Hielscher Ultrasonics
Bit će nam drago razgovarati o vašem procesu.
Nazovite nas: +49 3328 437-420
Pošaljite nam e-mail: info@hielscher.com

Ultrazvučne primjene u virusu MonkeyPox

Ultrazvučna obrada je važna metoda obrade za izolaciju virusa majmunskih boginja (MPXV) iz analitičkih uzoraka, za fragmentaciju DNK virusa kao iu proizvodnji cjepiva protiv majmunskih boginja. Za pripremu uzorka prije dijagnostike i analize (PCR, ELISA itd.) ultrazvuk se koristi za lizu stanica kako bi se virus majmunskih boginja oslobodio iz unutrašnjosti stanice i/ili fragmentirao DNA. U proizvodnji cjepiva, primjene se kreću od pripreme virusnih čestica/DNK, kapsuliranja u nosače lijeka i formuliranja inokula.
U nastavku možete pronaći detaljne informacije o ultrazvučnoj pripremi uzorka virusa majmunskih boginja kao i ultrazvučno potpomognutoj proizvodnji MPXV cjepiva.

 

Što ćete pronaći na ovoj stranici:

Zahtjev za informacije




Imajte na umu naše politika privatnosti.




Ultrazvučni uređaji visokih performansi ključni su alat za obradu u proizvodnji mnogih cjepiva.

Ovaj sustav od 2x 1kW ultrazvučnika za kontinuirani rad instaliran je u pogonu za proizvodnju cjepiva.

Ultrazvučna liza i fragmentacija DNK prije lančane reakcije polimerazom (PCR)

Infekcija virusom majmunskih boginja otkriva se testiranjem amplifikacije nukleinske kiseline (NAAT), korištenjem u stvarnom vremenu ili konvencionalne lančane reakcije polimeraze (PCR), za otkrivanje jedinstvenih sekvenci virusne DNA. Uzorak (npr. iz nazofaringealne zamjene ili biopsije kože) sadrži virus u stanicama.
Za analizu, virus se mora osloboditi iz stanica i virusna DNA mora biti fragmentirana za PCR.

Ultrazvučna liza:

Ultrasonicator UP200Ht s mikrovrhom S26d2 za ultrazvučnu lizu bioloških uzorakaUltrazvučno razbijanje/liza stanica je pouzdana i učinkovita metoda za izolaciju virusa iz staničnih uzoraka i stoga je poželjnija tehnika u odnosu na kemijska sredstva, kao što su lizozim, proteinaza K i različiti deterdženti koji se alternativno koriste za postizanje lize stanica i oslobađanje DNA.
Međutim, uporaba takvih kemijskih reagensa zahtijeva dugotrajnu pripremu uzorka u nekoliko koraka prije PCR analize kako bi se spriječila inhibicija PCR reakcije. Budući da PCR inhibitori utječu na učinkovitost umnožavanja, male varijacije u količini inhibitora koji nisu uklonjeni mogu dovesti do velikih varijacija u umnažanju produkta PCR (Diaco, 1995.).
Prednost ultrazvuka za lizu je u tome što su poželjni potpuni poremećaji staničnih struktura i oslobađanje DNA bez potrebe za reagensima za lizu i dugotrajne pripreme uzorka. (usp. Fykse i sur., 2003.)

Ultrazvučna fragmentacija DNK:

Ultrazvučna fragmentacija DNA jednostavna je i pouzdana jer proizvodi fragmente DNA podesive duljine (parovi baza, bp). Korištenjem ultrazvuka, DNK se može učinkovito fragmentirati na ciljanu duljinu DNK. Precizna kontrola ultrazvučnih parametara i sofisticirane mogućnosti hlađenja sprječavaju degradaciju DNK.
Pročitajte više o ultrazvučnoj fragmentaciji DNK!

 

Videozapis prikazuje ultrazvučni sustav za pripremu uzorka UIP400MTP, koji omogućuje pouzdanu pripremu uzorka bilo koje standardne ploče s više jažica korištenjem ultrazvuka visokog intenziteta. Tipične primjene UIP400MTP uključuju lizu stanica, DNA, RNA i cijepanje kromatina kao i ekstrakciju proteina.

Ultrasonicator UIP400MTP za sonikaciju ploča s više jažica

Video sličica

Zahtjev za informacije




Imajte na umu naše politika privatnosti.




Ultrazvučne primjene u cjepivu protiv virusa majmunskih boginja

Ultrazvuk se koristi za proizvodnju cjepiva kao što su cjepiva protiv majmunskih boginja. Cjepiva koja se koriste protiv virusa majmunskih boginja trenutno su živa virusna cjepiva. Novorazvijena cjepiva mogu koristiti druge platforme kao što je DNK-temeljena. Trenutačno sadrži modificirani Vaccinia Ankara viurs, atenuirani ortopoksvirus koji se ne replicira. Također sadrži Tris (tris-aminometan) i natrijev klorid. Cjepivo također može sadržavati male količine DNK i proteina iz stanica fibroblasta pilećeg embrija, koje se koriste za uzgoj virusa cjepiva, benzonaze i antibiotskih spojeva kao što su gentamicin i ciprofloksacin.

Ultrazvučna homogenizacija koristi se u proizvodnji živih atenuiranih virusnih cjepiva, DNA cjepiva, viševalentnih DNA koktela, mRNA cjepiva, rekombinantnih proteinskih cjepiva, cjepiva s česticama sličnim virusima itd.

Primjene ultrazvuka u proizvodnji cjepiva kreću se od

  • disperzija virusnih čestica i uzročnika
  • emulgiranje
  • inaktivacija virusa
  • formulacija nosača lijeka (NLC, SLN)
  • enkapsulacija
  • otapanje sredstava
  • priprema pomoćnih sredstava
  • Otplinjavanje/odzračivanje

 

Možete pronaći više detaljnih informacija o ultrazvučnim primjenama za poboljšanu proizvodnju cjepiva!

Protokol za ultrazvučnu izolaciju virusa majmunskih boginja

Istraživački tim Stittelaara (2005.) upotrijebio je ultrazvučnu lizu za oslobađanje virusa majmunskih boginja iz kulture stanica domaćina rasta kao i iz stanica dobivenih zamjenom grla zaraženih primata.

Priprema cjepiva protiv majmunskih boginja:

Virusi majmunskih boginja uzgojeni su na stanicama fibroblasta pilećeg embrija bez specifičnih patogena. Nakon inkubacije od 1 do 2 dana, suspenzija virusnih stanica sakupljena je jednom rundom zamrzavanja-odmrzavanja i zatim koncentrirana centrifugiranjem. Talog je resuspendiran i podvrgnut nekoliko ciklusa ultrazvučne homogenizacije.

Izolacija virusa majmunskih boginja iz cijepljenih makaka:

Uzorci su zamrznuti-odmrznuti tri puta i sonikirani u ultrazvučnom CupHornu. Dva razrjeđenja (1:10 i 1:100) u transportnom mediju s dodatkom 1% fetalnog goveđeg seruma korištena su za inokulaciju monoslojeva Vero stanica u ploče sa šest jažica. Nakon 1 h inkubacije na 37°C, inokula je uklonjena i zamijenjena medijem za kulturu s dodatkom 1% fetalnog goveđeg seruma. Jednoslojevi su uzgajani 5 dana na 37°C i obojeni kristalno ljubičastom otopinom.
(usp. Stittelaar i sur., 2005.)

U ovom videu prikazujemo vam ultrazvučni sustav od 2 kilovata za inline rad u ormaru koji se može pročišćavati. Hielscher isporučuje ultrazvučnu opremu za gotovo sve industrije, kao što su kemijska industrija, farmaceutska, kozmetička, petrokemijski procesi kao i za procese ekstrakcije na bazi otapala. Ovaj ormarić od nehrđajućeg čelika s mogućnošću čišćenja dizajniran je za rad u opasnim područjima. U tu svrhu kupac može pročistiti zatvoreni ormarić dušikom ili svježim zrakom kako bi se spriječio ulazak zapaljivih plinova ili para u ormarić.

2x 1000 W ultrazvučnika u ormaru koji se može čistiti za ugradnju u opasnim područjima

Video sličica

Ultrazvučni uređaji za analizu virusa i proizvodnju cjepiva

Širok portfelj proizvoda tvrtke Hielscher Ultrasonics nudi idealan ultrazvučni uređaj za istraživačke i analitičke laboratorije, kao i za industrijsku proizvodnju cjepiva.
Hielscher Ultrasonics specijaliziran je za dizajn, proizvodnju i distribuciju visokoučinkovitih ultrazvučnih uređaja i sono-bioreaktora za upotrebu u istraživačkim i analitičkim laboratorijima, kao i za primjenu u industrijskoj proizvodnji cjepiva (npr. cjepiva, Apis).
Hielscher Ultrasonics preciznu kontrolu nad parametrima ultrazvučnog procesa' inteligentni softverSonikacija se može primijeniti na otvorene posude, zatvorene reaktore s kontinuiranim miješanjem i reaktore s kontinuiranim protokom. Svi dijelovi ultrazvučnih sustava koji dolaze u kontakt s tekućim medijem izrađeni su od nehrđajućeg čelika, titana ili stakla. Dijelovi koji se mogu autoklavirati i sanitarna oprema osiguravaju proizvodnju pod uvjetima farmaceutske kvalitete.
Automatsko snimanje podataka: Inteligentni softver automatski bilježi parametre procesa ultrazvuka na integriranu SD memorijsku karticu. Precizna kontrola svih procesnih parametara osigurava ponovljivost, standardizacija proizvodnje, te olakšava ispunjavanje standarda sigurnosti farmaceutskih proizvoda.
Hielscher Ultrasonics’ ultrazvučni procesori su vrlo pouzdani i mogu se precizno kontrolirati. Svi industrijski uređaji za ultrazvuk mogu se prilagoditi za isporuku cijelog raspona od nižih do vrlo visokih amplituda. Robusnost Hielscherovih ultrazvučnih sustava omogućuje 24/7 rad pod teškim uvjetima iu zahtjevnim okruženjima.

Donja tablica daje vam naznaku približnog kapaciteta obrade naših ultrazvučnih uređaja:

Volumen serije Protok Preporučeni uređaji
ploče s više jažica / mikrotitarske ploče n/a UIP400MTP
1 do 500 ml 10 do 200 ml/min UP100H
10 do 2000 ml 20 do 400 ml/min UP200Ht, UP400St
0.1 do 20L 0.2 do 4L/min UIP2000hdT
10 do 100l 2 do 10L/min UIP4000hdT
n/a 10 do 100L/min UIP16000
n/a veći klaster od UIP16000

Kontaktirajte nas! / Pitajte nas!

Pitajte za više informacija

Molimo upotrijebite donji obrazac kako biste zatražili dodatne informacije o ultrazvučnim procesorima, primjeni i cijeni. Bit će nam drago razgovarati s vama o vašem procesu i ponuditi vam ultrazvučni sustav koji odgovara vašim zahtjevima!









Imajte na umu naše politika privatnosti.




Ultrazvučni homogenizatori su pouzdani za smicanje DNA

Ultrazvučno rezanje DNK
Prilagođeno iz Jkwchui pod CC-BY-SA.03



Literatura / Reference

  • Stittelaar, Koert; Amerongen, Geert; Kondova, Ivanela; Kuiken, Thijs; Lavieren, Rob; Pistoor, Frank; Niesters, Hubert; Doornum, Gerard; Van der Zeijst, Bernard; Mateo, Luis; Chaplin, Paul; Osterhaus, Albert (2005): Modified Vaccinia Virus Ankara Protects Macaques against Respiratory Challenge with Monkeypox Virus. Journal of Virology 79, 2005. 7845-51.
  • Shah Purvin, Parameswara Rao Vuddanda, Sanjay Kumar Singh, Achint Jain, and Sanjay Singh (2014): Pharmacokinetic and Tissue Distribution Study of Solid Lipid Nanoparticles of Zidov in Rats. Journal of Nanotechnology, Volume 2014.
  • J. Robin Harris, Andrei Soliakova, Richard J. Lewis, Frank Depoix, Allan Watkinson, Jeremy H. Lakeya (2012): Alhydrogel® adjuvant, ultrasonic dispersion and protein binding: a TEM and analytical study. Micron Volume 43, Issues 2–3, February 2012, 192-200.
  • Doron Melamed, Gabriel Leitner, E. Dan Heller (1991): A Vaccine against Avian Colibacillosis Based on Ultrasonic Inactivation of Escherichia coli. Avian Diseases Vol. 35, No. 1 (Jan. – Mar., 1991), 17-22.
  • Huang C-F, Wu T-C, Wu C-C, Lee C-C, Lo W-T, Hwang K-S, Hsu M-L, Peng H-J. (2011): Sublingual vaccination with sonicated Salmonella proteins and mucosal adjuvant induces mucosal and systemic immunity and protects mice from lethal enteritis. APMIS 119, 2011. 468–78.

Činjenice koje vrijedi znati

Virus majmunskih boginja

Majmunske boginje (MPV, MPXV ili hMPXV) su vrsta virusa dvolančane DNA koja uzrokuje virusnu zoonotsku bolest. Ova bolest je poznata kao infekcija majmunskim boginjama i može se pojaviti kod ljudi i životinja. Pripada rodu Orthopoxvirus iz obitelji Poxviridae. Virus majmunskih boginja jedan je od ljudskih ortopoksvirusa zajedno s virusima variole (VARV), kravljih boginja (CPX) i vakcinije (VACV). Ortopoksviruse karakteriziraju velike čestice virusa u obliku cigle, koje sadrže genom dvolančane DNA od približno 200 000 bp.

ELISA analiza

ELISA je kratica za Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay i označavani je imunotest koji se smatra zlatnim standardom imunotestova. ELISA je imunološki test, cijenjen zbog svoje visoke dijagnostičke osjetljivosti, koristi se za otkrivanje i kvantificiranje molekula, uključujući antitijela, antigene, proteine, glikoproteine i hormone. Princip ELISA-e temelji se na interakciji antigen-antitijelo. Ovom interakcijom antigen-antitijelo, specifična antitijela vežu se na ciljni antigen. Tek kada dođe do interakcije, supstrat se može vezati na enzim i može se uočiti naknadna pretvorba supstrata, što znači da se dobiva pozitivan rezultat.


High performance ultrasonics! Hielscher's product range covers the full spectrum from the compact lab ultrasonicator over bench-top units to full-industrial ultrasonic systems.

Hielscher Ultrasonics proizvodi ultrazvučne homogenizatore visokih performansi od laboratorija do industrijska veličina.

Bit će nam drago razgovarati o vašem procesu.

Let's get in contact.