Hielscher ուլտրաձայնային տեխնոլոգիա

Ուլտրաձայնային սպիտակուցը հյուսվածքից եւ բջջային մշակույթներից

  • Protein արդյունահանման էական նմուշ պատրաստման քայլ է Պրոտեոմիկա.
  • Սպիտակուցներ կարող է արդյունահանվող գործարանը եւ կենդանական հյուսվածքների, խմորասնկերի եւ միկրոօրգանիզմների.
  • Sonication է հուսալի, արդյունավետ սպիտակուցը արդյունահանման մեթոդը տալով բարձր սպիտակուցային զիջում է կարճ արդյունահանման ժամանակ:

 

Սպիտակուցների արդյունահանումը հյուսվածքներից և բջիջներից

Սպիտակուցը հանույթ հյուսվածքների եւ կուլտուրական բջիջների կարեւոր նմուշ պատրաստման քայլ է, որը կատարվում ընթացքում բազմաթիվ կենսաքիմիական եւ վերլուծական մեթոդների, ինչպիսիք են ELISA, էջ, արեւմտյան blotting, Զանգվածային սպեկտրաչափական, կամ սպիտակուցը մաքրում. Ուլտրաձայնային բջջային խզում, lysis եւ արդյունահանման Սա հենց վերահսկելի տեխնիկան է ապահովել բարձր զիջում սպիտակուցներ:

Սպիտակուցը արդյունահանման կենդանական հյուսվածքի

Ընդհանուր չափի հյուսվածքների պատրաստման համար (օրինակ `երիկամ, սրտի, թոքերի, մկանների եւ այլն), հյուսվածքները պետք է բաժանվեն շատ փոքր մասերի, մաքուր գործիքներով, սառույցի վրա, ինչպես նաեւ հնարավորինս արագ, կանխելու համար պրոտիտաներով դեգրադացիան (օրինակ, լիզի բուֆեր, ինչպիսիք են RIPA կամ hypotonic lizis բուֆեր պարունակող protease եւ phosphatase inhibitor կոկտեյլ): Կերակրման արդյունքում նմուշը ներծծվում է հեղուկ ազոտի մեջ, սեղմվելու համար: Նմուշը կարող է պահվել -80 ° C-ում հետագայում օգտագործելու կամ անմիջապես սառույցի վրա անմիջապես հոմոգենացման համար: Ուլտրաձայնային արդյունահանման անմիջապես առաջ, սառույցի սառը լիզի բուֆերը (ինչպես նաեւ պրոտեուսի inhibitors DTT, leupeptin եւ aprotinin) արագորեն ավելացվում են նմուշային խողովակի մեջ (մոտ 10 մգ հյուսվածքի մոտ ~ 600 մկլ բուֆեր են առաջարկվում): Մոտավորապես: 20-60 մգ հյուսվածքների խորհուրդ է տրվում մեկ նմուշի խողովակի մեջ:
Ուլտրաձայնային միատարրություն, lysis եւ արդյունահանման կատարվում է ուլտրաձայնային homogenizer, ինչպիսիք են Uf200 ः տ կամ UP200St, Հագեցած է միկրո-tip sonotrode. Sonication տեւողությունն է 60-90 վրկ. որպես ուլտրաձայնային ցիկլի ռեժիմով 15 վրկ. sonication եւ 10 վրկ. հանգստավայր անգամ: Ընտրանքը պետք է պահվեն սառույցի ամբողջ ժամանակը:
Այն բանից հետո, ուլտրաձայնային միատարրություն / արդյունահանման, որ lysate է centrifuged է 27,000g համար մոտ. 20 րոպե. Որից հետո supernatent է հավաքվում, այնպես, որ սպիտակուցը կոնցենտրացիան կարող է որոշվել է սպիտակուցային պարունակությունը, ինչպիսիք են Pierce սպիտակուցային հարգը BCA:

Սպիտակուցի սերմնացումը նմուշի պատրաստման կարևոր մեթոդ է

Ուլտրաձայնային սպիտակուցի արդյունահանում բջիջներից UP200St

Տեղեկատվության պահանջ





Սպիտակուցը արդյունահանման արյան շիճուկում

Շիճուկի եւ ֆոսֆատ բուֆերի միատարր խառնուրդի համար նմուշը գոլորշիացվում է առաջինը `մինչեւ ուլտրաձայնային բջջային լիզինգը: Ուլտրաձայնային լիզինգի համար նմուշը sonicated է ultrasonic lab homogenizer, ինչպիսիք են UP100H համար 8 փուլերից 20% լայնույթի համար փուլերի յուրաքանչյուր 5 վայրկյան եւ 15 վայրկյան դուրս. Sonocation իրականացվում է sonicationg փուլերի եւ դնելով նմուշ սառույցի, այնպես, որ գերտաքացումից եւ ջերմային դեգրադացիան նմուշի խուսափել. Քանի որ շիճուկ պարունակում է մեծ քանակությամբ բարձր մոլեկուլային քաշային սպիտակուցներ (ինչպիսիք են ալբումինի, α1-antitrypsin, transferrin, haptoglobulin, immunoglobulin G եւ immunoglobulin A), որոնք խանգարում են տարանջատման ցածր մոլեկուլային քաշային սպիտակուցներ ընթացքում IEF, ապա խորհուրդ է տրվում սպառել նրանց ից շիճուկ օգտագործելով ուժասպառությունից սյունը:

Սպիտակուցը հանույթ բուսական հյուսվածքի

Թարմ, փափուկ գործարանը հյուսվածք, օրինակ մամուռ եւ այլն, կարելի է հեշտությամբ դադարեցրեցին, պարզապես դնելով թակած օրինակելի նյութը lysis բուֆերի համար sonication. Կոշտ, ligenous բույսերի հյուսվածքներում, ինչպիսիք են սերմեր, եղեւնի ասեղներ եւ այլն, պետք է հիմնավորի չոր: Որոշ ծանր, փայտային բուսական նյութերը պետք է սառեցվում է եւ հիմք է հեղուկ ազոտի առաջ արդյունահանվող կողմից sonication. Համար գործարանը բջջային մշակույթի suspensions, ուլտրաձայնային բուժում միջեւ 30 եւ 150 վայրկյան է lysis բուֆերի հիմնականում բավարար է: Ավելի կոշտ նյութական, ինչպիսիք են դդմի սերմերը պահանջում է ավելի ինտենսիվ sonication, ինչպես նկարագրված է ստորեւ:

Արձանագրություն ուլտրաձայնային արդյունահանման ալբումինի ից դդում սերմերը

Ուլտրաձայնային հյուսվածք homogenizer UP400St հետ S24d40 - սպիտակուցային արդյունահանման բուսական եւ կենդանական հյուսվածքի (Մեծացնել)Համար ուլտրաձայնային սպիտակուցային արդյունահանման ալբումինի ից տուգանքի հրապարակների դդում սերմերի փոշի, 10 գ յուղազերծած դդում սերմերի փոշի եւ 100 մլ deionised ջրի, ինչպես վճարունակ են ավելացվել է 250 մլ ապակե բաժակով: Սպիտակուցը արդյունահանման բաղկացած է երկու փուլով: Առաջին, որ նմուշը sonicated հետ Հուշել-type ultrasonicator UP400St (400W, 24kHz) հետ հեծյալ sonotrode S24d7: Ապակին սկահակ, որը տեղադրված է սառը ջրային լոգանք ընթացքում ուլտրաձայնային համասեռացումից: The ընդլայնված է ultrasonicator UP400St խցանման ջերմաստիճանի տվիչի հետ ապահովել է, որ նմուշի ջերմաստիճանը միշտ պահվում է 30 ° C- ից ցածր: Հստակ ջերմաստիճանի հսկողության միջոցով, sonication- ում, խուսափում է albumin- ի denaturation: Երկրորդ, արդյունահանումը կատարվել է խառնիչով 200 ռ / ժ արագությամբ եւ 30 ° C- ով: Այնուհետեւ խոհանոցը տեղափոխվում է ջերմաստիճան: Գլոբալինը հեռացվում է դիալիզով, թորած ջրով: Գլոբալինի հեռացումից հետո սպիտակուցի քաղվածքը կարող է ընտրվել albumin պրոֆիլի որոշման համար եւ հետագայում համապատասխանեցվել pI = 3.0 օգտագործելով albumin կոագուլյացիայի համար 0.1 M HCl: Ամրապնդվող ֆազը բաժանվում է 5000 գ, 20 ° C ջերմաստիճանում եւ վերածվում է դեոնացված ջրի: Albumin coagulation կատարվում է երկու անգամ բարձրացնել սպիտակուցի հարաբերակցությունը albumin խտանյութում:

Ուլտրաձայնային ալկալային սպիտակուցը արդյունահանման համար նախապատրաստման սպիտակուցային խտանյութ ից Բրինձի Հատիկների ցույց է տալիս, որ ուլտրաձայնային բուժման արդյունքները բարձրագույն սպիտակուցային եկամտաբերության մի զգալիորեն կարճ արդյունահանման ժամանակ – համեմատ սովորական արդյունահանման մեթոդներով:

Ուլտրաձայնային սարքը VialTweeter սպիտակուցային արդյունահանման հյուսվածքների նմուշների (Մեծացնել)

VialTweeter- ը անուղղակի sonication.

առավելությունները

  • արագ
  • բարձր զիջում
  • բարձր արդյունավետ
  • Ճշգրիտ նկատմամբ վերահսկողությունը պարամետրերի
  • վերարտադրելի արդյունքներ
  • գծային scalability

Նմուշի նախապատրաստումը արձանագրություն ֆունկցիոնալ inos enzyme

Ստանալու լիովին ֆունկցիոնալ inos ֆերմենտը (օրինակ, թմրադեղերի ցուցադրումից), հետեւյալը արձանագրություն, խորհուրդ է տրվում `ՀՀ բջջային կասեցումը պետք է տեղադրված է սառույցի եւ sonicate հետ UP100H ժամը 10μm լիություն ժամը ցիկլի եղանակի 5 վրկ: sonication եւ 25 վրկ. հանգչի սառույցի. Ընթացակարգը պետք է կրկնվել մոտ: 3 անգամ. Որ հանգստավայր անգամ միջեւ sonication ցիկլերի նվազեցնում է ջերմաստիճանի աճ եւ, հետեւաբար, նվազեցնել denaturation:

Ուլտրաձայնային Protein Solubilization

Sonication կարող է արագացնել սպիտակուցը solubilization գործընթացը, որը, որպես կանոն, պահանջում է մի քանի ժամ: Որպեսզի չի գերտաքացում նմուշը եւ կանխելու սպիտակուցային դեգրադացիայի եւ փոփոխությունների լուծումների պարունակող urea, ուլտրաձայնային bursts չպետք է տեւի, քան մի քանի վայրկյանից:

Ընդհանուր Հրահանգներ

Ջերմաստիճանի: Է ապահովել բարձր սպիտակուցը եկամտաբերություն առանց ջերմային denaturation, ջերմաստիճանը ընթացքում արդյունահանման պետք է վերահսկվի: Hielscher պետական- of-արվեստի Ուլտրաձայնային Homogenizers – նաեւ կոչվում ուլտրաձայնային disintegrator կամ sonificator – են հենց վերահսկելի: Նրանք գալիս են մի plugable ջերմաստիճանի սենսորային. Ընդլայնված տարբերակներից ուլտրաձայնային homogenizer, առավելագույն ջերմաստիճանը կարող է սահմանվել: Երբ այս ջերմաստիճանը առավելագույնը է հասել, որ ultrasonicator ինքնաբերաբար դադարում է, մինչեւ նմուշ cooled ներքեւ.
բուֆեր: Հանձին հարմար բուֆերի եւ ճիշտ ծավալի բուֆերի տատանվում է հյուսվածքի հյուսվածքի եւ պետք է լինի նախշավոր դուրս է դատավարությունը ու սխալի փորձարկման.
Մեկուսացումը / մաքրում: Սպիտակուցային lysates կարող է պարունակել գերազանցող biomolecules, ինչպիսիք են ԴՆԹ կամ ածխաջրերի, որը կարող է հեռացվել սպիտակուցը տեղումների (deoxycholate-տրիքլորքացախաթթվի) կամ բուֆերային փոխանակում:

Chittapalo եւ Noomhorm (2009 թ.), Հաղորդում է, որ սպիտակուցը եկամտաբերությունը աճել է, օգտագործելով sonication եւ որ ուլտրաձայնային հյուսվածք միատարրություն եւ lysis գործընթացը կարող է բարձրացնել գոյություն ունեցող արդյունահանման գործընթացները էապես – հնարավորություն տալով նոր առեւտրային արդյունահանման հնարավորությունների.

Հնչի պաշտպանություն Hielscher ձայնային պարիսպ SPB-L եւ ուլտրաձայնային սարքի UP200St: (Մեծացնել)

Ուլտրաձայնային հյուսվածք homogenizer UP200St համար արդյունավետ սպիտակուցային արդյունահանման

Ճշգրիտ վերահսկողությունը ուլտրաձայնային բուժման (Մեծացնել)

Բրաուզերը վերահսկման համար ճշգրիտ շահագործման եւ մոնիթորինգի sonication գործընթացի

Ուլտրաձայնային Սարքավորանք Protein արդյունահանման

Hielscher Ultrasonics առաջարկում է լայն շրջանակ ուլտրաձայնային homogenizers համար փլուզումից բջիջների, հյուսվածքների, բակտերիաների, միկրոօրգանիզմների, խմորիչ, եւ սպորների.
Hielscher լաբորատորիայի ultrasonicators են հզոր եւ հեշտ է գործել. Կառուցվել է 24/7 շահագործման, դրանք նախատեսված են որպես առողջ եւ արդյունավետ լաբորատոր եւ bench վերին սարքերի. Բոլոր սարքերի համար, որ էներգետիկ արտադրանքի եւ առատություն կարող է ճշգրիտ վերահսկվում: Լայն շրջանակ Աքսեսուարներ բացում հետագա setup ընտրանքներ. Թվային սարքեր, ինչպիսիք են VialTweeter- ը,, Uf200 ः տ,, UP200St, եւ UP400St ունեն միասնական ջերմաստիճանի եւ որպես ներկառուցված SD քարտ ավտոմատ տվյալների ձայնագրության.
Անուղղակի, խաչաձեւ աղտոտման, ազատ եւ միաժամանակյա sonication բազմաթիվ նմուշների, մենք առաջարկում ենք VialTweeter- ը կամ Ուլտրաձայնային cuphorn,
Կախված Ձեր դիմումի, նյութական, եւ ընտրանքի ծավալի, մենք խորհուրդ ենք առավել հարմար Ստեղծեք ձեր ընտրանքային Prep. Կապվեք մեզ այսօր!

Կապ մեզ հետ | / Հարցրեք մեզ!

Խնդրում ենք օգտագործել ստորեւ բերված ձեւը, եթե ցանկանում է պահանջել լրացուցիչ տեղեկություններ ուլտրաձայնային համասեռացումից: Մենք ուրախ կլինենք առաջարկել Ձեզ ուլտրաձայնային համակարգ հանդիպել Ձեր պահանջներին:









Խնդրում ենք նկատի ունենալ մեր Գաղտնիության քաղաքականություն,


Գրականություն / հղումներ

  • Chittapalo T, Noomhorm Ա (2009 թ.): Ուլտրաձայնային օժանդակությամբ ալկալիների արդյունահանման սպիտակուցային ից յուղազերծած բրնձի թեփ եւ հատկությունների սպիտակուցային խտանյութերի: Միջ J պարենային Sci Technol 44: 1843-1849.
  • Simões, Անդրե E.S :; Pereira, Diane M .; Ամարալը, Joana D .; Nunes, Ana F .; Գոմեսը, Սոֆիա E .; Rodrigues, Պեդրո Մ .; Ահա, Adrian C .; D'Hooge, Ռուդի. Եզ, Clifford J .; Thibodeau, Stephen N .; Borralho, Պեդրո Մ .; Rodrigues Սեսիլիա պառլամենտի անդամ (2013 թ.): Արդյունավետ վերականգնում սպիտակուցներ բազմաթիվ կոդով նմուշների հետո trizol կամ trizol Լ.Ս. ՌՆԹ-ի առանձնացում եւ երկարաժամկետ պահեստավորման. BMC Genomics 2013, 14: 181.


Փաստեր Worth Իմանալով

Պրոտեոմիկա

Պրոտեոմիկա է հետազոտական ​​դաշտ, որ հետաքննում են սպիտակուցներ եւ proteome: Սպիտակուցներ fullfil մի հսկայական զանգված կենսագործունեության ընթացքում օրգանիզմների. Որ proteome է ամբողջ փաթեթը սպիտակուցներ արտահայտած մի գենոմի, խցում, հյուսվածքի կամ օրգանիզմի որոշակի ժամանակ: The proteome տատանվում ժամանակի եւ հստակ պահանջներին, կամ ընդգծում է, որ բջջային կամ օրգանիզմ է ենթարկվում: Ավելի կոնկրետ, դա այն է, որ փաթեթը արտահայտված սպիտակուցների տվյալ տեսակի խցում կամ օրգանիզմի, տվյալ պահին, համաձայն սահմանված պայմաններում: Տերմինը մի խառնուրդ է սպիտակուցների եւ գենոմի. Պրոտեոմիկա է ուսումնասիրություն է proteome:

Սպիտակուց

Սպիտակուցներ են են խոշոր biomolecules, այսպես կոչված, մակրոմոլեկուլների – որոնք կազմված են ամինաթթուների մնացորդների մեկ կամ ավելի երկար շղթաներից: Սպիտակուցները ներառում են ինչպես բուսական, այնպես էլ կենդանական ծագման բոլոր օրգանիզմներում, եւ դրանք կենսական կարեւոր գործառույթների մեծ մասի համար կարեւոր են: Քանի որ սպիտակուցները պարունակում են բազմաթիվ կենսաբանական տեղեկություններ, դրանք վերլուծվում են վերլուծական նպատակով, օրինակ, պրոտոմիկային հետազոտության համար: Սպիտակուցների կատարած ամենակարեւոր գործառույթը ներառում է մետաբոլիկ ռեակցիաների, DNA կրկնօրինակի, խթանիչ արձագանքման եւ մոլեկուլների տեղափոխումը մեկ վայրից մյուսը: Սպիտակուցները տարբերվում են միմյանցից, հիմնականում ամինաթթուների հերթականությամբ, որոնք թելադրված են իրենց գեների nucleotide հաջորդականությամբ, եւ որը սովորաբար առաջացնում է սպիտակուցի ծալման մեջ որոշակի եռաչափ կառուցվածք, որը որոշում է իր գործունեությունը: Սպիտակուցներ են – բացի պեպտիդների – մեկը առանցքային բաղադրամասերից սնունդ. Հետեւաբար, Պրոտեոմիկա է հզոր գործիք է սննդի գիտության օպտիմալացնել գործընթացները, սննդի անվտանգության եւ սննդային գնահատման.

գել Էլեկտրաֆորեզ

Գել electrophoresis է հիմնական մեթոդը առանձնացման եւ վերլուծության մակրոմոլեկուլների, ինչպիսիք են ԴՆԹ, ՌՆԹ եւ սպիտակուցներ, ինչպես նաեւ դրանց բեկորները, որոնք հիմնված են իրենց մեծությամբ ու պատասխանատու: Այն օգտագործվում է կլինիկական քիմիայի առանձնացնել սպիտակուցներ կողմից մեղադրանքի եւ / կամ չափի (IEF agarose, ըստ էության չափը անկախ) եւ կենսաքիմիայի, մոլեկուլային կենսաբանության եւ Պրոտեոմիկա է առանձնացնել մի խառը բնակչությանը ԴՆԹ-ի եւ ՌՆԹ դրվագներ երկարությամբ, գնահատել չափը ԴՆԹ եւ ՌՆԹ-ի բեկորները կամ առանձնացնել սպիտակուցներ կողմից մեղադրանքով:

բջջային կուլտուրաների

Բջջային մշակույթը վերահսկվում աճում գործընթացը, որի բջիջները կարող են մշակվում է հսկվող պայմաններում: Բջջային մշակույթի պայմանները տարբեր լինել յուրաքանչյուր բջջային տեսակի. Ընդհանուր առմամբ, շրջակա միջավայրը, որը բջջային մշակույթի բաղկացած է հարմար նավի (օրինակ Petri կերակրատեսակ) հետ substrate կամ միջին, որ մատակարարում է էական nutrients (amino թթուներ, ածխաջրեր, վիտամիններ, հանքային), աճի գործոնները, հորմոնների, եւ գազերի (CO2, The2), Եւ կարգավորում է Physio-քիմիական միջավայր (pH բուֆերային, osmotic ճնշման, ջերմաստիճանի). Շատ բջիջները պետք է մակերեսի կամ արհեստական ​​substrate, մինչդեռ այլ բջջային մշակույթները կարող են աճեցված ազատ լողացող մշակույթի միջին (կասեցման մշակույթի, բջջային կասեցնելու):
Զանգվածային մշակույթները կենդանիների բջջային գծերի օգտագործվում են արդյունաբերական արտադրության վիրուսային պատվաստանյութերի եւ այլ biotechnologically դրանցից ստացված մթերքների. Մարդու ցողունային բջիջները կարող են բարեկիրթ է ընդլայնել շարք բջիջների եւ տարբերակել բջիջները տարբեր սոմատիկ բջիջների տեսակների համար փոխպատվաստման նպատակով:

հյուսվածքի Օրինակներ

Տերմինը հյուսվածք նկարագրում է բջջային միջանկյալ, որտեղ բջջային նյութը է կազմակերպական մակարդակով միջեւ բջիջների եւ ամբողջական մարմին: Ի հյուսվածքի, նմանատիպ բջիջները, նույն ծագման, որ միասին իրականացնել որոշակի գործառույթ են հավաքվել. Ըստ ֆունկցիոնալ խմբավորման բազմաթիվ հյուսվածքների, համալիր կառույցները օրգանների ձեւավորվում են.
Հյուսվածք, որը sampled հետազոտությունների կենսաբանության, histology / histopathology, մակաբուծաբանության, կենսաքիմիայի, immunohistochemistry, ինչպես նաեւ մշակել եւ հանենք ԴՆԹ. Այն կարելի է տարբերել միջեւ կենդանիների (ստորաբաժանման կաթնասուն հյուսվածքները) եւ բուսական հյուսվածքի. Կենդանական հյուսվածքների խմբավորված են չորս հիմնական տեսակների կապ, մկանային, նյարդային, եւ epithelial հյուսվածքի. Գործարանը հյուսվածք, որը բաժանվում է հետեւյալ երեք հյուսվածքների համակարգերից epidermis, ցամաքային հյուսվածքի, եւ անոթային հյուսվածքի.
Հյուսվածքների նմուշները կարող է պատրաստված կենդանիների կամ բույսերի մասերի, օրինակ ոսկրային, մկանային, տերեւները, եւ այլն:

մարմնի հեղուկների

Արյան, շիճուկ, պլազմային, cerebrospinal հեղուկ, թուք ու synovial հեղուկ են մարմնի հեղուկների, որոնք առաջարկում են մեծ աղբյուր diagnostically համապատասխան տեղեկատվություն: Հետեւաբար, մի բարդ նախապատրաստում մարմնի Հեղուկի նմուշների վերլուծության կարեւոր է: Առաջին դժվարությունը կապված է լայն դինամիկ շարք բաղադրիչների ներկա մարմնի fluids մասին:

Ինքնորոշման սպիտակուցային կոնցենտրացիայի

Bradford հարգը, Lowry հարգը եւ bicinchoninic թթու (ԵՀՀ) հարգը են ընդհանուր assays որոշելու կոնցենտրացիան սպիտակուցներ: Խոշոր եղջերավոր անասունների շիճուկ սպիտ (BSA) մեկն է առավել հաճախակի օգտագործվող սպիտակուցային ստանդարտի:

lysis բուֆերային

Lysis բուֆերային պետք է ընտրված, համաձայն բջջային նյութի կամ անձեռոցիկով (հյուսվածքները մշակույթի, բույսերի, բակտերիաների, fungi, եւ այլն), եւ արդյոք բջիջները գտնվում են կառուցվածքի եւ տեսակից կառույցի: Լայն շրջանակ lysis buffers արդյունահանման սպիտակուցների, մեմբրաններ, եւ organelles են ձեւակերպված մեկ կամ ավելի ներգործության մաքրող նյութեր: Լվացքի, որը սովորաբար ընտրել միջոցով դատավարությունը եւ սխալվելու թեստերի կամ – Եթե ​​առկա է – ըստ գոյություն ունեցող սպիտակուցային արդյունահանման արձանագրության. Լվացքի պետք է լինի համատեղելի է հյուսվածքների աղբյուր եւ սպիտակուցներ: Ընդհանուր առմամբ, հոտ ախտահանող, որը աշխատում է կոնկրետ հյուսվածքները / սպիտակուցային, ընտրվում է, որպեսզի պահպանել առավելագույն ֆունկցիոնալությունը քաղվածքների: Ավելին, դեպքում արդյունահանման թաղանթներ եւ organelles, մեղմ ախտահանող պահում թաղանթ անձեռնմխելի. Սովորաբար օգտագործվող ներգործության մաքրող նյութեր lysis բուֆերների են հիմնականում ոչ իոնոգեն կամ zwitterionic, օրինակ Chaps, deoxycholate, Տրիտոնը ™ X-100, NP40, եւ Tween 20:
Օրինակ, հյուսվածքների, ինչպիսիք են ուղեղի, լյարդի, աղիների, երիկամների, փայծաղի եւ այլն կարող են պարզապես buffered հետ Ռիպա – սակայն պրոտեազների inhibitors եւ DTT (օրինակ գել electrophoresis) պետք է ներառվեն:
Lysis բուֆերային skeletal մկանային հյուսվածքի (սառույց սառը): 20 մմ Tris (pH 7,8), 137 մմ NaCl, 2.7 մմ kcl, 1 մմ MgCl2, 1% Triton X-100, 10% (Վտ / V) գլիցերինի, 1 մմ EDTA , 1 մմ dithiothreitol համալրվեց պրոտեազների եւ phosphatase inhibitor կոկտեյլ
Աղյուսակ ընդհանուր բուֆերների եւ դրանց pH միջակայք: Ընդհանուր առմամբ, այդ buffers են սովորաբար օգտագործվում է կոնցենտրացիաների 20-50 մմ:

բուֆեր pH տեսականին
Կիտրոնաթթու – NaOH- ը 2.2 – 6.5
նատրիումի ցիտրատ – Կիտրոնաթթու 3.0 – 6.2
նատրիումի acetate – քացախաթթու 3.6 – 5.6
Cacodylic թթու նատրիումի աղ – HCl 5.0 – 7.4
MY – NaOH- ը 5.6 – 6.8
Նատրիումի դեհիդրոֆոսֆատ – երկնատրիում ջրածնի ֆոսֆատ 5.8 – 8.0
imidazole – HCl 6.2 – 7.8
mops – KOH- ը 6.6 – 7.8
տրիէթանոլամին հիդրոքլորիդ – NaOH- ը 6.8 – 8.8
Tris – HCl յոթ – ինը
HEPES – NaOH- ը 7.2 – 8.2
Տրինին – NaOH- ը 7.6 – 8.6
նատրիումի tetraborate – բորային թթու 7.6 – 9.2
Bicine – NaOH- ը 7.7 – 8.9
Գլիցինի – NaOH- ը 8.6 – 10.6

Շատ buffers ցույց են տալիս, pH-կախվածությունը հետ ջերմաստիճանի. Սա հատկապես ճիշտ է Tris buffers. The pka փոխում է 8.06 ին, ժամը 25 ° C մինչեւ 8.85 0 ° C:
(PH եւ pka մի բուֆերի: pH չափում կոնցենտրացիան ջրածնային իոնների տված նստվածքային լուծման. Pka (= թթու բաժանում հաստատուն) հանդիսանում է կապված, բայց ավելի կոնկրետ միջոցը, որ դա օգնում է կանխատեսել, թե ինչպես է մոլեկուլ, որը գործելու է մի կոնկրետ pH արժեքը):

TRIzol

TRIzol է քիմիական լուծում կորզվում ՌՆԹ / ԴՆԹ / սպիտակուցը ընթացքում guanidinium thiocyanate-ֆենոլ-քլորոֆորմի արդյունահանման. Օգտագործումը Ultrasonically օժանդակած TRIzol արդյունահանման արդյունքների բարձր ԴՆԹ, ՌՆԹ, եւ սպիտակուցային զիջում են նույն նմուշի եւ գերազանցում է դրանով այլ արդյունահանման մեթոդները: