บัฟเฟอร์ Lysis สามารถเตรียมได้อย่างมีประสิทธิภาพและรวดเร็วโดยใช้ homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิก เนื่องจาก ultrasonicators เป็นเครื่องมือในฝันสําหรับการผสมละลายและการกระจายตัวจึงช่วยให้สามารถเตรียมบัฟเฟอร์ lysis ที่เชื่อถือได้และใช้งานง่าย

การเตรียมอัลตราโซนิกของบัฟเฟอร์ Lysis

homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกเป็นเครื่องมือทั่วไปสําหรับการหยุดชะงักของเซลล์การสลายตัวและการสกัดดังนั้นจึงมีอยู่ในห้องปฏิบัติการส่วนใหญ่ แอปพลิเคชั่นรองสําหรับ ultrasonicators ชนิดโพรบคือการเตรียมบัฟเฟอร์ lysis

บัฟเฟอร์ Lysis เป็นโซลูชันที่ใช้ในการทําลายเซลล์เปิด (lyse) และปล่อยเนื้อหาสําหรับการวิเคราะห์ปลายน้ํา องค์ประกอบเฉพาะของบัฟเฟอร์การสลายตัวอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับประเภทของเซลล์ที่ถูก lysed และแอปพลิเคชันดาวน์สตรีม อย่างไรก็ตามบัฟเฟอร์ lysis ทั่วไปมีส่วนประกอบเช่นผงซักฟอกเกลือและสารยับยั้งโปรตีเอส เกลือบัฟเฟอร์ (เช่น Tris-HCl) และเกลือไอออนิก (เช่น NaCl) มักใช้เพื่อควบคุมค่า pH และออสโมลาริตีของไลเสต
ในการสร้างบัฟเฟอร์ lysis ส่วนประกอบจะถูกผสมเข้าด้วยกันในความเข้มข้นและค่า pH ที่เหมาะสม ส่วนผสมมักจะกวนหรือเขย่าจนกว่าส่วนประกอบจะละลายและสารละลายเป็นเนื้อเดียวกัน
การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกเป็นวิธีการที่สามารถใช้เพื่อช่วยสร้างบัฟเฟอร์การสลายตัวที่ดีโดยการปรับปรุงการผสมและการละลายของส่วนประกอบ ในวิธีนี้คลื่นอัลตราซาวนด์ – โดยปกติอยู่ในช่วง 20 ถึง 30 kHz – ถูกนําไปใช้กับส่วนผสมซึ่งสร้างฟองอากาศที่ยุบตัวและสร้างพลังงานในท้องถิ่นที่รุนแรงซึ่งนําไปสู่แรงเฉือนเชิงกลและการผสมส่วนประกอบ
กระบวนการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกสามารถช่วยแยกกลุ่มหรือมวลรวมของส่วนประกอบออกและตรวจสอบให้แน่ใจว่าสารละลายผสมกันอย่างสม่ําเสมอ ดังนั้นบัฟเฟอร์การสลายตัวที่ได้รับการปรับปรุงดังกล่าวสามารถนําไปสู่การหยุดชะงักของเซลล์ที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นและผลผลิตที่สูงขึ้นของวัสดุที่สกัด นอกจากนี้การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกสามารถลดเวลาที่ต้องใช้ในการสร้างบัฟเฟอร์การสลายตัวเมื่อเทียบกับวิธีการกวนหรือเขย่าแบบดั้งเดิม
โดยรวมแล้วการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพในการปรับปรุงคุณภาพและประสิทธิภาพของการเตรียมบัฟเฟอร์ไลซิส

โปรโตคอลสําหรับการเตรียมบัฟเฟอร์อัลตราโซนิก Lysis

นี่คือโปรโตคอลทั่วไปสําหรับการสร้างบัฟเฟอร์ lysis โดยใช้ ultrasonicator ชนิดโพรบ:
 
วัสดุ:

• ผงซักฟอกที่เลือก (เช่น Triton X-100, SDS, CHAPS)
• เกลือที่เลือก (เช่น NaCl, KCl)
• สารยับยั้งโปรตีเอส (เช่น PMSF, aprotinin, leupeptin)
• ultrasonicator
• เครื่องกวน
• น้ําปราศจากไอออน
• เครื่องวัดค่า pH หรือแถบวัดค่า pH

 
 
คําแนะนําทีละขั้นตอน:

1. กําหนดองค์ประกอบของบัฟเฟอร์การสลายตัวตามเซลล์หรือเนื้อเยื่อที่คุณจะไลซิงและแอปพลิเคชันปลายน้ําที่คุณจะใช้ไลเสท เตรียมสารละลายสต็อกของผงซักฟอกเกลือและสารยับยั้งโปรตีเอสที่ความเข้มข้นที่ต้องการ
2. เพิ่มสารละลายสต็อกของผงซักฟอกเกลือและสารยับยั้งโปรตีเอสลงในบีกเกอร์หรือขวด
3. เติมน้ําปราศจากไอออนเพื่อเพิ่มปริมาตรให้กับบัฟเฟอร์ที่ต้องการ
4. ผสมส่วนประกอบโดยใช้เครื่องกวนเพื่อให้ได้สารละลายผสมล่วงหน้า
5. วัดค่า pH ของบัฟเฟอร์โดยใช้เครื่องวัดค่า pH หรือแถบวัดค่า pH และปรับค่า pH ตามความจําเป็นด้วยกรดหรือเบสจํานวนเล็กน้อย
6. ใช้เครื่องอัลตราโซนิกชนิดโพรบเพื่อทําให้สารละลายผสมล่วงหน้าเป็นเนื้อเดียวกันเพื่อให้ได้สารละลายที่เป็นเนื้อเดียวกันสูง ดังนั้นให้ส่งเสียงสารละลายเป็นเวลาสองสามวินาทีจนกว่าสารละลายจะถูกผสมอย่างทั่วถึงและก้อนหรือมวลรวมใด ๆ จะถูกทําลายลง ระยะเวลาและพลังของ sonication สามารถปรับให้เหมาะสมตามบัฟเฟอร์การสลายตัวและอัลตราโซนิกที่ใช้เฉพาะ
7. หลังจากอัลตราโซนิกให้วัดค่า pH ของบัฟเฟอร์อีกครั้งและปรับตามความจําเป็น
8. กรองบัฟเฟอร์ผ่านตัวกรองขนาด 0.2 ไมครอนเพื่อกําจัดเศษซากหรือมวลรวมที่อาจเกิดขึ้นระหว่างการแยกเสียง
9. บัฟเฟอร์ lysis พร้อมใช้งานแล้ว

 
หมายเหตุ: องค์ประกอบที่แน่นอนและค่า pH ของบัฟเฟอร์การสลายตัวอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับเซลล์หรือเนื้อเยื่อที่ถูกไลเซดและการใช้งานปลายน้ํา โปรโตคอลข้างต้นเป็นแนวทางทั่วไปและอาจจําเป็นต้องได้รับการปรับให้เหมาะสมสําหรับการใช้งานเฉพาะ
 
homogenizers อัลตราโซนิกมักใช้สําหรับการหยุดชะงักของเซลล์และการสกัดโมเลกุลภายในเซลล์ ดังนั้นการใช้งานการสลายจํานวนมากจึงใช้ sonication ชนิดโพรบไม่เพียง แต่สําหรับการเตรียมบัฟเฟอร์การสลายตัว แต่ยังสําหรับการหยุดชะงักของเซลล์เชิงกลและการสกัด
สิ่งนี้ทําให้ homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกเป็นเครื่องมืออเนกประสงค์สําหรับห้องปฏิบัติการและอธิบายการใช้ ultrasonicators อย่างกว้างขวางในจุลชีววิทยาเทคโนโลยีชีวภาพและวิทยาศาสตร์เพื่อชีวิต

homogenizers ห้องปฏิบัติการล้ำ

Hielscher Ultrasonics ผลิตและจําหน่าย homogenizers อัลตราโซนิกและโพรบ (sonotrodes) ที่ระดับพลังงานต่างๆและปริมาณตัวอย่าง สิ่งนี้ช่วยให้เราสามารถเสนอตัวรบกวนอัลตราโซนิกที่เหมาะสมที่สุดสําหรับการเตรียมตัวอย่างของคุณ เรามุ่งเน้นคุณภาพสูงสุดความสะดวกสบายของผู้ใช้ที่โดดเด่นและผลลัพธ์ sonication ที่เชื่อถือได้ เครื่องอัลตราโซนิกดิจิตอลทั้งหมดมีซอฟต์แวร์อัจฉริยะการเขียนโปรแกรมและการตั้งค่าโปรโตคอล sonication ล่วงหน้ารีโมทคอนโทรลของเบราว์เซอร์การควบคุมอุณหภูมิการส่องสว่างตัวอย่างรวมถึงการบันทึกข้อมูลอัตโนมัติบนการ์ด SD ในตัว

ออกแบบ ผลิต และให้คําปรึกษา – คุณภาพผลิตในประเทศเยอรมนี

เครื่องอัลตราโซนิก Hielscher เป็นที่รู้จักกันดีในด้านคุณภาพและมาตรฐานการออกแบบสูงสุด ความทนทานและใช้งานง่ายช่วยให้การรวมเครื่องอัลตราโซนิกของเราเข้ากับโรงงานอุตสาหกรรมได้อย่างราบรื่น สภาพที่หยาบกร้านและสภาพแวดล้อมที่มีความต้องการได้รับการจัดการอย่างง่ายดายโดยเครื่องอัลตราโซนิก Hielscher

Hielscher Ultrasonics เป็น บริษัท ที่ได้รับการรับรองมาตรฐาน ISO และให้ความสําคัญเป็นพิเศษกับเครื่องอัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูงที่มีเทคโนโลยีล้ําสมัยและใช้งานง่าย แน่นอนเครื่องอัลตราโซนิก Hielscher เป็นไปตามมาตรฐาน CE และตรงตามข้อกําหนดของ UL, CSA และ RoHs

The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators: