Liposomas, izmantojot apgrieztās fāzes iztvaikošanas metodi, izmantojot ultraskaņu
Liposomas ir daudzpusīgi nanokarjeri, ko izmanto zāļu piegādē, pateicoties to bioloģiskajai saderībai un spējai iekapsulēt gan hidrofilās, gan hidrofobās zāles. Apgrieztās fāzes iztvaikošanas metode (pazīstama arī kā emulgācijas metode vai šķīdinātāja iztvaikošanas metode) ir ievērojama liposomu sagatavošanas metode, kas piedāvā augstu iekapsulēšanas efektivitāti. Šajā rakstā galvenā uzmanība pievērsta liposomu sagatavošanai, izmantojot apgrieztās fāzes iztvaikošanas metodi, ko pastiprina zondes tipa ultraskaņas apstrāde, uzsverot procedūras soļus, ieguvumus un iespējamos pielietojumus zāļu piegādes sistēmās.
Liposomas ir vezikulāras struktūras, kas sastāv no viena vai vairākiem lipīdu divslāņiem, kas spēj iekapsulēt hidrofilos un hidrofobos savienojumus. To unikālā struktūra padara tos ideāli piemērotus mērķtiecīgai narkotiku piegādei. Apgrieztās fāzes iztvaicēšanas metode (pazīstama arī kā emulgācija vai šķīdinātāja iztvaikošanas metode) ir vispāratzīts liposomu sagatavošanas paņēmiens. Turpmākajos punktos mēs iepazīstinām jūs ar apgrieztās fāzes iztvaikošanas metodes priekšrocībām, izmantojot zondes tipa ultraskaņu, kas, kā zināms, uzlabo emulgāciju, iekapsulēšanas efektivitāti un liposomu izmēra samazināšanu.
Zondes tipa sonikators UP400St liposomu sagatavošanai
Liposomu sagatavošanas metodika, izmantojot apgrieztās fāzes iztvaikošanas metodi
Liposomu veidošanās, izmantojot apgrieztās iztvaikošanas metodi, izmantojot ultraskaņu, ietver lipīdu izšķīdināšanu hloroforma un metanola organiskā šķīdinātāja maisījumā (2:1 v / v), kas veicina apgrieztu micellu veidošanos. Pēc tam šim maisījumam pievieno ūdens buferšķīdumu. Kombinētais risinājums tiek apstrādāts ar ultraskaņu, piemēram, izmantojot zondes tipa sonikatoru, piemēram, UP400ST, lai izveidotu ūdens eļļas mikroemulsiju. Pēc tam organisko šķīdinātāju iztvaicē, izmantojot rotācijas ietvaicētāju, kā rezultātā rodas viskozs gēls, kas galu galā sabrūk, veidojot liposomas. Mikroemulsijas burbuļu lielais ūdens kodols veicina hidrofilo molekulu iekļūšanu, kā rezultātā rodas liposomālie gēli, kuriem piemīt kontrolēta izdalīšanās un labs caurlaidības profils. Visbeidzot, liposomas tiek samazinātas līdz vienādam izmēram, izmantojot sonikatoru.
Protokols / soli pa solim sniegtas instrukcijas:
- Nosver un izšķīdina lipīdus:
Precīzi nosver 40 mg L-α-fosfatidilholīna un holesterīna masas attiecībā 4:1 vai 7:3.
Nosvērtos lipīdus izšķīdina 10 ml hloroforma/metanola maisījuma (4:1 V/V) apaļkolbā. - Veidojiet lipīdu plēvi:
Apaļkolbu pievieno rotācijas ietvaicētājam.
Kolbu vakuuma apstākļos pagriež 8 x g 40 °C temperatūrā, līdz uz kolbas sienām veidojas plāna lipīdu plēvīte. - Noņemiet šķīdinātāja izgarojumus:
Atlikušos šķīdinātāja maisījuma dūmus izvada, skalojot kolbu ar slāpekļa gāzi. - Atkārtoti izšķīdiniet lipīdu plēvi:
Lipīdu plēvi no jauna izšķīdina 10 ml dietilētera, veidojot apgrieztās fāzes pūslīšus. - Sagatavojiet ūdens fāzi:
Sajauc 5 ml PBS buferšķīduma (0,1 M, pH 7,4), kas satur aktīvo vielu iekapsulēšanai, un 20 mg Tween 80 ar organisko fāzi (dietilēteri ar izšķīdinātiem lipīdiem). - Sonicate emulsija:
Ievietojiet emulsiju ledus vannā.
Ultraskaņas emulsiju, izmantojot zondes tipa sonikatoru UP200Ht pie 26 kHz un 50% impulsa režīma (0,5 cikli = 30 sek ON / 30 sek OFF) un 50% amplitūdu 1 minūti. - Iztvaicē, veidojot želeju:
Atgrieziet ultraskaņas emulsiju rotācijas ietvaicētājā.
Iztvaicē atmosfēras spiedienā 40 °C temperatūrā, līdz iegūst gelu. - Formas liposomas:
Tālāk iztvaicējiet želeju, sadalot to puscaurspīdīgā šķidrumā, norādot uz liposomu veidošanos. - Galīgā liposomu suspensija:
Liposomu suspensijai pievieno vēl 5 ml PBS buferšķīduma (0,1 M, pH 7,4).
Viegli virpiniet maisījumu.
Atlikušos dietilētera dūmus evakuē, izmantojot slāpekļa gāzi. - Uzglabāšanas:
Galīgo liposomu suspensiju uzglabā 4°C temperatūrā ledusskapī, līdz tas ir nepieciešams.
Šīs instrukcijas izklāsta soli pa solim liposomu sagatavošanas procesu, izmantojot apgrieztās fāzes iztvaikošanas metodi ar ultraskaņas homogenizāciju, nodrošinot augstu iekšējo ūdens slodzi un aktīvās vielas efektīvu iekapsulēšanu.
Apgrieztās fāzes iztvaikošanas metode, jo īpaši, izmantojot zondes tipa ultraskaņu, ir plaši pieņemta metode liposomu sagatavošanai, īpaši, ja mērķis ir augsta iekšējā ūdens slodze. Šī metode ir izdevīga salīdzinājumā ar tradicionālo plānās plēves hidratācijas metodi, jo tā spēj liposomās iekļaut lielāku ūdens fāzes daudzumu.
Rūpnieciskais sonikators UIP2000hdT liela apjoma liposomu ražošanai
Zondes tipa ultraskaņas priekšrocības liposomu veidošanai
- Uzlabota homogenitāte: Zondes tipa ultraskaņas apstrāde nodrošina konsekventu enerģijas ievadi, kā rezultātā liposomu izmērs ir vienmērīgāks.
- Uzlabota iekapsulēšana: Mehāniskie spēki ultraskaņas apstrādes laikā uzlabo zāļu iekapsulēšanu, īpaši hidrofiliem savienojumiem.
- Mērogojamība: Metodes ir viegli mērogojamas, padarot tās piemērotas liela mēroga liposomu ražošanai.
Liposomu pielietojums zāļu piegādē
Liposomas, kas sagatavotas, izmantojot emulgācijas un šķīdinātāja iztvaikošanas metodes ar zondes tipa ultraskaņu, ir piemērotas dažādiem zāļu piegādes lietojumiem, tostarp:
- Mērķtiecīga zāļu piegāde: Liposomu funkcionalizācija ar specifiskiem ligandiem ļauj mērķtiecīgi piegādāt konkrētus audus vai šūnas.
- Kontrolēta izlaišana: Lipīdu divslāņu struktūra ļauj kontrolēt zāļu izdalīšanos, uzlabojot terapeitisko efektivitāti.
- Daudzpusība: Šīs metodes ietver plašu terapeitisko līdzekļu klāstu, sākot no mazām molekulām līdz lielākām biomolekulām, piemēram, olbaltumvielām un nukleīnskābēm.
Apgrieztās fāzes iztvaikošanas metode ir īpaši atzīmēta ar augstāku iekšējo ūdens slodzi, salīdzinot ar plānās plēves hidratācijas metodi. Šī īpašība ir izdevīga lietojumiem, kuriem nepieciešama būtiska hidrofīlo zāļu vai citu terapeitisko līdzekļu iekapsulēšana.
Apgrieztās fāzes iztvaikošanas metode, izmantojot zondes tipa ultraskaņu, ir izturīga un efektīva metode liposomu sagatavošanai. Tā spēja panākt lielāku iekšējo ūdens slodzi padara to par vēlamo metodi farmaceitiskos lietojumos, kur izšķiroša nozīme ir hidrofilo vielu iekapsulēšanas maksimālai palielināšanai. Rūpīga šķīdinātāja iztvaikošanas kontrole un ultraskaņas izmantošana ir šīs metodes panākumu atslēga, kā rezultātā tiek ražotas augstas kvalitātes liposomas, kas piemērotas dažādiem terapeitiskiem mērķiem.
Atrodiet pareizo Sonicator savai liposomu ražošanai
Hielscher Ultrasonics piedāvā plašu zondes tipa sonikatoru produktu klāstu efektīvai liposomu ražošanai, kā rezultātā bioaktīvo molekulu augsta iekļūšana, efektīva un augsta kravnesība.
Jūs varat izmantot Hielscher ultraskaņas aparātus dažādiem liposomu sagatavošanas ceļiem, piemēram, šeit aprakstītajai apgrieztās fāzes iztvaikošanas tehnikai, emulgācijas metodei un plānas plēves metodei.
Lasiet vairāk par ultraskaņas liposomu sagatavošanu, izmantojot plānas plēves metodi!
Lasiet vairāk par ultrasoniski sagatavotām liposomām, kas iekapsulējas
- augsta efektivitāte
- vismodernākās tehnoloģijas
- uzticamība & Stabilitāti
- regulējama, precīza procesa vadība
- Partijas & Iekļautās
- jebkuram sējumam
- inteliģenta programmatūra
- viedās funkcijas (piemēram, programmējamas, datu protokolēšana, tālvadības pults);
- viegli un droši lietojams
- zema apkope
- CIP (tīrā vietā)
Projektēšana, ražošana un konsultācijas – Kvalitāte ražots Vācijā
Hielscher ultrasonikatori ir labi pazīstami ar saviem augstākajiem kvalitātes un dizaina standartiem. Robustums un viegla darbība ļauj vienmērīgi integrēt mūsu ultrasonikatorus rūpnieciskajās iekārtās. Hielscher ultrasonikatori viegli apstrādā neapstrādātus apstākļus un prasīgu vidi.
Hielscher Ultrasonics ir ISO sertificēts uzņēmums un īpašu uzsvaru liek uz augstas veiktspējas ultrasonikatoriem, kas piedāvā vismodernākās tehnoloģijas un lietotājdraudzīgumu. Protams, Hielscher ultrasonikatori atbilst CE prasībām un atbilst UL, CSA un RoHs prasībām.
Zemāk redzamajā tabulā ir sniegta norāde par mūsu ultrasonikatoru aptuveno apstrādes jaudu:
| Partijas apjoms | Plūsmas ātrums | Ieteicamās ierīces |
|---|---|---|
| 0.5 līdz 1,5 ml | n.p. | VialTweeter |
| 1 līdz 500 ml | 10 līdz 200 ml/min | UP100H |
| 10 līdz 2000 ml | 20 līdz 400 ml/min | UP200Ht, UP400St |
| 0.1 līdz 20L | 02 līdz 4 l/min | UIP2000hdT |
| 10 līdz 100L | 2 līdz 10L/min | UIP4000hdT |
| 15 līdz 150L | 3 līdz 15L/min | UIP6000hdT |
| 15 līdz 150L | 3 līdz 15L/min | UIP6000hdT |
| n.p. | 10 līdz 100L/min | UIP16000 |
| n.p. | Lielāku | kopa UIP16000 |
Sazinieties ar mums! / Jautājiet mums!
Literatūra / Atsauces
- Marco Paini, Sean Ryan Daly, Bahar Aliakbarian, Ali Fathi, Elmira Arab Tehrany, Patrizia Perego, Fariba Dehghani, Peter Valtchev (2015): An efficient liposome based method for antioxidants encapsulation. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Volume 136, 2015. 1067-1072.
- Yao, X., Bunt, C., Cornish, J., Quek, S.-Y. and Wen, J. (2014): Preparation, Optimization and Characterization of Bovine Lactoferrin-loaded Liposomes and Solid Lipid Particles Modified by Hydrophilic Polymers Using Factorial Design. Chemical Biology and Drug Design 83, 2014. 560-575.
- Seyedeh Parinaz Akhlaghi, Iris Renata Ribeiro, Ben J. Boyd, Watson Loh (2016): Impact of preparation method and variables on the internal structure, morphology, and presence of liposomes in phytantriol-Pluronic® F127 cubosomes. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, Volume 145, 2016. 845-853.
Fakti, kurus ir vērts zināt
Kas ir liposomas?
Liposomas ir sfēriskas pūslīši ar lipīdu divslāni, ko izmanto savienojumu iekapsulēšanai. Tos sagatavo šķīdumā, kas satur iesprūstošo savienojumu. Hidrofīliem savienojumiem, piemēram, olbaltumvielām, tiek izmantots ūdens šķīdums, bet hidrofobās molekulas tiek iekapsulētas, izmantojot šķīdumus organiskos šķīdinātājos, kas sajaukti ar lipīdiem. Šī daudzpusība padara liposomas vērtīgas zāļu piegādei un citiem biomedicīnas lietojumiem.
Kas ir apgrieztās fāzes iztvaikošanas metode liposomu sagatavošanai?
Apgrieztās fāzes iztvaicēšanas metode liposomu sagatavošanai ietver lipīdu izšķīdināšanu hloroforma/metanola maisījumā un plānas lipīdu plēves veidošanu rotācijas iztvaicēšanas ceļā. Pēc tam šo plēvi atkārtoti izšķīdina dietilēterī, veidojot apgrieztās fāzes pūslīšus. Ūdens fāzi, kas satur aktīvo vielu un Tween 80, sajauc ar organisko fāzi, veidojot emulsiju "ūdens eļļā". Emulsija tiek apstrādāta ar ultraskaņu, izmantojot zondes tipa sonikatoru, kam seko turpmāka rotācijas iztvaikošana, lai iegūtu želeju, kas galu galā veido liposomas pēc papildu iztvaikošanas. Galīgo suspensiju pabeidz, pievienojot PBS buferšķīdumu un atdalot atlikušos šķīdinātājus ar slāpekļa gāzi, kā rezultātā iegūst liposomas, kas tiek uzglabātas 4 °C temperatūrā.
Kāda ir ultraskaņas ietekme uz liposomām?
Ultraskaņas apstrāde ietekmē liposomas, izmantojot ultraskaņas viļņus, lai izjauktu un sajauktu lipīdu un ūdens fāzes, veicinot viendabīgas dispersijas veidošanos. Šis process palīdz kontrolēt liposomu lielumu un viendabīgumu un novērš pārkaršanu, ļaujot periodiskiem enerģijas pārrāvumiem. Kontrolētā kavitācija, ko izraisa ultraskaņas apstrāde, nodrošina efektīvu aktīvo sastāvdaļu iekapsulēšanu liposomās.
Kas ir fāžu pāreja liposomās?
Fāzu pāreja liposomās attiecas uz temperatūras izraisītām izmaiņām lipīdu fiziskajā stāvoklī. Fāzes pārejas temperatūra ir specifiska temperatūra, kurā lipīdi pāriet no pasūtītās gēla fāzes, kur ogļūdeņražu ķēdes ir pilnībā izstieptas un cieši iepakotas, uz nesakārtoto šķidro kristālisko fāzi, kur ogļūdeņražu ķēdes kļūst nejauši orientētas un šķidras. Šī pāreja ietekmē liposomu stabilitāti, caurlaidību un mijiedarbību ar iekapsulētām vielām.
Kas ir liposomu sagatavošanas ekstrūzijas metode?
Dažreiz plānas plēves hidratācijas metodi sauc arī par ekstrūzijas metodi, jo plānas plēves hidratācijas solim seko ekstrūzijas solis. Ekstrūzijas laikā liposomas tiek izspiestas caur polikarbonāta membrānām, lai iegūtu viendabīgas mazas liposomas. Alternatīvi ekstrūzijai, liposomas bieži tiek samazinātas ar ultraskaņu.
Kāda ir liposomu ultraskaņas metode?
Ultraskaņas apstrāde tiek izmantota dažādās liposomu veidošanās metodēs. Ultraskaņas apstrāde tiek izmantota lipīdu un šķīdinātāju emulgācijai, lipīdu plēves rehidratācijai un liposomu samazināšanai. Apgrieztās fāzes evaorācijas metodei lipīdi tiek ultrasoniski emulģēti ar ūdens fāzi. Plānas plēves metodei žāvēta lipīdu plēve tiek rehidrēta, izmantojot ultraskaņas aparātu, lai izveidotu daudzlamellāru vezikulu suspensiju. Vairākas liposomu sagatavošanas metodes izmanto ultraskaņu, lai pēc tam samazinātu izveidotās liposomas. Šeit ultraskaņas apstrāde rada vienmērīgi mazas un stabilas liposomas, kas piemērotas dažādiem lietojumiem.
Hielscher Ultrasonics ražo augstas veiktspējas ultraskaņas homogenizatorus no Lab līdz rūpnieciskais izmērs.


