Ultrasonic Preparation of Platelet Rich Serum
- Trombosit kaya plasma (PRP) adalah plasma darah yang telah diperkaya dengan trombosit, yang digunakan untuk perawatan medis dan estethic.
- Ultrasonic lisis dan pendingin merupakan metode yang sangat efektif untuk mempersiapkan plasma kaya trombosit.
- Hielscher Ultrasonics menawarkan berbagai sistem ultrasonik cocok dengan persyaratan pengobatan darah (misalnya untuk di dalam dan di luar persiapan ruang bersih).
Trombosit Kaya Serum
Sonication adalah metode yang dapat diandalkan dan mudah untuk melisiskan trombosit dalam serum darah autologous dalam rangka untuk melepaskan faktor pertumbuhan. Fraksi platelet-derived – juga dikenal sebagai autologous AC serum (ACS) – digunakan untuk perbaikan jaringan atau perawatan estetik. Untuk mendapatkan hasil yang optimal, PRP yang diperkaya sebelum injeksi.
Dalam rangka mempersiapkan plasma diperkaya dengan faktor-faktor pertumbuhan sel, sonikasi adalah metode yang sangat efektif dan efisien untuk melisiskan membran sel dan melepaskan hampir lengkap faktor pertumbuhan sel dari trombosit. Dengan lisis ultrasonik dan pendingin, bahkan darah anti-digumpalkan dapat digunakan.
Pengkondisian PRP melalui sonikasi adalah cara yang nyaman dan hemat biaya untuk menghasilkan faktor pertumbuhan terkonsentrasi.
Ultrasonic Efek Lisis
pengobatan ultrasonik hasil serum darah dalam lisis homogen trombosit untuk melepaskan faktor pertumbuhan terperangkap (faktor pertumbuhan AB (PDGF-AB), faktor pertumbuhan AA (PDGF-AA), faktor pertumbuhan BB (PDGF-BB), pembuluh darah faktor endotel pertumbuhan (VEGF), mengubah pertumbuhan β faktor (TGF-β), faktor pertumbuhan epidermal (EGF), insulin-like growth factor (IGF), epitel pertumbuhan sel-sel faktor ECGF dan faktor pertumbuhan fibroblastik (FGF)). Trombosit dan mereka alpha-butiran terganggu oleh sonikasi, menggunakan fenomena kavitasi akustik. Menggunakan kavitasi ultrasonik untuk lisis platelet mengurangi dampak negatif yang mungkin pada aktivitas faktor pertumbuhan metode freeze-thaw berulang.
Protokol untuk Ultrasonic PRP Persiapan
Approx. 16mL sampel darah autologous dikumpulkan segar terbalik lembut 8-10 kali dalam sebuah tabung sehingga darah dan antikoagulan yang baik dicampur. Setelah itu, sampel disentrifugasi pada 1800 g selama 20 menit pada suhu kamar. Setelah sentrifugasi tersebut, trombosit dan sel mononuklear membangun lapisan keputihan di bagian bawah lapisan plasma, yang dikenal sebagai plasma yang kaya platelet (PRP). Lapisan atas yang dikenal sebagai plasma platelet-miskin (PPP). Sel-sel mononuklear dapat dihapus atau tetap dalam sampel. Seringkali, sel-sel mononuklear tetap dalam sampel PRP untuk menghindari langkah-langkah tambahan, yang menanggung resiko kontaminasi.
Catatan: Perlakuan ultrasonik PRP autologus harus dilakukan di bawah kondisi steril.
PRP dan PPP dipisahkan dan dikumpulkan. Untuk PPP, 1.5ml 10% larutan kalsium klorida ditambahkan, sementara untuk PRP 0.5ml 5% etanol ditambahkan. Kedua suspensi gelisah lembut dan didiamkan selama 5 menit pada suhu kamar. Akhirnya, 1mL PPP ditambahkan ke suspensi PRP dan didiamkan sampai bentuk bekuan fibrin.
pengobatan ultrasonik: Sebagai gel tindakan trombosit dibentuk sebagai reservoir untuk faktor pertumbuhan dilepaskan, gel fibrin harus terganggu untuk melepaskan faktor pertumbuhan yang tersedia. Parameter untuk lisis ultrasonik dan pertumbuhan rilis faktor adalah sebagai berikut: sonicate dengan UP200Ht atau UP200St (200W, 26kHz) dengan sonotrode S26d2 sampel dalam tabung. Untuk menghindari overheating dari sampel darah, sonikasi dapat dilakukan di berdenyut siklus (misalnya 10 detik. Pada, 30 detik. Off). Sampel harus ditempatkan di atas es untuk mendinginkan sehingga suhu optimal disimpan antara 2 – 5 ° C. Setelah sonikasi, sampel disentrifugasi pada 16000 g selama 5 menit. pada suhu kamar. Supernatan dikumpulkan dan dapat disimpan pada -70 ° C.
Konsentrasi trombosit dalam fraksi PRP diperkaya 1,7 – 4,5 kali lipat dalam metode disonikasi jika dibandingkan dengan jumlah trombosit rata-rata sastra di seluruh darah.
PRP telah dikombinasikan dengan terapi sel induk adiposa yang diturunkan (ultrasonically dirilis sel induk autologous dari jaringan adiposa, Dicampur dengan PRP, dan disuntikkan kembali ke dalam jaringan pasien untuk perbaikan).
Peralatan Ultrasonik
Hielscher Ultrasonics ahli untuk teknologi ultrasonik canggih dan dapat diandalkan. perangkat ultrasonik kami digunakan di seluruh dunia untuk lisis, ekstraksi dan persiapan sampel – oleh langsung dan tidak langsung. AUTOCLAVABLE sebaik sekali pakai aksesoris memastikan bebas kontaminasi pengobatan sampel darah autologous. Sebagian besar sistem kami dapat digunakan untuk lisis ultrasonik sel induk dan PRP, yang membuat perangkat ultrasonik kami ekonomis bahkan lebih efisien.
Tabel di bawah ini daftar perangkat ultrasonik kami, yang cocok untuk persiapan plasma kaya trombosit, dan volume sampel direkomendasikan mereka, masing-masing. ultrasonicators lebih besar dan sistem disesuaikan tersedia, juga.
Perangkat | Kekuatan [W] | Sering [kHz] | Jenis | Volume [mL] | ||
---|---|---|---|---|---|---|
VialTweeter | 200 | 26 | berdiri sendiri | 0.5 | – | 1.5 |
UP50H | 50 | 30 | genggam atau standmounted | 0.01 | – | 250 |
UP100H | 100 | 30 | genggam atau standmounted | 0.01 | – | 500 |
UP200Ht | 200 | 26 | genggam atau standmounted | 01. | – | 1000 |
UP200St | 200 | 26 | standmounted | 01. | – | 1000 |
UP400St | 400 | 24 | standmounted | 5.0 | – | 2000 |
UP200St-SonoStep | 200 | 26 | berdiri sendiri | 30 | – | 500 |
GDmini2 | 200 | 26 | aliran bebas kontaminasi sel |
Silahkan hubungi kami hari ini! Kami akan senang untuk membantu Anda menemukan perangkat ultrasonik optimal!
Hubungi Kami! / Tanya Kami!
Literatur / Referensi
- Fortunato, T. M .; Beltrami, Ch .; Emanueli, C .; De Bank, P.A :; Pula, G. (2016): trombosit lisat gel dan progenitor endotel merangsang pembentukan jaringan mikrovaskuler in vitro: implikasi rekayasa jaringan. Sci. Rep. 6, 2016.
- Hamid, M.S.A .; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): Platelet-Kaya Plasma (PRP) untuk Cedera Otot Akut: Sebuah Systematic Review. PLoS ONE Volume 9, Edisi 2, 2014.
Fakta-fakta yang Patut Diketahui
Platelet Kaya Plasma
plasma kaya trombosit mengandung faktor pertumbuhan AB (PDGF-AB), platelet diturunkan faktor pertumbuhan AA (PDGF-AA), platelet diturunkan faktor pertumbuhan BB (PDGF-BB), faktor pertumbuhan endotel vaskular (VEGF), mengubah β faktor pertumbuhan (TGF -β), faktor pertumbuhan epidermal (EGF), insulin-like growth factor (IGF), sel-sel epitel faktor pertumbuhan ECGF dan faktor pertumbuhan fibroblastik (FGF), yang stimulan penting untuk pertumbuhan sel dan pembaharuan.
Autologus AC Serum (ACS)
Autologous AC plasma (ACP) adalah plasma kaya platelet yang diekstrak dari darah autologous yang digunakan untuk mendukung regenerasi dalam berbagai kondisi ortopedi dan prosedur bedah. Serum AC disiapkan dengan memisahkan plasma dari komponen darah lainnya (seperti eritrosit), dan berkonsentrasi. ACP adalah plasma kaya platelet (PRP). PRP adalah istilah umum untuk jenis plasma yang mengandung konsentrasi trombosit secara signifikan lebih tinggi bila dibandingkan dengan seluruh darah. Ia diekstrak dari seluruh darah. Komponen utama dari ACP termasuk trombosit (trombosit), dan beberapa faktor pertumbuhan yang memainkan peran penting dalam proses penyembuhan. Tidak seperti formulasi plasma lain yang kaya platelet, ACP dibedakan oleh konsentrasi rendah sel darah putih seperti granulosit neutrofil yang dapat merugikan proses penyembuhan ketika hadir dalam konsentrasi tinggi.
Platelet-Rich Plasma Suntikan
plasma kaya trombosit digunakan sebagai injeksi dalam pengobatan regeneratif serta dalam prosedur kosmetik. Penerapan PRP menjanjikan percepatan yang signifikan penyembuhan otot dan pemulihan otot. Selain itu, berhasil digunakan untuk mengobati peradangan, arthritis, nyeri, luka, lambat penyembuhan luka terbuka, dan luka bakar kulit yang serius. PRP mengandung tingkat tinggi faktor pertumbuhan, yang merangsang dan melindungi sel-sel penyembuhan ao bahwa jaringan yang rusak diperbaiki.
Untuk treaments kosmetik, PRP telah terbukti efektif untuk merangsang pertumbuhan rambut, peremajaan kulit (juga dikenal sebagai pengobatan vampir).
Platelet-Derived Growth Factor (PDGF)
Istilah platelet-derived growth factor (PDGF) mengacu pada faktor-faktor PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C dan PDGF-D. Ini adalah jaringan sinyal dari empat ligan (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C dan PDGF-D), dan dua reseptor, PDGFR-alpha dan PDGFR-beta.
faktor pertumbuhan, atau protein, mengatur pertumbuhan dan pembelahan sel. Sebagai mitogen yang ditemukan dalam serum mamalia, yang dilepaskan dari trombosit selama pembentukan gumpalan, memainkan peran penting dalam pembentukan pembuluh darah (angiogenesis), pertumbuhan pembuluh darah dari jaringan pembuluh darah yang sudah ada.