สารละลายบัฟเฟอร์ที่เตรียมด้วย Ultrasonication
บัฟเฟอร์ Lysis สามารถเตรียมได้อย่างมีประสิทธิภาพและรวดเร็วโดยใช้ homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิก เนื่องจาก ultrasonicators เป็นเครื่องมือในฝันสําหรับการผสมละลายและการกระจายตัวจึงช่วยให้สามารถเตรียมบัฟเฟอร์ lysis ที่เชื่อถือได้และใช้งานง่าย
การเตรียมอัลตราโซนิกของบัฟเฟอร์ Lysis
homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกเป็นเครื่องมือทั่วไปสําหรับการหยุดชะงักของเซลล์การสลายตัวและการสกัดดังนั้นจึงมีอยู่ในห้องปฏิบัติการส่วนใหญ่ แอปพลิเคชั่นรองสําหรับ ultrasonicators ชนิดโพรบคือการเตรียมบัฟเฟอร์ lysis
บัฟเฟอร์ Lysis เป็นโซลูชันที่ใช้ในการทําลายเซลล์เปิด (lyse) และปล่อยเนื้อหาสําหรับการวิเคราะห์ปลายน้ํา องค์ประกอบเฉพาะของบัฟเฟอร์การสลายตัวอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับประเภทของเซลล์ที่ถูก lysed และแอปพลิเคชันดาวน์สตรีม อย่างไรก็ตามบัฟเฟอร์ lysis ทั่วไปมีส่วนประกอบเช่นผงซักฟอกเกลือและสารยับยั้งโปรตีเอส เกลือบัฟเฟอร์ (เช่น Tris-HCl) และเกลือไอออนิก (เช่น NaCl) มักใช้เพื่อควบคุมค่า pH และออสโมลาริตีของไลเสต
ในการสร้างบัฟเฟอร์ lysis ส่วนประกอบจะถูกผสมเข้าด้วยกันในความเข้มข้นและค่า pH ที่เหมาะสม ส่วนผสมมักจะกวนหรือเขย่าจนกว่าส่วนประกอบจะละลายและสารละลายเป็นเนื้อเดียวกัน
การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกเป็นวิธีการที่สามารถใช้เพื่อช่วยสร้างบัฟเฟอร์การสลายตัวที่ดีโดยการปรับปรุงการผสมและการละลายของส่วนประกอบ ในวิธีนี้คลื่นอัลตราซาวนด์ – โดยปกติอยู่ในช่วง 20 ถึง 30 kHz – ถูกนําไปใช้กับส่วนผสมซึ่งสร้างฟองอากาศที่ยุบตัวและสร้างพลังงานในท้องถิ่นที่รุนแรงซึ่งนําไปสู่แรงเฉือนเชิงกลและการผสมส่วนประกอบ
กระบวนการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกสามารถช่วยแยกกลุ่มหรือมวลรวมของส่วนประกอบออกและตรวจสอบให้แน่ใจว่าสารละลายผสมกันอย่างสม่ําเสมอ ดังนั้นบัฟเฟอร์การสลายตัวที่ได้รับการปรับปรุงดังกล่าวสามารถนําไปสู่การหยุดชะงักของเซลล์ที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นและผลผลิตที่สูงขึ้นของวัสดุที่สกัด นอกจากนี้การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกสามารถลดเวลาที่ต้องใช้ในการสร้างบัฟเฟอร์การสลายตัวเมื่อเทียบกับวิธีการกวนหรือเขย่าแบบดั้งเดิม
โดยรวมแล้วการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพในการปรับปรุงคุณภาพและประสิทธิภาพของการเตรียมบัฟเฟอร์ไลซิส

ห้องปฏิบัติการอัลตราโซนิก homogenizer UP200Ht เป็นที่นิยมในห้องปฏิบัติการวิจัยสําหรับการเตรียมตัวอย่างการสลายการสกัดการกระจายตัวของดีเอ็นเอและการละลาย
โปรโตคอลสําหรับการเตรียมบัฟเฟอร์อัลตราโซนิก Lysis
นี่คือโปรโตคอลทั่วไปสําหรับการสร้างบัฟเฟอร์ lysis โดยใช้ ultrasonicator ชนิดโพรบ:
วัสดุ:
- ผงซักฟอกที่เลือก (เช่น Triton X-100, SDS, CHAPS)
- เกลือที่เลือก (เช่น NaCl, KCl)
- สารยับยั้งโปรตีเอส (เช่น PMSF, aprotinin, leupeptin)
- ultrasonicator
- เครื่องกวน
- น้ําปราศจากไอออน
- เครื่องวัดค่า pH หรือแถบวัดค่า pH
คําแนะนําทีละขั้นตอน:
- กําหนดองค์ประกอบของบัฟเฟอร์การสลายตัวตามเซลล์หรือเนื้อเยื่อที่คุณจะไลซิงและแอปพลิเคชันปลายน้ําที่คุณจะใช้ไลเสท เตรียมสารละลายสต็อกของผงซักฟอกเกลือและสารยับยั้งโปรตีเอสที่ความเข้มข้นที่ต้องการ
- เพิ่มสารละลายสต็อกของผงซักฟอกเกลือและสารยับยั้งโปรตีเอสลงในบีกเกอร์หรือขวด
- เติมน้ําปราศจากไอออนเพื่อเพิ่มปริมาตรให้กับบัฟเฟอร์ที่ต้องการ
- ผสมส่วนประกอบโดยใช้เครื่องกวนเพื่อให้ได้สารละลายผสมล่วงหน้า
- วัดค่า pH ของบัฟเฟอร์โดยใช้เครื่องวัดค่า pH หรือแถบวัดค่า pH และปรับค่า pH ตามความจําเป็นด้วยกรดหรือเบสจํานวนเล็กน้อย
- ใช้เครื่องอัลตราโซนิกชนิดโพรบเพื่อทําให้สารละลายผสมล่วงหน้าเป็นเนื้อเดียวกันเพื่อให้ได้สารละลายที่เป็นเนื้อเดียวกันสูง ดังนั้นให้ส่งเสียงสารละลายเป็นเวลาสองสามวินาทีจนกว่าสารละลายจะถูกผสมอย่างทั่วถึงและก้อนหรือมวลรวมใด ๆ จะถูกทําลายลง ระยะเวลาและพลังของ sonication สามารถปรับให้เหมาะสมตามบัฟเฟอร์การสลายตัวและอัลตราโซนิกที่ใช้เฉพาะ
- หลังจากอัลตราโซนิกให้วัดค่า pH ของบัฟเฟอร์อีกครั้งและปรับตามความจําเป็น
- กรองบัฟเฟอร์ผ่านตัวกรองขนาด 0.2 ไมครอนเพื่อกําจัดเศษซากหรือมวลรวมที่อาจเกิดขึ้นระหว่างการแยกเสียง
- บัฟเฟอร์ lysis พร้อมใช้งานแล้ว
หมายเหตุ: องค์ประกอบที่แน่นอนและค่า pH ของบัฟเฟอร์การสลายตัวอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับเซลล์หรือเนื้อเยื่อที่ถูกไลเซดและการใช้งานปลายน้ํา โปรโตคอลข้างต้นเป็นแนวทางทั่วไปและอาจจําเป็นต้องได้รับการปรับให้เหมาะสมสําหรับการใช้งานเฉพาะ
homogenizers อัลตราโซนิกมักใช้สําหรับการหยุดชะงักของเซลล์และการสกัดโมเลกุลภายในเซลล์ ดังนั้นการใช้งานการสลายจํานวนมากจึงใช้ sonication ชนิดโพรบไม่เพียง แต่สําหรับการเตรียมบัฟเฟอร์การสลายตัว แต่ยังสําหรับการหยุดชะงักของเซลล์เชิงกลและการสกัด
สิ่งนี้ทําให้ homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกเป็นเครื่องมืออเนกประสงค์สําหรับห้องปฏิบัติการและอธิบายการใช้ ultrasonicators อย่างกว้างขวางในจุลชีววิทยาเทคโนโลยีชีวภาพและวิทยาศาสตร์เพื่อชีวิต
homogenizers ห้องปฏิบัติการล้ำ
Hielscher Ultrasonics ผลิตและจําหน่าย homogenizers อัลตราโซนิกและโพรบ (sonotrodes) ที่ระดับพลังงานต่างๆและปริมาณตัวอย่าง สิ่งนี้ช่วยให้เราสามารถเสนอตัวรบกวนอัลตราโซนิกที่เหมาะสมที่สุดสําหรับการเตรียมตัวอย่างของคุณ เรามุ่งเน้นคุณภาพสูงสุดความสะดวกสบายของผู้ใช้ที่โดดเด่นและผลลัพธ์ sonication ที่เชื่อถือได้ เครื่องอัลตราโซนิกดิจิตอลทั้งหมดมีซอฟต์แวร์อัจฉริยะการเขียนโปรแกรมและการตั้งค่าโปรโตคอล sonication ล่วงหน้ารีโมทคอนโทรลของเบราว์เซอร์การควบคุมอุณหภูมิการส่องสว่างตัวอย่างรวมถึงการบันทึกข้อมูลอัตโนมัติบนการ์ด SD ในตัว
ออกแบบ ผลิต และให้คําปรึกษา – คุณภาพผลิตในประเทศเยอรมนี
เครื่องอัลตราโซนิก Hielscher เป็นที่รู้จักกันดีในด้านคุณภาพและมาตรฐานการออกแบบสูงสุด ความทนทานและใช้งานง่ายช่วยให้การรวมเครื่องอัลตราโซนิกของเราเข้ากับโรงงานอุตสาหกรรมได้อย่างราบรื่น สภาพที่หยาบกร้านและสภาพแวดล้อมที่มีความต้องการได้รับการจัดการอย่างง่ายดายโดยเครื่องอัลตราโซนิก Hielscher
Hielscher Ultrasonics เป็น บริษัท ที่ได้รับการรับรองมาตรฐาน ISO และให้ความสําคัญเป็นพิเศษกับเครื่องอัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูงที่มีเทคโนโลยีล้ําสมัยและใช้งานง่าย แน่นอนเครื่องอัลตราโซนิก Hielscher เป็นไปตามมาตรฐาน CE และตรงตามข้อกําหนดของ UL, CSA และ RoHs
The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators:
VialTweeter ที่ UP200St | 200W | 26kHz | ultrasonication ขวดขนาดเล็กเช่น Eppendorf 1.5ml |
UP50H | 50W | 30kHz | มือถือหรือ standmounted homogenizer ห้องปฏิบัติการ |
UP100H | 100w | 30kHz | มือถือหรือ standmounted homogenizer ห้องปฏิบัติการ |
Uf200 ःที | 200W | 26kHz | มือถือหรือ standmounted homogenizer ห้องปฏิบัติการ |
UP200St | 200W | 26kHz | homogenizer ห้องปฏิบัติการ standmounted |
UP400St | 400W | 24kHz | homogenizer ห้องปฏิบัติการ standmounted |
SonoStep | 200W | 26kHz | เครื่องปฏิกรณ์ห้องปฏิบัติการรวม, ultrasonication ปั๊มกวนและเรือ |
GDmini2 | 200W | 26kHz | เซลล์ไหลปนเปื้อนฟรี |
เต้าฮอร์น | 200W | 26kHz | อาบน้ําอัลตราโซนิกเข้มข้นสําหรับขวดและบีกเกอร์ |
UIP400MTP | 400W | 24kHz | ระบบอัลตราโซนิกสําหรับแผ่นหลายหลุม / แผ่นไมโครไทเตอร์ |

อัลตราโซนิก cuphorn สําหรับ sonication ที่รุนแรงของหลอดปิดและขวดสําหรับการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันปลอดเชื้อของตัวอย่าง
ติดต่อเรา! / ถามเรา!

ห้องปฏิบัติการอัลตราโซนิก homogenizer UP400St มักใช้สําหรับการเตรียมบัฟเฟอร์ Lysis และการหยุดชะงักของเซลล์ที่ตามมา
วรรณกรรม / อ้างอิง
- Fernandes, Luz; Santos, Hugo; Nunes-Miranda, J.; Lodeiro, Carlos; Capelo, Jose (2011): Ultrasonic Enhanced Applications in Proteomics Workflows: single probe versus multiprobe. Journal of Integrated OMICS 1, 2011.
- Priego-Capote, Feliciano; Castro, María (2004): Analytical uses of ultrasound – I. Sample preparation. TrAC Trends in Analytical Chemistry 23, 2004. 644-653.
- Welna, Maja; Szymczycha-Madeja, Anna; Pohl, Pawel (2011): Quality of the Trace Element Analysis: Sample Preparation Steps. In: Wide Spectra of Quality Control; InTechOpen 2011.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.

Hielscher Ultrasonics ผลิต homogenizers อัลตราโซนิกที่มีประสิทธิภาพสูงจาก ห้องปฏิบัติการ ไปยัง ขนาดอุตสาหกรรมของ