Elusi Antibodi oleh Sonikasi menggunakan Sonikasi High-Throughput

Kromatografi afinitas adalah teknik yang ampuh untuk pemurnian protein, yang membutuhkan elusi non-spesifik yang dibantu secara ultrasonik adalah teknik persiapan sampel yang andal untuk mendapatkan antibodi dari kromatografi afinitas. Elusi antibodi target yang efisien dan dapat direproduksi yang terikat pada matriks afinitas meningkat secara signifikan dengan sonikasi. UIP400MTP high-throughput plate-sonicator secara optimal cocok untuk mengencerkan jumlah sampel yang tinggi dalam pelat 96-well, microtiter dan multiwell serta memfasilitasi pemulihan antibodi dalam kromatografi afinitas.

Bagaimana Sonikasi memfasilitasi Elusi?

Menggunakan elusi non-spesifik ultrasonically intensif, pekerja laboratorium dan ilmuwan dapat secara efisien memulihkan antibodi dimurnikan dari kolom kromatografi afinitas. Antibodi yang dimurnikan ini dijalankan melalui aplikasi hilir di berbagai bidang, seperti imunologi, bioteknologi, dan diagnostik medis.

Elusi adalah langkah preparasi sampel yang biasa digunakan untuk Kromatografi Afinitas: Kromatografi Afinitas memanfaatkan interaksi yang sangat spesifik antara molekul target (seperti antibodi) dan ligan yang diimobilisasi pada matriks kromatografi. Hal ini memungkinkan pemurnian selektif molekul target dari campuran kompleks menggunakan afinitas pengikatan spesifik molekul, misalnya antibodi.
Pengikatan spesifik antibodi: Antibodi sering dimurnikan menggunakan kromatografi afinitas, di mana mereka secara selektif mengikat ligan yang diimobilisasi pada resin kromatografi. Ini bisa berupa antigen, protein A / G, atau molekul lain yang berinteraksi secara khusus dengan antibodi yang diinginkan.
Elusi: Setelah mengikat antibodi target ke matriks, langkah selanjutnya melibatkan eluting (atau mencuci) antibodi terikat dari resin. Langkah elusi ini biasanya melibatkan mengganggu pengikatan spesifik antara antibodi dan ligan. Langkah ini dapat dilengkapi dengan sonikasi.
Probe ultrasonik UP50H adalah homogenizer laboratorium yang sering digunakan sebagai pengganggu sel, disperser dan emulsifier di laboratorium.Ultrasonically dibantu elusi non-spesifik: Tidak seperti metode elusi spesifik yang hanya mengganggu interaksi antibodi-ligan, metode elusi non-spesifik mengganggu semua interaksi pada resin, termasuk yang tidak spesifik. Ini dapat menguntungkan ketika berhadapan dengan kontaminan yang terikat kuat yang dapat mengganggu proses pemurnian. Inilah sonikasi yang dimainkan! Gelombang ultrasonik digunakan untuk menghasilkan gelembung kavitasi di buffer elusi. Ketika gelembung-gelembung ini runtuh di dekat matriks resin, mereka menghasilkan gaya geser lokal yang intens dan microstreaming. Gangguan mekanis ini membantu memutus interaksi non-spesifik antara antibodi dan ligan, memfasilitasi elusi antibodi terikat dari matriks.

Pelat 96-sumur dan pelat multiwell lainnya paling baik diproses menggunakan UIP400MTP sonikator. Sistem ultrasonik ini sangat ideal untuk lisis, fragmentasi DNA dan sampel pemrosesan pelarutan sel dalam throughput tinggi.

Sonikator throughput tinggi UIP400MTP memfasilitasi elusi antibodi dan protein

Permintaan Informasi




Perhatikan Kebijakan pribadi.


 

Tutorial ini menjelaskan jenis sonikator apa yang terbaik untuk tugas persiapan sampel Anda seperti lisis, gangguan sel, isolasi protein, fragmentasi DNA dan RNA di laboratorium, analisis, dan penelitian. Pilih jenis sonikator yang ideal untuk aplikasi Anda, volume sampel, jumlah sampel, dan throughput. Hielscher Ultrasonics memiliki homogenizer ultrasonik yang ideal untuk Anda!

Cara Menemukan Sonicator Sempurna untuk Gangguan Sel dan Ekstraksi Protein dalam Sains dan Analisis

Gambar Mini Video

 

Keuntungan dari Ultrasonic Elution menggunakan Sonikasi

Elusi ultrasonik menawarkan beberapa keuntungan, terutama dalam konteks teknik pemurnian protein seperti kromatografi afinitas.
Misalnya, sonikasi unggul metode alternatif dalam hal integritas protein, pemulihan, kemurnian, fleksibilitas, dan efisiensi. Keuntungan ini membuat elusi ultrasonik pilihan yang lebih disukai untuk proses pemurnian protein, terutama dalam aplikasi di mana mempertahankan struktur protein dan aktivitas sangat penting. Selain itu, elusi ultrasonik menonjol karena kesederhanaan, efisiensi, fleksibilitas, dan kompatibilitasnya dengan berbagai protein dan matriks afinitas. Menerapkan gelombang ultrasound untuk mengganggu interaksi protein-matriks, elusi ultrasonik menawarkan metode yang lembut dan cepat untuk pemurnian protein, memastikan tingkat pemulihan yang tinggi dan menjaga integritas protein untuk aplikasi hilir.

Lebih lembut pada struktur protein: Elusi pH rendah melibatkan penggunaan buffer asam untuk mengganggu pengikatan antara protein target (misalnya, antibodi) dan matriks afinitas. Namun, paparan pH rendah dapat mengubah sifat protein, berpotensi membahayakan struktur dan aktivitas biologisnya. Sebaliknya, elusi ultrasonik terutama bergantung pada gangguan mekanis daripada denaturasi kimia, membuatnya lebih lembut pada struktur protein. Ini sangat menguntungkan ketika memurnikan protein halus atau antibodi yang sensitif terhadap perubahan pH.

  • Mengurangi Risiko Agregasi: Elusi pH rendah dapat meningkatkan risiko agregasi protein karena protein yang terbuka dan paparan daerah hidrofobik. Agregasi dapat menyebabkan hilangnya aktivitas protein dan kesulitan dalam pemrosesan hilir. Elusi ultrasonik, sebagai perbandingan, meminimalkan risiko agregasi dengan menggunakan kekuatan mekanik untuk mengganggu interaksi antara protein dan matriks afinitas tanpa secara signifikan mengubah konformasi asli protein.
  • Peningkatan Pemulihan dan Kemurnian: Elusi ultrasonik dapat mencapai tingkat pemulihan dan tingkat kemurnian yang lebih tinggi dibandingkan dengan metode elusi alternatif. Gangguan mekanis yang disediakan oleh ultrasonikasi secara efektif melepaskan protein terikat dari matriks afinitas sambil meminimalkan interaksi non-spesifik. Hal ini menghasilkan peningkatan pemulihan protein target dengan mengurangi kontaminasi dari molekul yang tidak terikat secara khusus, berkontribusi pada kemurnian fraksi elusi yang lebih tinggi.
  • Pemrosesan Throughput Tinggi: Hielscher Ultrasonics menawarkan berbagai sonikator untuk pemurnian protein yang dibantu ultrasound, elusi dan biopanning. Mikrotiter pelat-sonikator UIP400MTP memungkinkan pemrosesan massal sampel dalam 96-sumur dan pelat multiwell lainnya. VialTweeter sangat ideal untuk sonikasi simultan tanpa kerumitan hingga 10 tabung seperti botol Eppendorf dalam kondisi yang sama. CupHorn adalah sonikator serbaguna yang ideal untuk beberapa tabung, gelas kimia kecil dan kapal lainnya. Dan tentu saja, sonikator tipe probe klasik dengan microtips adalah alat laboratorium yang mapan untuk persiapan sampel. Berbagai produk Hielscher Ultrasonics memiliki sonikator ideal untuk pengaturan eksperimen Anda dan ukuran sampel Anda.
  • Fleksibilitas dan Kompatibilitas: Elusi ultrasonik kompatibel dengan berbagai protein dan matriks afinitas, menawarkan fleksibilitas dalam aplikasi pemurnian. Sebaliknya, elusi pH rendah mungkin tidak cocok untuk protein tertentu yang sensitif terhadap kondisi asam atau untuk matriks afinitas yang rentan terhadap degradasi atau pencucian pada pH rendah. Elusi ultrasonik memberikan alternatif yang lembut dan dapat diterapkan secara universal yang dapat disesuaikan dengan kebutuhan pemurnian spesifik tanpa mengorbankan integritas protein atau stabilitas matriks.
  • Waktu dan Efisiensi: Elusi ultrasonik biasanya membutuhkan waktu elusi yang lebih pendek dibandingkan dengan metode elusi lainnya. Pelepasan protein terikat yang cepat dan efisien yang difasilitasi oleh ultrasonikasi mengurangi waktu pemrosesan dan meningkatkan efisiensi pemurnian secara keseluruhan, menjadikannya pilihan yang menarik untuk aplikasi throughput tinggi atau ketika hasil sensitif waktu diperlukan.
96-Well Plate Sonicator UIP400MTP untuk lisis sel, ekstraksi DNA, fragmentasi DNA, pelarutan sel dan pemurnian protein.

Sonicator Pelat 96 Sumur UIP400MTP untuk sonikasi pelat multiwell, pelat PCR dan ELISA

 

VialTweeter di prosesor ultrasonik UP200ST

VialTweeter sonicator untuk sonikasi simultan dari 10 sampel, misalnya untuk mengganggu sel dan mengekstrak protein

Ultrasonically dibantu Biopanning

Biopanning adalah teknik penting dalam pemurnian antibodi, terutama ketika antibodi yang sangat spesifik untuk penelitian atau diagnostik medis harus diperoleh. Biopanning adalah proses di mana antibodi diisolasi dari campuran antibodi, yang disebut perpustakaan antibodi.

Bagaimana cara kerja Ultrasonic Biopanning?

Dimulai dengan perpustakaan antibodi, campuran berbagai antibodi. Setiap antibodi dicirikan oleh bentuk dan spesifisitas uniknya sendiri. Untuk analisis dan terapi, antibodi spesifik yang mengenali target tertentu, seperti virus atau sel kanker, harus diisolasi. Menggunakan biopanning, antibodi spesifik ini dapat diisolasi. Ultrasonication membantu memfasilitasi proses biopanning membuat pemurnian antibodi lebih efisien.

Dimulai dengan perpustakaan antibodi, antibodi biasanya ditampilkan pada permukaan bakteriofag, sel ragi, atau sistem tampilan lainnya. Perpustakaan ini mewakili beragam antibodi.
Pada langkah pertama, perpustakaan ini terkena molekul target Anda. Antibodi yang mengikat target akan menempel, sementara yang lain akan hanyut. Untuk menghilangkan antibodi yang tidak terikat, sampel dicuci beberapa kali dengan larutan buffer.

Sekarang, kami memiliki sampel yang hanya mengandung antibodi terikat. Namun, ini berarti antibodi masih melekat pada sistem tampilan mereka. Untuk membebaskan mereka, interaksi antibodi-ligan harus diputus. Langkah ini dikenal sebagai elusi. Sampel dapat dielusi menggunakan larutan yang mengganggu pengikatan, misalnya menggunakan buffer elusi tertentu, chaotropic, menurunkan nilai pH, menerapkan panas dll. Teknik elusi ini menghancurkan ikatan antibodi-ligan, tetapi juga dapat memperburuk antibodi itu sendiri. Itulah sebabnya sonikasi digunakan sebagai teknik alternatif untuk menghilangkan antibodi dengan lembut dari target mereka.

Setelah menyelesaikan langkah elusi, kami memperoleh antibodi murni, siap digunakan dalam penelitian, diagnostik, atau terapi.

Biopanning adalah teknik yang kuat dalam pemurnian antibodi dan elusi ultrasonik memfasilitasi dan mengintensifkan efektivitas – menghasilkan antibodi yang sangat murni dan tidak rusak. Biopanning ultrasonik memungkinkan para ilmuwan untuk mengisolasi antibodi yang sangat spesifik dari sampel kompleks, membuka pintu untuk berbagai aplikasi.

Sonicators untuk Pemurnian Antibodi

Hielscher sonicators adalah alat mapan yang digunakan di fasilitas penelitian terbaik di seluruh dunia. Dihargai karena desain canggih dan kinerja superior mereka, sonikator Hielscher dianggap sebagai alat laboratorium yang sangat diperlukan di bidang bioteknologi dan biologi molekuler. Hielscher Ultrasonics menawarkan sonikator untuk sampel tunggal serta persiapan sampel throughput tinggi, yang memfasilitasi pemurnian antibodi yang efisien dan elusi molekul yang terikat target, dan memungkinkan biopanning yang efisien untuk mengisolasi antibodi spesifik dengan presisi dan kecepatan.
Dalam konteks pemurnian antibodi, Hielscher sonicators unggul dalam memfasilitasi langkah-langkah pencucian dan elusi dengan secara efisien menghilangkan antibodi yang tidak terikat sambil menjaga integritas kompleks yang terikat target. Kontrol dan skalabilitasnya yang tepat memungkinkan kondisi pemrosesan yang disesuaikan, memastikan hasil pemurnian yang optimal di berbagai volume dan kompleksitas sampel.
Hielscher sonicators mewakili inovasi teknologi dalam pengolahan ultrasonik, menawarkan kemampuan yang tak tertandingi untuk pemurnian antibodi, elusi, dan biopanning. Dengan presisi, keandalan, dan kemudahan operasi, berbagai sistem ultrasonik menawarkan efisiensi dan fleksibilitas optimal untuk penelitian biofarmasi, diagnostik, dan terapi.
Hubungi kami sekarang untuk mempelajari lebih lanjut tentang Hielscher sonicators untuk pemurnian antibodi, elusi, dan biopanning! Staf teknis kami yang berpengalaman dengan senang hati mendiskusikan aplikasi terkait antibodi Anda!

Mengapa Hielscher Ultrasonics?

  • efisiensi yang sangat tinggi
  • Teknologi mutakhir
  • handal & sangat kuat
  • Kontrol proses yang dapat disesuaikan dan akurat
  • setumpuk & inline
  • untuk volume apa pun
  • perangkat lunak cerdas
  • Fitur pintar (misalnya, dapat diprogram, protokol data, remote control)
  • Mudah dan aman untuk beroperasi
  • biaya pemeliharaan yang rendah
  • CIP (bersih-di-tempat)

Desain, Manufaktur, dan Konsultasi – Kualitas Buatan Jerman

Ultrasonicators Hielscher terkenal dengan kualitas tertinggi dan standar desainnya. Kekokohan dan pengoperasian yang mudah memungkinkan integrasi yang lancar dari ultrasonicators kami ke dalam fasilitas industri. Kondisi kasar dan lingkungan yang menuntut mudah ditangani oleh ultrasonicators Hielscher.

Hielscher Ultrasonics adalah perusahaan bersertifikat ISO dan menempatkan penekanan khusus pada ultrasonicators berkinerja tinggi yang menampilkan teknologi canggih dan keramahan pengguna. Tentu saja, ultrasonicators Hielscher sesuai dengan CE dan memenuhi persyaratan UL, CSA dan RoHs.

Hubungi Kami! / Tanya Kami!

Meminta informasi lebih lanjut

Silakan gunakan formulir di bawah ini untuk meminta informasi tambahan tentang prosesor ultrasonik, aplikasi dan harga. Kami akan dengan senang hati mendiskusikan proses Anda dengan Anda dan menawarkan sistem ultrasonik yang memenuhi kebutuhan Anda!









Harap dicatat bahwa Kebijakan pribadi.


Video menunjukkan sistem persiapan sampel ultrasonik UIP400MTP, yang memungkinkan persiapan sampel yang andal dari setiap pelat multi-sumur standar menggunakan ultrasound intensitas tinggi. Aplikasi khas UIP400MTP termasuk lisis sel, DNA, RNA, dan geser kromatin serta ekstraksi protein.

Ultrasonicator UIP400MTP untuk sonikasi pelat multi-sumur

Gambar Mini Video

Perbandingan Ultrasonic Elution vs Teknik Elution Tradisional

  1. Elusi Gradien: Dalam elusi gradien, kekuatan pengikatan antara protein target dan matriks afinitas secara bertahap dikurangi dengan mengubah komposisi buffer elusi. Ini dapat melibatkan faktor-faktor yang mengubah seperti pH, konsentrasi garam, atau konsentrasi ligan yang bersaing. Elusi gradien memungkinkan penyempurnaan kondisi elusi untuk melepaskan protein target secara selektif sambil meminimalkan pengikatan non-spesifik.
    Keuntungan dari Ultrasonic Elution: Elusi ultrasonik menawarkan pelepasan protein terikat yang lebih cepat dan seragam dibandingkan dengan elusi gradien. Sementara elusi gradien membutuhkan optimasi dan pemantauan kondisi elusi yang cermat, elusi ultrasonik menyediakan metode yang lebih sederhana dan lebih efisien untuk pemulihan protein.
  2. Elusi Kompetitif: Dalam elusi kompetitif, konsentrasi tinggi ligan yang bersaing dimasukkan ke dalam buffer elusi untuk mengganggu pengikatan antara protein target dan matriks afinitas. Ligan yang bersaing bersaing dengan protein target untuk mengikat situs pada matriks, sehingga memindahkan protein dan melepaskannya ke dalam eluat.
    Keuntungan dari Ultrasonic Elution: Elusi ultrasonik menawarkan alternatif yang lebih lembut dan lebih serbaguna untuk elusi kompetitif. Elusi kompetitif mungkin memerlukan penggunaan konsentrasi tinggi agen chaotropic (yaitu co-zat terlarut yang mengganggu jaringan ikatan hidrogen antara molekul air dan mengurangi stabilitas keadaan asli protein dengan melemahkan efek hidrofobik) atau bahan kimia keras, yang dapat mempengaruhi stabilitas protein dan aktivitas. Sebaliknya, elusi ultrasonik memberikan gangguan mekanis tanpa perlu agen kimia tambahan, menjaga integritas protein dan memastikan tingkat pemulihan yang tinggi.
  3. Elusi yang diinduksi suhu: Elusi yang diinduksi suhu melibatkan perubahan suhu buffer elusi untuk mengganggu pengikatan antara protein target dan matriks afinitas. Ini dapat dicapai dengan menaikkan atau menurunkan suhu, tergantung pada interaksi matriks protein tertentu.
    Keuntungan dari Ultrasonic Elution: Elusi ultrasonik menawarkan metode yang lebih cepat dan terkontrol untuk elusi protein dibandingkan dengan metode yang diinduksi suhu. Sementara elusi yang diinduksi suhu mungkin memerlukan kontrol gradien suhu yang tepat dan waktu kesetimbangan yang lebih lama, elusi ultrasonik memberikan gangguan mekanis langsung, menghasilkan waktu elusi yang lebih pendek dan peningkatan efisiensi.
  4. Elusi enzimatik: Elusi enzimatik menggunakan enzim spesifik yang membelah ikatan antara protein target dan matriks afinitas, melepaskan protein ke dalam eluat. Metode ini sangat berguna untuk protein yang terikat erat dengan matriks atau untuk aplikasi yang membutuhkan kontrol yang tepat atas kondisi elusi.
    Keuntungan dari Ultrasonic Elution: Elusi ultrasonik menawarkan alternatif non-enzimatik dan bebas bahan kimia untuk elusi enzimatik. Sementara elusi enzimatik mungkin memerlukan optimalisasi konsentrasi enzim, waktu inkubasi, dan kondisi pH, elusi ultrasonik menyediakan metode yang mudah dan dapat diterapkan secara universal untuk pemulihan protein tanpa memerlukan reagen tambahan atau peralatan khusus.
Sonicator untuk persiapan sampel throughput tinggi! Sonikator pelat UIP400MTP memfasilitasi lisis, ekstraksi protein, fragmentasi DNA, dan pelarutan sel sampel biologis dalam pelat 96 sumur.

Plat sonikator UIP400MTP untuk pelat 96-sumur, pelat mikrotiter, dan pelat multi-sumur.



Literatur/referensi


Ultrasonik kinerja tinggi! Rangkaian produk Hielscher mencakup spektrum penuh dari ultrasonicator laboratorium kompak di atas unit bench-top hingga sistem ultrasonik industri penuh.

Hielscher Ultrasonics memproduksi homogenizers ultrasonik kinerja tinggi dari laboratorium hingga ukuran industri.


Kami akan dengan senang hati mendiskusikan proses Anda.

Mari kita hubungi.