Sonication համար Lysis

Բջիջների տարրալուծումը կամ լիզը կենսատեխնոլոգիական լաբորատորիաներում ամենօրյա նմուշի պատրաստման ընդհանուր մասն է: Լիզիսի նպատակն է խաթարել բջջային պատի կամ ամբողջական բջիջի մասերը՝ կենսաբանական մոլեկուլներ ազատելու համար: Ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորները լայնորեն օգտագործվում են բջիջների հաջող լիզացիայի համար: Բարդ ուլտրաձայնային սարքերի հիմնական առավելությունը գործընթացի պարամետրերի ճշգրիտ վերահսկումն է, ինչպիսիք են ինտենսիվությունը և ջերմաստիճանը, ինչը թույլ է տալիս նուրբ, բայց շատ արդյունավետ բջիջների խզում և արդյունահանում:

Բջջային լիզիս՝ օգտագործելով ուլտրաձայնային հետազոտություն

Զոնդի տիպի ուլտրաձայնային սարքերը, ինչպիսին է UP200St-ը, հյուսվածքների հուսալի համասեռացուցիչներ են և լայնորեն օգտագործվում են գենետիկայի մեջ նմուշների պատրաստման համար, օրինակ՝ ագրոբակտերիումի միջնորդավորված տրանսֆորմացիայի (SAAT) ձայնագրման օգնությամբ:Ուլտրաձայնային բջիջների լիզումը և արդյունահանումը մեթոդ է, որն օգտագործվում է բաց բջիջները կոտրելու և պարունակությունը հանելու համար՝ օգտագործելով բարձր հաճախականության ձայնային ալիքներ, այսինքն՝ ուլտրաձայնային: Sonication-ը լիզի տեխնիկա է, որը լայնորեն կիրառվում է որպես բջիջների քայքայման և ներբջջային նյութի արդյունահանման հաստատված և հուսալի մեթոդներ: Ուլտրաձայնային լիզը հուսալի մեթոդ է, օրինակ՝ պլազմիդ, ընկալիչի անալիզներ, սպիտակուցներ, ԴՆԹ, ՌՆԹ և այլն պարունակող լիզատ պատրաստելու համար: Քանի որ ուլտրաձայնային ինտենսիվությունը կարող է կարգավորվել գործընթացի պարամետրերը կարգավորելու միջոցով, շատ փափուկից մինչև ինտենսիվ ձայնային արտանետման օպտիմալ ինտենսիվությունը կարող է սահմանվել անհատապես: յուրաքանչյուր նյութ և միջավայր՝ համապատասխան կիրառման հատուկ պահանջներին: Լիզիզի հետևյալ քայլերն են՝ ֆրակցիան, օրգանելների մեկուսացումը կամ/և սպիտակուցի արդյունահանումը և մաքրումը: Արդյունահանված նյութը (= լիզատ) պետք է առանձնացվի և ենթակա է հետագա հետազոտությունների կամ կիրառման, օրինակ՝ պրոտեոմային հետազոտությունների համար:

Ուլտրաձայնային լաբորատոր դիսեմբրատորներ UP100H և UP400St նմուշների պատրաստման համար (հոմոգենացում, լիզում, արդյունահանում):

Ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորներ UP100H (100 վտ) եւ UP400St (400 վտ) նմուշների պատրաստման համար, ինչպիսիք են լիզիսը և արդյունահանումը:

Տեղեկատվության պահանջ





Բջջի լիզի և արդյունահանման այլ մեթոդների համեմատ, ուլտրաձայնային բջիջների լիզումն ունի մի քանի առավելություն.

  1. Արագություն: Ուլտրաձայնային բջիջների լիզումը և արդյունահանումը արագ մեթոդ է, որը կարող է կոտրել բաց բջիջները մի քանի վայրկյանում: Սա շատ ավելի արագ է, քան մյուս մեթոդները, ինչպիսիք են համասեռացումը, սառեցման-հալեցումը կամ բշտիկ-ֆրեզումը:
  2. արդյունավետությունը: Ուլտրաձայնային բջիջների լիզը և արդյունահանումը կարող են օգտագործվել փոքր, մեծ կամ մի քանի նմուշներ միանգամից բուժելու համար՝ դարձնելով այն ավելի արդյունավետ, քան մյուս մեթոդները, որոնք պահանջում են փոքր նմուշների անհատական մշակում:
  3. Առանց քիմիական նյութերիՈւլտրաձայնային բջիջների լիզը և արդյունահանումը ոչ ինվազիվ մեթոդ է, որը չի պահանջում կոշտ քիմիական նյութերի կամ ֆերմենտների օգտագործում: Սա այն դարձնում է իդեալական այն ծրագրերի համար, որտեղ անհրաժեշտ է պահպանել բջջային բովանդակության ամբողջականությունը: Հնարավոր է խուսափել նմուշների անցանկալի աղտոտումից:
  4. Բարձր եկամտաբերություն. Ուլտրաձայնային բջիջների լիզումը և արդյունահանումը կարող են արդյունահանել բջջային բովանդակության բարձր եկամտաբերություն, ներառյալ ԴՆԹ, ՌՆԹ և սպիտակուցներ: Դա պայմանավորված է նրանով, որ բարձր հաճախականությամբ ձայնային ալիքները կոտրում են բջջային պատերը և պարունակությունը թողնում շրջակա լուծույթի մեջ:
  5. Ջերմաստիճանի: Բարդ ուլտրաձայնային սարքերը թույլ են տալիս ճշգրիտ վերահսկել նմուշի ջերմաստիճանը: Hielscher թվային ձայնային սարքերը հագեցած են խցանվող ջերմաստիճանի սենսորով և ջերմաստիճանի մոնիտորինգի ծրագրային ապահովմամբ:
  6. Վերարտադրելի: Ուլտրաձայնային բջիջների լիզիզի արձանագրությունները կարող են հեշտությամբ վերարտադրվել և նույնիսկ համապատասխանեցնել տարբեր մեծ կամ փոքր նմուշների ծավալներին պարզ գծային մասշտաբով:
  7. Բազմակողմանի: Ուլտրաձայնային բջիջների լիզը և արդյունահանումը կարող են օգտագործվել բջիջների տեսակների լայն շրջանակ հանելու համար, ներառյալ բակտերիաները, խմորիչները, սնկերը, բույսերը և կաթնասունների բջիջները: Այն կարող է օգտագործվել նաև տարբեր տեսակի մոլեկուլների, այդ թվում՝ սպիտակուցների, ԴՆԹ-ի, ՌՆԹ-ի և լիպիդների արդյունահանման համար:
  8. Բազմաթիվ նմուշների միաժամանակյա պատրաստում. Hielscher Ultrasonics-ն առաջարկում է մի քանի լուծումներ բազմաթիվ նմուշների հարմարավետ մշակման համար ճիշտ նույն գործընթացի պայմաններում: Սա դարձնում է լիզի և արդյունահանման նմուշի պատրաստման փուլը բարձր արդյունավետ և ժամանակի խնայողություն:
  9. Հեշտ է օգտագործել: Ուլտրաձայնային բջիջների լիզման և արդյունահանման սարքավորումները հեշտ է օգտագործել և պահանջում են նվազագույն ուսուցում: Սարքավորումը նաև տնտեսապես է, քանի որ այն մեկ ներդրում է, առանց հեռացման վերագնման պահանջի: Սա այն գրավիչ է դարձնում հետազոտողների և լաբորատորիաների լայն շրջանակի համար:

Ընդհանուր առմամբ, ուլտրաձայնային բջիջների լիզումը և արդյունահանումը արագ, արդյունավետ, ճշգրիտ վերահսկելի և բազմակողմանի մեթոդ է բջջային բովանդակությունը հանելու համար: Դրա առավելությունները այլընտրանքային մեթոդների նկատմամբ այն գրավիչ ընտրություն են դարձնում հետազոտական և արդյունաբերական կիրառությունների լայն շրջանակի համար:

Ուլտրաձայնային բջիջների լիզիսի աշխատանքային սկզբունքը

Ուլտրաձայնային բջիջների լիզումը և արդյունահանումը օգտագործում են բարձր հաճախականության ձայնային ալիքներ՝ բջիջները խափանելու և դրանց պարունակությունը հանելու համար: Ձայնային ալիքները ճնշման փոփոխություններ են առաջացնում շրջակա հեղուկում, ինչը հանգեցնում է փոքր փուչիկների ձևավորմանը և փլուզմանը, որը հայտնի է որպես կավիտացիա: Այս փուչիկները առաջացնում են տեղայնացված բարձր ինտենսիվ մեխանիկական ուժեր, որոնք կարող են կոտրել բաց բջիջները և ազատել դրանց պարունակությունը շրջակա լուծույթի մեջ:

Ուլտրաձայնային սարքի միջոցով բջիջների լիզումը սովորաբար ներառում է հետևյալ քայլերը.

  • Նմուշը տեղադրվում է հեղուկ բուֆերով խողովակի կամ տարայի մեջ:
  • Նմուշի մեջ տեղադրվում է ուլտրաձայնային զոնդ, և բարձր հաճախականությամբ ձայնային ալիքները մոտ. Կիրառվում են 20-30 կՀց:
  • Ուլտրաձայնային ալիքները շրջակա հեղուկում առաջացնում են տատանումներ և կավիտացիա՝ առաջացնելով տեղայնացված ուժեր, որոնք կոտրում են բաց բջիջները և ազատում դրանց պարունակությունը։
  • Նմուշը ցենտրիֆուգվում կամ ֆիլտրվում է բջջային բեկորները հեռացնելու համար, իսկ արդյունահանված պարունակությունը հավաքվում է ներքևում գտնվող վերլուծության համար:
Ուլտրաձայնային արդյունահանումը գործում է բջջային կառուցվածքների խաթարման և զանգվածի փոխանցման խթանման միջոցով

Ուլտրաձայնային հզոր ալիքները խախտում են կենսաբանական կառուցվածքների բջիջների մատրիցը և ազատում կենսաակտիվ միացությունները: Զանգվածի փոխանցումը բուսանյութի և լուծիչի (օրինակ՝ բուֆերի) միջև ուժեղանում է։ (գրաֆիկ՝ ©Vilkhu et al., 2006)

Այս տեսահոլովակը ցույց է տալիս Hielscher ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորը UP100H, ուլտրաձայնային սարք, որը լայնորեն օգտագործվում է լաբորատորիաներում նմուշների պատրաստման համար:

Ուլտրաձայնային հոմոգենիզատոր UP100H

Տեսանյութի մանրապատկեր

Լիզիսի ընդհանուր մեթոդների թերությունները

Լաբորատորիաներում ձեր աշխատանքի ընթացքում դուք, հավանաբար, արդեն զգացել եք բջիջների լիզի դժվարությունը՝ օգտագործելով ավանդական մեխանիկական կամ քիմիական լիզի արձանագրությունները:

  • Մեխանիկական լուծ. Լիզայի մեխանիկական մեթոդները, ինչպիսիք են հավանգով և նեխուրով հղկելը կամ միատարրացումը ֆրանսիական մամլիչով, ուլունքների աղացով կամ ռոտոր-ստատոր համակարգով, հաճախ զուրկ են ճշգրիտ հսկողության և ճշգրտման տարբերակներից: Սա նշանակում է, որ ֆրեզերային և հղկման օգտագործումը կարող է արագ առաջացնել ջերմություն և կտրող ուժեր, որոնք կարող են վնասել նմուշը և դենատուրացնել սպիտակուցները: Դրանք կարող են նաև ժամանակատար լինել և մեծ քանակությամբ սկզբնական նյութ պահանջել:
  • Քիմիական lysis: Քիմիական լիզի մեթոդները, ինչպիսիք են լվացող միջոցների վրա հիմնված լիզիսը, կարող են վնասել նմուշը՝ խաթարելով լիպիդային երկշերտը և դենատուրացնելով սպիտակուցները: Նրանք կարող են նաև պահանջել մի քանի քայլեր և կարող են թողնել մնացորդային աղտոտիչներ, որոնք խանգարում են հոսանքով ներքևող ծրագրերին: Լվացող միջոցի օպտիմալ չափաբաժին գտնելը լրացուցիչ խնդիր է:
  • Սառեցման-հալման ցիկլեր. Սառեցման և հալեցման ցիկլերը կարող են առաջացնել բջջային թաղանթների պատռում, սակայն կրկնվող ցիկլերը կարող են նաև առաջացնել սպիտակուցի դենատուրացիա և դեգրադացիա: Այս մեթոդը կարող է նաև պահանջել մի քանի ցիկլեր, որոնք կարող են ժամանակատար լինել և հաճախ ավելի ցածր եկամտաբերություն ունենալ:
  • Ֆերմենտային լիզ. Ֆերմենտային լիզի մեթոդները կարող են հատուկ լինել բջիջների որոշակի տեսակների համար և պահանջում են մի քանի քայլեր՝ դրանք դարձնելով ժամանակատար: Նրանք նաև առաջացնում են թափոններ և պահանջում են մանրակրկիտ օպտիմալացում՝ նմուշի դեգրադացիան խուսափելու համար: Ֆերմենտային լիզի փաթեթները հաճախ թանկ են: Եթե ձեր ընթացիկ ֆերմենտային լիզի պրոցեդուրան տալիս է անբավարար արդյունքներ, ապա սիներգետիկ մեթոդը կարող է կիրառվել որպես սիներգետիկ մեթոդ՝ բջիջների խանգարումն ուժեղացնելու համար:

Ի տարբերություն սովորական մեխանիկական և քիմիական բջիջների լուծարման մեթոդների, sonication-ը բջիջների տարրալուծման համար շատ արդյունավետ և հուսալի գործիք է, որը թույլ է տալիս ամբողջական վերահսկել sononication պարամետրերը: Սա ապահովում է նյութերի թողարկման և արտադրանքի մաքրության բարձր ընտրողականություն: [տես. Բալասունդարամ և այլք, 2009]
Այն հարմար է բոլոր տեսակի բջիջների համար և հեշտությամբ կիրառելի է փոքր և մեծ մասշտաբով – միշտ վերահսկվող պայմաններում։ Ուլտրաձայնային սարքերը հեշտ է մաքրել: Ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորը միշտ ունի մաքուր տեղում (CIP) և ստերիլիզացման (SIP) գործառույթ: Սոնոտրոդը բաղկացած է հսկայական տիտանի եղջյուրից, որը կարելի է սրբել կամ լվանալ ջրի կամ լուծիչի մեջ (կախված աշխատանքային միջավայրից): Ուլտրաձայնային սարքերի սպասարկումը պայմանավորված է նրանց ամրությամբ, որը գրեթե անտեսվում է:

 

Այս ձեռնարկը բացատրում է, թե որ տեսակի sonicator-ն է լավագույնը ձեր նմուշի պատրաստման առաջադրանքների համար, ինչպիսիք են լիզիսը, բջիջների խանգարումը, սպիտակուցի մեկուսացումը, ԴՆԹ-ի և ՌՆԹ-ի մասնատումը լաբորատորիաներում, վերլուծություններ և հետազոտություններ: Ընտրեք իդեալական sonicator տեսակը ձեր դիմումի, նմուշի ծավալի, նմուշի համարի և թողունակության համար: Hielscher Ultrasonics-ը ձեզ համար ունի իդեալական ուլտրաձայնային հոմոգենիզատոր:

Ինչպես գտնել կատարյալ Sonicator բջիջների խանգարման և սպիտակուցի արդյունահանման համար գիտության և վերլուծության մեջ

Տեսանյութի մանրապատկեր

 

Ուլտրաձայնային լուծույթ և բջիջների խափանում

Ընդհանուր առմամբ, լաբորատորիայում նմուշների լիզինգը կտեւի 15 վայրկյանից 2 րոպե: Որպես sonication- ի ինտենսիվությունը շատ հեշտ է հարմարեցնել ամպլիտի չափման միջոցով sonication ժամանակը, ինչպես նաեւ ընտրելով ճիշտ սարքավորումները, հնարավոր է խանգարել բջջային թաղանթները շատ նրբորեն կամ շատ կտրուկ, կախված բջջային կառուցվածքի եւ լիզիզմի նպատակով ( օրինակ, ԴՆԹ-ի արդյունահանումը պահանջում է ավելի փափուկ sonication, բակտերիաների ամբողջական սպիտակուցային արդյունահանումը պահանջում է ավելի ինտենսիվ ուլտրաձայնային բուժում): Ընթացքում ջերմաստիճանը կարելի է վերահսկել ինտեգրված ջերմաստիճանի սենսորով եւ հեշտությամբ կարելի է վերահսկել սառեցման (սառույցի լոգանք կամ հոսքի բջիջներ սառեցնող բաճկոններով) կամ էլեկտրական լարման ռեժիմում sonication- ի միջոցով: Զարկերակային ռեժիմում sonication ընթացքում, կարճ sonication պայթել ցիկլերը 1-15 վայրկյան տեւողությամբ թույլ է տալիս ջերմության dissipation եւ սառեցման ընթացքում ավելի երկար ժամանակահատվածում:
Բոլոր ուլտրաձայնային վրա հիմնված գործընթացներ են ամբողջովին վերարտադրելի եւ գծային scalable.

Տեղեկատվության պահանջ





VialTweeter-ը MultiSample Ultraonicator է, որը թույլ է տալիս ստերիլ պայմաններում նմուշների հուսալի համասեռացում:

The VialTweeter ուլտրաձայնային հոմոգենիզատոր է բազմաթիվ նմուշների միաժամանակյա, միատեսակ և արագ ստերիլ պատրաստման համար:

Ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորներ բջիջների լիզի և արդյունահանման համար

Ուլտրաձայնային սարքերի տարբեր տեսակներ թույլ են տալիս համապատասխանել նմուշի պատրաստման նպատակին և ապահովել օգտագործողի համար հարմարավետություն և շահագործման հարմարավետություն: Զոնդի տիպի ուլտրաձայնային սարքերը լաբորատորիայում ամենատարածված սարքերն են: Դրանք առավել հարմար են 0,1 մլ-ից մինչև 1000 մլ ծավալներով փոքր և միջին չափի նմուշների պատրաստման համար: Տարբեր հզորության չափերը և sonotrodes-ը թույլ են տալիս հարմարեցնել ուլտրաձայնային սարքը նմուշի ծավալին և նավին առավել արդյունավետ և արդյունավետ sonicating արդյունքների համար: Ուլտրաձայնային զոնդ սարքը լավագույն ընտրությունն է, երբ առանձին նմուշներ պետք է պատրաստվեն:

Եթե պետք է ավելի շատ նմուշներ պատրաստվեն, օրինակ՝ բջջային լուծույթի 8-10 սրվակ, ինտենսիվ անուղղակի հնչյունավորումը ուլտրաձայնային համակարգերով, ինչպիսին է VialTweeter-ը կամ ուլտրաձայնային գավաթը, միատարրացման ամենահարմար մեթոդն է արդյունավետ լիզի համար: Մի քանի սրվակներ միաժամանակ ձայնագրվում են նույն ինտենսիվությամբ: Սա խնայում է ոչ միայն ժամանակ, այլ նաև ապահովում է բոլոր նմուշների նույն վերաբերմունքը, ինչը նմուշների միջև արդյունքները դարձնում է հուսալի և համեմատելի: Ավելին, անուղղակի ձայնային ախտահանման ժամանակ խուսափում են խաչաձև աղտոտումից՝ ընկղմելով ուլտրաձայնային սոնոտրոդը (նաև հայտնի է որպես ուլտրաձայնային զոնդ, եղջյուր, ծայր կամ մատ): Քանի որ օգտագործվում են առանձին նմուշի չափի համապատասխան սրվակներ, ժամանակատար մաքրումը և նմուշի կորուստը անոթների տարանջատման պատճառով բաց են թողնվում: Բազմաբխի կամ միկրոտիտրային թիթեղների միատեսակ արտահոսքի համար Hielscher-ն առաջարկում է UIP400MTP:
Բարձրագույն ծավալների, օրինակ համար առեւտրային արտադրության բջջային մտքեր, շարունակական ուլտրաձայնային համակարգեր հոսքի բջջային ռեակտորի առավել հարմար. Շարունակական եւ նույնիսկ հոսքը վերամշակված նյութի վստահեցնում է նույնիսկ sonication. Բոլոր պարամետրերը ուլտրաձայնային փլուզումից, գործընթացը կարող է օպտիմիզացված եւ ճշգրտվում են պահանջների կիրառման եւ կոնկրետ բջջային նյութական.
 
 
Օրինակելի կարգը ուլտրաձայնային նկարագիրը ԲԱԿՏԵՐԱՅԻՆ բջիջների:

  • Պատրաստում է բջջային կասեցման Բջջային կարկուտ պետք է ամբողջությամբ կասեցվել է բուֆերային լուծմանը համասեռացման (ընտրել ձեր բուֆերային լուծույթի հետ համատեղելի հետեւյալ վերլուծության, օրինակ հատուկ քրոմատագրման մեթոդ): Ավելացնել lysozymes եւ / կամ այլ հավելումները, անհրաժեշտության դեպքում (դրանք պետք է լինեն նաեւ համատեղելի տարանջատումը / մաքրման միջոցներով): Խառնել / homogenize լուծում նրբորեն տակ մեղմ sonication մինչեւ ամբողջական կասեցումը է հասել:
  • Ուլտրաձայնային lysis: Տեղի նմուշը է սառույցը լողանում. Համար բջջային կկազմալուծվի, sonicate կասեցնելու 60-90-րդ bursts (օգտագործելով ձեր ultrasonicator ի իմպուլսի ռեժիմ):
  • Առանձնացման: Centrifuge է lysate (օրինակ 10 րոպե. Էր 10,000 x գ ժամը 4degC): Առանձնացնել supernatant է բջջային գնդիկ ուշադիր. The supernatant է ընդհանուր բջջային lysate: Հետո, քամում է supernatant, դուք ձեռք բերել պարզելու հեղուկ է լուծելի բջջային սպիտակուցային.

 

Տեսանյութում ցուցադրվում է ուլտրաձայնային նմուշի պատրաստման UIP400MTP համակարգը, որը թույլ է տալիս հուսալի նմուշի պատրաստում ցանկացած ստանդարտ բազմաբնակարանային թիթեղներից՝ օգտագործելով բարձր ինտենսիվության ուլտրաձայնային հետազոտություն: UIP400MTP-ի բնորոշ կիրառությունները ներառում են բջիջների լիզը, ԴՆԹ, ՌՆԹ և քրոմատինի կտրումը, ինչպես նաև սպիտակուցի արդյունահանումը:

Ultrasonicator UIP400MTP բազմահորս ափսեի ձայնայնացման համար

Տեսանյութի մանրապատկեր

 
Ամենատարածված հայտերը ultrasonicators կենսաբանության եւ կենսատեխնոլոգիայի են

  • Բջջային քաղվածք պատրաստում
  • Խմորիչի, բակտերիաների, բույսերի բջիջների, փափուկ կամ կոշտ բջջային հյուսվածքի, նուկլեինային նյութի խախտում
  • Protein արդյունահանման
  • Պատրաստում եւ մեկուսացումը ֆերմենտների
  • Արտադրությունը անտիգենների
  • ԴՆԹ հանույթ եւ / կամ նպատակային fragmentation
  • liposome պատրաստում
Բջիջների խզումը, լիզացումը և ուլտրաձայնային արդյունահանումը լաբորատորիաներում նմուշի պատրաստման արդյունավետ մեթոդ է:

Բջիջների խափանումը զոնդի տիպի ուլտրաձայնային սարքով նմուշի պատրաստման արդյունավետ մեթոդ է:

Ստորև բերված աղյուսակը ձեզ տալիս է ակնարկ մեր ուլտրաձայնային սարքերի վերաբերյալ բջիջների խզման և արդյունահանման համար: Կտտացրեք սարքի տեսակի վրա՝ յուրաքանչյուր ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորի մասին լրացուցիչ տեղեկություններ ստանալու համար: Մեր լավ պատրաստված և երկար տարիների փորձ ունեցող տեխնիկական անձնակազմը ուրախ կլինի օգնել ձեզ ընտրել ձեր նմուշների համար ամենահարմար ուլտրաձայնային սարքը:
 

խմբաքանակի VolumeԾախսի RateԱռաջարկվող սարքեր
մինչև 10 սրվակ կամ խողովակnaVialTweeter- ը
բազմաբնակարան / միկրոտիտրային թիթեղներnaUIP400MTP
բազմաթիվ խողովակներ / անոթներnaCuphorn
1-ից 500 մլ10-ից մինչեւ 200 մլ / վրկUP100H
10-ից 1000 մլ20-ից 200 մլ / րոպեUf200 ः տ,, UP200St
10-ից մինչեւ 2000 մլ20-ից 400 մլ / վրկUP400St

Հետադարձ կապ / Հարցրեք ավելի շատ տեղեկությունների համար

Խոսեք մեզ հետ ձեր բջիջների լիզի և արդյունահանման գործընթացի մասին: Մենք ձեզ խորհուրդ կտանք բջիջների խանգարման համար առավել հարմար ուլտրաձայնային սարքի և մշակման պարամետրերը:





Խնդրում ենք նկատի ունենալ մեր Գաղտնիության քաղաքականություն,


 

Հաճախորդների դիմումների գնահատման և օպտիմալացման համար Hielscher Ultrasonics-ն առաջարկում է լիովին կահավորված ուլտրաձայնային պրոցեսի լաբորատորիա: Խնդրում ենք կապնվել մեզ հետ լրացուցիչ տեղեկությունների համար:
Այս տեսանյութը ցույց է տալիս 100 վտ հզորությամբ ուլտրաձայնային հոմոգենիզատոր UP100H բուսաբանական նյութերի արդյունահանման համար:

Կենսաակտիվ միացությունների ուլտրաձայնային արդյունահանում

Տեսանյութի մանրապատկեր



Պէսպէս դիմումները ուլտրաձայնային մասնաճյուղերի դուրս ոլորտներում կենսատեխնոլոգիայի, bioengineering, միկրոկենսաբանության, մոլեկուլային կենսաբանության, կենսաքիմիայի, իմունոլոգիայի, բակտերիոլոգիա, վիրուսաբանության, Պրոտեոմիկա, գենետիկայի, ֆիզիոլոգիայի, բջջային կենսաբանության, արյունաբանության եւ բուսաբանության.

Լիզիս. Բջջային կառուցվածքների խախտում

Բջիջները պաշտպանված են կիսամյակային permeable պլազմայի մեմբրանի, որը բաղկացած է մի phospho-լիպիդային երկշերտ (նաեւ սպիտակուցը լիպիդային երկշերտ, ձեւավորվում է hydrophobic լիպիդների եւ hydrophilic ֆոսֆոր մոլեկուլների հետ ներդրված սպիտակուցային մոլեկուլների) եւ ստեղծում է պատնեշ միջեւ բջջային interiors (cytoplasm) եւ որ Extracellular միջավայրը: Բույսերի բջիջները եւ prokaryotic բջիջները շրջապատված է բջջային պատի. Պայմանավորված է բազմաթիվ շերտերի հաստ բջջային պատի Հյուրատետր բջջանյութ, բուսական բջիջները դժվար է lyse քան կենդանիների բջիջների. Բջիջը ինտերիեր, ինչպես, օրինակ, organelles, կորիզ, mitochondrion, այն կայունացել է, որ cytoskeleton.
Ըստ նկարագիրը բջիջները, որ այն ուղղված է դրա պարունակության որակական եւ առանձնացնելով organelles, սպիտակուցներ, ԴՆԹ-ն, mRNA կամ այլ biomolecules:

Բջիջների լիզիսի սովորական մեթոդները և դրանց թերությունները

Կան մի քանի մեթոդներ lysate բջիջները, որոնք կարելի է բաժանել մեխանիկական եւ քիմիական մեթոդներով, որոնք ներառում են օգտագործումը Լվացող եւ կամ լուծիչների, դիմումը բարձր ճնշման, կամ օգտագործումը կաթիլ ջրաղացին կամ ֆրանսիական մամուլում: Առավել խնդրահարույց թերությունն այդ մեթոդներով է դժվար վերահսկողության եւ կարգաբերում գործընթացի պարամետրերի եւ այդպիսով ազդեցությունը:
Ստորև բերված աղյուսակը ցույց է տալիս լիզինգի ընդհանուր մեթոդների հիմնական թերությունները.

Աղյուսակում թվարկված են բջիջների խզման և լուծման սովորական մեթոդները և ցույց են տալիս յուրաքանչյուր մեթոդի հիմնական թերությունները:

Աղյուսակ `ավանդական մեթոդների բջջային lysis ունեն խոշոր թերությունները

 

Լիզիսի կարգը

Lysis է զգայուն գործընթաց է: Ընթացքում lysis պաշտպանությունը բջջային մեմբրանի է ոչնչացվել, սակայն ապաակտիվացման, դենատուրացիա եւ դեգրադացիայի արդյունահանվող սպիտակուցների կողմից unphysiological միջավայրում (շեղումը pH արժեք) պետք է կանխել: Այդ իսկ պատճառով, ընդհանուր առմամբ, lysis իրականացվում է բուֆերային լուծում. Շատ դժվարություններ են ծագել անվերահսկելի բջջային կազմալուծման արդյունքում է անհասցե ազատ արձակել բոլոր ներբջջային նյութական կամ / եւ denaturation նպատակային արտադրանքի.

Գրականություն / հղումներ

Մենք ուրախ կլինենք քննարկել ձեր գործընթացը:

Եկեք կապ հաստատենք: