ლიზისის ბუფერები შეიძლება ეფექტურად და სწრაფად მომზადდეს ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორების გამოყენებით. ვინაიდან ულტრაბგერითი არის საოცნებო ინსტრუმენტი შერევის, დაშლისა და დაშლისთვის, ისინი საშუალებას იძლევა საიმედო და მოსახერხებელი მომზადება ლიზის ბუფერებისთვის.

ლიზის ბუფერების ულტრაბგერითი მომზადება

ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორები არის უჯრედების დაშლის, ლიზისა და ექსტრაქციის საერთო ინსტრუმენტი, ამიტომ ხელმისაწვდომია უმეტეს ლაბორატორიებში. ზონდის ტიპის ულტრაბგერითების მეორადი განაცხადია ლიზის ბუფერების მომზადება.

ლიზისის ბუფერი არის ხსნარი, რომელიც გამოიყენება ღია (ლიზის) უჯრედების დასაშლელად და მათი შიგთავსის გასათავისუფლებლად. ლიზისის ბუფერის სპეციფიკური შემადგენლობა შეიძლება განსხვავდებოდეს ლიზირებული უჯრედების ტიპისა და ქვემოთ გამოყენების მიხედვით. თუმცა, ტიპიური ლიზის ბუფერი შეიცავს კომპონენტებს, როგორიცაა სარეცხი საშუალებები, მარილები და პროტეაზას ინჰიბიტორები. ბუფერული მარილები (მაგ. Tris-HCl) და იონური მარილები (მაგ. NaCl) ჩვეულებრივ გამოიყენება ლიზატის pH-ისა და ოსმოლარობის დასარეგულირებლად.
ლიზისის ბუფერის დასამზადებლად კომპონენტები ერთმანეთს ურევენ შესაბამის კონცენტრაციებში და pH-ში. ნარევს ჩვეულებრივ ურევენ ან ურევენ, სანამ კომპონენტები არ დაიშლება და ხსნარი ერთგვაროვანი გახდება.
ულტრაბგერითი ჰომოგენიზაცია არის მეთოდი, რომელიც შეიძლება გამოყენებულ იქნას კარგი ლიზის ბუფერის შესაქმნელად კომპონენტების შერევისა და დაშლის გაუმჯობესებით. ამ მეთოდით, ულტრაბგერითი ტალღები – ჩვეულებრივ 20-დან 30 kHz-მდე დიაპაზონში – გამოიყენება ნარევზე, რომელიც ქმნის კავიტაციის ბუშტებს, რომლებიც იშლება და წარმოქმნის ინტენსიურ ადგილობრივ ენერგიას, რაც იწვევს მექანიკურ ათრევას და კომპონენტების შერევას.
ულტრაბგერითი ჰომოგენიზაციის პროცესი ხელს უწყობს კომპონენტების ნებისმიერი გროვის ან აგრეგატის დაშლას და უზრუნველყოს ხსნარის ერთგვაროვანი შერევა. შესაბამისად, ლიზისის გაუმჯობესებულმა ბუფერმა შეიძლება გამოიწვიოს უჯრედების უფრო ეფექტური დაშლა და მოპოვებული მასალის უფრო მაღალი მოსავლიანობა. გარდა ამისა, ულტრაბგერითი ჰომოგენიზაციას შეუძლია შეამციროს ლიზის ბუფერის დასამზადებლად საჭირო დრო ტრადიციულ მორევის ან შერყევის მეთოდებთან შედარებით.
საერთო ჯამში, ულტრაბგერითი ჰომოგენიზაცია არის ძლიერი ინსტრუმენტი ლიზის ბუფერის მომზადების ხარისხისა და ეფექტურობის გასაუმჯობესებლად.

ულტრაბგერითი ლიზის ბუფერის მომზადების პროტოკოლი

ეს არის ზოგადი პროტოკოლი ლიზის ბუფერის შესაქმნელად ზონდის ტიპის ულტრაბგერითი აპარატის გამოყენებით:
 
მასალები:

• არჩეული სარეცხი (მაგ. Triton X-100, SDS, CHAPS)
• სასურველი მარილი(ები) (მაგ. NaCl, KCl)
• პროტეაზას ინჰიბიტორები (მაგ. PMSF, აპროტინინი, ლეუპეპტინი)
• ულტრაბგერითი
• შემრევი
• დეიონიზებული წყალი
• pH მეტრი ან pH ზოლები

 
 
ნაბიჯ-ნაბიჯ ინსტრუქციები:

1. განსაზღვრეთ ლიზისის ბუფერის შემადგენლობა იმ უჯრედების ან ქსოვილის საფუძველზე, რომლებსაც თქვენ ლიზირებთ, და ქვედა დინების აპლიკაციებზე, რომლებისთვისაც გამოიყენებთ ლიზატს. მოამზადეთ სარეცხი საშუალებების, მარილების და პროტეაზას ინჰიბიტორების ხსნარი სასურველი კონცენტრაციით.
2. დაამატეთ სარეცხი საშუალებების, მარილების და პროტეაზას ინჰიბიტორების მარაგის ხსნარები ჭიქაში ან კოლბაში.
3. დაამატეთ დეიონიზებული წყალი, რომ მოცულობა მიიყვანეთ ბუფერის სასურველ რაოდენობამდე.
4. შეურიეთ კომპონენტები სარეველების გამოყენებით, რათა მიიღოთ წინასწარ შერევის ხსნარი.
5. გაზომეთ ბუფერის pH pH მრიცხველის ან pH ზოლების გამოყენებით და საჭიროების შემთხვევაში დაარეგულირეთ pH მცირე რაოდენობით მჟავას ან ფუძეს.
6. გამოიყენეთ ზონდის ტიპის ულტრაბგერითი წინასწარი შერევის ხსნარის ჰომოგენიზაციისთვის ისე, რომ მიიღება უაღრესად ერთგვაროვანი ხსნარი. ამიტომ, ხსნარის გაჟღენთვა რამდენიმე წამის განმავლობაში, სანამ ხსნარი საფუძვლიანად არ არის შერეული და ნებისმიერი გროვა ან აგრეგატი არ დაიშლება. გაჟონვის ხანგრძლივობისა და სიმძლავრის ოპტიმიზირება შესაძლებელია კონკრეტული ლიზის ბუფერისა და გამოყენებული ულტრაბგერითი აპარატის საფუძველზე.
7. ულტრაბგერითი გამოკვლევის შემდეგ, ხელახლა გაზომეთ ბუფერის pH და შეცვალეთ საჭიროებისამებრ.
8. გაფილტრეთ ბუფერი 0,2 მიკრონიანი ფილტრის მეშვეობით, რათა ამოიღოთ ნარჩენები ან აგრეგატები, რომლებიც შეიძლება წარმოიქმნას სონიკაციის დროს.
9. ლიზის ბუფერი ახლა მზად არის გამოსაყენებლად.

 
შენიშვნა: ლიზისის ბუფერის ზუსტი შემადგენლობა და pH შეიძლება განსხვავდებოდეს ლიზირებული უჯრედების ან ქსოვილების და ქვედა დინების გამოყენების მიხედვით. ზემოაღნიშნული პროტოკოლი არის ზოგადი სახელმძღვანელო და შესაძლოა საჭირო გახდეს ოპტიმიზაცია კონკრეტული აპლიკაციებისთვის.
 
ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორები ჩვეულებრივ გამოიყენება უჯრედის დაშლისა და უჯრედშიდა მოლეკულების ექსტრაქციისთვის. ამიტომ ლიზისის მრავალი აპლიკაცია იყენებს ზონდის ტიპის სონიკას არა მხოლოდ ლიზის ბუფერის მოსამზადებლად, არამედ უჯრედის მექანიკური დაშლისა და ექსტრაქციისთვის.
ეს ხდის ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორების მრავალმხრივ იარაღს ლაბორატორიებისთვის და ხსნის ულტრაბგერითი აპარატების ფართო გამოყენებას მიკრობიოლოგიაში, ბიოტექნოლოგიასა და სიცოცხლის მეცნიერებაში.

ულტრაბგერითი ლაბორატორია homogenizers

Hielscher Ultrasonics აწარმოებს და აწვდის ულტრაბგერით ჰომოგენიზატორებს და ზონდებს (სონოტროდები) სხვადასხვა სიმძლავრის რეიტინგებით და ნიმუშის მოცულობით. ეს საშუალებას გვაძლევს შემოგთავაზოთ ყველაზე შესაფერისი ულტრაბგერითი დამრღვევი თქვენი ნიმუშის მომზადებისთვის. ჩვენ ფოკუსირებული ვართ უმაღლესი ხარისხის, მომხმარებლისთვის გამორჩეული კომფორტისა და სანდო ზონირების შედეგებზე. ყველა ციფრული ულტრაბგერითი აღჭურვილია ჭკვიანი პროგრამული უზრუნველყოფის, პროგრამირება და წინასწარი დაყენება sonication პროტოკოლები, ბრაუზერის დისტანციური მართვა, ტემპერატურის კონტროლი, ნიმუში განათება, ისევე როგორც მონაცემთა ავტომატური ჩაწერა ჩაშენებული SD-ბარათზე.

დიზაინი, წარმოება და კონსულტაცია – ხარისხი დამზადებულია გერმანიაში

Hielscher ულტრაბგერითები ცნობილია მათი უმაღლესი ხარისხისა და დიზაინის სტანდარტებით. გამძლეობა და მარტივი ოპერაცია საშუალებას იძლევა ჩვენი ულტრაბგერითი აპარატების გლუვი ინტეგრაცია სამრეწველო ობიექტებში. უხეში პირობები და მომთხოვნი გარემო ადვილად უმკლავდება Hielscher ულტრაბგერითებს.

Hielscher Ultrasonics არის ISO სერთიფიცირებული კომპანია და განსაკუთრებული აქცენტი კეთდება მაღალი ხარისხის ულტრაბგერაზე, რომელიც აღჭურვილია უახლესი ტექნოლოგიით და მომხმარებლის კეთილგანწყობით. რა თქმა უნდა, Hielscher ულტრაბგერითები შეესაბამება CE და აკმაყოფილებს UL, CSA და RoHs მოთხოვნებს.

The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators: