สารละลายบัฟเฟอร์ที่เตรียมด้วยอัลตราโซนิก
บัฟเฟอร์ Lysis สามารถเตรียมได้อย่างมีประสิทธิภาพและรวดเร็วโดยใช้โฮโมจีไนเซอร์เนื้อเยื่ออัลตราโซนิก เนื่องจากเครื่องอัลตราโซนิกเป็นเครื่องมือในฝันสําหรับการผสมละลายและกระจายตัวจึงช่วยให้สามารถเตรียมบัฟเฟอร์สลายได้อย่างน่าเชื่อถือและเป็นมิตรกับผู้ใช้
การเตรียมอัลตราโซนิกของบัฟเฟอร์ Lysis
Ultrasonic tissue homogenizers เป็นเครื่องมือทั่วไปสําหรับการหยุดชะงักของเซลล์การสลายและการสกัดดังนั้นจึงมีอยู่ในห้องปฏิบัติการส่วนใหญ่ การประยุกต์ใช้รองสําหรับเครื่องอัลตราโซนิกชนิดโพรบคือการเตรียมบัฟเฟอร์การสลาย
บัฟเฟอร์ Lysis เป็นสารละลายที่ใช้ในการทําลายเซลล์ที่เปิดอยู่ (ไลซิส) และปล่อยเนื้อหาสําหรับการวิเคราะห์ปลายน้ํา องค์ประกอบเฉพาะของบัฟเฟอร์สไลซิสอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับประเภทของเซลล์ที่ไลซิสและการใช้งานปลายน้ํา อย่างไรก็ตาม บัฟเฟอร์การสลายทั่วไปมีส่วนประกอบต่างๆ เช่น ผงซักฟอก เกลือ และสารยับยั้งโปรตีเอส เกลือบัฟเฟอร์ (เช่น Tris-HCl) และเกลือไอออนิก (เช่น NaCl) มักใช้เพื่อควบคุมค่า pH และออสโมลาริตี้ของไลเสท
ในการสร้างบัฟเฟอร์สลาย ส่วนประกอบจะถูกผสมเข้าด้วยกันในความเข้มข้นและค่า pH ที่เหมาะสม ส่วนผสมมักจะกวนหรือเขย่าจนกว่าส่วนประกอบจะละลายและสารละลายเป็นเนื้อเดียวกัน
การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกเป็นวิธีการที่สามารถใช้เพื่อช่วยสร้างบัฟเฟอร์การสลายที่ดีโดยการปรับปรุงการผสมและการละลายของส่วนประกอบ ในวิธีนี้คลื่นอัลตราซาวนด์ – โดยปกติอยู่ในช่วง 20 ถึง 30 kHz – ถูกนําไปใช้กับส่วนผสม ซึ่งสร้างฟองอากาศที่ยุบตัวและสร้างพลังงานในท้องถิ่นที่เข้มข้น ซึ่งนําไปสู่แรงเฉือนเชิงกลและการผสมส่วนประกอบ
กระบวนการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกสามารถช่วยแยกก้อนหรือมวลรวมของส่วนประกอบออกจากกันและให้แน่ใจว่าสารละลายผสมอย่างสม่ําเสมอ ดังนั้นบัฟเฟอร์การสลายที่ได้รับการปรับปรุงดังกล่าวสามารถนําไปสู่การหยุดชะงักของเซลล์ที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นและให้ผลผลิตที่สูงขึ้นของวัสดุที่สกัดออกมา นอกจากนี้การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกสามารถลดเวลาที่ต้องใช้ในการสร้างบัฟเฟอร์การสลายเมื่อเทียบกับวิธีการกวนหรือเขย่าแบบดั้งเดิม
โดยรวมแล้วการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพในการปรับปรุงคุณภาพและประสิทธิภาพของการเตรียมบัฟเฟอร์การสลาย

เครื่องทําโฮโมจีไนเซอร์ในห้องปฏิบัติการอัลตราโซนิก UP200Ht เป็นที่นิยมในห้องปฏิบัติการวิจัยสําหรับการเตรียมตัวอย่าง การสลาย การสกัด การแยกส่วน DNA และการละลาย
โปรโตคอลสําหรับการเตรียมบัฟเฟอร์ Lysis อัลตราโซนิก
นี่คือโปรโตคอลทั่วไปสําหรับการสร้างบัฟเฟอร์การสลายโดยใช้เครื่องอัลตราโซนิกชนิดโพรบ:
วัสดุ:
- ผงซักฟอกที่เลือก (เช่น Triton X-100, SDS, CHAPS)
- เกลือที่เลือก (เช่น NaCl, KCl)
- สารยับยั้งโปรตีเอส (เช่น PMSF, aprotinin, leupeptin)
- เครื่องอัลตราโซนิก
- เครื่องกวน
- น้ําปราศจากไอออน
- เครื่องวัดค่า pH หรือแถบ pH
คําแนะนําทีละขั้นตอน:
- กําหนดองค์ประกอบของบัฟเฟอร์สไลซิสตามเซลล์หรือเนื้อเยื่อที่คุณจะสลาย และการใช้งานปลายน้ําที่คุณจะใช้ไลเสท เตรียมสารละลายสต็อกของผงซักฟอก เกลือ และสารยับยั้งโปรตีเอสที่ความเข้มข้นที่ต้องการ
- เติมสารละลายสต็อกของผงซักฟอก เกลือ และสารยับยั้งโปรตีเอสลงในบีกเกอร์หรือขวด
- เติมน้ําปราศจากไอออนเพื่อเพิ่มปริมาตรให้ได้ปริมาณบัฟเฟอร์ที่ต้องการ
- ผสมส่วนประกอบโดยใช้เครื่องกวนเพื่อให้ได้สารละลายผสมล่วงหน้า
- วัดค่า pH ของบัฟเฟอร์โดยใช้เครื่องวัดค่า pH หรือแถบ pH และปรับค่า pH ตามความจําเป็นด้วยกรดหรือเบสปริมาณเล็กน้อย
- ใช้เครื่องอัลตราโซนิกชนิดโพรบเพื่อทําให้สารละลายผสมล่วงหน้าเป็นเนื้อเดียวกันเพื่อให้ได้สารละลายที่เป็นเนื้อเดียวกันสูง ดังนั้นให้ sonicate สารละลายสักครู่จนกว่าสารละลายจะผสมให้เข้ากันและก้อนหรือมวลรวมใด ๆ จะถูกสลายตัว ระยะเวลาและพลังของ sonication สามารถปรับให้เหมาะสมได้ตามบัฟเฟอร์การสลายเฉพาะและเครื่องอัลตราโซนิกที่ใช้
- หลังจากอัลตราโซนิกให้วัดค่า pH ของบัฟเฟอร์อีกครั้งและปรับตามความจําเป็น
- กรองบัฟเฟอร์ผ่านตัวกรอง 0.2 ไมครอนเพื่อขจัดเศษขยะหรือมวลรวมที่อาจก่อตัวขึ้นระหว่างการ sonication
- บัฟเฟอร์ lysis พร้อมใช้งานแล้ว
หมายเหตุ: องค์ประกอบที่แน่นอนและค่า pH ของบัฟเฟอร์สไลซิสอาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับเซลล์หรือเนื้อเยื่อที่ไลซิสและการใช้งานปลายน้ํา โปรโตคอลข้างต้นเป็นแนวทางทั่วไปและอาจต้องปรับให้เหมาะสมสําหรับการใช้งานเฉพาะ
Homogenizers อัลตราโซนิกมักใช้สําหรับการหยุดชะงักของเซลล์และการสกัดโมเลกุลภายในเซลล์ ดังนั้นแอพพลิเคชั่นการสลายจํานวนมากจึงใช้ sonication ชนิดโพรบไม่เพียง แต่สําหรับการเตรียมบัฟเฟอร์การสลายเท่านั้น แต่ยังรวมถึงการหยุดชะงักของเซลล์เชิงกลและการสกัดด้วย
สิ่งนี้ทําให้ homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกเป็นเครื่องมืออเนกประสงค์สําหรับห้องปฏิบัติการและอธิบายถึงการใช้เครื่องอัลตราโซนิกอย่างกว้างขวางในจุลชีววิทยาเทคโนโลยีชีวภาพและวิทยาศาสตร์เพื่อชีวิต
อัลตราโซนิกห้องปฏิบัติการ Homogenizers
Hielscher Ultrasonics ผลิตและจัดหาโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกและโพรบ (sonotrodes) ที่ระดับพลังงานและปริมาณตัวอย่างต่างๆ สิ่งนี้ช่วยให้เราสามารถนําเสนอตัวก่อกวนอัลตราโซนิกที่เหมาะสมที่สุดสําหรับการเตรียมตัวอย่างของคุณ เรามุ่งเน้นไปที่คุณภาพสูงสุดความสะดวกสบายของผู้ใช้ที่โดดเด่นและผลลัพธ์การ sonication ที่เชื่อถือได้ เครื่องอัลตราโซนิกดิจิตอลทั้งหมดมีซอฟต์แวร์อัจฉริยะการเขียนโปรแกรมและการตั้งค่าล่วงหน้าของโปรโตคอล sonication รีโมทคอนโทรลของเบราว์เซอร์การควบคุมอุณหภูมิการส่องสว่างตัวอย่างตลอดจนการบันทึกข้อมูลอัตโนมัติบนการ์ด SD ในตัว
การออกแบบ การผลิต และการให้คําปรึกษา – คุณภาพ ผลิตในประเทศเยอรมนี
เครื่องอัลตราโซนิก Hielscher เป็นที่รู้จักกันดีในด้านคุณภาพและมาตรฐานการออกแบบสูงสุด ความทนทานและใช้งานง่ายช่วยให้สามารถรวมเครื่องอัลตราโซนิกของเราเข้ากับโรงงานอุตสาหกรรมได้อย่างราบรื่น สภาพที่ขรุขระและสภาพแวดล้อมที่ต้องการสามารถจัดการได้ง่ายโดยเครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher
Hielscher Ultrasonics เป็น บริษัท ที่ได้รับการรับรองมาตรฐาน ISO และให้ความสําคัญเป็นพิเศษกับเครื่องอัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูงที่มีเทคโนโลยีล้ําสมัยและเป็นมิตรกับผู้ใช้ แน่นอนว่าเครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher เป็นไปตามมาตรฐาน CE และตรงตามข้อกําหนดของ UL, CSA และ RoHs
ตารางด้านล่างให้ภาพรวมของเครื่องอัลตราโซนิกในห้องปฏิบัติการต่างๆของเรา:
VialTweeter ที่ UP200St | 200 วัตต์ | 26 กิโลเฮิร์ตซ์ | อัลตราโซนิกของขวดขนาดเล็กเช่น Eppendorf 1.5mL |
UP50H | 50 วัตต์ | 30 กิโลเฮิร์ตซ์ | โฮโมจีไนเซอร์ในห้องปฏิบัติการแบบใช้มือถือหรือแบบตั้งพื้น |
UP100H | 100 วัตต์ | 30 กิโลเฮิร์ตซ์ | โฮโมจีไนเซอร์ในห้องปฏิบัติการแบบใช้มือถือหรือแบบตั้งพื้น |
UP200 ฮิต | 200 วัตต์ | 26 กิโลเฮิร์ตซ์ | โฮโมจีไนเซอร์ในห้องปฏิบัติการแบบใช้มือถือหรือแบบตั้งพื้น |
UP200 เซนต์ | 200 วัตต์ | 26 กิโลเฮิร์ตซ์ | Homogenizer ห้องปฏิบัติการแบบตั้งพื้น |
UP400ST | 400 วัตต์ | 24 กิโลเฮิร์ตซ์ | Homogenizer ห้องปฏิบัติการแบบตั้งพื้น |
โซโนสเต็ป | 200 วัตต์ | 26 กิโลเฮิร์ตซ์ | เครื่องปฏิกรณ์ห้องปฏิบัติการรวมกัน, อัลตราโซนิก, ปั๊ม, เครื่องกวนและภาชนะ |
จีดีมินิ 2 | 200 วัตต์ | 26 กิโลเฮิร์ตซ์ | โฟลว์เซลล์ที่ปราศจากการปนเปื้อน |
คัพฮอร์น | 200 วัตต์ | 26 กิโลเฮิร์ตซ์ | อ่างอัลตราโซนิกเข้มข้นสําหรับขวดและบีกเกอร์ |
UIP400MTP | 400 วัตต์ | 24 กิโลเฮิร์ตซ์ | ระบบอัลตราโซนิกสําหรับแผ่นมัลติเวล? แผ่นไมโครไทเตอร์ |

อัลตราโซนิก CupHorn สําหรับการ sonication ที่เข้มข้นของหลอดปิดและขวดสําหรับการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของตัวอย่างที่ปราศจากเชื้อ
ติดต่อเรา!? ถามเรา!

อัลตราโซนิกห้องปฏิบัติการโฮโมจีไนเซอร์ UP400St มักใช้สําหรับการเตรียมบัฟเฟอร์สลายและการหยุดชะงักของเซลล์ในภายหลัง
วรรณกรรม? อ้างอิง
- Fernandes, Luz; Santos, Hugo; Nunes-Miranda, J.; Lodeiro, Carlos; Capelo, Jose (2011): Ultrasonic Enhanced Applications in Proteomics Workflows: single probe versus multiprobe. Journal of Integrated OMICS 1, 2011.
- Priego-Capote, Feliciano; Castro, María (2004): Analytical uses of ultrasound – I. Sample preparation. TrAC Trends in Analytical Chemistry 23, 2004. 644-653.
- Welna, Maja; Szymczycha-Madeja, Anna; Pohl, Pawel (2011): Quality of the Trace Element Analysis: Sample Preparation Steps. In: Wide Spectra of Quality Control; InTechOpen 2011.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.

Hielscher Ultrasonics ผลิตโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูงจาก ห้องทดลอง ถึง ขนาดอุตสาหกรรม