გენეტიკური ტრანსფორმაცია მცენარეთა უჯრედებში ულტრაბგერითი გამოყენებით

Agrobacterium-ის შუამავლობით ტრანსფორმაცია (SAAT) არის ეფექტური მეთოდი მცენარეთა უჯრედების უცხო გენებით დაინფიცირებისთვის აგრობაქტერიის, როგორც გადამტანის გამოყენებით. ულტრაბგერითი კავიტაცია იწვევს სონოპორაციას, რაც შეიძლება შეფასდეს, როგორც მცენარის ქსოვილის მიზანმიმართული მიკრო ჭრილობა. ამ ულტრაბგერითი შექმნილი მიკრო ჭრილობების მეშვეობით, დნმ და დნმ ვექტორები შეიძლება ეფექტურად გადაიტანონ უჯრედის მატრიქსში.

სონოპორაცია – ულტრაბგერითი გაძლიერებული უჯრედის ტრანსფორმაცია

Ultrasonicator UP100H არის ლაბორატორიული ჰომოგენიზატორი, რომელიც ხშირად გამოიყენება უჯრედის კულტურის ფირფიტების ნიმუშის მოსამზადებლად.როდესაც დაბალი სიხშირის ულტრაბგერა (დაახლოებით 20 კჰც) გამოიყენება უჯრედის სუსპენზიებზე, აკუსტიკური კავიტაციის ეფექტი იწვევს უჯრედულ ქსოვილებზე მემბრანის გარდამავალ გამტარიანობას. ეს ულტრაბგერითი ეფექტი ცნობილია როგორც სონოპორაცია და გამოიყენება უჯრედებში ან ქსოვილებში გენის გადასატანად.
ულტრაბგერითი მოქმედების უპირატესობები ემყარება მის არათერმული მექანიკური მუშაობის პრინციპს, რაც ხდის სონიფიკაციას ხშირად უფრო მრავალმხრივს და ნაკლებად დამოკიდებულს უჯრედების ტიპებზე. სონოპორაციის მრავალმხრივი გამოყენება ხსნის ტრანსგენური მცენარეების გამოყენების შესაძლებლობას, რომლებსაც აქვთ მნიშვნელოვანი პოტენციალი ადამიანის რთული თერაპიული ცილების ბიოწარმოებაში. ასეთი მცენარეული ბიორეაქტორები ადვილად შეიძლება იყოს გენეტიკურად მანიპულირებული, თავიდან აიცილონ ადამიანის პათოგენებით პოტენციური დაბინძურება, არ დააზიანოს ტრანსფორმაციის შუამავალი ბაქტერიები (მაგ. აგრობაქტერიუმი) და წარმოადგენს ბიოსინთეზის იაფ, ეფექტურ მეთოდს.

ინფორმაციის მოთხოვნა




გაითვალისწინეთ ჩვენი კონფიდენციალურობის პოლიტიკა.


ვიდეო გვიჩვენებს ულტრაბგერითი ნიმუშის მომზადების სისტემა UIP400MTP, რომელიც საშუალებას იძლევა საიმედო ნიმუშის მომზადება ნებისმიერი სტანდარტული მრავალ ჭაბურღილის ფირფიტაზე მაღალი ინტენსივობის ულტრაბგერის გამოყენებით. UIP400MTP-ის ტიპიური აპლიკაციები მოიცავს უჯრედების ლიზას, დნმ-ს, რნმ-ს და ქრომატინის ცვლას, ასევე ცილების ექსტრაქციას.

ულტრაბგერითი UIP400MTP მრავალ ჭაბურღილის ფირფიტის გამაჯანსაღებისთვის

უჯრედების ტრანსფორმაცია ულტრაბგერითი დახმარებით

ზონდის ტიპის ულტრაბგერითი აპარატები, როგორიცაა UP200St, არის ქსოვილის საიმედო ჰომოგენიზატორები და ფართოდ გამოიყენება გენეტიკაში ნიმუშის მოსამზადებლად, მაგ., აგრობაქტერიის შუამავლობით ტრანსფორმაციისთვის (SAAT) სონიკაციის დახმარებით.Sonication არის ტექნიკა, რომელიც იყენებს დაბალი სიხშირის ულტრაბგერითი ტალღებს ნაწილაკების ხსნარში აჟიტირებისთვის, ხსნარების შერევისთვის, რითაც ზრდის მასის გადაცემის და დაშლის სიჩქარეს. ამავდროულად, გაჟღენთვას შეუძლია გახსნილი აირები სითხეებიდან ამოიღოს. მცენარის ტრანსფორმაციისას, ხმოვანი გამოსხივება გამოიწვევს მცენარის ქსოვილზე მიკროჭრილობების წარმოქმნას და აძლიერებს შიშველი დნმ-ის მიწოდებას მცენარის პროტოპლასტში.

გენეტიკური ტრანსფორმაციისთვის, Agrobacterium-ის შუამავლობით გაჟღენთილი ტრანსფორმაცია (SAAT) არის სასურველი მეთოდი და აქვს ბევრად უფრო მაღალი ეფექტურობა, ვიდრე სონიკა, რომელიც გამოიყენება შიშველი დნმ-ის და დნმ-ის ვექტორების პირდაპირ პროტოპლასტში გადასატანად. მრავალრიცხოვანმა კვლევამ აჩვენა, რომ აგრობაქტერიის შუამავლობით გამოწვეული ტრანსფორმაცია (SAAT) შეიძლება გამოყენებულ იქნას მცენარეთა უჯრედებზე მექანიკური შეფერხებისა და ჭრილობების წარმოქმნის მიზნით ულტრაბგერითი ტალღებით და შედეგად მიღებული აკუსტიკური კავიტაციის შედეგად. მოკლე ულტრაბგერითი მკურნალობა ქმნის მიკროჭრილობებს ექსპლანტანტების ზედაპირზე. ვინაიდან დაჭრილი უჯრედები საშუალებას მისცემს აგრობაქტერიის შეღწევას მცენარის ქსოვილების ღრმა ნაწილში, რითაც იზრდება მცენარის უჯრედების ინფიცირების ალბათობა. გარდა ამისა, გამოყოფილი ფენოლური ნაერთები აძლიერებენ ტრანსფორმაციას. ულტრაბგერითი წარმოქმნილი მიკრო ჭრილობები ბაქტერიების მიერ ექსპლანტაციის შეღწევას ასევე უფრო შესაძლებელს ხდის. SAAT წარმატებით გამოიყენებოდა გენეტიკური ტრანსფორმაციისთვის მცენარეთა სახეობებში, რომლებიც განსაკუთრებით რეზისტენტული იყო აგრობაქტერიის მიმართ.
არის ძალიან მარტივი და იაფი მეთოდი, ისევე როგორც აგრობაქტერიის შუამავლობით გენის გადაცემის მნიშვნელოვანი გაძლიერება SAAT-ის მთავარი უპირატესობაა. გარდა SAAT-ის წარმატებული გამოყენებისა Chenopodium rubrum L. და Beta vulgaris L.-ის ტრანსფორმაციაში, ეს მიდგომა ასევე გამოყენებულია რეკომბინანტული Escherichia coli ველური ტიპის სითბოსადმი მდგრადი ჰოლოტოქსინის და Escherichia coli მუტანტის LT ვაქცინის ადიუვანტების წარმოებაში Nicotiana tabacum-ში. , რომელშიც ყველაზე მაღალი სისტემური LT-B-სპეციფიკური IgG ტიტრები გამოვლინდა ფრინველებში.
(შდრ. Laere et al., 2016; M. Klimek-Chodacka and R. Baranski, 2014)

VialTweeter შეიძლება გამოვიყენოთ გეგმის უჯრედების დნმ-ის ინფექციისთვის, მაგ., აგრობაქტერიის შუამავლობით ტრანსფორმაციის (SAAT) სონიკაციის დახმარებით.

VialTweeter მრავალი ნიმუშის მილის ერთდროული გაჟღერებისთვის, მაგ., აგრობაქტერიის შუამავლობით ტრანსფორმაციისთვის (SAAT) გაჟღერების დახმარებით.

მეცნიერულად დადასტურებული სარგებელი Sonication-ის დახმარებით Agrobacterium Mediamediate Transformation (SAAT)

Agrobacterium-ის შუამავლობით ტრანსფორმაცია (SAAT) გამოყენებული იქნა მცენარეთა მრავალ სახეობაში. მცენარეთა უჯრედების კულტურების მოკლე და შედარებით რბილი ულტრაბგერითი მკურნალობა იწვევს სონოპორაციას, რაც შემდგომში აგრობაქტერიის, როგორც გენის გადამტანის, ღრმა შეღწევის საშუალებას იძლევა. ქვემოთ შეგიძლიათ წაიკითხოთ სანიმუშო კვლევები, რომლებიც აჩვენებენ SAAT-ის სასარგებლო ეფექტებს.

აშვაგანდას ტრანსფორმაცია ულტრაბგერითი დახმარებით

W. somnifera-ში ტრანსფორმაციის ეფექტურობის გასაუმჯობესებლად (ცნობილია როგორც აშვაგანდა ან ზამთრის ალუბალი), დეჰდაშტიმ და კოლეგებმა (2016) გამოიკვლიეს აცეტოსირინგონის (AS) და სონიკაციის გამოყენება.
აცეტოსირინგონი (AS) დაემატა სამ ეტაპად: აგრობაქტერიუმის თხევადი კულტურა, აგრობაქტერიული ინფექცია და ექსპლანტანტების თანაკულტივირება აგრობაქტერიუმთან. Agrobacterium-ის თხევად კულტურაში 75 μM AS-ის დამატება აღმოჩნდა ოპტიმალური ვირ გენების ინდუქციისთვის.
sonication-ის (SAAT) დამატებით გამოყენებამ გამოიწვია გენის ყველაზე მაღალი ექსპრესია. აღმოჩნდა, რომ gusA გენის გამოხატულება თმიან ფესვებში იყო საუკეთესო, როდესაც ფოთლები და ყლორტების წვერები ხდებოდა 10 და 20 წამის განმავლობაში, შესაბამისად. გაუმჯობესებული პროტოკოლის ტრანსფორმაციის ეფექტურობა დაფიქსირდა 66,5 და 59,5% ფოთლისა და ყლორტის წვერის ექსპლანტანტების შემთხვევაში, შესაბამისად. სხვა პროტოკოლებთან შედარებით, ამ გაუმჯობესებული პროტოკოლის ტრანსფორმაციის ეფექტურობა აღმოჩნდა 2,5-ჯერ მეტი ფოთლებისთვის და 3,7-ჯერ მეტი გასროლის წვეროებისთვის. Southern blot ანალიზებმა დაადასტურა gusA ტრანსგენის 1-2 ასლი W1-W4 ხაზებში, ხოლო 1-4 ტრანსგენის ასლი გამოვლინდა გაუმჯობესებული პროტოკოლით გენერირებული W5 ხაზში.

სონიკაციის ხანგრძლივობა (ულტრაბგერითი ზემოქმედების დრო) გავლენას ახდენს ბგერითი დახმარებით Agrobacterium-ის შუამავლობით ტრანსფორმაციაზე (SAAT) ტრანსფორმაციაზე W. somnifera-ში.

ბგერითი დახმარებით აგრობაქტერიული ტრანსფორმაციის (SAAT) ხანგრძლივობის ეფექტი W. somnifera ფოთლის (a) და ყლორტის წვერის (b) ექსპლანტაციის ტრანსფორმაციის სიხშირეზე
(კვლევა და გრაფიკა: © დეჰდაშტი და სხვ., 2016)

ინფორმაციის მოთხოვნა




გაითვალისწინეთ ჩვენი კონფიდენციალურობის პოლიტიკა.


ბამბის ტრანსფორმაცია ულტრაბგერითი დახმარებით

ჰუსეინი და სხვ. (2007) აჩვენეთ ბამბის ტრანსფორმაციის გახმოვანებით დამხმარე ეფექტების დემონსტრირება. დაბალი სიხშირის ულტრაბგერით გამოწვეული აკუსტიკური კავიტაცია ქმნის მიკროჭრილობებს მცენარის ქსოვილის ზედაპირზე და მის ქვემოთ (სონოპორაცია) და საშუალებას აძლევს აგრობაქტერიას იმოგზაუროს უფრო ღრმად და მთლიანად მცენარის ქსოვილში. ეს ჭრილობა ზრდის ქსოვილებში ღრმად მდებარე მცენარეული უჯრედების დაინფიცირების ალბათობას. SAAT-ის ტრანსფორმაციის ეფექტურობის შესაფასებლად, გაზომეს GUS გენის ექსპრესია. GUS რეპორტიორის სისტემა არის რეპორტიორი გენის სისტემა, განსაკუთრებით სასარგებლო მცენარეთა მოლეკულურ ბიოლოგიასა და მიკრობიოლოგიაში. სხვადასხვა SAAT პარამეტრების კორექტირებით, GUS-ის გარდამავალი გამოხატულება ბამბაში სექსუალურ ემბრიონების გამოყენებით ექსპლანტაციის სახით მნიშვნელოვნად გაუმჯობესდა. GUS პირველად გამოვლინდა ექსპლანტანტების ინკუბაციიდან 24 სთ-ში და 48 სთ-ისთვის GUS-ის გამოხატულება იყო ძალიან ინტენსიური, რაც ემსახურებოდა ბამბის ექსპლანტაციის წარმატებული ტრანსფორმაციის სასარგებლო ინდიკატორს აგრობაქტერიის შუამავლობით გაფორმებული ტრანსფორმაციის (SAAT) შემდეგ გაჟღერების დახმარებით. ტრანსფორმაციის სხვადასხვა ტექნიკის (კერძოდ, ბიოლისტიკური, აგრო, BAAT, SAAT) შედარებამ აჩვენა ტრანსფორმაციის შორს საუკეთესო შედეგები.

Agrobacterium-ის შუამავლობით ტრანსფორმაცია გაჟღერებით (SAAT) აჩვენებს მნიშვნელოვნად უფრო მაღალ გარდამავალ გამოხატულებას ინფექციის ალტერნატიულ მეთოდებთან შედარებით.

ტრანსფორმაციის პროცედურის არჩევანი GUS-ის გარდამავალი გამოხატვის საფუძველზე. Agrobacterium-ის შუამავლობით ტრანსფორმაცია (SAAT) ავლენს გაჟღენთილი დახმარებით.
(შესწავლა და გრაფიკა: © Hussain et al., 2007)

მაღალი ხარისხის ულტრაბგერითი გადაწყვეტილებები Sonoporation-ისთვის და SAAT-ისთვის

Hielscher Ultrasonics-ს დიდი ხნის გამოცდილება აქვს მაღალი ხარისხის ულტრაბგერითი აპარატების შემუშავებასა და წარმოებაში ლაბორატორიებისთვის, კვლევითი ობიექტებისთვის და ასევე სამრეწველო წარმოებისთვის ძალიან მაღალი გამტარუნარიანობით. მიკრობიოლოგიისა და სიცოცხლის მეცნიერებისთვის, Hielscher გთავაზობთ სხვადასხვა გადაწყვეტილებებს კონკრეტული ქსოვილებისა და მათი მკურნალობისთვის აუცილებელი სხვადასხვა მოთხოვნების დასაკმაყოფილებლად. მრავალი ნიმუშის ერთდროული ულტრაბგერითი გამოსაყენებლად Hielscher გთავაზობთ UIP400MTP-ს მულტიბგერითი ფირფიტებისთვის, VialTweeter-ს 10-მდე ფლაკონისთვის (მაგ., Eppendorf მილები) ან ულტრაბგერითი CupHorn-ისთვის. ზონდის ტიპის ულტრაბგერითები ხელმისაწვდომია 50-დან 400 ვატამდე, როგორც ლაბორატორიული ჰომოგენიზატორები, ხოლო სამრეწველო სისტემები მოიცავს სიმძლავრის დიაპაზონს 500 ვატიდან 16 კვტ-მდე.
გთხოვთ, დაგვიკავშირდეთ და შეგვატყობინოთ თქვენი განაცხადის და პროცესის მოთხოვნების შესახებ. ჩვენი გამოცდილი პერსონალი სიამოვნებით შემოგთავაზებთ ყველაზე შესაფერისი ულტრაბგერითი აპარატს თქვენი ბიოლოგიური პროცესისთვის.
ქვემოთ მოყვანილი ცხრილი გაძლევთ ჩვენს ულტრასონისტების სავარაუდო დამუშავების შესაძლებლობებს:

Batch მოცულობა დინების სიჩქარე რეკომენდირებული მოწყობილობები
მულტიბელ / მიკროტიტრული ფირფიტები na UIP400MTP
10 ფლაკონამდე na VialTweeter
5-მდე ფლაკონი/ტუბი ან 1 უფრო დიდი ჭურჭელი na თასი
1-დან 500 მლ-მდე 10 დან 200 მლ / წთ UP100H
10 დან 2000 მლ 20 დან 400 მლ / წთ Uf200 ः t, UP400St
01-დან 20 ლ-მდე 02-დან 4 ლ / წთ UIP2000hdT
10-დან 100 ლ 2-დან 10 ლ / წთ UIP4000hdT
na 10-დან 100 ლ / წთ UIP16000
na უფრო დიდი კასეტური UIP16000

დაგვიკავშირდით! / გვკითხე ჩვენ!

სთხოვეთ დამატებითი ინფორმაციის მისაღებად

გთხოვთ, შეავსოთ ქვემოთ მოცემული ფორმა, რომ მოითხოვოთ დამატებითი ინფორმაცია ჩვენი ულტრაბგერითი აპარატების, მათი აპლიკაციებისა და ფასის შესახებ. მოხარული ვიქნებით განვიხილოთ თქვენთან თქვენი პროცესი და შემოგთავაზოთ ულტრაბგერითი სისტემა, რომელიც აკმაყოფილებს თქვენს მოთხოვნებს!









გთხოვთ გაითვალისწინოთ ჩვენი კონფიდენციალურობის პოლიტიკა.



ულტრაბგერითი მაღალი ათვლის ჰომოგენიზატორები გამოიყენება ლაბორატორიაში, სკამზე, პილოტში და სამრეწველო დამუშავებაში.

Hielscher Ultrasonics აწარმოებს მაღალი ხარისხის ულტრაბგერით ჰომოგენიზატორებს ლაბორატორიული, საპილოტე და სამრეწველო მასშტაბის პროგრამების, დისპერსიის, ემულგირებისა და მოპოვების შერევისთვის.



ლიტერატურა / ცნობები


მაღალი ხარისხის ულტრაბგერითი! Hielscher-ის პროდუქციის ასორტიმენტი მოიცავს სრულ სპექტრს კომპაქტური ლაბორატორიული ულტრაბგერითი აპარატიდან დაწყებული სკამების ზედა ერთეულებამდე სრულ ინდუსტრიულ ულტრაბგერით სისტემებამდე.

Hielscher Ultrasonics აწარმოებს მაღალი ხარისხის ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორებისგან ლაბორატორია to სამრეწველო ზომა.