Ultrasonic Preparation of Platelet Rich Serum
- Plasma kaya trombosit (PRP) adalah plasma darah yang telah diperkaya dengan tredit, yang digunakan untuk perawatan medis dan estetik.
- Lisis dan pengkondisian ultrasonik adalah metode yang sangat efektif untuk menyiapkan plasma kaya trombosit.
- Hielscher Ultrasonics menawarkan berbagai sistem ultrasonik yang sesuai dengan persyaratan perawatan darah (misalnya untuk persiapan ruang bersih di dalam dan di luar).
serum kaya trombosit
Sonikasi adalah metode yang andal dan mudah untuk melisiskan trombosit dalam serum darah autologus untuk melepaskan faktor pertumbuhan. Fraksi turunan trombosit – juga dikenal sebagai autologus conditioned serum (ACS) – digunakan untuk perbaikan jaringan atau perawatan estetika. Untuk mendapatkan hasil yang optimal, PRP diperkaya sebelum injeksi.
Untuk menyiapkan plasma yang diperkaya dengan faktor pertumbuhan sel, sonikasi adalah metode yang sangat efektif dan efisien untuk melisiskan membran sel dan melepaskan hampir seluruh faktor pertumbuhan sel dari trombosit. Dengan lisis dan pengkondisian ultrasonik, bahkan darah anti-koagulasi dapat digunakan.
Pengkondisian PRP melalui sonikasi adalah cara yang nyaman dan hemat biaya untuk menghasilkan faktor pertumbuhan terkonsentrasi.
Lisis ultrasonik plasma kaya trombosit (PRP)
Efek Lisis Ultrasonik
Pengobatan ultrasonik serum darah menghasilkan lisis homogen trombosit untuk melepaskan faktor pertumbuhan yang terperangkap (faktor pertumbuhan AB (PDGF-AB), faktor pertumbuhan AA (PDGF-AA), faktor pertumbuhan BB (PDGF-BB), faktor pertumbuhan endotel vaskular (VEGF), faktor pertumbuhan transformasi β (TGF-β), faktor pertumbuhan epidermis (EGF), faktor pertumbuhan seperti insulin (IGF), faktor pertumbuhan sel epitel EKG dan faktor pertumbuhan fibroblastik (FGF)). Trombosit dan butiran alfanya terganggu oleh sonikasi, menggunakan fenomena kavitasi akustik. Menggunakan kavitasi ultrasonik untuk lisis trombosit mengurangi kemungkinan dampak negatif pada aktivitas faktor pertumbuhan dari metode beku-cair berulang.
Protokol Persiapan PRP Ultrasonik
Sekitar 16mL sampel darah autologus segar yang dikumpulkan dibalikkan dengan lembut 8-10 kali dalam tabung sehingga darah dan antikoagulan tercampur dengan baik. Setelah itu, sampel disentrifugasi pada 1800 g selama 20 menit pada suhu kamar. Setelah sentrifugasi, trombosit dan sel mononuklear membangun lapisan keputihan di bagian bawah lapisan plasma, yang dikenal sebagai plasma kaya trombosit (PRP). Lapisan atas dikenal sebagai plasma miskin trombosit (PPP). Sel-sel mononuklear dapat dikeluarkan atau tetap berada di sampel. Seringkali, sel mononuklear tetap berada dalam sampel PRP untuk menghindari langkah-langkah tambahan, yang menanggung risiko kontaminasi.
Catatan: Perawatan ultrasonik PRP autologus harus dilakukan dalam kondisi steril.
PRP dan PPP dipisahkan dan dikumpulkan. Untuk PPP, larutan kalsium klorida 1.5mL 10% ditambahkan, sedangkan etanol PRP 0.5mL 5% ditambahkan. Kedua suspensi diaduk dengan lembut dan dibiarkan selama 5 menit pada suhu kamar. Akhirnya, 1mL PPP ditambahkan ke suspensi PRP dan dibiarkan berdiri sampai gumpalan fibrin terbentuk.
Perawatan ultrasonik: Karena gel trombosit yang terbentuk bertindak sebagai reservoir untuk faktor pertumbuhan yang dilepaskan, gel fibrin harus terganggu untuk melepaskan faktor pertumbuhan yang tersedia. Parameter untuk lisis ultrasonik dan pelepasan faktor pertumbuhan adalah sebagai berikut: Sonikasi dengan UP200Ht atau UP200St (200W, 26kHz) dengan sonotrode S26d2 sampel di dalam tabung. Untuk menghindari panas berlebih dari sampel darah, sonikasi dapat dilakukan dalam siklus berdenyut (misalnya 10 detik aktif, 30 detik mati). Sampel harus ditempatkan di atas es untuk pendinginan sehingga suhu dijaga secara optimal antara 2 – 5 derajat Celcius. Setelah sonikasi, sampel disentrifugasi pada 16000 g selama 5 menit. Supernatan dikumpulkan dan dapat disimpan pada suhu -70°C.
Konsentrasi trombosit dalam fraksi PRP diperkaya 1,7 – 4,5 kali lipat dalam metode sonikasi jika dibandingkan dengan literatur jumlah trombosit rata-rata dalam darah utuh.
PRP telah dikombinasikan dengan terapi sel punca yang diturunkan dari adiposa (Sel induk autologus yang dilepaskan secara ultrasonik dari jaringan adiposa, dicampur dengan PRP, dan disuntikkan kembali ke jaringan pasien untuk diperbaiki).
Peralatan Ultrasonik
Hielscher Ultrasonics adalah ahli untuk teknologi ultrasonik yang canggih dan andal. Perangkat ultrasonik kami digunakan di seluruh dunia untuk lisis, ekstraksi, dan persiapan sampel – secara langsung dan tidak langsung. AUTOCLAVABLE serta Langsung buang Aksesoris memastikan a bebas kontaminasi Pengobatan sampel darah autologus. Sebagian besar sistem kami dapat digunakan untuk lisis ultrasonik sel induk dan PRP, yang membuat perangkat ultrasonik kami secara ekonomis bahkan lebih efisien.
Tabel di bawah ini mencantumkan perangkat ultrasonik kami, yang cocok untuk persiapan plasma kaya trombosit, dan volume sampel yang direkomendasikan, masing-masing. Ultrasonicator yang lebih besar dan sistem yang disesuaikan juga tersedia.
| Perangkat | Kekuatan [W] | Sering [kHz] | Jenis | Volume [mL] | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| VialTweeter | 200 | 26 | berdiri sendiri | 0.5 | – | 1.5 |
| UP50H | 50 | 30 | genggam atau standmounted | 0.01 | – | 250 |
| UP100H | 100 | 30 | genggam atau standmounted | 0.01 | – | 500 |
| UP200Ht | 200 | 26 | genggam atau standmounted | 01. | – | 1000 |
| UP200St | 200 | 26 | standmounted | 01. | – | 1000 |
| UP400St | 400 | 24 | standmounted | 5.0 | – | 2000 |
| UP200St-SonoStep | 200 | 26 | berdiri sendiri | 30 | – | 500 |
| GDmini2 | 200 | 26 | aliran bebas kontaminasi sel | |||
Silahkan hubungi kami hari ini! Kami akan dengan senang hati membantu Anda menemukan perangkat ultrasonik yang optimal!
Hubungi Kami! / Tanya Kami!
GDmini2 di UP200St-TD Transducer (200 watt)
Literatur / Referensi
- Fortunato, TM; Beltrami, Ch.; Emanueli, C.; De Bank, PA:; Pula, G. (2016): Gel lisat trombosit dan nenek moyang endotel merangsang pembentukan jaringan mikrovaskular in vitro: implikasi rekayasa jaringan. Wakil Ilmiah 6, 2016.
- Hamid, MSA; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): Plasma Kaya Trombosit (PRP) untuk Cedera Otot Akut: Tinjauan Sistematis. PLOS ONE Volume 9, Edisi 2, 2014.
Fakta-fakta yang Patut Diketahui
Plasma Kaya Trombosit
Plasma kaya trombosit mengandung faktor pertumbuhan AB (PDGF-AB), faktor pertumbuhan turunan trombosit AA (PDGF-AA), faktor pertumbuhan turunan trombosit BB (PDGF-BB), faktor pertumbuhan endotel vaskular (VEGF), faktor pertumbuhan transformasi β (TGF-β), faktor pertumbuhan epidermis (EGF), faktor pertumbuhan seperti insulin (IGF), faktor pertumbuhan sel epitel EKG dan faktor pertumbuhan fibroblastik (FGF), yang merupakan stimulan penting untuk pertumbuhan dan pembaruan sel.
Serum Terkondisi Autologus (ACS)
Autologous Conditioned Plasma (ACP) adalah plasma kaya trombosit yang diekstraksi dari darah autologus yang digunakan untuk mendukung regenerasi dalam berbagai kondisi ortopedi dan prosedur bedah. Serum terkondisi disiapkan dengan memisahkan plasma dari komponen darah lainnya (seperti eritrosit), dan memusatkan itu. ACP adalah plasma kaya trombosit (PRP). PRP adalah istilah umum untuk jenis plasma yang mengandung konsentrasi trombosit yang jauh lebih tinggi jika dibandingkan dengan darah utuh. Itu diekstraksi dari darah utuh. Komponen utama ACP meliputi trombosit (trombosit), dan beberapa faktor pertumbuhan yang berperan penting dalam proses penyembuhan. Tidak seperti formulasi plasma kaya trombosit lainnya, ACP dibedakan oleh konsentrasi sel darah putih yang rendah seperti granulosit neutrofil yang dapat merugikan proses penyembuhan ketika hadir dalam konsentrasi tinggi.
Suntikan plasma kaya trombosit
Plasma kaya trombosit digunakan sebagai injeksi dalam pengobatan regeneratif serta dalam prosedur kosmetik. Penerapan PRP menjanjikan percepatan penyembuhan otot dan pemulihan otot yang signifikan. Selain itu, berhasil digunakan untuk mengobati peradangan, radang sendi, nyeri, luka, penyembuhan lambat luka terbuka, dan luka bakar kulit yang serius. PRP mengandung faktor pertumbuhan tingkat tinggi, yang merangsang dan melindungi sel-sel penyembuhan sehingga jaringan yang rusak diperbaiki.
Untuk perawatan kosmetik, PRP telah terbukti efektif untuk merangsang pertumbuhan rambut, pembaruan kulit (juga dikenal sebagai pengobatan vampir).
Faktor Pertumbuhan yang Diturunkan dari Trombosit (PDGF)
Istilah faktor pertumbuhan turunan trombosit (PDGF) mengacu pada faktor PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C dan PDGF-D. Ini adalah jaringan pensinyalan dari empat ligan (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C dan PDGF-D), dan dua reseptor, PDGFR-alfa dan PDGFR-beta.
Faktor pertumbuhan, atau protein, mengatur pertumbuhan dan pembelahan sel. Sebagai mitogen utama yang ditemukan dalam serum mamalia, yang dilepaskan dari trombosit selama pembentukan gumpalan, mitogen memainkan peran penting dalam pembentukan pembuluh darah (angiogenesis), pertumbuhan pembuluh darah dari jaringan pembuluh darah yang sudah ada.