יישומים על-קוליים בנגיף אבעבועות הקופים

אולטראסוניזציה היא שיטת עיבוד חשובה לבידוד נגיף אבעבועות הקופים (MPXV) מדגימות אנליטיות, לפיצול דנ"א של הנגיף וכן לייצור חיסונים נגד אבעבועות קופים. להכנת דגימה לפני אבחון וניתוח (PCR, ELISA וכו ') ultrasonication משמש כדי lyse תאים על מנת לשחרר את וירוס אבעבועות הקופים מן פנים התא ו / או כדי לפצל DNA. בייצור חיסונים, היישומים נעים בין הכנת חלקיקי וירוס / DNA, אנקפסולציה בנשאי תרופות וגיבוש האינוקולה.
להלן תוכלו למצוא מידע מפורט על הכנת דגימת נגיף אבעבועות קופים קוליות, כמו גם על ייצור חיסון MPXV בסיוע קולי.

 

מה תמצאו בדף זה:

בקשת מידע





אולטרה-סוניקטורים בעלי ביצועים גבוהים הם כלי עיבוד קריטי בייצור חיסונים רבים.

מערכת זו של 2x 1kW ultrasonicators לפעולה זרימה רציפה מותקן במתקן ייצור חיסונים.

ליזה קולית ופיצול DNA לפני תגובת שרשרת פולימראז (PCR)

זיהום בנגיף אבעבועות הקופים מזוהה על ידי בדיקת הגברה של חומצות גרעין (NAAT), תוך שימוש בתגובת שרשרת פולימראז (PCR) בזמן אמת או קונבנציונלית, לזיהוי רצפים ייחודיים של דנ"א נגיפי. הדגימה (למשל מהחלפת אף-לוע או ביופסיות עור) מכילה את הנגיף בתאים.
לצורך ניתוח, הנגיף חייב להשתחרר מהתאים והדנ"א הנגיפי חייב להיות מקוטע עבור PCR.

ליזיס קולית:

Ultrasonicator UP200Ht עם microtip S26d2 עבור תמוגה קולית של דגימות ביולוגיותשיבוש / ליזה של תאים על-קוליים היא שיטה אמינה ויעילה לבידוד נגיפים מדגימות תאים ובכך טכניקה עדיפה על פני חומרים כימיים, כגון ליזוזים, פרוטאינאז K ודטרגנטים שונים המשמשים לחלופין להשגת תזה תאית ושחרור דנ"א.
עם זאת, השימוש בריאגנטים כימיים כאלה דורש הכנת דגימה גוזלת זמן במספר שלבים לפני ניתוח PCR כדי למנוע עיכוב של תגובת PCR. מכיוון שמעכבי PCR משפיעים על יעילות ההגברה, וריאציות קטנות של כמות המעכבים שאינם מוסרים יכולות להוביל לשינויים גדולים בהגברת מוצר ה-PCR (Diaco, 1995).
היתרון של אולטרה-סוניזציה לתזה הוא ששיבוש מוחלט של מבנים תאיים ושחרור דנ"א ללא צורך ברינגים משקרים והכנת דגימות גוזלות זמן רב הם רצויים. (ראה: Fykse et al., 2003)

פיצול דנ"א על-קולי:

פיצול דנ"א על-קולי הוא פשוט ואמין, וכך גם מייצר מקטעי דנ"א הניתנים לכוונון באורך (basepairs, bp). באמצעות אולטרסאונד, דנ"א יכול להיות מקוטע ביעילות לאורך הדנ"א הממוקד. שליטה מדויקת בפרמטרים על-קוליים ואפשרויות קירור מתוחכמות מונעות פגיעה בדנ"א.
קרא עוד על פיצול דנ"א על-קולי!

 

הווידאו מראה את מערכת הכנת מדגם קולי UIP400MTP, המאפשר הכנת מדגם אמין של כל צלחות מרובות טוב סטנדרטי באמצעות אולטרסאונד בעוצמה גבוהה. יישומים אופייניים של UIP400MTP כוללים תמוגה בתא, DNA, RNA, גיזת כרומטין, כמו גם מיצוי חלבון.

אולטרה סאונד UIP400MTP עבור sonication צלחת רב-באר

בקשת מידע





יישומים קוליים בחיסון נגד אבעבועות קופים

אולטראסוניזציה משמשת לייצור חיסונים כגון חיסונים נגד אבעבועות קופים. חיסונים המשמשים נגד נגיף אבעבועות הקופים הם כיום חיסונים נגד נגיפים חיים. חיסונים שפותחו לאחרונה עשויים להשתמש בפלטפורמות אחרות כגון מבוססות דנ"א The מכיל כיום Vaccinia Ankara viurs שונה, אורתו-וירוס מוחלש ולא משכפל. הוא מכיל גם טריס (טריס-אמינומתאן) ונתרן כלורי. החיסון עשוי להכיל גם כמויות קטנות של דנ"א וחלבון מתאי הפיברובלסט של עובר העוף, המשמשים לגידול נגיף החיסון, בנזונאז ותרכובות אנטיביוטיות כגון גנטמיצין וציפרופלוקסאצין.

הומוגניזציה קולית משמשת לייצור חיסונים נגד נגיפים מוחלשים חיים, חיסוני דנ"א, קוקטיילים של דנ"א רב-ערכי, חיסוני mRNA, חיסוני חלבון רקומביננטי, חיסוני חלקיקים דמויי וירוסים וכו '.

היישומים של אולטראסוניקה בייצור חיסונים נעים בין

  • פיזור חלקיקי וירוסים וסוכנים
  • תחליב
  • השבתה של וירוסים
  • נוסחת נשא תרופות (NLC, SLN)
  • כימוס
  • המסת סוכנים
  • הכנת אדג'ובנטים
  • דגה / דה-Aeration

 

אתה יכול למצוא מידע מעמיק יותר על יישומים קוליים לייצור חיסונים משופר!

פרוטוקול לבידוד על-קולי של נגיף אבעבועות הקופים

צוות המחקר של Stittelaar (2005) השתמש בליזה קולית כדי לשחרר את נגיף אבעבועות הקופים מתרבית התאים המארחים הגדילה, כמו גם מתאים שהתקבלו באמצעות החלפות גרון מפרימטים נגועים.

הכנת חיסון נגד אבעבועות קופים:

נגיפי אבעבועות הקופים גודלו על תאים פיברובלסטים של עובר עוף ספציפי ללא פתוגנים. לאחר הדגירה למשך יום עד יומיים, תרחיף תאי הנגיף נקצר על ידי סיבוב אחד של הפשרה בהקפאה ולאחר מכן התרכז בצנטריפוגה. הכדור עבר החייאה והיה נתון למספר סבבים של הומוגניזציה קולית.

בידוד נגיף אבעבועות הקופים מקופי מקוק מחוסנים:

דגימות הופשרו בהקפאה שלוש פעמים והושמעו ב-CupHorn על-קולי. שני דילולים (1:10 ו-1:100) במדיום הובלה בתוספת 1% סרום בקר עוברי שימשו לחיסון מונו-שכבות של תאי Vero בצלחות של שש בארות. לאחר שעה אחת של דגירה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס, הוסרה האינוקולה והוחלפה במדיום תרבית בתוספת 1% סרום בקר עוברי. החד-שכבתיים היו מתורבתים במשך 5 ימים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס והוכתמו בתמיסה סגולה גבישית.
(ראה: Stittelaar et al., 2005)

בסרטון זה אנו מראים לך מערכת קולית של 2 קילוואט לפעולה מוטבעת בארון הניתן לטיהור. Hielscher מספקת ציוד על-קולי כמעט לכל התעשיות, כגון התעשייה הכימית, תרופות, קוסמטיקה, תהליכים פטרוכימיים וכן לתהליכי מיצוי מבוססי ממסים. ארון נירוסטה הניתן לטיהור זה מיועד לפעולה באזורים מסוכנים. לשם כך, הארון האטום יכול להיות מטוהר על ידי הלקוח עם חנקן או אוויר צח כדי למנוע גזים דליקים או אדים להיכנס לארון.

2x 1000 וואט אולטרה-סוניקטורים בארון הניתן לטיהור להתקנה באזורים מסוכנים

אולטראסוניקטורים לניתוח וירוסים וייצור חיסונים

תיק המוצרים הרחב של Hielscher Ultrasonics מציע את האולטרה-סוניקטור האידיאלי למעבדות מחקר ואנליטיקה, כמו גם לייצור חיסונים תעשייתיים.
Hielscher Ultrasonics מתמחה בתכנון, ייצור והפצה של אולטרה-סוניקטורים וסונוריקטורים בעלי ביצועים גבוהים לשימוש במעבדות מחקר ואנליטיקה, כמו גם ליישום בייצור חיסונים תעשייתיים (למשל). חיסונים, APIs).
שליטה מדויקת על הפרמטרים של תהליך אולטרסאונד על ידי Hielscher אולטרה סוניק' תוכנה אינטליגנטיתניתן ליישם סוניקציה על כלי שיט פתוחים, כורים סגורים מעורבבים ברציפות וכורים זורמים רציפים. כל חלקי המערכות העל-קוליות, אשר באים במגע עם המדיום הנוזלי, עשויים מפלדת אל-חלד, טיטניום או זכוכית. חלקים הניתנים להתאמה אוטומטית ואביזרים סניטריים מבטיחים את הייצור תחת תנאים ברמת פארמה.
הקלטת נתונים אוטומטית: תוכנה אינטליגנטית רושמת את הפרמטרים של תהליך sonication באופן אוטומטי על כרטיס זיכרון SD משולב. השליטה המדויקת של כל פרמטרי התהליך מבטיחה ש שחזור, בניית הייצורומאפשר את עמידתם בתקני בטיחות של מוצרים פרמצבטיים.,
Hielscher אולטרסוניקה’ מעבדים קוליים הם אמינים מאוד וניתן לשלוט בהם במדויק. כל האולטרה-סוניקטורים התעשייתיים ניתנים להתאמה כדי לספק את כל הטווח מאמפליטודות נמוכות יותר לגבוהות מאוד. החוסן של המערכות העל-קוליות של Hielscher מאפשר פעולה 24/7 תחת עומס כבד ובסביבות תובעניות.

הטבלה להלן נותן לך אינדיקציה של יכולת עיבוד משוער של ultrasonicators שלנו:

נפח תצווה קצב זרימה התקנים מומלצים
צלחות מולטי-באר / מיקרוטיטר n/a UIP400MTP
1 עד 500mL 10 עד 200mL / min מעלהay
10 עד 2000mL 20 עד 400mL / min Uf200 ः t, UP400St
0.1 ל 20L 0.2 ל 4 ליטר / דקה UIP2000hdT
10 עד 100 ליטר 2 עד 10L / min UIP4000hdT
n/a 10 עד 100L / min UIP16000
n/a יותר גדול אשכול UIP16000

תיצור איתנו קשר! / שאל אותנו!

בקש מידע נוסף

אנא השתמש בטופס שלהלן כדי לבקש מידע נוסף אודות מעבדים אולטרה סאונד, יישומים ומחיר. נשמח לדון בתהליך שלך איתך ולהציע לך מערכת אולטרה סאונד לפגישה הדרישות שלך!









הינכם מתבקשים לשים לב מדיניות פרטיות.


homogenizers אולטרה סאונד אמינים עבור גזירה DNA

Ultrasonic DNA גזיזה
עיבוד מ Jkwchui תחת CC-BY-SA.03



ספרות/הפניות

  • Stittelaar, Koert; Amerongen, Geert; Kondova, Ivanela; Kuiken, Thijs; Lavieren, Rob; Pistoor, Frank; Niesters, Hubert; Doornum, Gerard; Van der Zeijst, Bernard; Mateo, Luis; Chaplin, Paul; Osterhaus, Albert (2005): Modified Vaccinia Virus Ankara Protects Macaques against Respiratory Challenge with Monkeypox Virus. Journal of Virology 79, 2005. 7845-51.
  • Shah Purvin, Parameswara Rao Vuddanda, Sanjay Kumar Singh, Achint Jain, and Sanjay Singh (2014): Pharmacokinetic and Tissue Distribution Study of Solid Lipid Nanoparticles of Zidovudine in Rats. Journal of Nanotechnology, Volume 2014.
  • J. Robin Harris, Andrei Soliakova, Richard J. Lewis, Frank Depoix, Allan Watkinson, Jeremy H. Lakeya (2012): Alhydrogel® adjuvant, ultrasonic dispersion and protein binding: a TEM and analytical study. Micron Volume 43, Issues 2–3, February 2012, 192-200.
  • Doron Melamed, Gabriel Leitner, E. Dan Heller (1991): A Vaccine against Avian Colibacillosis Based on Ultrasonic Inactivation of Escherichia coli. Avian Diseases Vol. 35, No. 1 (Jan. – Mar., 1991), 17-22.
  • Huang C-F, Wu T-C, Wu C-C, Lee C-C, Lo W-T, Hwang K-S, Hsu M-L, Peng H-J. (2011): Sublingual vaccination with sonicated Salmonella proteins and mucosal adjuvant induces mucosal and systemic immunity and protects mice from lethal enteritis. APMIS 119, 2011. 468–78.

עובדות שראוי לדעת

וירוס אבעבועות הקופים

אבעבועות קופים (שם מדעי: MPV, MPXV או hMPXV) הוא מין של נגיף דנ"א דו-גדילי, הגורם למחלה זואונוטית נגיפית. מחלה זו ידועה בשם זיהום אבעבועות קופים ויכולה להתרחש בבני אדם ובבעלי חיים. הוא שייך לסוג Orthopoxvirus במשפחה Poxviridae. נגיף אבעבועות הקופים הוא אחד מהנגיפים האורתופוקסיים האנושיים יחד עם נגיפי וריולה (VARV), אבעבועות פרה (CPX) וחיסון (VACV). אורתו-וירוסים מאופיינים בחלקיקי נגיף גדולים בצורת לבנים, המכילים גנום דנ"א דו-גדילי של כ-200,000 bp.

בדיקת אליסה

ELISA מייצג את הבדיקה החיסונית הקשורה לאנזים והוא אימונואסאי מסומן שנחשב לתקן הזהב של אימונואסים. ELISA היא בדיקה אימונולוגית, המוערכת בשל רגישותה האבחנתית הגבוהה, משמשת לאיתור וכימות מולקולות, כולל נוגדנים, אנטיגנים, חלבונים, גליקופרוטאינים והורמונים. העיקרון של ELISA מבוסס על אינטראקציה אנטיגן-נוגדנים. על ידי אינטראקציה אנטיגן-נוגדן זו, הנוגדנים הספציפיים נקשרים לאנטיגן היעד שלו. רק כאשר האינטראקציה מתרחשת, הסובסטרט יכול להיקשר לאנזים והמרה סובסטרט לאחר מכן ניתן לראות, כלומר מתקבלת תוצאה חיובית.


אולטרסוניקה ביצועים גבוהים! מגוון המוצרים של Hielscher מכסה את הספקטרום המלא מן ultrasonicator המעבדה קומפקטית על יחידות ספסל העליון למערכות אולטראסאונד תעשייתי מלא.

Hielscher אולטרסוניקה מייצרת homogenizers קולי ביצועים גבוהים מ מַעבָּדָה ל גודל תעשייתי.