สารละลายบัฟเฟอร์ที่เตรียมด้วยอัลตราโซนิก

บัฟเฟอร์ Lysis สามารถเตรียมได้อย่างมีประสิทธิภาพและรวดเร็วโดยใช้โฮโมจีไนเซอร์เนื้อเยื่ออัลตราโซนิก เนื่องจากเครื่องอัลตราโซนิกเป็นเครื่องมือในฝันสําหรับการผสมละลายและกระจายตัวจึงช่วยให้สามารถเตรียมบัฟเฟอร์สลายได้อย่างน่าเชื่อถือและเป็นมิตรกับผู้ใช้

การเตรียมอัลตราโซนิกของบัฟเฟอร์ Lysis

Ultrasonic tissue homogenizers เป็นเครื่องมือทั่วไปสําหรับการหยุดชะงักของเซลล์การสลายและการสกัดดังนั้นจึงมีอยู่ในห้องปฏิบัติการส่วนใหญ่ การประยุกต์ใช้รองสําหรับเครื่องอัลตราโซนิกชนิดโพรบคือการเตรียมบัฟเฟอร์การสลาย

บัฟเฟอร์ Lysis เป็นสารละลายที่ใช้ในการทําลายเซลล์ที่เปิดอยู่ (ไลซิส) และปล่อยเนื้อหาสําหรับการวิเคราะห์ปลายน้ํา องค์ประกอบเฉพาะของบัฟเฟอร์สไลซิสอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับประเภทของเซลล์ที่ไลซิสและการใช้งานปลายน้ํา อย่างไรก็ตาม บัฟเฟอร์การสลายทั่วไปมีส่วนประกอบต่างๆ เช่น ผงซักฟอก เกลือ และสารยับยั้งโปรตีเอส เกลือบัฟเฟอร์ (เช่น Tris-HCl) และเกลือไอออนิก (เช่น NaCl) มักใช้เพื่อควบคุมค่า pH และออสโมลาริตี้ของไลเสท
ในการสร้างบัฟเฟอร์สลาย ส่วนประกอบจะถูกผสมเข้าด้วยกันในความเข้มข้นและค่า pH ที่เหมาะสม ส่วนผสมมักจะกวนหรือเขย่าจนกว่าส่วนประกอบจะละลายและสารละลายเป็นเนื้อเดียวกัน
การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกเป็นวิธีการที่สามารถใช้เพื่อช่วยสร้างบัฟเฟอร์การสลายที่ดีโดยการปรับปรุงการผสมและการละลายของส่วนประกอบ ในวิธีนี้คลื่นอัลตราซาวนด์ – โดยปกติอยู่ในช่วง 20 ถึง 30 kHz – ถูกนําไปใช้กับส่วนผสม ซึ่งสร้างฟองอากาศที่ยุบตัวและสร้างพลังงานในท้องถิ่นที่เข้มข้น ซึ่งนําไปสู่แรงเฉือนเชิงกลและการผสมส่วนประกอบ
กระบวนการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกสามารถช่วยแยกก้อนหรือมวลรวมของส่วนประกอบออกจากกันและให้แน่ใจว่าสารละลายผสมอย่างสม่ําเสมอ ดังนั้นบัฟเฟอร์การสลายที่ได้รับการปรับปรุงดังกล่าวสามารถนําไปสู่การหยุดชะงักของเซลล์ที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นและให้ผลผลิตที่สูงขึ้นของวัสดุที่สกัดออกมา นอกจากนี้การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกสามารถลดเวลาที่ต้องใช้ในการสร้างบัฟเฟอร์การสลายเมื่อเทียบกับวิธีการกวนหรือเขย่าแบบดั้งเดิม
โดยรวมแล้วการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพในการปรับปรุงคุณภาพและประสิทธิภาพของการเตรียมบัฟเฟอร์การสลาย

โปรโตคอลสําหรับการเตรียมบัฟเฟอร์ Lysis อัลตราโซนิก

นี่คือโปรโตคอลทั่วไปสําหรับการสร้างบัฟเฟอร์การสลายโดยใช้เครื่องอัลตราโซนิกชนิดโพรบ:
 
วัสดุ:

• ผงซักฟอกที่เลือก (เช่น Triton X-100, SDS, CHAPS)
• เกลือที่เลือก (เช่น NaCl, KCl)
• สารยับยั้งโปรตีเอส (เช่น PMSF, aprotinin, leupeptin)
• เครื่องอัลตราโซนิก
• เครื่องกวน
• น้ําปราศจากไอออน
• เครื่องวัดค่า pH หรือแถบ pH

 
 
คําแนะนําทีละขั้นตอน:

1. กําหนดองค์ประกอบของบัฟเฟอร์สไลซิสตามเซลล์หรือเนื้อเยื่อที่คุณจะสลาย และการใช้งานปลายน้ําที่คุณจะใช้ไลเสท เตรียมสารละลายสต็อกของผงซักฟอก เกลือ และสารยับยั้งโปรตีเอสที่ความเข้มข้นที่ต้องการ
2. เติมสารละลายสต็อกของผงซักฟอก เกลือ และสารยับยั้งโปรตีเอสลงในบีกเกอร์หรือขวด
3. เติมน้ําปราศจากไอออนเพื่อเพิ่มปริมาตรให้ได้ปริมาณบัฟเฟอร์ที่ต้องการ
4. ผสมส่วนประกอบโดยใช้เครื่องกวนเพื่อให้ได้สารละลายผสมล่วงหน้า
5. วัดค่า pH ของบัฟเฟอร์โดยใช้เครื่องวัดค่า pH หรือแถบ pH และปรับค่า pH ตามความจําเป็นด้วยกรดหรือเบสปริมาณเล็กน้อย
6. ใช้เครื่องอัลตราโซนิกชนิดโพรบเพื่อทําให้สารละลายผสมล่วงหน้าเป็นเนื้อเดียวกันเพื่อให้ได้สารละลายที่เป็นเนื้อเดียวกันสูง ดังนั้นให้ sonicate สารละลายสักครู่จนกว่าสารละลายจะผสมให้เข้ากันและก้อนหรือมวลรวมใด ๆ จะถูกสลายตัว ระยะเวลาและพลังของ sonication สามารถปรับให้เหมาะสมได้ตามบัฟเฟอร์การสลายเฉพาะและเครื่องอัลตราโซนิกที่ใช้
7. หลังจากอัลตราโซนิกให้วัดค่า pH ของบัฟเฟอร์อีกครั้งและปรับตามความจําเป็น
8. กรองบัฟเฟอร์ผ่านตัวกรอง 0.2 ไมครอนเพื่อขจัดเศษขยะหรือมวลรวมที่อาจก่อตัวขึ้นระหว่างการ sonication
9. บัฟเฟอร์ lysis พร้อมใช้งานแล้ว

 
หมายเหตุ: องค์ประกอบที่แน่นอนและค่า pH ของบัฟเฟอร์สไลซิสอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับเซลล์หรือเนื้อเยื่อที่ไลซิสและการใช้งานปลายน้ํา โปรโตคอลข้างต้นเป็นแนวทางทั่วไปและอาจต้องปรับให้เหมาะสมสําหรับการใช้งานเฉพาะ
 
Homogenizers อัลตราโซนิกมักใช้สําหรับการหยุดชะงักของเซลล์และการสกัดโมเลกุลภายในเซลล์ ดังนั้นแอพพลิเคชั่นการสลายจํานวนมากจึงใช้ sonication ชนิดโพรบไม่เพียง แต่สําหรับการเตรียมบัฟเฟอร์การสลายเท่านั้น แต่ยังรวมถึงการหยุดชะงักของเซลล์เชิงกลและการสกัดด้วย
สิ่งนี้ทําให้ homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกเป็นเครื่องมืออเนกประสงค์สําหรับห้องปฏิบัติการและอธิบายถึงการใช้เครื่องอัลตราโซนิกอย่างกว้างขวางในจุลชีววิทยาเทคโนโลยีชีวภาพและวิทยาศาสตร์เพื่อชีวิต

อัลตราโซนิกห้องปฏิบัติการ Homogenizers

Hielscher Ultrasonics ผลิตและจัดหาโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกและโพรบ (sonotrodes) ที่ระดับพลังงานและปริมาณตัวอย่างต่างๆ สิ่งนี้ช่วยให้เราสามารถนําเสนอตัวก่อกวนอัลตราโซนิกที่เหมาะสมที่สุดสําหรับการเตรียมตัวอย่างของคุณ เรามุ่งเน้นไปที่คุณภาพสูงสุดความสะดวกสบายของผู้ใช้ที่โดดเด่นและผลลัพธ์การ sonication ที่เชื่อถือได้ เครื่องอัลตราโซนิกดิจิตอลทั้งหมดมีซอฟต์แวร์อัจฉริยะการเขียนโปรแกรมและการตั้งค่าล่วงหน้าของโปรโตคอล sonication รีโมทคอนโทรลของเบราว์เซอร์การควบคุมอุณหภูมิการส่องสว่างตัวอย่างตลอดจนการบันทึกข้อมูลอัตโนมัติบนการ์ด SD ในตัว

การออกแบบ การผลิต และการให้คําปรึกษา – คุณภาพ ผลิตในประเทศเยอรมนี

เครื่องอัลตราโซนิก Hielscher เป็นที่รู้จักกันดีในด้านคุณภาพและมาตรฐานการออกแบบสูงสุด ความทนทานและใช้งานง่ายช่วยให้สามารถรวมเครื่องอัลตราโซนิกของเราเข้ากับโรงงานอุตสาหกรรมได้อย่างราบรื่น สภาพที่ขรุขระและสภาพแวดล้อมที่ต้องการสามารถจัดการได้ง่ายโดยเครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher

Hielscher Ultrasonics เป็น บริษัท ที่ได้รับการรับรองมาตรฐาน ISO และให้ความสําคัญเป็นพิเศษกับเครื่องอัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูงที่มีเทคโนโลยีล้ําสมัยและเป็นมิตรกับผู้ใช้ แน่นอนว่าเครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher เป็นไปตามมาตรฐาน CE และตรงตามข้อกําหนดของ UL, CSA และ RoHs

ตารางด้านล่างให้ภาพรวมของเครื่องอัลตราโซนิกในห้องปฏิบัติการต่างๆของเรา: