અલ્ટ્રાસોનિક્સનો ઉપયોગ કરીને વનસ્પતિ કોષોમાં આનુવંશિક રૂપાંતરણ
સોનિકેશન-સહાયિત Agrobacterium-મધ્યસ્થ રૂપાંતરણ (SAAT) એ Agrobacteriumનો વાહક તરીકે ઉપયોગ કરીને વનસ્પતિ કોષોને વિદેશી જનીનોથી સંક્રમિત કરવાની કાર્યક્ષમ પદ્ધતિ છે. અલ્ટ્રાસોનિક કેવિટેશનથી સોનોપોરેશન થાય છે, જેને વનસ્પતિ પેશીમાં લક્ષિત સૂક્ષ્મ ઇજાઓ સર્જવાની પ્રક્રિયા તરીકે વર્ણવી શકાય છે. અલ્ટ્રાસોનિક રીતે સર્જાયેલી આ સૂક્ષ્મ ઇજાઓ મારફતે DNA અને DNA વાહકોને કોષ મેટ્રિક્સમાં કાર્યક્ષમ રીતે પહોંચાડી શકાય છે.
સોનોપોરેશન – અલ્ટ્રાસોનિક રીતે વધારેલું કોષ રૂપાંતરણ
કોષ નિલંબનો પર ઓછી આવૃત્તિવાળા અલ્ટ્રાસાઉન્ડ (આશરે 20kHz) લાગુ કરવામાં આવે ત્યારે ધ્વનિક કેવિટેશનની અસરો કોષીય પેશીઓના પટલની પારગમ્યતામાં અસ્થાયી વધારો કરે છે. આ અલ્ટ્રાસોનિક અસર સોનોપોરેશન તરીકે ઓળખાય છે અને તેનો ઉપયોગ કોષો અથવા પેશીઓમાં જનીન સ્થાનાંતરણ માટે થાય છે.
અલ્ટ્રાસોનિકેશનના ફાયદા તેના બિન-ઉષ્મીય યાંત્રિક કાર્યસિદ્ધાંત પર આધારિત છે, જે સોનિકેશનને ઘણી વાર વધુ બહુમુખી અને કોષોના પ્રકારો પર ઓછું આધારિત બનાવે છે. સોનોપોરેશનના બહુમુખી ઉપયોગથી ટ્રાન્સજેનિક વનસ્પતિઓના ઉપયોગની શક્યતા ઊભી થાય છે, જે જટિલ માનવ ચિકિત્સાકીય પ્રોટીનના જૈવઉત્પાદનમાં નોંધપાત્ર સંભાવના ધરાવે છે. આવા વનસ્પતિ-આધારિત બાયોરિએક્ટરોમાં સરળતાથી આનુવંશિક ફેરફાર કરી શકાય છે, તેઓ માનવ રોગકારકોથી સંભવિત દૂષણ અટકાવે છે, રૂપાંતરણમાં મધ્યસ્થી કરતા બેક્ટેરિયા (દા.ત. Agrobacterium)ને નુકસાન પહોંચાડતા નથી અને જૈવસંશ્લેષણની સસ્તી, અસરકારક પદ્ધતિ છે.
અલ્ટ્રાસોનિકેટર UP200St (200W, 26kHz) ધ્વનિરોધક આવરણ સાથે
અલ્ટ્રાસોનિક-સહાયિત કોષ રૂપાંતરણ
સોનિકેશન એ એવી તકનીક છે જેમાં દ્રાવણમાં રહેલા કણોને હલાવવા અને દ્રાવણોને મિશ્રિત કરવા માટે ઓછી આવૃત્તિવાળા અલ્ટ્રાસાઉન્ડ તરંગો લાગુ કરવામાં આવે છે, જેથી દ્રવ્ય સ્થાનાંતરણ અને દ્રાવણનો દર વધે છે. સાથે જ, સોનિકેશન પ્રવાહીઓમાંથી ઓગળેલા વાયુઓ દૂર કરી શકે છે. વનસ્પતિ રૂપાંતરણમાં, સોનિકેશન વનસ્પતિ પેશીમાં સૂક્ષ્મ ઇજાઓ સર્જશે અને વનસ્પતિના પ્રોટોપ્લાસ્ટમાં અનાવૃત DNA પહોંચાડવાની પ્રક્રિયાને વધારશે.
આનુવંશિક રૂપાંતરણ માટે, સોનિકેશન-સહાયિત Agrobacterium-મધ્યસ્થ રૂપાંતરણ (SAAT) પસંદગીની પદ્ધતિ છે અને અનાવૃત DNA તથા DNA વાહકોને સીધા પ્રોટોપ્લાસ્ટમાં સ્થાનાંતરિત કરવા માટે વપરાતા સોનિકેશન કરતાં તેની કાર્યક્ષમતા નોંધપાત્ર રીતે વધારે છે. અનેક અભ્યાસોએ દર્શાવ્યું છે કે સોનિકેશન-સહાયિત Agrobacterium-મધ્યસ્થ રૂપાંતરણ (SAAT)નો ઉપયોગ અલ્ટ્રાસાઉન્ડ તરંગો અને તેનાથી સર્જાતા ધ્વનિક કેવિટેશન દ્વારા વનસ્પતિ કોષોમાં યાંત્રિક વિક્ષેપ અને ઇજાઓ સર્જવા માટે કરી શકાય છે. ટૂંકી અલ્ટ્રાસોનિક સારવાર એક્સપ્લાન્ટની સપાટી પર સૂક્ષ્મ ઇજાઓ સર્જે છે. ઇજાગ્રસ્ત કોષો Agrobacteriumને વનસ્પતિ પેશીઓના વધુ ઊંડા ભાગમાં પ્રવેશવા દેશે, જેથી વનસ્પતિ કોષો સંક્રમિત થવાની સંભાવના વધે છે. વધુમાં, સ્રવિત ફિનોલિક સંયોજનો રૂપાંતરણ વધારે છે. અલ્ટ્રાસોનિક રીતે સર્જાયેલી સૂક્ષ્મ ઇજાઓ બેક્ટેરિયા દ્વારા એક્સપ્લાન્ટમાં પ્રવેશને પણ વધુ સુગમ બનાવે છે. ખાસ કરીને Agrobacterium પ્રત્યે પ્રતિરોધક ગણાતી વનસ્પતિ પ્રજાતિઓમાં આનુવંશિક રૂપાંતરણ માટે SAATનો સફળતાપૂર્વક ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો.
અત્યંત સરળ અને સસ્તી પદ્ધતિ હોવી તથા Agrobacterium-મધ્યસ્થ જનીન સ્થાનાંતરણમાં નોંધપાત્ર વધારો કરવો એ SAATના મુખ્ય ફાયદા છે. Chenopodium rubrum L. અને Beta vulgaris L.ના રૂપાંતરણમાં SAATના સફળ ઉપયોગ ઉપરાંત, આ અભિગમ Nicotiana tabacumમાં પુનઃસંયોજિત Escherichia coliના વન્ય-પ્રકારના ઉષ્મા-અસ્થિર હોલોટોક્સિન અને Escherichia coliના મ્યુટન્ટ LT રસી સહાયકોના ઉત્પાદનમાં પણ લાગુ કરવામાં આવ્યો છે, જેમાં પક્ષીઓમાં સર્વોચ્ચ સમગ્રદેહીય LT-B-વિશિષ્ટ IgG ટાઇટર જોવા મળ્યા હતા.
(જુઓ Laere et al., 2016; M. Klimek-Chodacka and R. Baranski, 2014)
VialTweeter એકસાથે અનેક નમૂના ટ્યુબના સોનિકેશન માટે, દા.ત. સોનિકેશન-સહાયિત Agrobacterium-મધ્યસ્થ રૂપાંતરણ (SAAT) માટે
વનસ્પતિ કોષોમાં સોનોપોરેશન દ્વારા જનીન સ્થાનાંતરણ માટેની સામાન્ય પ્રક્રિયા
- આનુવંશિક સામગ્રીની તૈયારી: તમે વનસ્પતિ કોષોમાં દાખલ કરવા માંગતા હો તે આનુવંશિક સામગ્રી તૈયાર કરીને શરૂઆત કરો. આ પ્લાઝ્મિડ DNA, RNA અથવા અન્ય ન્યુક્લિક એસિડ હોઈ શકે છે.
- વનસ્પતિ કોષોનું અલગીકરણ: તમે જે વનસ્પતિ કોષોને લક્ષ્ય બનાવવા માંગો છો તેમને અલગ કરો. તમારા પ્રયોગના આધારે, આ કોષોને વનસ્પતિની પેશીઓ અથવા સંવર્ધનોમાંથી અલગ કરી શકાય છે.
- કોષ નિલંબન: વનસ્પતિ કોષોને યોગ્ય માધ્યમ અથવા બફરમાં નિલંબિત કરો. કોષો સ્વસ્થ હોય અને જનીન ગ્રહણ માટે અનુકૂળ સ્થિતિમાં હોય તે સુનિશ્ચિત કરવા માટે આ આવશ્યક છે.
- તમારું સોનિકેટર તૈયાર કરો: કંપનવિસ્તાર, સમય, ઊર્જા અને તાપમાન જેવા સોનિકેશન પરિમાણોને અગાઉથી સેટ કરીને તમારું પ્રોબ પ્રકારનું સોનિકેટર તૈયાર કરો. અલ્ટ્રાસોનિક પ્રોબને કોષ નિલંબનમાં ડુબાડો.
- સોનિકેશન: સોનિકેશન પ્રક્રિયા શરૂ કરો. પ્રોબના અગ્રભાગનું ઝડપી દોલન પ્રવાહીમાં કેવિટેશનના પરપોટા ઉત્પન્ન કરે છે. અલ્ટ્રાસોનિક તરંગોને કારણે આ પરપોટા વિસ્તરે છે અને તૂટી પડે છે, જેનાથી નિલંબનમાં યાંત્રિક બળો અને સૂક્ષ્મ પ્રવાહો સર્જાય છે.
- સોનોપોરેશન: કેવિટેશનથી ઉત્પન્ન થતાં યાંત્રિક બળો અને સૂક્ષ્મ પ્રવાહો વનસ્પતિ કોષોના પટલોમાં અસ્થાયી છિદ્રો અને કાણાં બનાવે છે. નિલંબનમાં હાજર આનુવંશિક સામગ્રી આ છિદ્રો દ્વારા વનસ્પતિ કોષોમાં પ્રવેશી શકે છે.
- ઇન્ક્યુબેશન: સોનોપોરેશનની સારવાર પછી, વનસ્પતિ કોષોને પુનઃસ્વસ્થ થવા અને તેમનાં પટલોને સ્થિર કરવા દેવા માટે તેમનું ઇન્ક્યુબેશન કરો. કોષોનું અસ્તિત્વ અને સફળ જનીન સ્થાનાંતરણ સુનિશ્ચિત કરવા માટે આ એક નિર્ણાયક પગલું છે.
Agrobacterium અથવા લિપોસોમ દ્વારા જનીન સ્થાનાંતરણ
વનસ્પતિ કોષોમાં ટ્રાન્સફેક્શન કરવાની બે સામાન્ય પદ્ધતિઓ છે. તેમાં આનુવંશિક સામગ્રીના વાહક તરીકે ગ્રામ-નેગેટિવ બેક્ટેરિયાની એક પ્રજાતિગત શ્રેણી Agrobacterium અથવા લિપોસોમનો ઉપયોગ થાય છે.
- Agrobacterium-મધ્યસ્થી સોનોપોરેશન: Agrobacterium tumefaciens એ વનસ્પતિ આનુવંશિક ઇજનેરીમાં સામાન્ય રીતે ઉપયોગમાં લેવાતો બેક્ટેરિયમ છે. આ પદ્ધતિમાં, ઇચ્છિત જનીન ધરાવતું પ્લાઝ્મિડ DNA Agrobacteriumમાં દાખલ કરવામાં આવે છે, જેને પછી વનસ્પતિ કોષો સાથે ભેળવવામાં આવે છે. પ્રોબ પ્રકારના સોનિકેટરનો ઉપયોગ કરીને કોષ નિલંબનનું સોનોપોરેશન કરવામાં આવે છે. અલ્ટ્રાસોનિક ઊર્જા Agrobacteriumમાંથી વનસ્પતિ કોષોમાં આનુવંશિક સામગ્રીનું સ્થાનાંતરણ વધારે છે. વનસ્પતિઓના આનુવંશિક સંશોધન માટે આ પદ્ધતિનો વ્યાપકપણે ઉપયોગ થાય છે.
- લિપોસોમ-મધ્યસ્થી સોનોપોરેશન: લિપોસોમ એ લિપિડ આધારિત પુટિકાઓ છે જે આનુવંશિક સામગ્રીનું વહન કરી શકે છે. આ પદ્ધતિમાં, પ્લાઝ્મિડ DNA અથવા અન્ય ન્યુક્લિક એસિડથી ભરેલા લિપોસોમને વનસ્પતિ કોષો સાથે ભેળવવામાં આવે છે. વનસ્પતિ કોષો દ્વારા લિપોસોમનું ગ્રહણ સરળ બનાવવા માટે પ્રોબ પ્રકારના સોનિકેટરનો ઉપયોગ કરીને સોનોપોરેશન કરવામાં આવે છે. અલ્ટ્રાસાઉન્ડ લિપોસોમના લિપિડ દ્વિસ્તરોને ખંડિત કરે છે, જેનાથી આનુવંશિક સામગ્રી વનસ્પતિ કોષોમાં મુક્ત થાય છે. વનસ્પતિ કોષોમાં ક્ષણિક જનીન અભિવ્યક્તિના અભ્યાસો માટે આ અભિગમ ઉપયોગી છે.
સોનિકેશન-સહાયિત Agrobacterium-મધ્યસ્થી રૂપાંતરણ (SAAT)ના વૈજ્ઞાનિક રીતે સાબિત થયેલા લાભો
સોનિકેશન-સહાયિત Agrobacterium-મધ્યસ્થી રૂપાંતરણ (SAAT)નો ઉપયોગ વનસ્પતિની અનેક પ્રજાતિઓમાં કરવામાં આવ્યો છે. વનસ્પતિ કોષ સંવર્ધનોની ટૂંકી અને પ્રમાણમાં હળવી અલ્ટ્રાસોનિક સારવારથી સોનોપોરેશન થાય છે, જે ત્યારબાદ જનીન વાહક તરીકે Agrobacteriumના ઊંડા પ્રવેશને શક્ય બનાવે છે. નીચે તમે SAATની લાભદાયી અસરો દર્શાવતા ઉદાહરણરૂપ અભ્યાસો વાંચી શકો છો.
સોનિકેટર UP200Ht સોનોપોરેશન દ્વારા જનીન ટ્રાન્સફેક્શન માટે
અશ્વગંધાનું અલ્ટ્રાસોનિક સહાયિત રૂપાંતરણ
W. somnifera (જે અશ્વગંધા અથવા વિન્ટર ચેરી તરીકે ઓળખાય છે)માં રૂપાંતરણની કાર્યક્ષમતા સુધારવા માટે, Dehdashti અને સહકર્મીઓએ (2016) એસિટોસિરિંગોન (AS) અને સોનિકેશનના ઉપયોગની તપાસ કરી હતી.
એસિટોસિરિંગોન (AS) ત્રણ તબક્કે ઉમેરવામાં આવ્યું હતું: Agrobacteriumનું પ્રવાહી સંવર્ધન, Agrobacterium દ્વારા ચેપ અને Agrobacterium સાથે એક્સપ્લાન્ટનું સહસંવર્ધન. Agrobacteriumના પ્રવાહી સંવર્ધનમાં 75 μM AS ઉમેરવાનું vir જનીનોના પ્રેરણ માટે શ્રેષ્ઠ હોવાનું જણાયું હતું.
સોનિકેશન (SAAT)ના વધારાના ઉપયોગથી સર્વોચ્ચ જનીન અભિવ્યક્તિ પ્રાપ્ત થઈ હતી. પાંદડાં અને પ્રરોહના અગ્રભાગોનું અનુક્રમે 10 અને 20s માટે સોનિકેશન કરવામાં આવ્યું ત્યારે રોમમૂળોમાં gusA જનીનની અભિવ્યક્તિ શ્રેષ્ઠ હોવાનું જણાયું હતું. સુધારેલા પ્રોટોકોલની રૂપાંતરણ કાર્યક્ષમતા પાંદડાં અને પ્રરોહના અગ્રભાગોના એક્સપ્લાન્ટ માટે અનુક્રમે 66.5 અને 59.5% નોંધાઈ હતી. અન્ય પ્રોટોકોલ સાથે સરખામણી કરતાં આ સુધારેલા પ્રોટોકોલની રૂપાંતરણ કાર્યક્ષમતા પાંદડાં માટે 2.5 ગણી વધુ અને પ્રરોહના અગ્રભાગો માટે 3.7 ગણી વધુ હોવાનું જણાયું હતું. સધર્ન બ્લોટ વિશ્લેષણોએ W1-W4 લાઇનોમાં gusA ટ્રાન્સજનીનની 1–2 નકલોની પુષ્ટિ કરી હતી, જ્યારે સુધારેલા પ્રોટોકોલ દ્વારા ઉત્પન્ન કરાયેલી W5 લાઇનમાં ટ્રાન્સજનીનની 1–4 નકલો મળી આવી હતી.
UP200St પ્રોબ-પ્રકારનું હોમોજેનાઇઝર સોનોપોરેશન અને જનીન ટ્રાન્સફેક્શન માટે
અલ્ટ્રાસોનિક સહાયથી કપાસનું રૂપાંતરણ
Hussain et al. (2007) સોનિકેશન-સહાયિત કપાસના રૂપાંતરણની લાભદાયી અસરો દર્શાવે છે. ઓછી આવૃત્તિના અલ્ટ્રાસાઉન્ડથી સર્જાતું ધ્વનિક કેવિટેશન વનસ્પતિ પેશીની સપાટી પર અને તેની નીચે સૂક્ષ્મ ઘા બનાવે છે (સોનોપોરેશન) અને Agrobacteriumને વનસ્પતિ પેશીમાં વધુ ઊંડે તથા સમગ્ર પેશીમાં સંપૂર્ણપણે ફેલાવા દે છે. આ રીતે ઘા પડવાથી પેશીમાં વધુ ઊંડે આવેલા વનસ્પતિ કોષોને ચેપ લાગવાની સંભાવના વધે છે. SAATની રૂપાંતરણ કાર્યક્ષમતાનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે GUS જનીનની અભિવ્યક્તિ માપવામાં આવી હતી. GUS રિપોર્ટર પ્રણાલી એક રિપોર્ટર જનીન પ્રણાલી છે, જે ખાસ કરીને વનસ્પતિના આણ્વિક જીવવિજ્ઞાન અને સૂક્ષ્મજીવવિજ્ઞાનમાં ઉપયોગી છે. SAATના વિવિધ પરિમાણો સમાયોજિત કરીને, પરિપક્વ ભ્રૂણોનો એક્સપ્લાન્ટ તરીકે ઉપયોગ કરતાં કપાસમાં GUSની ક્ષણિક અભિવ્યક્તિમાં નોંધપાત્ર વધારો થયો હતો. એક્સપ્લાન્ટના ઇન્ક્યુબેશન પછી 24hએ પ્રથમ વખત GUS મળી આવ્યું હતું અને 48h સુધીમાં GUSની અભિવ્યક્તિ ખૂબ તીવ્ર બની હતી, જે સોનિકેશન-સહાયિત Agrobacterium-મધ્યસ્થી રૂપાંતરણ (SAAT) પછી કપાસના એક્સપ્લાન્ટના સફળ રૂપાંતરણનું ઉપયોગી સૂચક બની હતી. વિવિધ રૂપાંતરણ તકનીકોની (એટલે કે બાયોલિસ્ટિક, Agro, BAAT, SAAT) સરખામણીમાં, સોનિકેશન-સહાયિત Agrobacterium-મધ્યસ્થી રૂપાંતરણ (SAAT)એ રૂપાંતરણનાં અન્ય તમામ કરતાં ઘણા શ્રેષ્ઠ પરિણામો દર્શાવ્યાં હતાં.
GUSની ક્ષણિક અભિવ્યક્તિના આધારે રૂપાંતરણ પ્રક્રિયાની પસંદગી. સોનિકેશન-સહાયિત Agrobacterium-મધ્યસ્થી રૂપાંતરણ (SAAT) નોંધપાત્ર રીતે વધુ ક્ષણિક અભિવ્યક્તિ દર્શાવે છે.
(અભ્યાસ અને આલેખ: © Hussain et al., 2007)
સોનોપોરેશન અને SAAT માટે ઉચ્ચ કાર્યક્ષમતાવાળા અલ્ટ્રાસોનિક ઉકેલો
Hielscher Ultrasonics પ્રયોગશાળાઓ, સંશોધન સુવિધાઓ તેમજ અત્યંત ઊંચી પ્રક્રિયા ક્ષમતાવાળા ઔદ્યોગિક ઉત્પાદન માટે ઉચ્ચ કાર્યક્ષમતાવાળા અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સના વિકાસ અને ઉત્પાદનમાં લાંબા સમયનો અનુભવ ધરાવે છે. સૂક્ષ્મજીવવિજ્ઞાન અને જીવનવિજ્ઞાન માટે, Hielscher ચોક્કસ પેશીઓ અને તેમની સારવાર માટે જરૂરી જુદી જુદી જરૂરિયાતોને અનુરૂપ વિવિધ ઉકેલો પ્રદાન કરે છે. અનેક નમૂનાઓનું એકસાથે અલ્ટ્રાસોનિકેશન કરવા માટે Hielscher મલ્ટીવેલ પ્લેટ્સ માટે UIP400MTP, 10 સુધીની વાયલ્સના સોનિકેશન માટે VialTweeter (દા.ત., Eppendorf ટ્યુબ્સ) અથવા અલ્ટ્રાસોનિક CupHorn પ્રદાન કરે છે. પ્રયોગશાળાના હોમોજેનાઇઝર્સ તરીકે 50 થી 400 વોટના પ્રોબ પ્રકારના અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સ ઉપલબ્ધ છે, જ્યારે ઔદ્યોગિક સિસ્ટમ્સ 500 વોટથી 16kW સુધીની શક્તિ શ્રેણીને આવરી લે છે.
કૃપા કરીને અમારો સંપર્ક કરો અને તમારી ઉપયોગપદ્ધતિ તથા પ્રક્રિયાની જરૂરિયાતો વિશે અમને જણાવો. અમારા બહોળો અનુભવ ધરાવતા કર્મચારીઓ તમારી જૈવિક પ્રક્રિયા માટે સૌથી યોગ્ય અલ્ટ્રાસોનિકેટરની ભલામણ કરવામાં આનંદ અનુભવશે.
નીચેનું કોષ્ટક અમારા અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સની અંદાજિત પ્રક્રિયા ક્ષમતાનો ખ્યાલ આપે છે:
| બેચનું આયતન | પ્રવાહ દર | ભલામણ કરેલ ઉપકરણો |
|---|---|---|
| મલ્ટીવેલ / માઇક્રોટાઇટર પ્લેટ્સ | n.a. | UIP400MTP |
| 10 સુધીની વાયલ્સ | n.a. | VialTweeter |
| 5 સુધીની વાયલ્સ/ટ્યુબ્સ અથવા 1 વધુ મોટું પાત્ર | n.a. | CupHorn |
| 1 થી 500mL | 10 થી 200mL/min | UP100H |
| 10 થી 2000mL | 20 થી 400mL/min | UP200Ht, UP400St |
| 0.1 થી 20L | 0.2 થી 4L/min | UIP2000hdT |
| 10 થી 100L | 2 થી 10L/min | UIP4000hdT |
| n.a. | 10 થી 100L/min | UIP16000 |
| n.a. | વધુ ઊંચો | સમૂહમાં ગોઠવાયેલા UIP16000 |
અમારો સંપર્ક કરો! / અમને પૂછો!
સાહિત્ય / સંદર્ભો
- Klimek-Chodacka, Magdalena & Baranski, Rafal (2014): A protocol for sonication-assisted Agrobacterium rhizogenesmediated transformation of haploid and diploid sugar beet (Beta vulgaris L.) explants. Acta biochimica Polonica 2014. 13-17.
- Bing-fu GUO, Yong GUO, Jun WANG, Li-juan ZHANG, Long-guo JIN, Hui-long HONG, Ru-zheng CHANG, Li-juan QIU (2015): Co-treatment with surfactant and sonication significantly improves Agrobacterium-mediated resistant bud formation and transient expression efficiency in soybean. Journal of Integrative Agriculture, Volume 14, Issue 7, 2015. 1242-1250.
- Dehdashti, Sayed Mehdi; Acharjee, Sumita; Kianamiri, Shahla; Deka, Manab (2016): An efficient Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation protocol of Withania somnifera. Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC), 128(1), 2016. 55–65.
- Syed Sarfraz Hussain; Tayyab Husnain; S. Riazuddin (2007): Sonication Assisted Agrobacterium Mediated Transformation (Saat): An Alternative Method For Cotton Transformation. Pak. J. Bot., 39(1), 2007. 223-230.
Hielscher Ultrasonics ઉચ્ચ કાર્યક્ષમતાવાળા અલ્ટ્રાસોનિક હોમોજેનાઇઝર્સ પ્રયોગશાળાના કદથી લઈને ઔદ્યોગિક કદ સુધી બનાવે છે.


