Elution נוגדנים על ידי סוניקציה באמצעות סוניק בתפוקה גבוהה

כרומטוגרפיית זיקה היא טכניקה רבת עוצמה לטיהור חלבונים, הדורשת אלוציה לא ספציפית בסיוע אולטרסאונד היא טכניקת הכנת דגימה אמינה לקבלת נוגדנים מכרומטוגרפיית זיקה. ההדחה היעילה והניתנת לשחזור של נוגדני מטרה הקשורים למטריצות זיקה משופרת באופן משמעותי על ידי סוניקציה. UIP400MTP הסוניקטור בעל התפוקה הגבוהה מתאים באופן אופטימלי לפליטת מספרי דגימה גבוהים בלוחות 96 באר, מיקרוטיטר ורב-באר ומקל על התאוששות נוגדנים בכרומטוגרפיית זיקה.

כיצד סוניקציה מקלה על Elution?

באמצעות הדבקה לא ספציפית מוגברת באולטרסאונד, עובדי מעבדה ומדענים יכולים לשחזר ביעילות נוגדנים מטוהרים מעמודות כרומטוגרפיה של זיקה. נוגדנים מטוהרים אלה מופעלים באמצעות יישומים במורד הזרם בתחומים שונים, כגון אימונולוגיה, ביוטכנולוגיה ואבחון רפואי.

Elution הוא שלב הכנה לדוגמה המשמש בדרך כלל עבור כרומטוגרפיית זיקה: כרומטוגרפיית זיקה מנצלת את האינטראקציות הספציפיות ביותר בין מולקולת מטרה (כגון נוגדן) לבין ליגנד משותק על מטריצה כרומטוגרפית. זה מאפשר טיהור סלקטיבי של מולקולת המטרה מתערובת מורכבת באמצעות זיקה קשירה ספציפית של מולקולות, למשל נוגדנים.
קשירה ספציפית של נוגדנים: נוגדנים מטוהרים לעתים קרובות באמצעות כרומטוגרפיית זיקה, שם הם נקשרים באופן סלקטיבי לליגנד משותק על שרף הכרומטוגרפיה. זה יכול להיות אנטיגן, חלבון A/G, או כל מולקולה אחרת שמתקשרת באופן ספציפי עם הנוגדן המעניין.
אילוץ: לאחר קשירת נוגדן המטרה למטריצה, השלב הבא כולל פליטה (או שטיפה) של הנוגדן הכבול מהשרף. שלב זה כרוך בדרך כלל בשיבוש הקישור הספציפי בין הנוגדן לליגנד. שלב זה יכול להיות מותקן על ידי סוניקציה.
בדיקה קולית UP50H היא הומוגנייזר מעבדה המשמש לעתים קרובות כמשבש תאים, מפזר ומתחלב במעבדות.הדבקה לא ספציפית בסיוע אולטרה-סאונד: בניגוד לשיטות אלוציה ספציפיות המשבשות רק את האינטראקציה בין הנוגדנים לליגנד, שיטות אלוציה לא ספציפיות משבשות את כל האינטראקציות בשרף, כולל אינטראקציות לא ספציפיות. זה יכול להיות יתרון כאשר מתמודדים עם מזהמים קשורים חזק שעלולים להפריע לתהליך הטיהור. כאן נכנסת סוניקציה לפעולה! גלים על-קוליים משמשים ליצירת בועות קוויטציה במאגר האלוטיון. כאשר בועות אלה קורסות ליד מטריצת השרף, הן מייצרות כוחות גזירה מקומיים אינטנסיביים ומיקרו-זרם. שיבוש מכני זה מסייע בשבירת האינטראקציות הלא ספציפיות בין הנוגדן לליגנד, ומקל על הוצאת הנוגדן הכבול מהמטריצה.

צלחות 96 בארות וצלחות מרובות אחרות מעובדות בצורה הטובה ביותר באמצעות UIP400MTP הסוניקטור. מערכת קולית זו אידיאלית עבור ליזיס, פיצול DNA ודגימות עיבוד מסיסות תאים בתפוקה גבוהה.

UIP400MTP סוניקטור בתפוקה גבוהה מקל על אלוציה של נוגדנים וחלבונים

בקשת מידע





 

מדריך זה מסביר איזה סוג של סוניקטור הוא הטוב ביותר עבור משימות הכנת הדגימה שלך כגון ליזה, שיבוש תאים, בידוד חלבונים, פיצול DNA ו- RNA במעבדות, ניתוח ומחקר. בחר את סוג הסוניקטור האידיאלי עבור היישום שלך, נפח הדגימה, מספר הדגימה והתפוקה. Hielscher Ultrasonics יש הומוגנייזר קולי אידיאלי בשבילך!

כיצד למצוא את הסוניקטור המושלם לשיבוש תאים ומיצוי חלבונים במדע וניתוח

תמונה ממוזערת של וידאו

 

היתרונות של Elution קולי באמצעות סוניקציה

אלוציה על-קולית מציעה מספר יתרונות, במיוחד בהקשר של טכניקות טיהור חלבונים כגון כרומטוגרפיית זיקה.
לדוגמה, סוניקציה מצטיינת בשיטות חלופיות במונחים של שלמות חלבון, התאוששות, טוהר, ורסטיליות ויעילות. יתרונות אלה הופכים את האלוטיון העל-קולי לבחירה מועדפת לתהליכי טיהור חלבונים, במיוחד ביישומים שבהם שמירה על מבנה ופעילות החלבון חיונית. בנוסף, אלוציה קולית בולטת בפשטותה, יעילותה, צדדיותה ותאימותה למגוון רחב של חלבונים ומטריצות זיקה. באמצעות שימוש בגלי אולטרסאונד כדי לשבש אינטראקציות חלבון-מטריצה, Ultrasonic Elution מציע שיטה עדינה ומהירה לטיהור חלבונים, הבטחת שיעורי התאוששות גבוהים ושמירה על שלמות החלבון עבור יישומים במורד הזרם.

עדין יותר במבנה החלבון: אלוציה של pH נמוך כרוכה בשימוש במאגרים חומציים כדי לשבש את הקישור בין חלבון המטרה (למשל, נוגדנים) לבין מטריצת הזיקה. עם זאת, חשיפה ל- pH נמוך עלולה לפרק חלבונים, מה שעלול לסכן את המבנה והפעילות הביולוגית שלהם. לעומת זאת, אלוציה על-קולית מסתמכת בעיקר על שיבוש מכני ולא על דנטורציה כימית, מה שהופך אותה לעדינה יותר על מבנה החלבון. זה יתרון במיוחד בעת טיהור חלבונים עדינים או נוגדנים רגישים לשינויים pH.

  • סיכון מופחת לצבירה: אלוציה בעלת pH נמוך עלולה להגביר את הסיכון לצבירת חלבונים עקב התפתחות חלבונים וחשיפה לאזורים הידרופוביים. צבירה עלולה להוביל לאובדן פעילות החלבונים ולקשיים בעיבוד במורד הזרם. הדבקה על-קולית, לעומת זאת, ממזערת את הסיכון לצבירה על ידי הפעלת כוחות מכניים כדי לשבש את האינטראקציות בין החלבון לבין מטריצת הזיקה מבלי לשנות באופן משמעותי את הקונפורמציה הטבעית של החלבון.
  • שיפור ההתאוששות והטוהר: אלוציה אולטראסונית יכולה להשיג שיעורי התאוששות ורמות טוהר גבוהים יותר בהשוואה לשיטות אלוציה חלופיות. השיבוש המכני המסופק על ידי אולטרה-סוניקציה משחרר ביעילות חלבונים קשורים ממטריצת הזיקה תוך מזעור אינטראקציות לא ספציפיות. התוצאה היא התאוששות משופרת של חלבון המטרה עם זיהום מופחת ממולקולות שאינן קשורות באופן ספציפי, מה שתורם לטוהר גבוה יותר של החלק המדולל.
  • עיבוד בתפוקה גבוהה: Hielscher Ultrasonics מציעה sonicators שונים עבור טיהור חלבון בסיוע אולטרסאונד, elution ו biopanning. UIP400MTP המיקרוטיטר צלחות-סוניקטור מאפשר עיבוד המוני של דגימות בלוחות 96 בארות ולוחות רב-באר אחרים. ה- VialTweeter אידיאלי לסוניק סימולטני ללא טרחה של עד 10 צינורות כגון בקבוקוני אפנדורף באותם תנאים. ה- CupHorn הוא סוניק רב-תכליתי אידיאלי למספר צינורות, כוסות קטנות וכלי שיט אחרים. וכמובן, הסוניקטורים הקלאסיים מסוג בדיקה עם microtips הם כלי מעבדה מבוסס היטב להכנת דגימה. טווח המוצרים Hielscher Ultrasonics יש את הסוניקטור האידיאלי עבור הגדרת הניסוי שלך ואת גודל הדגימה שלך.
  • רב-תכליתיות ותאימות: אלוציה על-קולית תואמת למגוון רחב של חלבונים ומטריצות זיקה, ומציעה רב-תכליתיות ביישומי טיהור. לעומת זאת, אלוציה בעלת pH נמוך עשויה שלא להתאים לחלבונים מסוימים הרגישים לתנאים חומציים או למטריצות זיקה המועדות להתכלות או לזליגה ב-pH נמוך. אלוציה על-קולית מספקת חלופה עדינה וישימה אוניברסלית שניתן להתאים לצרכי טיהור ספציפיים מבלי להתפשר על שלמות החלבונים או יציבות המטריצה.
  • זמן ויעילות: אלוציה על-קולית דורשת בדרך כלל זמני אלוציה קצרים יותר בהשוואה לשיטות אלוציה אחרות. השחרור המהיר והיעיל של חלבונים קשורים המתאפשר על ידי אולטרה-סוניקציה מקצר את זמן העיבוד ומגביר את יעילות הטיהור הכוללת, מה שהופך אותו לאופציה אטרקטיבית עבור יישומים בעלי תפוקה גבוהה או כאשר נדרשות תוצאות תלויות זמן.
96-Well Plate Sonicator UIP400MTP לליזה של תאים, מיצוי DNA, פיצול DNA, מסיסות תאים וטיהור חלבונים.

96-באר צלחת Sonicator UIP400MTP עבור סוניקציה של לוחות multiwell, PCR ו ELISA צלחות

 

VialTweeter במעבד קולי UP200ST

VialTweeter sonicator עבור סוניקציה בו זמנית של 10 דגימות, למשל כדי לשבש תאים ולמצות חלבונים

ביו-פנינג בסיוע אולטרה-סאונד

Biopanning היא טכניקה קריטית בטיהור נוגדנים, במיוחד כאשר יש להשיג נוגדנים ספציפיים מאוד למחקר או אבחון רפואי. Biopanning הוא התהליך שבו נוגדנים מבודדים מתערובת של נוגדנים, מה שנקרא ספריית נוגדנים.

כיצד פועלת Biopanning קולי?

זה מתחיל בספרייה של נוגדנים, תערובת של נוגדנים שונים. כל נוגדן מאופיין בצורה ייחודית וספציפיות משלו. לצורך ניתוח וטיפול, יש לבודד נוגדנים ספציפיים המזהים מטרה מסוימת, כגון וירוס או תא סרטני. באמצעות biopanning, נוגדנים ספציפיים אלה ניתן לבודד. Ultrasonication מסייע להקל על תהליך biopanning מה שהופך את טיהור נוגדנים יעיל יותר.

החל מספרייה של נוגדנים, הנוגדנים מוצגים בדרך כלל על פני השטח של בקטריופאג', תא שמרים או מערכת תצוגה אחרת. ספרייה זו מייצגת מגוון רחב של נוגדנים.
בשלב הראשון, ספרייה זו נחשפת למולקולת המטרה שלך. הנוגדנים שנקשרים למטרה יידבקו, בעוד האחרים יישטפו. כדי להסיר את הנוגדנים הלא מאוגדים, הדגימות נשטפות מספר פעמים בתמיסת חיץ.

כעת, יש לנו דגימות המכילות נוגדנים קשורים בלבד. עם זאת, משמעות הדבר היא שהנוגדנים עדיין מחוברים למערכת התצוגה שלהם. כדי לשחרר אותם, יש לשבור את האינטראקציה בין נוגדנים לליגנד. שלב זה ידוע בשם elution. ניתן לדלל דגימות באמצעות תמיסה המשבשת את הקשירה, למשל באמצעות חיץ אלוציה ספציפי, כאוטי, הורדת ערך pH, הפעלת חום וכו '. טכניקות אלוציה אלה הורסות את קשירת ליגנד הנוגדנים, אך גם יכולות לדרדר את הנוגדנים עצמם. לכן סוניקציה משמשת כטכניקה חלופית כדי להסיר בעדינות את הנוגדנים מן המטרה שלהם.

לאחר השלמת שלב האלוציה, אנו מקבלים נוגדנים מטוהרים, מוכנים לשימוש במחקר, אבחון או טיפול.

Biopanning היא טכניקה רבת עוצמה בטיהור נוגדנים ו elution קולי מקל ומעצים את היעילות – וכתוצאה מכך נוגדנים מטוהרים מאוד, ללא נזק. ביו-פנינג על-קולי מאפשר למדענים לבודד נוגדנים ספציפיים מאוד מדגימות מורכבות, ופותח דלתות למגוון רחב של יישומים.

סוניקטורים לטיהור נוגדנים

Hielscher sonicators הם כלים מבוססים היטב המשמשים את מתקני המחקר הטובים ביותר בעולם. מוערכים על העיצוב החדיש שלהם וביצועים מעולים, סוניקטורים Hielscher נחשבים כלי מעבדה חיוניים בתחומי ביוטכנולוגיה וביולוגיה מולקולרית. Hielscher Ultrasonics מציעה סוניקטורים עבור דגימה בודדת, כמו גם הכנת דגימה בתפוקה גבוהה, אשר מאפשרים טיהור יעיל של נוגדנים ו elution של מולקולות ממוקדות מטרה, ומאפשרים biopanning יעיל לבודד נוגדנים ספציפיים עם דיוק ומהירות.
בהקשר של טיהור נוגדנים, הסוניקטורים של Hielscher מצטיינים בהקלת שלבי השטיפה והאלוציה על ידי הסרה יעילה של נוגדנים לא קשורים תוך שמירה על שלמותם של קומפלקסים מכווני מטרה. הבקרה והמדרגיות המדויקות שלהם מאפשרות תנאי עיבוד מותאמים אישית, ומבטיחים תוצאות טיהור אופטימליות במגוון רחב של נפחי דגימה ומורכבויות.
הסוניקטורים של Hielscher מייצגים את החדשנות הטכנולוגית בעיבוד קולי, ומציעים יכולות שאין שני להן לטיהור נוגדנים, הדבקה וביו-פנינג. עם הדיוק, האמינות וקלות התפעול שלהן, המערכות העל-קוליות השונות מציעות יעילות ורב-תכליתיות אופטימליות למחקר, אבחון וטיפול ביו-פרמצבטיים.
צרו איתנו קשר עכשיו כדי ללמוד עוד על הסוניקטורים של Hielscher לטיהור נוגדנים, הדבקה וביו-פנינג! הצוות הטכני המנוסה שלנו שמח לדון ביישום הקשור לנוגדנים שלך!

למה Hielscher אולטרסוניקה?

  • יעילות גבוהה
  • טכנולוגיה מתקדמת
  • אֲמִינוּת & חוסן
  • בקרת תהליך מתכווננת ומדויקת
  • קְבוּצָה & בשורה
  • עבור כל אמצעי אחסון
  • תוכנה אינטליגנטית
  • תכונות חכמות (למשל, ניתנות לתכנות, פרוטוקול נתונים, שלט רחוק)
  • קל ובטוח לתפעול
  • תחזוקה נמוכה
  • CIP (נקי במקום)

בקשת מידע





תכנון, ייצור וייעוץ – איכות תוצרת גרמניה

Hielscher אולטראסוניקאטורים ידועים באיכות הגבוהה ביותר שלהם סטנדרטים עיצוב. עמידות ותפעול קל מאפשרים שילוב חלק של האולטרסוניקאטורים שלנו במתקנים תעשייתיים. תנאים מחוספסים וסביבות תובעניות מטופלים בקלות על ידי Hielscher אולטראסוניקאטורים.

Hielscher אולטרסוניקה היא חברה מוסמכת ISO ולשים דגש מיוחד על ultrasonicators ביצועים גבוהים הכוללים טכנולוגיה חדישה וידידותיות למשתמש. כמובן, Hielscher אולטרסוניקאטורים הם תואמי CE ועומדים בדרישות של UL, CSA ו- RoHs.

תיצור איתנו קשר! / שאל אותנו!

בקש מידע נוסף

אנא השתמש בטופס שלהלן כדי לבקש מידע נוסף על מעבדים קוליים, יישומים ומחיר. נשמח לדון איתך בתהליך שלך ולהציע לך מערכת קולית הממלאת את דרישותיך!









הינכם מתבקשים לשים לב מדיניות פרטיות.


הווידאו מראה את מערכת הכנת מדגם קולי UIP400MTP, המאפשר הכנת מדגם אמין של כל צלחות מרובות טוב סטנדרטי באמצעות אולטרסאונד בעוצמה גבוהה. יישומים אופייניים של UIP400MTP כוללים תמוגה בתא, DNA, RNA, גיזת כרומטין, כמו גם מיצוי חלבון.

אולטרה סאונד UIP400MTP עבור sonication צלחת רב-באר

תמונה ממוזערת של וידאו

השוואה בין טכניקות אלוציה אולטראסוניות לעומת טכניקות אלוציה מסורתיות

  1. הדבקה הדרגתית: בהדבקה הדרגתית, חוזק הקשירה בין חלבון המטרה לבין מטריצת הזיקה מופחת בהדרגה על ידי שינוי הרכב חיץ האלוטיון. זה יכול לכלול גורמים משתנים כגון pH, ריכוז מלח, או ריכוז של ליגנדות מתחרות. אלוציה הדרגתית מאפשרת כוונון עדין של תנאי אלוציה כדי לשחרר באופן סלקטיבי את חלבון המטרה תוך מזעור קשירה לא ספציפית.
    היתרונות של Elution קולי: אלוציה על-קולית מציעה שחרור מהיר ואחיד יותר של חלבונים קשורים בהשוואה להדבקה הדרגתית. בעוד שאלוציה הדרגתית דורשת אופטימיזציה וניטור זהירים של תנאי האלוטיון, אלוציה על-קולית מספקת שיטה פשוטה ויעילה יותר לשחזור חלבון.
  2. אלוציה תחרותית: בהדבקה תחרותית, ריכוז גבוה של ליגנד מתחרה מוכנס לתוך מאגר האלוציה כדי לשבש את הקישור בין חלבון המטרה לבין מטריצת הזיקה. הליגנד המתחרה מתחרה עם חלבון המטרה על אתרי קשירה על המטריצה, ובכך מחליף את החלבון ומשחרר אותו לתוך הפולט.
    היתרונות של Elution קולי: אלוציה קולית מציעה חלופה עדינה ורב-תכליתית יותר לאלוציה תחרותית. אלוציה תחרותית עשויה לדרוש שימוש בריכוזים גבוהים של חומרים כאוטרופיים (כלומר מומס משותף המשבש את רשת קשרי המימן בין מולקולות מים ומפחית את יציבות המצב הטבעי של חלבונים על ידי החלשת ההשפעה ההידרופובית) או כימיקלים קשים, שיכולים להשפיע על יציבות ופעילות החלבון. לעומת זאת, אלוציה על-קולית מספקת שיבוש מכני ללא צורך בחומרים כימיים נוספים, שומרת על שלמות החלבונים ומבטיחה שיעורי התאוששות גבוהים.
  3. הדבקה הנגרמת על ידי טמפרטורה: אלוציה הנגרמת על ידי טמפרטורה כרוכה בשינוי הטמפרטורה של חיץ האלוטיון כדי לשבש את הקישור בין חלבון המטרה לבין מטריצת הזיקה. ניתן להשיג זאת על ידי עלייה או הקטנה של הטמפרטורה, בהתאם לאינטראקציה הספציפית בין חלבון למטריצה.
    היתרונות של Elution קולי: אלוציה על-קולית מציעה שיטה מהירה ומבוקרת יותר לאלוציה של חלבונים בהשוואה לשיטות המושרות על ידי טמפרטורה. בעוד שאלוציה הנגרמת על ידי טמפרטורה עשויה לדרוש שליטה מדויקת בשיפועי הטמפרטורה וזמני שיווי משקל ארוכים יותר, אלוציה על-קולית מספקת הפרעה מכנית מיידית, וכתוצאה מכך זמני אלוציה קצרים יותר ויעילות משופרת.
  4. הדבקה אנזימטית: אלוציה אנזימטית משתמשת באנזימים ספציפיים המנתקים את הקשרים בין חלבון המטרה לבין מטריצת הזיקה, ומשחררים את החלבון לתוך הפולט. שיטה זו שימושית במיוחד עבור חלבונים הקשורים באופן הדוק למטריצה או עבור יישומים הדורשים שליטה מדויקת על תנאי אלוציה.
    היתרונות של Elution קולי: אלוציה על-קולית מציעה חלופה לא אנזימטית ונטולת כימיקלים לאלוטיון אנזימטי. בעוד שאלוציה אנזימטית עשויה לדרוש אופטימיזציה של ריכוז האנזים, זמן הדגירה ותנאי ה- pH, אלוציה על-קולית מספקת שיטה פשוטה וישימה אוניברסלית לשחזור חלבונים ללא צורך בריאגנטים נוספים או ציוד מיוחד.
סוניקטור להכנת דגימות בתפוקה גבוהה! הסוניקטור של צלחת UIP400MTP מאפשר ליזיס, מיצוי חלבונים, פיצול DNA ומסיסות תאים של דגימות ביולוגיות בלוחות 96 בארות.

Plate sonicator UIP400MTP עבור כל צלחות 96 בארות, לוחות microtiter ולוחות multi-well.



ספרות/הפניות


אולטרסוניקה ביצועים גבוהים! מגוון המוצרים Hielscher מכסה את הספקטרום המלא מן ultrasonicator המעבדה הקומפקטית מעל יחידות ספסל העליון למערכות אולטראסאונד תעשייתיות מלאות.

Hielscher אולטרסוניקה מייצרת homogenizers קולי ביצועים גבוהים מ מַעבָּדָה ל גודל תעשייתי.


נשמח לדון בתהליך שלך.

בואו ניצור קשר.