สารละลายบัฟเฟอร์ที่เตรียมด้วยการใช้คลื่นอัลตราโซนิก

สามารถเตรียมบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์ได้อย่างมีประสิทธิภาพและรวดเร็วโดยใช้เครื่องโฮโมจีไนเซอร์เนื้อเยื่อแบบอัลตราโซนิก เนื่องจากเครื่องอัลตราโซนิกเป็นเครื่องมือในฝันสำหรับการผสม การละลาย และการกระจายตัว จึงช่วยให้การเตรียมบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์มีความน่าเชื่อถือและใช้งานได้สะดวก

การเตรียมบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์ด้วยคลื่นอัลตราโซนิก

เครื่องโฮโมจีไนเซอร์เนื้อเยื่อแบบอัลตราโซนิกเป็นเครื่องมือที่ใช้กันทั่วไปในการทำให้เซลล์แตก การสลายเซลล์ และการสกัด จึงมีอยู่ในห้องปฏิบัติการส่วนใหญ่ การประยุกต์ใช้อีกอย่างหนึ่งของเครื่องอัลตราโซนิกแบบโพรบคือการเตรียมบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์

บัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์เป็นสารละลายที่ใช้ทำให้เซลล์แตกเปิดออก (สลายเซลล์) และปลดปล่อยองค์ประกอบภายในเซลล์เพื่อการวิเคราะห์ในขั้นตอนต่อไป องค์ประกอบเฉพาะของบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์อาจแตกต่างกันไปตามชนิดของเซลล์ที่ต้องการสลายและการประยุกต์ใช้ในขั้นตอนต่อไป อย่างไรก็ตาม บัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์โดยทั่วไปมีองค์ประกอบ เช่น สารซักฟอก เกลือ และสารยับยั้งโปรตีเอส เกลือบัฟเฟอร์ (เช่น Tris-HCl) และเกลือไอออนิก (เช่น NaCl) มักใช้เพื่อควบคุมค่า pH และออสโมลาริตีของสารละลายที่ได้จากการสลายเซลล์
ในการเตรียมบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์ จะผสมองค์ประกอบต่าง ๆ เข้าด้วยกันที่ความเข้มข้นและค่า pH ที่เหมาะสม โดยปกติจะกวนหรือเขย่าส่วนผสมจนองค์ประกอบต่าง ๆ ละลายและสารละลายเป็นเนื้อเดียวกัน
การทำให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยคลื่นอัลตราโซนิกเป็นวิธีที่สามารถใช้ช่วยเตรียมบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์ที่ดี โดยปรับปรุงการผสมและการละลายขององค์ประกอบต่าง ๆ ในวิธีนี้ จะส่งคลื่นอัลตราโซนิก – โดยปกติอยู่ในช่วง 20 ถึง 30 kHz – เข้าไปในส่วนผสม ทำให้เกิดฟองคาวิเทชันที่ยุบตัวและก่อให้เกิดพลังงานเฉพาะจุดที่เข้มข้น ส่งผลให้เกิดแรงเฉือนเชิงกลและการผสมองค์ประกอบต่าง ๆ
กระบวนการทำให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยคลื่นอัลตราโซนิกสามารถช่วยสลายก้อนหรือกลุ่มก้อนขององค์ประกอบต่าง ๆ และทำให้มั่นใจว่าสารละลายได้รับการผสมอย่างสม่ำเสมอ ดังนั้น บัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์ที่ได้รับการปรับปรุงเช่นนี้จึงสามารถทำให้การทำให้เซลล์แตกมีประสิทธิภาพมากขึ้นและให้ผลได้ของสารที่สกัดสูงขึ้น นอกจากนี้ การทำให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยคลื่นอัลตราโซนิกสามารถลดเวลาที่ใช้ในการเตรียมบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์เมื่อเทียบกับวิธีกวนหรือเขย่าแบบดั้งเดิม
โดยรวมแล้ว การทำให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยคลื่นอัลตราโซนิกเป็นเครื่องมือที่ทรงประสิทธิภาพในการปรับปรุงคุณภาพและประสิทธิภาพของการเตรียมบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์

ขั้นตอนปฏิบัติสำหรับการเตรียมบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์ด้วยคลื่นอัลตราโซนิก

นี่คือขั้นตอนปฏิบัติทั่วไปสำหรับการเตรียมบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์โดยใช้เครื่องอัลตราโซนิกแบบโพรบ:
 
วัสดุและอุปกรณ์:

• สารซักฟอกชนิดที่เลือกใช้ (เช่น Triton X-100, SDS, CHAPS)
• เกลือชนิดที่เลือกใช้ (เช่น NaCl, KCl)
• สารยับยั้งโปรตีเอส (เช่น PMSF, aprotinin, leupeptin)
• เครื่องอัลตราโซนิก
• เครื่องกวน
• น้ำปราศจากไอออน
• เครื่องวัด pH หรือแถบทดสอบ pH

 
 
คำแนะนำทีละขั้นตอน:

1. กำหนดองค์ประกอบของบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์โดยพิจารณาจากเซลล์หรือเนื้อเยื่อที่จะสลาย และการประยุกต์ใช้สารละลายที่ได้จากการสลายเซลล์ในขั้นตอนต่อไป เตรียมสารละลายสต็อกของสารซักฟอก เกลือ และสารยับยั้งโปรตีเอสที่ความเข้มข้นตามต้องการ
2. เติมสารละลายสต็อกของสารซักฟอก เกลือ และสารยับยั้งโปรตีเอสลงในบีกเกอร์หรือขวดรูปชมพู่
3. เติมน้ำปราศจากไอออนเพื่อปรับปริมาตรให้ได้บัฟเฟอร์ตามปริมาณที่ต้องการ
4. ผสมองค์ประกอบต่าง ๆ โดยใช้เครื่องกวนเพื่อให้ได้สารละลายที่ผสมเบื้องต้น
5. วัดค่า pH ของบัฟเฟอร์โดยใช้เครื่องวัด pH หรือแถบทดสอบ pH และปรับค่า pH ตามความจำเป็นด้วยกรดหรือเบสในปริมาณเล็กน้อย
6. ใช้เครื่องอัลตราโซนิกแบบโพรบทำให้สารละลายที่ผสมเบื้องต้นเป็นเนื้อเดียวกัน เพื่อให้ได้สารละลายที่มีความเป็นเนื้อเดียวกันสูง โดยให้สารละลายได้รับคลื่นอัลตราโซนิกเป็นเวลาสองสามวินาทีจนสารละลายผสมเข้ากันอย่างทั่วถึง และก้อนหรือกลุ่มก้อนต่าง ๆ สลายตัว สามารถปรับระยะเวลาและกำลังของการใช้คลื่นอัลตราโซนิกให้เหมาะสมที่สุดตามบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์และเครื่องอัลตราโซนิกที่ใช้
7. หลังจากใช้คลื่นอัลตราโซนิก ให้วัดค่า pH ของบัฟเฟอร์อีกครั้งและปรับตามความจำเป็น
8. กรองบัฟเฟอร์ผ่านตัวกรองขนาด 0.2 ไมครอนเพื่อกำจัดเศษวัสดุหรือกลุ่มก้อนที่อาจเกิดขึ้นระหว่างการใช้คลื่นอัลตราโซนิก
9. ขณะนี้บัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์พร้อมใช้งานแล้ว

 
หมายเหตุ: องค์ประกอบและค่า pH ที่แน่นอนของบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์อาจแตกต่างกันไปตามเซลล์หรือเนื้อเยื่อที่ต้องการสลายและการประยุกต์ใช้ในขั้นตอนต่อไป ขั้นตอนปฏิบัติข้างต้นเป็นแนวทางทั่วไป และอาจจำเป็นต้องปรับให้เหมาะสมที่สุดสำหรับการประยุกต์ใช้เฉพาะด้าน
 
เครื่องโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกมักใช้ในการทำให้เซลล์แตกและการสกัดโมเลกุลภายในเซลล์ ดังนั้น การประยุกต์ใช้เพื่อสลายเซลล์จำนวนมากจึงใช้คลื่นอัลตราโซนิกแบบโพรบทั้งในการเตรียมบัฟเฟอร์สำหรับสลายเซลล์ และในการทำให้เซลล์แตกเชิงกลและการสกัด
ด้วยเหตุนี้ เครื่องโฮโมจีไนเซอร์เนื้อเยื่อแบบอัลตราโซนิกจึงเป็นเครื่องมืออเนกประสงค์สำหรับห้องปฏิบัติการ และเป็นเหตุผลที่เครื่องอัลตราโซนิกถูกใช้อย่างแพร่หลายในจุลชีววิทยา เทคโนโลยีชีวภาพ และวิทยาศาสตร์ชีวภาพ

เครื่องโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกสำหรับห้องปฏิบัติการ

Hielscher Ultrasonics ผลิตและจัดจำหน่ายเครื่องโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกและโพรบ (โซโนโทรด) สำหรับกำลังพิกัดและปริมาตรตัวอย่างที่หลากหลาย ซึ่งทำให้เราสามารถนำเสนอเครื่องทำให้เซลล์แตกด้วยคลื่นอัลตราโซนิกที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการเตรียมตัวอย่างของคุณ เรามุ่งเน้นคุณภาพสูงสุด ความสะดวกในการใช้งานที่โดดเด่น และผลลัพธ์จากการใช้คลื่นอัลตราโซนิกที่เชื่อถือได้ เครื่องอัลตราโซนิกดิจิทัลทุกรุ่นมีซอฟต์แวร์อัจฉริยะ การตั้งโปรแกรมและการกำหนดขั้นตอนปฏิบัติสำหรับการใช้คลื่นอัลตราโซนิกล่วงหน้า การควบคุมระยะไกลผ่านเบราว์เซอร์ การควบคุมอุณหภูมิ ไฟส่องตัวอย่าง ตลอดจนการบันทึกข้อมูลอัตโนมัติลงในการ์ด SD ที่ติดตั้งในตัวเครื่อง

การออกแบบ การผลิต และการให้คำปรึกษา – คุณภาพที่ผลิตในเยอรมนี

เครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher เป็นที่รู้จักในด้านมาตรฐานคุณภาพและการออกแบบที่สูงที่สุด ความทนทานและการใช้งานที่ง่ายช่วยให้สามารถนำเครื่องอัลตราโซนิกของเราเข้าใช้งานในโรงงานอุตสาหกรรมได้อย่างราบรื่น เครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher รับมือกับสภาวะที่รุนแรงและสภาพแวดล้อมที่มีข้อเรียกร้องสูงได้อย่างง่ายดาย

Hielscher Ultrasonics เป็นบริษัทที่ได้รับการรับรอง ISO และให้ความสำคัญเป็นพิเศษกับเครื่องอัลตราโซนิกสมรรถนะสูงที่มีเทคโนโลยีล้ำสมัยและใช้งานง่าย แน่นอนว่าเครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher เป็นไปตามมาตรฐาน CE และตรงตามข้อกำหนดของ UL, CSA และ RoHs

ตารางด้านล่างแสดงภาพรวมของเครื่องอัลตราโซนิกสำหรับห้องปฏิบัติการรุ่นต่าง ๆ ของเรา: