Alpha-Synuclein Fragmentatioun mam VialTweeter Sonicator
α-Synuclein Fibrillen a Bänner ginn an der wëssenschaftlecher Fuerschung fragmentéiert fir méi kleng Fibril Snippets oder souguer eenzel Proteinmoleküle ze generéieren, déi méi einfach analyséiert kënne ginn mat verschiddenen experimentellen Techniken. De VialTweeter Sonicator ass ee vun de meescht benotzt Ultraschaller fir effizient an zouverlässeg Alpha-Synuclein Fragmentatioun.
α-Synuclein an der Fuerschung
Alpha-Synuclein Fibrille si Proteinaggregate déi staark mat neurodegenerative Stéierunge wéi Parkinson Krankheet a bestëmmte Forme vun Demenz verbonne sinn, dorënner Demenz mat Lewy Kierper. Fuerschung fokusséiert op Alpha-Synuclein Fibrillen zielt hir Roll am Krankheetsprogressioun ze verstoen an potenziell therapeutesch Interventiounen z'entwéckelen. Andeems se Alpha-Synuclein Fibrillen a méi kleng Fragmenter ofbriechen, kënnen d'Fuerscher hir spezifesch strukturell Fonctiounen ënnersichen. Zum Beispill, fragmentéierend Alpha-Synuclein Fibrillen erméiglecht d'Fuerscher hir Interaktioune mat anere Moleküle z'ënnersichen, wéi Proteinen, Lipiden oder kleng Molekülen. Andeems Dir méi kleng Fragmenter produzéiert, kënnen d'Bindungsplazen an d'Affinitéit fir dës interagéierend Partner méi effektiv gepréift ginn. Méi kleng α-Syn Fribrillen a Bänner kënnen och verännert Toxizitéit a biochemesch Effekter weisen. Dofir ass eng zouverlässeg an effizient Fragmentéierungstechnik, déi reproduzéierbar Resultater an enger schneller an einfacher Probebehandlung produzéiert, entscheedend.
Ultraschall Alpha-Syn Fragmentatioun: De VialTweeter Sonicator ass den etabléierten Ultrasonic Probe Prep System deen bis zu 10 Fläschen gläichzäiteg ënner exakt déiselwecht Konditiounen sonicéiert. Programméierbar Astellunge erméiglechen den einfachen a séieren Neilaf vun de selweschten Experimenter, wat héich zouverlässeg a reproduzéierbar Resultater an der Alpha-Synuclein Fibril Fragmentatioun gëtt.
VialTweeter sonicator fir simultan Ultraschallfragmentatioun vu multiple Alpha-Synuclein Proben.
α-Synuclein Probe Virbereedung mat engem Sonicator
Eng Approche fir Alpha-Synuclein Fibrillen ze studéieren involvéiert hir Extraktioun a Fragmentatioun mat Techniken wéi Sonikatioun. Sonication ass e Prozess deen héich-Intensitéit, niddereg-Frequenz Ultraschallwellen benotzt fir Proteinaggregate ze stéieren an ze zerbriechen, wat zu der Verëffentlechung vu méi klengen Fibrillen oder eenzel Proteinmoleküle féiert. De Sonicator VialTweeter ass en allgemeng benotzten Apparat an α-Synuclein-relatéierte Fuerschungsstudien fir dësen Zweck.
Vill Fuerschungsstudien beschreiwen präzis Probepräparatiounsprotokoller vun Alpha-Synuclein Fibrillen-Sonication, déi den Hielscher VialTweeter fir effizient an zouverlässeg α-Synuclein Fibril Fragmentatioun benotzen. Duerch d'Fragmentatioun vun de Fibrillen Ultraschall kënnen d'Fuerscher déi resultéierend Produkter analyséieren an hir Struktur, Toxizitéit an Interaktioune mat anere Molekülen ënnersichen. Dës Fuerschung liwwert wichteg Abléck an d'Mechanismen ënner der Neurodegeneratioun a potenziell nei therapeutesch Ziler z'identifizéieren. Déi gutt etabléiert α-Synuclein-Sonicatiounsprotokoller mat dem VialTweeter Sonicator erlaben zouverlässeg a reproduzéierbar Resultater.
Uewer Biller: onfragmentéiert Alpha-Synuclein Fibrillen
Ënneschten Biller: Ultraschall fragmentéiert Alpha-Synuclein Fibrille mam VialTweeter Sonicator
(Etude a Biller: ©Dieriks et al., 2022)
Ultraschall Fragmentatioun vun α-Synuclein Fibrillen – Protokoller
Well vill Fuerscher de VialTweeter Sonicator als bevorzugt Fragmentatiounstechnik benotzen fir eenheetlech α-Synuclein Fibril Fragmenter ze produzéieren, sinn etabléiert Protokoller liicht verfügbar. Hei ënnen fannt Dir e puer exemplaresch Fragmentatiounsprotokoller.
ClearTau Som Virbereedung: D'ClearTau Fibrille goufen op 10 μM an dH2O verdünnt an sonicated bei 70% Amplitude fir 50 s mat 1 s ON 1 s OFF Zyklus am Tube mam Sonicator UP200St mat VialTweeter. Somen goufen duerch Elektronenmikroskopie charakteriséiert.
ThS Fluoreszenz Messung: D'ClearTau Fibrille goufen op 2,5 μM an dH2O verdünnt a sonicated bei 70% Amplitude fir 50 s mat 1 s ON 1 s OFF Zyklus am Tube mat UP200St mat VialTweeter. 2,5 μM voll Längt Tau 4R2N Monomer gouf als Kontroll benotzt. Zu der 100 μl Reaktioun goufen 100 μl ThS (10 μM) bäigefüügt, déi endgülteg Proteinkonzentratioune vun 1,25 μM erginn. Single-Zäit Punkt ThS Fluoreszenz war gemooss mat 96 gutt kloer ënnen Placke opgestallt am FLUOstar Omega microplate Lieser mat excitation bei 445 nm an Emissioun op 485 nm war opgeholl.
(cf. Limorenko et al., 2023)
Uniform α-Synuclein Längt mat Hëllef vun Sonikatioun: D'Längt Heterogenitéit vun α-syn Fibrillen a Bänner gouf reduzéiert duerch Sonikatioun fir 20 min op Äis an 2-ml Eppendorf-Röhre an engem VialTweeter op 75% Amplitude, 0,5 s Impulser.
(cf. Bousset et al., 2013)
D'Qualitéitskontrolle vu mënschleche rekombinante monomeresche WT oder S129A a-Syn an de fibrillar Polymorphen, déi se generéieren, souwéi déi vun a-Syn 1-110, gouf duerchgefouert. Duerno goufen d'fibrillar Polymorphe fragmentéiert duerch Sonikatioun fir 20 min an 2-ml Eppendorf-Röhre am VialTweeter Ultraschall fir fibrillar Partikel mat enger duerchschnëttlecher Gréisst vun 42-52 nm ze generéieren, déi fir Endozytose gëeegent sinn.
(cf. Shrivastava et al., 2020)
Charakteriséierung vu fënnef fibrillaren α-Syn Polymorphen. (A) Transmissioun Elektronen micrographs vun negativ gefierft α-Syn fibrillar polymorphs fibrills, Bänner, fibrils-91, fibrils-65, an fibrils-110 virun (ieweschte Lane) an no Fragmentatioun mat der VialTweeter (ënneschten Lane) sinn gewisen. (B) Längt Verdeelung vun der fragmentaresch fibrillar polymorphs gëtt gewisen. D'Zuel (n) vu fibrillar Versammlungen, aus deenen d'Histogramme ofgeleet goufen, gëtt uginn.
(Studie a Biller: Shrivastava et al., 2020)
D'α-Syn Fibrille goufen duerch Sonikatioun fir 20 min an 2 ml Eppendorf-Röhre an engem VialTweeter fragmentéiert fir fibrillär Partikelen mat enger duerchschnëttlecher Gréisst 42-52 nm ze generéieren wéi duerch TEM Analyse bewäert.
(cf. Negrini et al., 2022)
Déi resuspendéiert Fibrillen91 (am PBS) goufen fragmentéiert virum Zousaz zu Zellkulturen duerch Sonikatioun fir 20 min an 2 mL Eppendorf-Röhre mat dem Vial Tweeter Sonicator, aliquotéiert, flash gefruer a flëssege Stickstoff a gelagert bis de Gebrauch bei -80 ̊C.
(cf. Vajhøj et al., 2021)
Sonicator UIP400MTP fir Alpha-Synuclein Fibril Fragmentatioun a Multi-Well Placken.
VialTweeter a Lab Sonicators fir α-Syn Fragmentatioun
Hielscher Ultrasonics ass weltwäit unerkannt als féierende Hiersteller vun opzedeelen Ultrasonicatoren. Vertrauen an a grousse Fuerschungslaboratoiren weltwäit etabléiert, eis Ultraschaller bidden oniwwertraff Qualitéit a Leeschtung fir Är kritesch Experimenter.
Mat dem Hielscher VialTweeter an all aner Hielscher Sonicator, wäert Dir en onvergläichleche Benotzerkomfort erliewen, well se duerchduechte konstruéiert sinn fir reproduzéierbar Resultater, einfacher Benotzung an nahtlos Operatioun. Mat automateschen Dateopnamfunktiounen, kënnt Dir op Är Fuerschung fokusséieren, während eis Ultraschaller suergfälteg entscheedend Daten fir Reproduktioun a Präzisioun ophuelen.
Erreecht konsequent a reproduzéierbar Resultater mat Vertrauen!
Eis Ultraschaller ginn an Däitschland konstruéiert a fabrizéiert. Däitsch Präzisioun an héchster Ingenieursqualitéit fir zouverlässeg a präzis Probepräparatioun sou eng Alpha-Synuclein Fibril Fragmentatioun all Kéier ze garantéieren. Keng Suergen méi iwwer onkonsequent Resultater - eis Ultraschalltechnologie garantéiert datt Är Fuerschung un der Spëtzt vum wëssenschaftleche Fortschrëtt bleift.
Mee dat ass net alles! Eist Engagement fir Exzellenz geet iwwer eis Produkter eraus. Mir si stolz op eisen aussergewéinleche Clientsservice, liwweren Expert Ënnerstëtzung fir all Ufroen oder Bedenken ze adresséieren déi Dir hutt. Eist engagéiert Team ass hei fir Iech bei all Schrëtt vun Ärer Fuerschungsrees ze hëllefen, fir sécherzestellen datt Dir dat Bescht aus eisen Ultraschaller kritt.
Wielt Innovatioun, Zouverlässegkeet an aussergewéinlech Benotzererfarung - wielt eis Labo Sonicatoren wéi de VialTweeter fir Alpha-Synuclein Fibril Fragmentatioun. Profitéiert vun de scho etabléierte Protokoller a kommt an d'Ränge vu féierende Fuerscher, déi eis Technologie fir hir kritesch Studien vertrauen. Erweidert Är Fuerschung an entdeckt nei Grenzen an Demenz an neurodegenerativ Krankheet Fuerschung mat eise modernsten Ultraschaller.
- héich Effizienz
- State-of-the-art Technologie
- Zouverlässegkeet & Robustitéit
- Reproduzabilitéit
- justierbar, präzis Prozess Kontroll
- fir all Volume
- intelligent Software
- Smart Features (zB programméierbar, Dateprotokolléierung, Fernsteierung)
- Einfach a sécher ze bedreiwen
- niddreg Wartung
- CIP (propper op der Plaz)
Design, Fabrikatioun a Berodung – Qualitéit Made in Germany
Hielscher Ultraschaller si bekannt fir hir héchst Qualitéit an Designnormen. Robustheet an einfach Operatioun erlaben déi glat Integratioun vun eisen Ultraschaller an industriellen Ariichtungen. Rau Konditiounen an erfuerderlech Ëmfeld ginn einfach vun Hielscher Ultraschaller gehandhabt.
Hielscher Ultrasonics ass eng ISO zertifizéiert Firma a setzt spezielle Wäert op High-Performance Ultrasonicatoren mat modernste Technologie a Benotzerfrëndlechkeet. Natierlech sinn Hielscher Sonicatoren CE konform an entspriechen d'Ufuerderunge vun UL, CSA a RoHs.
D'Tabell hei drënner gëtt Iech eng Indikatioun vun der geschätzter Veraarbechtungskapazitéit vun eise Labo-Gréisst Ultraschaller:
| recommandéiert Comments | Konte gefouert QShortcut | Duerchflossrate |
|---|---|---|
| UIP400MTP | Multi-Well / Mikrotiter Placke | na |
| Ultraschall CupHorn | CupHorn fir Fläschen oder Becher | na |
| GDmini2 | Ultraschall Mikro-Flow Reaktor | na |
| VialTweeter | 0.5 an 1,5mL | na |
| UP100H | 1 bis 500mL | 10 bis 200mL / min |
| UP200Ht, An UP400St | 10 bis 2000mL | 20 bis 400mL / min |
Kontaktéiert eis! / Frot eis!
De VialTweeter gëtt allgemeng benotzt fir Alpha-Synuclein Fibrill als Schrëtt vun der pre-analytescher Probepräparatioun ze fragmentéieren
Literatur / Referenzen
- Emil Dandanell Agerschou, Marie P. Schützmann, Nikolas Reppert, Michael M. Wördehoff, Hamed Shaykhalishahi, Alexander K. Buell, Wolfgang Hoyer (2021): β-Turn exchanges in the α-synuclein segment 44-TKEG-47 reveal high sequence fidelity requirements of amyloid fibril elongation. Biophysical Chemistry, Volume 269, 2021.
- Bousset, L., Pieri, L., Ruiz-Arlandis, G. et al. (2013): Structural and functional characterization of two alpha-synuclein strains. Nature Communications 4, 2575 (2013).
- Vajhøj, Charlott; Schmid, Benjamin; Alik, Ania; Melki, Ronald; Fog, Karina; Holst, Bjørn; Stummann, Tina (2021): Establishment of a human induced pluripotent stem cell neuronal model for identification of modulators of A53T α-synuclein levels and aggregation. PLOS ONE 16, 2021.
- Dieriks B.V.; Highet B.; Alik A.; Bellande T.; Stevenson T.J.; Low V.; Park T.I.; Correia J.; Schweder P.; Faull R.L.M.; Melki R.; Curtis M.A.; Dragunow M. (2022): Human pericytes degrade diverse α-synuclein aggregates. PLoS One, Nov 18;17(11), 2022.
- Amulya Nidhi Shrivastava, Luc Bousset, Marianne Renner, Virginie Redeker, Jimmy Savistchenko, Antoine Triller, Ronald Melki (2020): Differential Membrane Binding and Seeding of Distinct α-Synuclein Fibrillar Polymorphs. Biophysical Journal, Volume 118, Issue 6, 2020. 1301-1320.
- Negrini M, Tomasello G, Davidsson M, Fenyi A, Adant C, Hauser S, Espa E, Gubinelli F, Manfredsson FP, Melki R, Heuer A. (2022): Sequential or Simultaneous Injection of Preformed Fibrils and AAV Overexpression of Alpha-Synuclein Are Equipotent in Producing Relevant Pathology and Behavioral Deficits. Journal of Parkinsons Disease 12(4), 2022. 1133-1153.
- Limorenko G, Tatli M, Kolla R, Nazarov S, Weil MT, Schöndorf DC, Geist D, Reinhardt P, Ehrnhoefer DE, Stahlberg H, Gasparini L, Lashuel HA (2023): Fully co-factor-free ClearTau platform produces seeding-competent Tau fibrils for reconstructing pathological Tau aggregates. Nature Communications 4;14(1), July 2023.
Hielscher Ultrasonics fabrizéiert performant Ultraschall Homogeniséierer aus Labo ze industriell Gréisst.