Ուլտրաձայնային կիրառություններ MonkeyPox վիրուսում

Ուլտրաձայնային ախտորոշումը մշակման կարևոր մեթոդ է ջրծաղիկի վիրուսի (MPXV) վերլուծական նմուշներից մեկուսացման, վիրուսի ԴՆԹ-ի մասնատման, ինչպես նաև կապիկների դեմ պատվաստանյութերի արտադրության համար: Նմուշի պատրաստման համար նախքան ախտորոշումը և անալիզը (PCR, ELISA և այլն) ուլտրաձայնային ախտորոշումն օգտագործվում է բջիջները լիզելու համար՝ կապիկի սնկային վիրուսը բջջի ներսից և/կամ մասնատելու ԴՆԹ-ից ազատելու համար: Պատվաստանյութերի արտադրության մեջ կիրառությունները տատանվում են՝ սկսած վիրուսի մասնիկների/ԴՆԹ-ի պատրաստումից, թմրամիջոցների կրիչների մեջ պարուրվելուց և պատվաստանյութի ձևավորումից:
Ստորև կարող եք գտնել մանրամասն տեղեկատվություն ուլտրաձայնային կապիկի վիրուսի նմուշի պատրաստման, ինչպես նաև MPXV պատվաստանյութի ուլտրաձայնային օգնությամբ:

 

Այն, ինչ դուք կգտնեք այս էջում.

Տեղեկատվության պահանջ





Բարձր արդյունավետության ուլտրաձայնային սարքերը շատ պատվաստանյութերի արտադրության համար կարևոր մշակման գործիք են:

Այս համակարգը 2x 1կՎտ հզորությամբ ուլտրաձայնային սարքերի համար՝ շարունակական հոսքի շահագործման համար, տեղադրված է պատվաստանյութերի արտադրության հաստատությունում:

Ուլտրաձայնային լիզը և ԴՆԹ-ի մասնատումը մինչև պոլիմերազային շղթայական ռեակցիան (PCR)

Կապիկի ջրծաղիկի վիրուսի վարակը հայտնաբերվում է նուկլեինաթթվի ուժեղացման թեստով (NAAT)՝ օգտագործելով իրական ժամանակում կամ սովորական պոլիմերազային շղթայական ռեակցիա (PCR), վիրուսային ԴՆԹ-ի եզակի հաջորդականությունների հայտնաբերման համար: Նմուշը (օրինակ՝ քիթ-կոկորդային խոռոչի փոխարկումից կամ մաշկի բիոպսիայից) պարունակում է վիրուս բջիջներում:
Վերլուծության համար վիրուսը պետք է ազատվի բջիջներից, իսկ վիրուսային ԴՆԹ-ն պետք է մասնատվի PCR-ի համար:

Ուլտրաձայնային Լիզիս.

Ուլտրաձայնային սարք UP200Ht microtip S26d2 կենսաբանական նմուշների ուլտրաձայնային լուծարման համարԲջիջների ուլտրաձայնային խանգարումը/լիզացումը հուսալի և արդյունավետ մեթոդ է բջիջների նմուշներից վիրուսները մեկուսացնելու համար և, հետևաբար, նախընտրելի մեթոդ քիմիական նյութերի նկատմամբ, ինչպիսիք են լիզոզիմը, պրոտեինազ K և տարբեր լվացող միջոցները, որոնք այլընտրանքային կերպով օգտագործվում են բջիջների լիզացման և ԴՆԹ-ի ազատման համար:
Այնուամենայնիվ, նման քիմիական ռեակտիվների օգտագործումը պահանջում է ժամանակատար նմուշի պատրաստում մի քանի քայլով, նախքան PCR վերլուծությունը, որպեսզի կանխվի PCR ռեակցիայի արգելակումը: Քանի որ PCR ինհիբիտորները ազդում են ուժեղացման արդյունավետության վրա, չհեռացված ինհիբիտորների քանակի փոքր տատանումները կարող են հանգեցնել PCR արտադրանքի ուժեղացման մեծ տատանումների (Diaco, 1995):
Լիզիզի համար ուլտրաձայնային ախտահանման առավելությունն այն է, որ ցանկալի է բջջային կառուցվածքների ամբողջական խախտումը և ԴՆԹ-ի ազատումը առանց լիզինգի ռեակտիվների և ժամանակատար նմուշների պատրաստման: (տես Fykse et al., 2003 թ.)

Ուլտրաձայնային ԴՆԹ-ի մասնատում.

Ուլտրաձայնային ԴՆԹ-ի մասնատումը պարզ և հուսալի է, քանի որ արտադրում է երկարությամբ կարգավորելի ԴՆԹ բեկորներ (բազային զույգեր, bp): Օգտագործելով ուլտրաձայնը, ԴՆԹ-ն կարող է արդյունավետորեն մասնատվել ԴՆԹ-ի նպատակային երկարությանը: Ուլտրաձայնային պարամետրերի ճշգրիտ վերահսկումը և հովացման բարդ տարբերակները կանխում են ԴՆԹ-ի քայքայումը:
Կարդացեք ավելին ուլտրաձայնային ԴՆԹ-ի մասնատման մասին:

 

Տեսանյութում ցուցադրվում է ուլտրաձայնային նմուշի պատրաստման UIP400MTP համակարգը, որը թույլ է տալիս հուսալի նմուշի պատրաստում ցանկացած ստանդարտ բազմաբնակարանային թիթեղներից՝ օգտագործելով բարձր ինտենսիվության ուլտրաձայնային հետազոտություն: UIP400MTP-ի բնորոշ կիրառությունները ներառում են բջիջների լիզը, ԴՆԹ, ՌՆԹ և քրոմատինի կտրումը, ինչպես նաև սպիտակուցի արդյունահանումը:

Ultrasonicator UIP400MTP բազմահորս ափսեի ձայնայնացման համար

Տեղեկատվության պահանջ





Ուլտրաձայնային կիրառություններ Monkeypox վիրուսի պատվաստանյութում

Ultrasonication-ը օգտագործվում է այնպիսի պատվաստանյութեր արտադրելու համար, ինչպիսիք են կապիկի դեմ պատվաստանյութերը: Կապիկի վիրուսի դեմ օգտագործվող պատվաստանյութերը ներկայումս կենդանի վիրուսի պատվաստանյութեր են: Նոր մշակված պատվաստանյութերը կարող են օգտագործել այլ հարթակներ, ինչպիսիք են ԴՆԹ-ի վրա հիմնված: Ներկայում պարունակում է փոփոխված Vaccinia Ankara վիրուսներ՝ թուլացած, չվերարտադրվող օրթոպոքսվիրուս: Այն նաև պարունակում է տրիս (տրիս-ամինոմեթան) և նատրիումի քլորիդ: Պատվաստանյութը կարող է նաև պարունակել փոքր քանակությամբ ԴՆԹ և սպիտակուց՝ հավի սաղմի ֆիբրոբլաստ բջիջներից, որոնք օգտագործվում են պատվաստանյութի վիրուսը, բենզոնազը և հակաբիոտիկ միացությունները, ինչպիսիք են գենտամիցինը և ցիպրոֆլոքասինը, աճեցնելու համար:

Ուլտրաձայնային հոմոգենացումն օգտագործվում է կենդանի թուլացած վիրուսի պատվաստանյութերի, ԴՆԹ պատվաստանյութերի, բազմավալենտ ԴՆԹ կոկտեյլների, mRNA պատվաստանյութերի, ռեկոմբինանտ սպիտակուցային պատվաստանյութերի, վիրուսանման մասնիկների պատվաստանյութերի և այլնի արտադրության մեջ:

Ուլտրաձայնային կիրառությունները պատվաստանյութերի արտադրության մեջ տատանվում են

  • վիրուսի մասնիկների և գործակալների ցրում
  • էմուլսացիա
  • վիրուսների ապաակտիվացում
  • դեղամիջոցի կրիչի ձևակերպում (NLC, SLN)
  • Ներդաշնակություն
  • գործակալների լուծարում
  • օժանդակ նյութերի պատրաստում
  • Degassing / De-Aeration

 

Դուք կարող եք ավելի խորը տեղեկատվություն գտնել ուլտրաձայնային հավելվածների մասին՝ պատվաստանյութերի բարելավված արտադրության համար:

Ծաղկի վիրուսի ուլտրաձայնային մեկուսացման արձանագրություն

Stittelaar-ի հետազոտական թիմը (2005) օգտագործել է ուլտրաձայնային լուծ՝ կապիկի ծաղիկի վիրուսը ազատելու համար աճող հյուրընկալող բջիջների կուլտուրայից, ինչպես նաև վարակված պրիմատներից կոկորդի փոխանակման միջոցով ստացված բջիջներից:

Կապիկի դեմ պատվաստանյութի պատրաստում.

Monkeypox վիրուսները աճեցվել են հատուկ պաթոգենից զերծ հավի սաղմի ֆիբրոբլաստ բջիջների վրա: 1-ից 2 օր ինկուբացիայից հետո վիրուս-բջիջների կախոցը հավաքվել է սառեցման-հալեցման մեկ փուլով և այնուհետև կենտրոնացվել ցենտրիֆուգման միջոցով: Գնդիկը նորից կասեցվեց և ենթարկվեց ուլտրաձայնային հոմոգենացման մի քանի փուլերի:

Monkeypox վիրուսի մեկուսացում պատվաստված մակակներից.

Նմուշները երեք անգամ սառեցվել-հալվել են և հնչյունավորվել ուլտրաձայնային CupHorn-ում: Երկու նոսրացում (1:10 և 1:100) տրանսպորտային միջավայրում, որը լրացվել է 1% պտղի տավարի շիճուկով, օգտագործվել է վեց ջրհորի ափսեներում Vero բջջային մոնաշերտերը պատվաստելու համար: 37°C-ում ինկուբացիայից 1 ժամ հետո պատվաստումները հեռացվեցին և փոխարինվեցին կուլտուրայի միջավայրով, որը լրացվում էր 1% պտղի տավարի շիճուկով: Միաշերտերը մշակվել են 5 օր 37°C ջերմաստիճանում և ներկվել բյուրեղյա մանուշակագույն լուծույթով:
(տես Stittelaar et al., 2005 թ.)

Այս տեսանյութում մենք ձեզ ցույց ենք տալիս 2 կիլովատ հզորությամբ ուլտրաձայնային համակարգ մաքրման պահարանում ներկառուցված աշխատանքի համար: Hielscher-ը ուլտրաձայնային սարքավորումներ է մատակարարում գրեթե բոլոր ոլորտներին, ինչպիսիք են քիմիական արդյունաբերությունը, դեղագործությունը, կոսմետիկան, նավթաքիմիական գործընթացները, ինչպես նաև լուծիչների վրա հիմնված արդյունահանման գործընթացները: Չժանգոտվող պողպատից մաքրվող այս պահարանը նախատեսված է վտանգավոր տարածքներում աշխատելու համար: Այդ նպատակով կնքված պահարանը հաճախորդը կարող է մաքրել ազոտով կամ մաքուր օդով, որպեսզի կանխվի դյուրավառ գազերի կամ գոլորշիների մուտքը պահարան:

2 x 1000 Վտ հզորությամբ ուլտրաձայնային սարք մաքրման պահարանում՝ վտանգավոր տարածքներում տեղադրելու համար

Ուլտրաձայնային սարքեր վիրուսների վերլուծության և պատվաստանյութերի արտադրության համար

Hielscher Ultrasonics-ի արտադրանքի լայն պորտֆելը առաջարկում է իդեալական ուլտրաձայնային սարք հետազոտական և վերլուծական լաբորատորիաների, ինչպես նաև արդյունաբերական պատվաստանյութերի արտադրության համար:
Hielscher Ultrasonics-ը մասնագիտացած է բարձր արդյունավետության ուլտրաձայնային սարքերի և սոնոբիոռեակտորների նախագծման, արտադրության և բաշխման մեջ՝ հետազոտական և անալիտիկ լաբորատորիաներում օգտագործելու, ինչպես նաև արդյունաբերական պատվաստանյութերի արտադրության մեջ (օրինակ՝ պատվաստանյութեր,, API- ներ):
Hielscher Ultrasonics- ի կողմից ուլտրաձայնային գործընթացի պարամետրերի ճշգրիտ վերահսկողություն' խելացի ծրագրակազմSonication-ը կարող է կիրառվել բաց անոթների, փակ շարունակաբար խառնվող ռեակտորների և շարունակական հոսքի միջով ռեակտորների համար: Ուլտրաձայնային համակարգերի բոլոր մասերը, որոնք շփվում են հեղուկ միջավայրի հետ, պատրաստված են չժանգոտվող պողպատից, տիտանից կամ ապակուց: Ավտոկլավվող մասերը և սանիտարական կցամասերը ապահովում են արտադրությունը տակ դեղագործական պայմաններ.
Տվյալների ավտոմատ գրանցում. Խելացի ծրագրային ապահովումը ձայնագրման չափանիշների ինքնաբերաբար արձանագրում է ինտեգրված SD հիշողության քարտում: Բոլոր գործընթացի պարամետրերի ճշգրիտ վերահսկումը ապահովում է reproducibility,, արտադրության ստանդարտացումև նպաստում է դեղագործական արտադրանքի անվտանգության ստանդարտների կատարմանը:
Hielscher Ultrasonics- ը’ Ուլտրաձայնային պրոցեսորները շատ հուսալի են և կարող են ճշգրիտ կառավարվել: Բոլոր արդյունաբերական ուլտրաձայնային սարքերը կարող են ճշգրտվել, որպեսզի մատուցեն ամբողջ տիրույթը՝ ցածրից մինչև շատ բարձր ամպլիտուդներով: Hielscher-ի ուլտրաձայնային համակարգերի ամրությունը թույլ է տալիս 24/7 աշխատել ծանր պարտականությունների և պահանջկոտ միջավայրերում:

Ստորեւ ներկայացված աղյուսակը ձեզ ցույց է տալիս մեր ultrasonicators- ի մոտավոր մշակման հզորությունը:

խմբաքանակի Volume Ծախսի Rate Առաջարկվող սարքեր
բազմաբնակարան հորատանցք / միկրոտիտրային թիթեղներ հ/հ UIP400MTP
1-ից 500 մլ 10-ից մինչեւ 200 մլ / վրկ UP100H
10-ից մինչեւ 2000 մլ 20-ից 400 մլ / վրկ Uf200 ः տ,, UP400St
01-ից մինչեւ 20 լ 02-ից 4 լ / րոպե UIP2000hdT
10-ից 100 լ 2-ից 10 լ / րոպե UIP4000hdT
հ/հ 10-ից 100 լ / րոպե UIP16000
հ/հ ավելի մեծ Կլաստերի UIP16000

Կապ մեզ հետ | / Հարցրեք մեզ!

Հարցրեք ավելին

Խնդրում ենք օգտագործել ստորև բերված ձևը `ուլտրաձայնային պրոցեսորների, ծրագրերի և գնի վերաբերյալ լրացուցիչ տեղեկություններ ստանալու համար: Մենք ուրախ կլինենք ձեզ հետ քննարկել ձեր գործընթացը և առաջարկել ձեզ ուլտրաձայնային համակարգ, որը բավարարում է ձեր պահանջները:









Խնդրում ենք նկատի ունենալ մեր Գաղտնիության քաղաքականություն,


Ուլտրաձայնային հոմոգենիզատորները հուսալի են ԴՆԹ-ի կտրման համար

Ուլտրաձայնային ԴՆԹ-ի կտրում
Հարմարեցված է Jkwchui- ից CC-BY-SA.03-ի ներքո



Գրականություն / Հղումներ

  • Stittelaar, Koert; Amerongen, Geert; Kondova, Ivanela; Kuiken, Thijs; Lavieren, Rob; Pistoor, Frank; Niesters, Hubert; Doornum, Gerard; Van der Zeijst, Bernard; Mateo, Luis; Chaplin, Paul; Osterhaus, Albert (2005): Modified Vaccinia Virus Ankara Protects Macaques against Respiratory Challenge with Monkeypox Virus. Journal of Virology 79, 2005. 7845-51.
  • Shah Purvin, Parameswara Rao Vuddanda, Sanjay Kumar Singh, Achint Jain, and Sanjay Singh (2014): Pharmacokinetic and Tissue Distribution Study of Solid Lipid Nanoparticles of Zidovudine in Rats. Journal of Nanotechnology, Volume 2014.
  • J. Robin Harris, Andrei Soliakova, Richard J. Lewis, Frank Depoix, Allan Watkinson, Jeremy H. Lakeya (2012): Alhydrogel® adjuvant, ultrasonic dispersion and protein binding: a TEM and analytical study. Micron Volume 43, Issues 2–3, February 2012, 192-200.
  • Doron Melamed, Gabriel Leitner, E. Dan Heller (1991): A Vaccine against Avian Colibacillosis Based on Ultrasonic Inactivation of Escherichia coli. Avian Diseases Vol. 35, No. 1 (Jan. – Mar., 1991), 17-22.
  • Huang C-F, Wu T-C, Wu C-C, Lee C-C, Lo W-T, Hwang K-S, Hsu M-L, Peng H-J. (2011): Sublingual vaccination with sonicated Salmonella proteins and mucosal adjuvant induces mucosal and systemic immunity and protects mice from lethal enteritis. APMIS 119, 2011. 468–78.

Փաստեր Worth Իմանալով

Monkeypox վիրուս

Կապիկի ջրծաղիկը (MPV, MPXV կամ hMPXV) երկշղթա ԴՆԹ վիրուսի տեսակ է, որն առաջացնում է վիրուսային կենդանաբանական հիվանդություն։ Այս հիվանդությունը հայտնի է որպես կապիկների վարակ և կարող է առաջանալ մարդկանց և կենդանիների մոտ: Պատկանում է օրթոպոքսվիրուսների ցեղին՝ Poxviridae ընտանիքին։ Monkeypox վիրուսը մարդու օրթոպոքսվիրուսներից է variola (VARV), կովերի ջրծաղիկ (CPX) և vaccinia (VACV) վիրուսների հետ միասին: Օրթոպոքսվիրուսները բնութագրվում են խոշոր աղյուսի տեսքով վիրուսային մասնիկներով, որոնք պարունակում են մոտ 200,000 bp երկշղթա ԴՆԹ գենոմ:

ELISA փորձարկում

ELISA-ն նշանակում է Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay և պիտակավորված իմունովերլուծություն է, որը համարվում է իմունովերլուծության ոսկե ստանդարտ: ELISA-ն իմունոլոգիական թեստ է, որը գնահատվում է իր բարձր ախտորոշիչ զգայունության համար, որն օգտագործվում է մոլեկուլների հայտնաբերման և քանակականացման համար, ներառյալ հակամարմինները, անտիգենները, սպիտակուցները, գլիկոպրոտեինները և հորմոնները: ELISA-ի սկզբունքը հիմնված է հակագեն-հակամարմին փոխազդեցության վրա: Այս հակագեն-հակամարմին փոխազդեցությամբ հատուկ հակամարմինները կապվում են նրա թիրախային անտիգենին: Միայն երբ փոխազդեցությունը տեղի է ունենում, սուբստրատը կարող է կապվել ֆերմենտին և կարող է դիտվել սուբստրատի հետագա փոխակերպում, ինչը նշանակում է, որ դրական արդյունք է ստացվում:


Բարձր արդյունավետության ուլտրաձայնային! Hielscher-ի արտադրանքի տեսականին ընդգրկում է ամբողջ սպեկտրը՝ կոմպակտ լաբորատոր ուլտրաձայնային սարքից մինչև նստարանային վերին ագրեգատներից մինչև ամբողջական արդյունաբերական ուլտրաձայնային համակարգեր:

Hielscher Ultrasonics- ը արտադրում է բարձրորակ ուլտրաձայնային հոմոգենացնողներից ` Լաբորատորիա դեպի արդյունաբերական չափը