Ultraschall Zell Detachement
Ultrasonic Zell Detachement ass eng héich effektiv an zouverlässeg Probepräparatiounstechnik déi a verschiddene Beräicher vun der Zellbiologie a Biotechnologie benotzt gëtt. Mat Hëllef vun Ultraschallwellen trennt de Multi-Well Platte-Sonicator UIP400MTP adherent Zellen aus Kulturoberflächen of a preparéiert Zellsuspensioune fir Downstream Uwendungen. Sonication bitt verschidde Virdeeler iwwer traditionell enzymatesch, chemesch a mechanesch Detachement Techniken, sou datt et e wäertvollt Tool fir Fuerscher mécht.
Prinzip vun Ultraschall Zell Detachement
Ultraschallzellentscheedung hänkt op d'Benotzung vu Kraaft-Ultraschall fir d'Interaktiounen tëscht Zellen an dem Substrat ze stéieren, mat deem se befestegt sinn. Ultraschallwellen generéieren Mikrobubbles, akustesch Kavitatioun a Schwéngungen am Kulturmedium, déi mechanesch Kräfte produzéieren, déi sanft awer effektiv d'Zellen entloossen. Dëse Prozess gëtt typesch mam Net-Kontakt Sonicator UIP400MTP fir Multi-Well Placken duerchgefouert.
Net-Kontakt Sonicator UIP400MTP fir Zell Détachement
D'Zellen ofhuelen ass entscheedend wann Dir adherent Zellen kultivéiert. Wärend Trypsiniséierung déi meescht benotzt Technik ass, kann et d'Zellviabilitéit reduzéieren andeems d'Zellmembran an d'extrazellulär Matrix beschiedegt ginn. Fir d'Effizienz vun der Zellkultur ze verbesseren, ass et wichteg dëse Schued ze minimiséieren. Ultraschall Zell Detachement ass eng héich effektiv an zouverlässeg Enzym-gratis Technik. Dëst mécht den UIP400MTP Mikroplate-Sonicator eng exzellent Alternativ fir Enzym-baséiert Zellentfernung. Sonication applizéiert akustesch Kavitatioun an Agitatioun an engem serumfräie Medium, wat d'Zellen sanft entléisst ouni se ze schueden.
Verglach vun Ultrasonic Zell Detachement mat traditionellen Techniken
| Virdeeler | Ultrasonic Detachement | Enzymatesch Detachement | Chemeschen Détachement |
|---|---|---|---|
| Zell Viabilitéit | héich | Mëttelméisseg | Variabel |
| Speed | Schnell (Minuten) | Mëttelméisseg (Minuten bis Stonnen) | Variabel (Minuten bis Stonnen) |
| Erhaalung vun Surface Markers | exzellent | Kann geännert ginn | Kann geännert ginn |
| Skalierbarkeet | héich | Mëttelméisseg | Variabel |
| Rescht-Fräi | Jo | Nee (Enzymrest) | Variabel (chemesche Rescht) |
| Equipement Käschten | Eemol Investitioun, keng propriétaire Disposéierbar, keng nei Käschten | Re-opkommen Käschten | Re-opkommen Käschten |
| Einfachheet vun Optimisatioun | Einfach | Einfach | Variabel |
De Multi-Well Platte-Sonicator UIP400MTP bitt vill Virdeeler fir High-Throughput Probe Virbereedung wéi Zellentscheedung.
Dësen Hielscher Sonicator ass ISO zertifizéiert, UL, RoHs an CE konform. Et huet 24/7 Operatiounsfäegkeet fir High-Throughput Workflows.
Drënner fannt Dir eng exemplaresch Instruktioun fir d'Zell-Detachement mat der Multi-Well Platte-Sonicator UIP400MTP.
Ausrüstung a Material fir Ultrasonic Zell Detachement
- Non-Contact Sonicator fir Multi-Well Platen UIP400MTP: Dësen High-Throughput Sonicator ass de Schlësselinstrument. De Plack Sonicator UIP400MTP ass gëeegent fir all Standard Multi-Well a Mikrotiter Placke wéi och fir Petri Platen. Ultraschallwellen liwweren déi néideg mechanesch Energie fir d'Zell-Detachement.
- Zell Kultur Platen oder Petri Platen: Standard Schëffer benotzt fir adherent Zellkulturen ze wuessen.
- Kulturmedium: De flëssege Medium an deem d'Zellen ugebaut an erhale ginn.
- Sterile PBS (Phosphat-Buffered Saline): Benotzt fir Zellen ze wäschen virum Ofbau.
- Sammlung Tubes: Fir déi ofgebauter Zellsuspension ze sammelen.
Protokoll fir Ultrasonic Detachment mam Plate Sonicator UIP400MTP
- Virbereedung
– Vergewëssert Iech datt all Ausrüstung propper a steril ass fir Kontaminatioun ze vermeiden.
– Pre-waarm de Kulturmedium a PBS op déi entspriechend Temperatur (normalerweis 37 ° C). - Zell Wäsch
– Aspiréiert d'Kulturmedium aus der Zellkulturfläsch oder Plack.
– Wäscht d'Zellen sanft mat sterile PBS fir all Reschtmedium an ofgebauten Zellen ze läschen. - sonication
– Füügt e klenge Volume vu PBS oder frësche Kulturmedium an d'Fläsch oder d'Plack fir d'Zellmonolayer ze decken.
– Place de Petri Plat oder Plat an der UIP400MTP sonicator.
– Sonicate fir eng spezifizéiert Dauer, typesch rangéiert vun e puer Sekonnen bis e puer Minutten, ofhängeg vun der Zelltyp an der Kraaft vum Uschloss. - Sammlung vun Zell Suspension
– No sonication, beobachten d'Zellen ënner engem Mikroskop fir Détachement ze garantéieren.
– Pipette sanft d'Zellsuspension fir déi ofgebauten Zellen ze sammelen.
– Transfert d'Suspension an e Sammelröhre. - Post-Detachement Veraarbechtung
– Zentrifuge d'Zellsuspension wann néideg fir d'Zellen ze konzentréieren.
– Resuspendéiert d'Zellen a frësche Kulturmedium oder Puffer fir Downstream Uwendungen.
Notizen: D'Parameteren (wéi sonication Zäit an Intensitéit) muss fir verschidden Zell Zorte optimiséiert ginn Zell Schued ze vermeiden. E puer delikat Zelltypen kënne méi empfindlech op Ultraschallbehandlung sinn, déi virsiichteg Optimiséierung erfuerderen.
Praktesch Uwendungen vun Ultrasonic Zell Detachement
Ultrasonic Zell Detachement gëtt a verschiddene Fuerschungen a klineschen Astellungen benotzt:
- Flow Cytometry: Virbereedung vun eenzel Zell Suspensioune fir Analyse.
- Zellzielung a Viabilitéitsassays: Detaching Zellen fir korrekt Zielen a Viabilitéitsbewäertungen.
- Subkultur: Transfert vun Zellen vun engem Kulturbehälter an en anert.
- Molekulare Biologie Experimenter: Isoléieren Zellen fir DNA, RNA, a Protein Extraktioun.
Firwat Soll ech Zell Scraping duerch Zell Detachment mam UIP400MTP Mikroplate Sonciator ersetzen?
Ersatz vun Zellschrauwen mat Zellentscheedung mam UIP400MTP Mikroplate Sonicator bitt Fuerscher verschidde Virdeeler. Am Géigesaz zu der manueller Schrauwen ass déi präzis kontrolléierbar Sonikatioun mat der UIP400MTP eng konsequent a sanft Zellentfernung, miniméiert mechanesche Schued an d'Zellliewensfäegkeet. D'UIP400MTP bitt präzis Kontroll iwwer Sonikatiounsparameter, déi eenheetlech Behandlung iwwer all Brunnen erméiglecht an d'Verännerlechkeet tëscht Proben eliminéiert. Dës Method ass méi séier, méi effizient a skalierbar, wat et ideal mécht fir High-Throughput Uwendungen wärend d'Reproduzibilitéit an d'Integritéit vu sensiblen Zellkulturen behalen. Fannt déi komparativ Etude hei!
96-Well Placke sonicator UIP400MTP fir d'Sonicatioun vu Mikrotiter a Multiwell Placken
96-Well Platte Sonicator UIP400MTP: D'Ultraschall-iwwerdroende Flëssegkeet ëmginn all Brunnen a bitt eenheetlech Sonikatioun vun all Probe
Gemeinsam Zell Zorte fir Ultraschall Zell Detachement
- Fibroblasten:
Allgemeng benotzt an Tissuetechnik a Woundheilungsforschung.
Adherent Zellen déi Détachement erfuerderen fir Passage an Experimenter. - Epithelzellen:
Benotzt an Studien iwwer Tissue Barrièren, Kriibsfuerschung, an Drogentesten.
Verlaangt Détachement fir Analyse an subculturing. - Endothelzellen:
Wichteg fir vaskulär Fuerschung a Studien iwwer Angiogenese.
Adherent Zellen déi Detachement brauchen fir In vitro Assays. - Stammzellen:
Dorënner mesenchymal Stammzellen an induzéiert pluripotent Stammzellen.
Erfuerdert sanft Detachementmethoden fir Viabilitéit a Pluripotenz z'erhalen. - Kriibs Zell Linnen:
Vill an der Kriibsfuerschung an der Drogenentwécklung benotzt.
Adherent Zellen déi reegelméisseg Detachement fir experimentell Manipulatioun erfuerderen. - Hepatocyten:
Benotzt an der Liewerfunktiounsstudien an Drogenmetabolismusfuerschung.
Erfuerdert Detachement fir In vitro Modeller an Assays. - Keratinozyten:
Predominant Zelltyp an der Epidermis an allgemeng benotzt an Hautfuerschung, Woundheilungstudien, a kosmetesch Tester.
Wéi aner adherent Zellen, wuessen d'Keratinozyten un der Uewerfläch vu Kulturfläschen oder Placken befestegt a musse fir verschidden experimentell Prozeduren ofgeschaaft ginn, dorënner Passage, Analyse a Subkulturéierung. - Makrophagen:
Oft erfuerdert Ofbau wann se in vitro kultivéiert ginn.
Macrophages sinn adherent Zellen, déi typesch un d'Uewerfläch vu Kulturfläschen oder Placken befestigen. Fir se ze sammelen fir Downstream Uwendungen wéi Analyse, Subkulturéierung oder Experimenter, musse se vun der Kulturoberfläche getrennt ginn.
Literatur / Referenzen
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- Lauren E. Cruchley-Fuge, Martin R. Jones, Ossama Edbali, Gavin R. Lloyd, Ralf J. M. Weber, Andrew D. Southam, Mark R. Viant (2024): Automated extraction of adherent cell lines from 24-well and 96-well plates for multi-omics analysis using the Hielscher UIP400MTP sonicator and Beckman Coulter i7 liquid handling workstation. Metabomeeting 2024, University of Liverpool, 26-28th November 2024.
- UIP400MTP-Multi-well-Plate-Sonicator-Infographic
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
Fakten Worth Wëssen
Wat ass Zell Detachment?
Zell Detachement ass de Prozess fir adherent Zellen vun der Uewerfläch vun hirem Kulturbehälter ze trennen, wat hir Sammlung a Virbereedung fir weider experimentell Prozeduren oder Analyse erméiglecht. Dëst kann duerch enzymatesch, chemesch, mechanesch oder Ultraschallmethoden erreecht ginn.
Wat ass Zell Dissoziatioun?
Zelldissoziatioun ass de Prozess fir Zellaggregaten oder Stoffer an eenzel, liewensfäeg Zellen ofzebriechen. Dëst gëtt erreecht andeems d'extrazellulär Matrix an d'Zellzelladhäsiounen mat enzymateschen, mechanesche (zB Sonikatioun) oder chemesche Methoden stéieren. Zelldissoziatioun ass wesentlech fir verschidden Uwendungen, dorënner primär Zellkultur, Eenzellanalyse, an d'Virbereedung vun Zellsuspensioune fir Experimenter an therapeutesch Notzung.
Wat ass den Ënnerscheed tëscht enger Adherent Zellkultur an engem Biofilm?
Adherent Zellkultur bezitt sech op de Wuesstum vun Zellen, typesch eukaryot, déi un e Substrat an engem kontrolléierten Laborëmfeld befestigen, vertrauen op Nährstoffer, déi duerch d'Kulturmedium geliwwert ginn. Am Géigesaz, ass e Biofilm eng komplex, natierlech optriedend mikrobial Gemeinschaft déi sech un eng Uewerfläch hält an an enger extrazellulärer Matrix ageklemmt ass, mat Zellen déi kollektivt Verhalen demonstréieren, chemesch Gradienten a verstäerkte Resistenz géint extern Stress. Wärend adherent Zellkulturen kënschtlech sinn a fir Fuerschungszwecker benotzt ginn, Biofilmer sinn dynamesch Ökosystemer déi an natierlechen oder manipuléierten Ëmfeld fonnt ginn.
Sonication mat der UIP400MTP ass eng héich effizient, enzymfräi Technik fir adherent Zellen ze trennen an Biofilmen z'entloossen. Liest méi iwwer d'Virdeeler vum Biofilm Entloossung vu Mikroplaten a Petri Platen mat der UIP400MTP Multi-Well Platte Sonicator!
Wat sinn d'Virdeeler vun Ultrasonic Zell Detachement?
- Gentle op Zellen: Ultrasonic Detachement ass manner haart am Verglach mat enzymatesch Methoden (wéi Trypsiniséierung) a mechanesch Schrauwen, d'Zellviabilitéit an d'Uewerflächemarker erhalen.
- Schnell an effizient: De Prozess ass séier, dauert dacks nëmmen e puer Minutten, a kann effizient Zellen och vu grousse Kulturoberflächen trennen.
- Skalierbarkeet: Gëeegent fir béid kleng Skala Labo Uwendungen a méi grouss biotechnologesch Prozesser.
- Keen Enzymresidu: Eliminéiert d'Noutwendegkeet vun Enzymen, reduzéiert de Risiko fir Zelloberflächeproteine ze veränneren oder Kontaminanten aféieren.