Ultrazvučne aplikacije u virusu majmunskih boginja

Ultrazvuka je važan metod obrade za izolaciju virusa majmunskih boginja (MPXV) od analitičkih uzoraka, za fragmentaciju DNK virusa kao i u proizvodnji vakcine protiv majmunskih boginja. Za pripremu uzorka pre dijagnostike i analize (PCR, ELISA itd.) ultrazvuka se koristi za liziju ćelija u cilju oslobađanja virusa majmunskih boginja iz unutrašnjosti ćelije i / ili do fragmenta DNK. U proizvodnji vakcina, primena se kreće od čestica virusa / DNK preparata, enkapsulacije kod nosača lekova i formulisanja vakcinacije.
U nastavku možete pronaći detaljne informacije o ultrazvučnom preparatu za uzorke virusa majmunskih boginja kao i o ultrasonično potpomognute proizvodnji MPXV vakcine.

 

Šta ćete pronaći na ovoj stranici:

Захтев за информације




Obratite pažnju na naše Правила о приватности.


Ultrazvučnici visokih performansi su kritično sredstvo za obradu u proizvodnji mnogih vakcina.

Ovaj sistem 2x 1kW ultrazvučnika za rad neprekidnog protoka instaliran je u postrojenju za proizvodnju vakcina.

Ultrazvučna liza i fragmentacija DNK pre lančane reakcije Polimeraze (PCR)

Infekcija virusa majmunskih boginja je otkrivena testiranjem pojačavanja nukleinska kiselina (NAAT), koristeći u realnom vremenu ili konvencionalnu lančanu reakciju polimeraze (PCR), radi otkrivanja jedinstvenih sekvenci virusne DNK. Uzorak (npr. iz nasopharyngeal swap ili biopsije kože) sadrži virus u ćelijama.
Za analizu, virus mora biti oslobođen iz ćelija ans virusna DNK mora biti fragmentirana za PCR.

Ultrazvučni Lysis:

Ultrazvučni UP200Ht sa mikrotipom S26d2 za ultrazvučnu lizu bioloških uzorakaUltrazvučni poremećaj ćelija / liza je pouzdan i efikasan metod izolacije virusa od uzoraka ćelija i samim time poželjna tehnika u odnosu na hemijske agense, kao što su lizozim, proteinase K i različiti deterdženti koji se alternativno koriste za postizanje ćelijske lize i oslobađanje DNK.
Međutim, upotreba takvih hemijskih reagensa zahteva vremenski zahtevnu pripremu uzorka u nekoliko koraka pre PCR analize kako bi se sprečila inhibicija PCR reakcije. S obzirom da PCR inhibitori utiču na efikasnost pojačavanja, male varijacije količine inhibitora koji nisu uklonjeni mogu dovesti do velikih varijacija u pojačavanju PCR proizvoda (Diaco, 1995).
Prednost ultrazvučnosti za lizu je u tome što je potpuno ometanje ćelijskih struktura i oslobađanje DNK bez potrebe za lisnatim reagensima i dugotrajnim pripremom uzoraka poželjno. (cf. Fykse et al., 2003)

Fragmentacija ultrazvučne DNK:

Ultrazvučna DNK fragmentacija je jednostavna i pouzdana kao što proizvodi DNK fragmente tunable u dužini (basepairs, bp). Pomoću ultrazvuka, DNK se može efikasno fragmentirati na ciljanu DNK dužinu. Precizna kontrola ultrazvučnih parametara i sofisticiranih opcija hlađenja sprečavaju degradaciju DNK.
Pročitaj više o Fragmentacija ultrazvučne DNK!

 

Na snimku se vidi ultrazvučni sistem za pripremu uzoraka UIP400MTP, koji omogućava pouzdanu probnu pripremu svih standardnih ploča sa više bunara pomoću ultrazvuka visokog intenziteta. Tipične primene UIP400MTP uključuju ćelijsku lizu, DNK, RNK i šering hromatina, kao i vađenje proteina.

Ultrazvučni UIP400MTP za višestruku sonikuaciju ploča

Захтев за информације




Obratite pažnju na naše Правила о приватности.


Ultrazvučne primene u vakcini protiv virusa majmunskih boginja

Ultrazvuka se koristi za proizvodnju vakcina kao što su vakcine protiv majmunskih boginja. Vakcine koje se koriste protiv virusa majmunskih boginja trenutno su žive vakcine protiv virusa. Novorazvijene vakcine mogle bi da koriste druge platforme kao što je DNK The currently contains a modified Vaccinia Ankara viurs, an attenuated, non-replicating orthopoxvirus. Sadrži i Tris (tris-aminometan) i natrijum hlorid. Vakcina takođe može da sadrži male količine DNK i proteina iz ćelija Pilećeg embriona Fibroblast, koje se koriste za uzgajanje virusa vakcine, benzonaze i antibiotičkih jedinjenja kao što su gentamicin i ciprofloksacin.

Ultrazvučna homogenizacija se koristi u proizvodnji živih vakcina protiv virusa, DNK vakcina, višestruko valentnih DNK koktela, MRNA vakcina, rekombinantnih proteinskih vakcina, vakcina sličnih virusima, itd.

Primena ultrazvuka u proizvodnji vakcina kreće se od

  • raspršivanje čestica virusa i agenasa
  • емулзификација
  • neaktivnost virusa
  • formulacija nosača lekova (NLC, SLN)
  • Encapsulation
  • rastvaranje agenata
  • priprema ađuvanta
  • Degassing / De-Aeration

 

Detaljnije informacije o ultrazvučnim aplikacijama možete pronaći za poboljšanu proizvodnju vakcine!

Protokol za ultrazvučnu izolaciju virusa majmunskih boginja

Istraživački tim Stitelara (2005) koristio je ultrazvučnu lizu za oslobađanje virusa majmunskih boginja iz kulture ćelija domaćina rasta, kao i iz ćelija dobijenih preko zamene grla od zaraženih primata.

Priprema vakcine protiv majmunskih boginja:

Virusi majmunskih boginja uzgajani su na specifičnim ćelijama pilećeg embriona bez patogena. Posle inkubacije u trajanju od 1 do 2 dana, obustava virusnih ćelija je požnjevena jednom turom otapanja zamrzavanja, a zatim koncentrisana centrifugacijom. Kuglica je ponovo zamenjena i podvrgnuta nekoliko rundi ultrazvučne homogenizacije.

Izolacija od virusa majmuna od vakcinisanih makakija:

Uzorci su tri puta otopljeni i u ultrazvučnim CupHorn-om. Dve razvodnjenosti (1:10 i 1:100) u transportnom medijumu dopunjene sa 1% fetalnog bovinog seruma korišćene su za vakcinaciju monolajera ćelija Vero u šest bunarskih ploča. Nakon 1 h inkubacije na 37°C, inokula je uklonjena i zamenjena kulturom srednje dopunjenom sa 1% fetalnog bovin seruma. Monolajeri su bili kulturni 5 dana na 37°C i umrljani rastvorom kristalne ljubičice.
(cf. Stittelaar et al., 2005)

U ovom videu vam prikazujemo ultrazvučni sistem od 2 kilovata za umetnuti rad u čistom kabinetu. Hielscher snabdeva ultrazvučnu opremu gotovo svim industrijama, kao što su hemijska industrija, farmaceutska industrija, kozmetika, petrohemijski procesi, kao i za procese ekstrakcije zasnovane na rastvaračima. Ovaj čist kabinet od nerđajućeg čelika dizajniran je za rad u opasnim oblastima. U tu svrhu, zapečaćeni ormarić može da očisti mušterija azotom ili svežim vazduhom kako bi se sprečio ulazak zapaljivih gasova ili isparenja u kabinet.

2x 1000 Watts Ultrasonicators in Purgeable Cabinet for Installation in Hazardous Areas

Ultrazvučnici za analizu virusa i proizvodnju vakcina

Portfolio širokih proizvoda Hielscher Ultrasonics nudi idealan ultrazvučnik za istraživačke i analitičke laboratorije, kao i za industrijsku proizvodnju vakcina.
Hielscher Ultrasonics je specijalizovan za dizajn, proizvodnju i distribuciju ultrazvučnika visokih performansi i sono-bioreaktora za upotrebu u istraživačkim i analitičkim laboratorijama, kao i za implementaciju u proizvodnji industrijskih vakcina (npr. Vakcine, Apis).
Preciznu kontrolu nad ultrasonovim parametrima za obradu Hielscher Ultrasonics' inteligentan softverSonication se može primeniti na otvorena plovila, zatvorene neprekidno uzburkane reaktore i neprekidne protočne reaktore. Svi delovi ultrazvučnih sistema, koji su u kontaktu sa tečnim medijumom, napravljeni su od nerđajućeg čelika, titanijuma ili stakla. Autoklavabilni delovi i sanitarna oprema obezbeđuju proizvodnju pod uslovi za farmaceutske razrede.
Automatsko snimanje podataka: Inteligentni softver snima parametre procesa sonacija automatski na integrisanoj SD memorijskoj kartici. Precizna kontrola svih parametara procesa osigurava da se Ponovno produktivnost, standardizacija proizvodnjei olakšava ispunjavanje standarda bezbednosti farmaceutskih proizvoda.
Хиелсцхер Ултрасонична терапија’ ultrazvučni procesori su veoma pouzdani i mogu se precizno kontrolisati. Svi industrijski ultrazvučnici mogu da se prilagode da isporuče ceo opseg od nižih do veoma visokih amplitude. Robustnost Hielscherovih ultrazvučnih sistema omogućava non-stop rad pod velikim dužnostima i u zahtevnim okruženjima.

Табела испод показује приближни капацитет обраде наших ултразвучних уређаја:

батцх tom Проток Препоручени уређаји
višestruko dobro / mikrotiter ploče N/a UIP400MTP
1 до 500 мл 10 до 200мЛ / мин УП100Х
10 до 2000мЛ 20 до 400мЛ / мин УП200Хт, УП400Ст
0.1 до 20Л 0.2 до 4Л / мин УИП2000хдТ
10 до 100Л 2 до 10Л / мин UIP4000hdT
N/a 10 до 100Л / мин УИП16000
N/a веће кластер УИП16000

Контактирајте нас! / Питајте нас!

Traži više informacija

Koristite donji obrazac da biste zatražili dodatne informacije o Ultrason, procesorima, aplikacijama i ceni. Biće nam drago da razgovaramo o vašem procesu sa vama i da vam ponudimo ultrasonični sistem koji ispunjava vaše zahteve!









Molimo vas da zabeležite naše Правила о приватности.


Ultrazvučni homogenizatori su pouzdani za DNK šišanje

Ултразвучни ДНА Схеаринг
Adaptirano iz Jkwchui pod CC-BY-SA.03



Literatura/reference

  • Stittelaar, Koert; Amerongen, Geert; Kondova, Ivanela; Kuiken, Thijs; Lavieren, Rob; Pistoor, Frank; Niesters, Hubert; Doornum, Gerard; Van der Zeijst, Bernard; Mateo, Luis; Chaplin, Paul; Osterhaus, Albert (2005): Modified Vaccinia Virus Ankara Protects Macaques against Respiratory Challenge with Monkeypox Virus. Journal of Virology 79, 2005. 7845-51.
  • Shah Purvin, Parameswara Rao Vuddanda, Sanjay Kumar Singh, Achint Jain, and Sanjay Singh (2014): Pharmacokinetic and Tissue Distribution Study of Solid Lipid Nanoparticles of Zidovudine in Rats. Journal of Nanotechnology, Volume 2014.
  • J. Robin Harris, Andrei Soliakova, Richard J. Lewis, Frank Depoix, Allan Watkinson, Jeremy H. Lakeya (2012): Alhydrogel® adjuvant, ultrasonic dispersion and protein binding: a TEM and analytical study. Micron Volume 43, Issues 2–3, February 2012, 192-200.
  • Doron Melamed, Gabriel Leitner, E. Dan Heller (1991): A Vaccine against Avian Colibacillosis Based on Ultrasonic Inactivation of Escherichia coli. Avian Diseases Vol. 35, No. 1 (Jan. – Mar., 1991), 17-22.
  • Huang C-F, Wu T-C, Wu C-C, Lee C-C, Lo W-T, Hwang K-S, Hsu M-L, Peng H-J. (2011): Sublingual vaccination with sonicated Salmonella proteins and mucosal adjuvant induces mucosal and systemic immunity and protects mice from lethal enteritis. APMIS 119, 2011. 468–78.

Чињенице вреди знати

Virus majmunskih boginja

Majmunske boginje (MPV, MPXV ili hMPXV) su vrsta dvostruko nasukanog DNK virusa, koji izaziva virusnu zoonotičku bolest. Ova bolest je poznata kao infekcija majmunskih boginja i može se javiti kod ljudi i životinja. Pripada rodu Ortopoksvirus u porodici Poxviridae. Virus majmunskih boginja je jedan od virusa ljudske ortopoksvirusa zajedno sa variolom (VARV), kravljim boginjama (CPX) i vakcinijom (VACV). Ortopoksviruse karakterišu velike čestice virusa u obliku cigle, koje sadrže dvostruko nasukani DNK genom od približno 200.000 bp.

ELISA Assay

ELISA se zalaže za ImunoSorbent Assay povezan sa Enzyme-Linked i označena je kao imunoassay koja se smatra zlatnim standardom imunoassays. ELISA je imunološki test, čija se vrednost vrednuje zbog visoke dijagnostičke osetljivosti, koristi se za otkrivanje i kvantifikaciju molekula, uključujući antitela, antigene, proteine, glikoproteine i hormone. Princip ELISA se zasniva na antigeno-antitelo interakciji. Ovom interakcijom antigena i antitela, specifična antitela se vezuju za ciljani antigen. Samo kada dođe do interakcije, supstrat može da se veže za enzim i može se poštovati naknadna konverzija supstrata, što znači da se dobija pozitivan rezultat.


Ultrazvuk visokih performansi! Hielscher-jev proizvodni asortiman pokriva pun spektar od kompaktnog laboratorijskog ultrazvuka preko klupa-vrhunskih jedinica do full-industrijskih ultrazvučnih sistema.

Hielscher Ultrasonics proizvodi ultrazvučne homogenizatore visokih performansi od Лаб до industrijske veličine.