Science of Food and Agriculture 94(3), 2014. 585–590.
- Schmidt, M.M.; Dornelles, R.C.P.; Mello, R.O.; Kubota, E.H.; Mazutti, M.A.; Kempka, A.P.; Demiate, I.M. (2016): กระบวนการสกัดคอลลาเจน International Food Research Journal 23(3), 2016. 913–922.
- Siritientong, Tippawan; Bonani, Walter; Motta, Antonella; Migliaresi, Claudio; Aramwit, Pornanong (2016): ผลของสายพันธุ์ไหม Bombyx mori และระยะเวลาการสกัดต่อลักษณะทางโมเลกุลและชีวภาพของเซริซิน Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry เล่ม 80, ฉบับ 2, 2016. 241–249.
- Zeng, J.N.; Jiang, B.Q.; Xiao, Z.Q., Li, S.H. (2011): การสกัดคอลลาเจนจากเกล็ดปลาด้วยปาเปนโดยใช้การปรับสภาพเบื้องต้นด้วยอัลตราโซนิก Advanced Materials Research, เล่ม 366, 2011. 421–424.
ข้อเท็จจริงที่ควรรู้
คอลลาเจน
คอลลาเจนเป็นโปรตีนโครงสร้างหลักในบริเวณนอกเซลล์ของเนื้อเยื่อเกี่ยวพันชนิดต่าง ๆ ในร่างกายสัตว์ ในฐานะองค์ประกอบหลักของเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน คอลลาเจนเป็นโปรตีนที่มีมากที่สุดในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม[1] โดยคิดเป็น 25% ถึง 35% ของปริมาณโปรตีนทั้งร่างกาย คอลลาเจนประกอบด้วยกรดอะมิโนที่พันกันเป็นเกลียวสามสายเพื่อสร้างเส้นใยย่อยที่ยาว เนื้อเยื่อเส้นใย เช่น เอ็นกล้ามเนื้อ เอ็นยึดข้อ และผิวหนัง มีคอลลาเจนในปริมาณสูงที่สุด คอลลาเจนแบ่งแยกได้เป็นสามชนิด:
คอลลาเจนชนิด I: คิดเป็น 90% ของโปรตีนในผิวหนัง เส้นผม เล็บ อวัยวะ กระดูก และเอ็นยึดข้อ
คอลลาเจนชนิด II: คิดเป็น 50–60% ของโปรตีนในกระดูกอ่อน และ 85–90% ของคอลลาเจนในกระดูกอ่อนผิวข้อ
คอลลาเจนชนิด III: ให้โปรตีนแก่โปรตีนเส้นใยในกระดูก กระดูกอ่อน เนื้อฟัน เอ็นกล้ามเนื้อ และเนื้อเยื่อเกี่ยวพันอื่น ๆ
คอลลาเจนในร่างกาย
คอลลาเจนแต่ละชนิดจากทั้งสามชนิดประกอบด้วยโปรตีนที่แตกต่างกัน ซึ่งทำหน้าที่ต่างกันในร่างกาย คอลลาเจนชนิด I และ III ต่างเป็นองค์ประกอบหลักของผิวหนัง กล้ามเนื้อ กระดูก เส้นผม และเล็บ คอลลาเจนเหล่านี้จำเป็นต่อสุขภาพ การเจริญเติบโต และการสร้างส่วนต่าง ๆ เหล่านี้ขึ้นใหม่ คอลลาเจนชนิด II พบเป็นส่วนใหญ่ในกระดูกอ่อนและข้อต่อ
คอลลาเจนชนิด I และ III ต่างมีกรดอะมิโน 19 ชนิดซึ่งถือเป็นกรดอะมิโนจำเป็น คอลลาเจนเหล่านี้ผลิตโดยไฟโบรบลาสต์ (เซลล์ในเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน) และออสทีโอบลาสต์ (เซลล์ที่สร้างกระดูก) โปรตีนที่สำคัญที่สุดในคอลลาเจนชนิด I และ III ได้แก่ ไกลซีน โพรลีน อะลานีน และไฮดรอกซีโพรลีน ชนิด III เป็นสเคลอโรโปรตีนที่มีลักษณะเป็นเส้นใย
ไกลซีนเป็นกรดอะมิโนที่มีปริมาณสูงที่สุดในคอลลาเจน โพรลีนเป็นกรดอะมิโนไม่จำเป็น ซึ่งสามารถสังเคราะห์จากไกลซีนได้และมีส่วนช่วยต่อข้อต่อและเอ็นกล้ามเนื้อ ไฮดรอกซีโพรลีนเป็นกรดอะมิโนที่มีส่วนช่วยให้คอลลาเจนมีความคงตัว อะลานีนเป็นกรดอะมิโนที่สำคัญต่อการสังเคราะห์โปรตีนทางชีวภาพ
เช่นเดียวกับชนิด I และ III คอลลาเจนชนิด II สร้างเส้นใยย่อย โครงข่ายเส้นใยย่อยของคอลลาเจนนี้มีความสำคัญในกระดูกอ่อน เนื่องจากทำให้สามารถกักเก็บโปรตีโอไกลแคนได้ นอกจากนี้ยังให้ความต้านทานแรงดึงแก่เนื้อเยื่อ
แหล่งที่มาและการใช้งาน
คอลลาเจนเป็นโปรตีนเส้นใยที่พบมากในเนื้อเยื่อเกี่ยวพันของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม เช่น โคและสุกร คอลลาเจนส่วนใหญ่สกัด
จากหนังและกระดูกสุกร รวมทั้งจากแหล่งที่เป็นโค แหล่งทางเลือกสำหรับการสกัดคอลลาเจน ได้แก่ ปลาและสัตว์ปีก คอลลาเจนมีการใช้อย่างแพร่หลายในอาหาร ผลิตภัณฑ์เสริมอาหาร เภสัชภัณฑ์/ผลิตภัณฑ์ทางการแพทย์ และเครื่องสำอาง รวมถึงผลิตภัณฑ์อื่น ๆ การสกัดคอลลาเจนเป็นธุรกิจที่กำลังเติบโต เนื่องจากโปรตีนนี้สามารถทดแทนสารสังเคราะห์ในกระบวนการอุตสาหกรรมต่าง ๆ ได้