અલ્ટ્રાસોનિક્સનો ઉપયોગ કરીને છોડના કોષોમાં આનુવંશિક પરિવર્તન

Sonication-Assisted Agrobacterium-Mediated Transformation (SAAT) એ એગ્રોબેક્ટેરિયમનો ટ્રાન્સપોર્ટર તરીકે ઉપયોગ કરીને છોડના કોષોને વિદેશી જનીનોથી સંક્રમિત કરવાની એક કાર્યક્ષમ પદ્ધતિ છે. અલ્ટ્રાસોનિક પોલાણ સોનોપોરેશનનું કારણ બને છે, જેને છોડની પેશીઓના લક્ષિત માઇક્રો-વાઉન્ડિંગ તરીકે વર્ણવી શકાય છે. આ અલ્ટ્રાસોનિકલી માઇક્રો-વાઉન્ડ્સ બનાવે છે, ડીએનએ અને ડીએનએ વેક્ટર્સને સેલ મેટ્રિક્સમાં અસરકારક રીતે પરિવહન કરી શકાય છે.

સોનોપોરેશન – અલ્ટ્રાસોનિકલી ઉન્નત સેલ ટ્રાન્સફોર્મેશન

અલ્ટ્રાસોનિકેટર UP100H એ લેબ હોમોજેનાઇઝર છે જેનો ઉપયોગ સેલ કલ્ચર પ્લેટ્સના નમૂના તૈયાર કરવા માટે થાય છે.જ્યારે ઓછી-આવર્તન અલ્ટ્રાસાઉન્ડ (આશરે 20kHz) સેલ સસ્પેન્શન પર લાગુ થાય છે, ત્યારે એકોસ્ટિક પોલાણની અસરો કોષની પેશીઓ પર ક્ષણિક પટલ અભેદ્યકરણનું કારણ બને છે. આ અલ્ટ્રાસોનિક અસરને સોનોપોરેશન તરીકે ઓળખવામાં આવે છે અને તેનો ઉપયોગ કોષો અથવા પેશીઓમાં જનીન ટ્રાન્સફર માટે થાય છે.
અલ્ટ્રાસોનિકેશનના ફાયદા તેના નોન-થર્મલ મેકેનિકલ કામના સિદ્ધાંત પર આધારિત છે, જે સોનિકેશનને ઘણી વખત વધુ સર્વતોમુખી બનાવે છે અને સેલ પ્રકારો પર ઓછું નિર્ભર કરે છે. સોનોપોરેશનનો સર્વતોમુખી ઉપયોગ ટ્રાન્સજેનિક છોડના ઉપયોગની શક્યતા ખોલે છે, જે જટિલ માનવ ઉપચારાત્મક પ્રોટીનના જૈવઉત્પાદનમાં નોંધપાત્ર ક્ષમતા ધરાવે છે. આવા છોડ-આધારિત બાયોરિએક્ટર સરળતાથી આનુવંશિક રીતે ચાલાકી કરી શકાય છે, માનવ રોગાણુઓ સાથે સંભવિત દૂષણને અટકાવે છે, પરિવર્તન મધ્યસ્થી બેક્ટેરિયા (દા.ત. એગ્રોબેક્ટેરિયમ) ને નુકસાન કરતા નથી, અને જૈવ-સંશ્લેષણની સસ્તી, અસરકારક પદ્ધતિ છે.

માહિતી માટે ની અપીલ





વિડિયો અલ્ટ્રાસોનિક નમૂના તૈયારી પ્રણાલી UIP400MTP બતાવે છે, જે ઉચ્ચ-તીવ્રતાના અલ્ટ્રાસાઉન્ડનો ઉપયોગ કરીને કોઈપણ પ્રમાણભૂત મલ્ટિ-વેલ પ્લેટના વિશ્વસનીય નમૂના તૈયાર કરવાની મંજૂરી આપે છે. UIP400MTP ના લાક્ષણિક કાર્યક્રમોમાં સેલ લિસિસ, DNA, RNA અને ક્રોમેટિન શીયરિંગ તેમજ પ્રોટીન નિષ્કર્ષણનો સમાવેશ થાય છે.

મલ્ટિ-વેલ પ્લેટ સોનિકેશન માટે અલ્ટ્રાસોનિસેટર UIP400MTP

અલ્ટ્રાસોનિક-આસિસ્ટેડ સેલ ટ્રાન્સફોર્મેશન

પ્રોબ-ટાઈપ અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સ જેમ કે UP200St એ ભરોસાપાત્ર ટિશ્યુ હોમોજેનાઇઝર્સ છે અને જિનેટિક્સમાં નમૂનાની તૈયારી માટે વ્યાપકપણે ઉપયોગમાં લેવાય છે, દા.ત., સોનિકેશન-આસિસ્ટેડ એગ્રોબેક્ટેરિયમ-મીડિયેટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન (SAAT) માટે.સોનિકેશન એ એવી તકનીક છે જે સોલ્યુશનમાં કણોને ઉશ્કેરવા માટે, ઉકેલોને મિશ્રિત કરવા માટે ઓછી-આવર્તન અલ્ટ્રાસાઉન્ડ તરંગો લાગુ કરે છે, જેનાથી સમૂહ ટ્રાન્સફર અને વિસર્જનનો દર વધે છે. સાથોસાથ, સોનિકેશન પ્રવાહીમાંથી ઓગળેલા વાયુઓને દૂર કરી શકે છે. પ્લાન્ટ-ટ્રાન્સફોર્મેશનમાં, સોનિકેશન છોડની પેશીઓ પર માઇક્રોવાઉન્ડ્સનું નિર્માણ કરશે અને છોડના પ્રોટોપ્લાસ્ટમાં નગ્ન ડીએનએની ડિલિવરી વધારશે.

આનુવંશિક પરિવર્તન માટે, સોનિકેશન-આસિસ્ટેડ એગ્રોબેક્ટેરિયમ-મીડિયેટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન (SAAT) એ પસંદગીની પદ્ધતિ છે અને નગ્ન DNA અને DNA વેક્ટર્સને સીધા પ્રોટોપ્લાસ્ટમાં સ્થાનાંતરિત કરવા માટે ઉપયોગમાં લેવાતા સોનિકેશન કરતાં નોંધપાત્ર રીતે વધુ કાર્યક્ષમતા ધરાવે છે. અસંખ્ય અભ્યાસોએ દર્શાવ્યું છે કે સોનિકેશન આસિસ્ટેડ એગ્રોબેક્ટેરિયમ-મીડિયેટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન (SAAT) નો ઉપયોગ અલ્ટ્રાસાઉન્ડ તરંગો અને પરિણામી એકોસ્ટિક પોલાણ દ્વારા છોડના કોષો પર યાંત્રિક વિક્ષેપ અને ઘાવની રચનાને પ્રેરિત કરવા માટે થઈ શકે છે. ટૂંકી અલ્ટ્રાસોનિક ટ્રીટમેન્ટ એક્સ્પ્લાન્ટની સપાટી પર સૂક્ષ્મ ઘા બનાવે છે. કારણ કે ઘાયલ કોષો એગ્રોબેક્ટેરિયમને છોડની પેશીઓના ઊંડા ભાગમાં પ્રવેશવાની મંજૂરી આપશે, આમ છોડના કોષોને ચેપ લાગવાની સંભાવના વધી જાય છે. વધુમાં, સ્ત્રાવિત ફિનોલિક સંયોજનો પરિવર્તનને વધારે છે. અલ્ટ્રાસોનિકલી જનરેટેડ માઇક્રો-વાઉન્ડ્સ બેક્ટેરિયા દ્વારા સ્પષ્ટ પ્રવેશને પણ વધુ શક્ય બનાવે છે. ખાસ કરીને એગ્રોબેક્ટેરિયમ સામે પ્રતિરોધક ગણાતી છોડની પ્રજાતિઓમાં આનુવંશિક પરિવર્તન માટે SAATનો સફળતાપૂર્વક ઉપયોગ કરવામાં આવ્યો હતો.
ખૂબ જ સરળ અને સસ્તી પદ્ધતિ હોવાના કારણે, તેમજ એગ્રોબેક્ટેરિયમ-મધ્યસ્થી જીન ટ્રાન્સફરમાં નોંધપાત્ર વધારો એ SAAT ના મુખ્ય ફાયદા છે. ચેનોપોડિયમ રુબ્રમ એલ. અને બીટા વલ્ગારિસ એલ.ના રૂપાંતરણમાં SAATના સફળ ઉપયોગ ઉપરાંત, આ અભિગમ નિકોટિયાના ટેબેકમમાં રિકોમ્બિનન્ટ એસ્ચેરીચિયા કોલી વાઇલ્ડ-ટાઈપ હીટ-લેબિલ હોલોટોક્સિન અને એસ્ચેરીચિયા કોલી મ્યુટન્ટ એલટી રસી સહાયકોના ઉત્પાદનમાં પણ લાગુ કરવામાં આવ્યો છે. , જેમાં પક્ષીઓમાં સૌથી વધુ પ્રણાલીગત LT-B-વિશિષ્ટ IgG ટાઇટર્સ મળી આવ્યા હતા.
(cf. Laere et al., 2016; M. Klimek-Chodacka and R. Baranski, 2014)

VialTweeter નો ઉપયોગ પ્લાન કોશિકાઓના DNA ચેપ માટે થઈ શકે છે, દા.ત. સોનિકેશન-આસિસ્ટેડ એગ્રોબેક્ટેરિયમ-મીડિયેટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન (SAAT) નો ઉપયોગ કરીને

વીયલટેવેટર બહુવિધ સેમ્પલ ટ્યુબના એક સાથે સોનિકેશન માટે, દા.ત. સોનિકેશન-સહાયિત એગ્રોબેક્ટેરિયમ-મીડિયેટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન (SAAT) માટે

સોનિકેશન-આસિસ્ટેડ એગ્રોબેક્ટેરિયમ-મીડિયેટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન (SAAT) ના વૈજ્ઞાનિક રીતે સાબિત લાભો

સોનિકેશન-આસિસ્ટેડ એગ્રોબેક્ટેરિયમ-મીડિયેટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન (SAAT) અસંખ્ય છોડની પ્રજાતિઓ પર લાગુ કરવામાં આવ્યું છે. પ્લાન્ટ સેલ કલ્ચરની ટૂંકી અને પ્રમાણમાં હળવી અલ્ટ્રાસોનિક ટ્રીટમેન્ટ સોનોપોરેશનનું કારણ બને છે, જે પાછળથી જનીન ટ્રાન્સપોર્ટર તરીકે એગ્રોબેક્ટેરિયમના ઊંડા પ્રવેશને મંજૂરી આપે છે. નીચે તમે SAAT ની ફાયદાકારક અસરો દર્શાવતા અનુકરણીય અભ્યાસો વાંચી શકો છો.

અશ્વગંધાનું અલ્ટ્રાસોનિકલી-આસિસ્ટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન

W. somnifera (અશ્વગંધા અથવા શિયાળુ ચેરી તરીકે ઓળખાય છે) માં પરિવર્તન કાર્યક્ષમતા સુધારવા માટે, દેહદષ્ટિ અને સહકર્મીઓ (2016) એ એસીટોસિરીંગોન (AS) અને સોનિકેશનના ઉપયોગની તપાસ કરી.
Acetosyringone (AS) ત્રણ તબક્કામાં ઉમેરવામાં આવ્યું હતું: એગ્રોબેક્ટેરિયમ લિક્વિડ કલ્ચર, એગ્રોબેક્ટેરિયમ ઇન્ફેક્શન અને એગ્રોબેક્ટેરિયમ સાથે એક્સ્પ્લાન્ટ્સની સહ-સંસ્કૃતિ. એગ્રોબેક્ટેરિયમ લિક્વિડ કલ્ચરમાં 75 μM ASનો ઉમેરો વીર જનીનોના ઇન્ડક્શન માટે શ્રેષ્ઠ હોવાનું જણાયું હતું.
સોનિકેશન (SAAT) ની વધારાની એપ્લિકેશન ઉચ્ચતમ જનીન અભિવ્યક્તિમાં પરિણમી. રુવાંટીવાળા મૂળમાં gusA જનીન અભિવ્યક્તિ શ્રેષ્ઠ હોવાનું જણાયું હતું જ્યારે પાંદડા અને અંકુરની ટીપ્સ અનુક્રમે 10 અને 20s માટે સોનિકેટ કરવામાં આવી હતી. સુધારેલ પ્રોટોકોલની રૂપાંતર કાર્યક્ષમતા લીફ અને શૂટ ટીપ એક્સ્પ્લાન્ટના કિસ્સામાં અનુક્રમે 66.5 અને 59.5% નોંધવામાં આવી હતી. અન્ય પ્રોટોકોલ સાથે સરખામણી કરવામાં આવે ત્યારે આ સુધારેલ પ્રોટોકોલની રૂપાંતર કાર્યક્ષમતા પાંદડા માટે 2.5 ગણી વધારે અને શૂટ ટીપ્સ માટે 3.7 ગણી વધુ હોવાનું જણાયું હતું. સધર્ન બ્લોટ વિશ્લેષણે W1-W4 લાઇનમાં gusA ટ્રાંસજીનની 1-2 નકલોની પુષ્ટિ કરી છે, જ્યારે સુધારેલ પ્રોટોકોલ દ્વારા જનરેટ કરાયેલ W5 લાઇનમાં 1-4 ટ્રાન્સજેન નકલો મળી આવી હતી.

સોનિકેશન સમયગાળો (અલ્ટ્રાસાઉન્ડના સંપર્કમાં સમય) ડબ્લ્યુ. સોમ્નિફેરામાં પરિવર્તન પર સોનિકેશન-આસિસ્ટેડ એગ્રોબેક્ટેરિયમ-મીડિયેટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન (SAAT) ને અસર કરે છે.

ડબ્લ્યુ. સોમનિફેરા લીફ (એ) અને શૂટ ટીપ (બી) એક્સ્પ્લેન્ટની ટ્રાન્સફોર્મેશન ફ્રીક્વન્સી પર સોનિકેશન-આસિસ્ટેડ એગ્રોબેક્ટેરિયમ-મીડિયેટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન (SAAT) ના સમયગાળાની અસર
(અભ્યાસ અને ગ્રાફિક: © દેહદષ્ટિ એટ અલ., 2016)

માહિતી માટે ની અપીલ





કપાસનું અલ્ટ્રાસોનિકલી-આસિસ્ટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન

હુસૈન એટ અલ. (2007) સોનિકેશન-આસિસ્ટેડ કોટન ટ્રાન્સફોર્મેશનની ફાયદાકારક અસરો દર્શાવો. ઓછી-આવર્તન અલ્ટ્રાસાઉન્ડ દ્વારા થતા એકોસ્ટિક પોલાણ છોડની પેશીઓ (સોનોપોરેશન) ની સપાટી પર અને નીચે સૂક્ષ્મ ઘા બનાવે છે અને એગ્રોબેક્ટેરિયમને છોડની પેશીઓમાં ઊંડા અને સંપૂર્ણ રીતે મુસાફરી કરવાની મંજૂરી આપે છે. આ ઘાવની ફેશન પેશીઓમાં ઊંડા પડેલા છોડના કોષોને ચેપ લગાડવાની સંભાવના વધારે છે. SAAT ની પરિવર્તન કાર્યક્ષમતાનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે, GUS જનીન અભિવ્યક્તિ માપવામાં આવી હતી. GUS રિપોર્ટર સિસ્ટમ એ રિપોર્ટર જનીન સિસ્ટમ છે, જે ખાસ કરીને પ્લાન્ટ મોલેક્યુલર બાયોલોજી અને માઇક્રોબાયોલોજીમાં ઉપયોગી છે. વિવિધ SAAT પરિમાણોને સમાયોજિત કરીને, પરિપક્વ એમ્બ્રોયોનો ઉપયોગ કરીને કપાસમાં GUS ક્ષણિક અભિવ્યક્તિ નોંધપાત્ર રીતે ઉન્નત કરવામાં આવી હતી. એક્સ્પ્લાન્ટના ઇન્ક્યુબેશન પછી 24 કલાકમાં પ્રથમ વખત GUS શોધી કાઢવામાં આવ્યું હતું અને 48 કલાક સુધીમાં, GUS અભિવ્યક્તિ ખૂબ જ તીવ્ર હતી જે સોનિકેશન આસિસ્ટેડ એગ્રોબેક્ટેરિયમ મિડિયેટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન (SAAT)ને પગલે કપાસના એક્સ્પ્લાન્ટના સફળ પરિવર્તનના ઉપયોગી સૂચક તરીકે સેવા આપી હતી. વિવિધ ટ્રાન્સફોર્મેશન ટેક્નિક (જેમ કે બાયોલિસ્ટિક, એગ્રો, BAAT, SAAT), સોનિકેશન-સહાયિત એગ્રોબેક્ટેરિયમ-મીડિયેટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન (SAAT) ની સરખામણીએ રૂપાંતરણના અત્યાર સુધીના શ્રેષ્ઠ પરિણામો દર્શાવ્યા છે.

સોનિકેશન-આસિસ્ટેડ એગ્રોબેક્ટેરિયમ-મીડિયેટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન (SAAT) વૈકલ્પિક ચેપ પદ્ધતિઓની તુલનામાં નોંધપાત્ર રીતે ઉચ્ચ ક્ષણિક અભિવ્યક્તિ દર્શાવે છે.

GUS ના ક્ષણિક અભિવ્યક્તિના આધારે પરિવર્તન પ્રક્રિયાની પસંદગી. સોનિકેશન-આસિસ્ટેડ એગ્રોબેક્ટેરિયમ-મીડિયેટેડ ટ્રાન્સફોર્મેશન (SAAT) નોંધપાત્ર રીતે ઉચ્ચ ક્ષણિક અભિવ્યક્તિ દર્શાવે છે.
(અભ્યાસ અને ગ્રાફિક: © હુસૈન એટ અલ., 2007)

સોનોપોરેશન અને SAAT માટે ઉચ્ચ-પ્રદર્શન અલ્ટ્રાસોનિક સોલ્યુશન્સ

Hielscher Ultrasonics એ પ્રયોગશાળાઓ, સંશોધન સુવિધાઓ તેમજ ખૂબ જ ઉચ્ચ થ્રુપુટ સાથે ઔદ્યોગિક ઉત્પાદન માટે ઉચ્ચ-પ્રદર્શન અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સના વિકાસ અને ઉત્પાદનમાં લાંબા સમયથી અનુભવી છે. માઇક્રોબાયોલોજી અને જીવન વિજ્ઞાન માટે, Hielscher ચોક્કસ પેશીઓ અને તેમની સારવાર માટે જરૂરી વિવિધ જરૂરિયાતોને સમાવવા માટે વિવિધ ઉકેલો પ્રદાન કરે છે. અસંખ્ય નમૂનાઓના એકસાથે અલ્ટ્રાસોનિકેશન માટે Hielscher મલ્ટિવેલ પ્લેટ્સ માટે UIP400MTP ઓફર કરે છે, 10 શીશીઓ (દા.ત., એપેન્ડોર્ફ ટ્યુબ) અથવા અલ્ટ્રાસોનિક કપહોર્ન સુધીના સોનિકેશન માટે VialTweeter. પ્રોબ પ્રકારના અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સ લેબ હોમોજેનાઇઝર્સ તરીકે 50 થી 400 વોટ સુધી ઉપલબ્ધ છે, જ્યારે ઔદ્યોગિક સિસ્ટમો 500 વોટથી 16kW સુધીની પાવર રેન્જને આવરી લે છે.
કૃપા કરીને અમારો સંપર્ક કરો અને અમને તમારી અરજી અને પ્રક્રિયાની જરૂરિયાતો વિશે જણાવો. અમારા અનુભવી સ્ટાફને તમારી જૈવિક પ્રક્રિયા માટે સૌથી યોગ્ય અલ્ટ્રાસોનિકેટરની ભલામણ કરવામાં આનંદ થશે.
નીચે આપેલ કોષ્ટક તમને અમારા અલ્ટ્રાસોનાનેટર્સની અંદાજિત પ્રક્રિયા ક્ષમતા વિશે સંકેત આપે છે:

બેચ વોલ્યુમ પ્રવાહ દર ભલામણ ઉપકરણો
મલ્ટીવેલ / માઇક્રોટાઇટર પ્લેટો ના UIP400MTP
10 શીશીઓ સુધી ના વીયલટેવેટર
5 શીશીઓ/ટ્યુબ અથવા 1 મોટા જહાજ સુધી ના કપહોર્ન
1 થી 500 એમએલ 10 થી 200 એમએલ / મિનિટ UP100H
10 થી 2000 એમએલ 20 થી 400 એમએલ / મિનિટ Uf200 ः ટી, UP400St
0.1 થી 20 એલ 0.2 થી 4 એલ / મીન UIP2000hdT
10 થી 100 એલ 2 થી 10 એલ / મિ યુઆઇપી 4000 એચડીટી
ના 10 થી 100 લિ / મિનિટ યુઆઇપી 16000
ના મોટા ના ક્લસ્ટર યુઆઇપી 16000

અમારો સંપર્ક કરો! / અમારો કહો!

વધુ માહિતી માટે પૂછો

અમારા અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સ, તેમની અરજીઓ અને કિંમત વિશે વધારાની માહિતીની વિનંતી કરવા માટે કૃપા કરીને નીચેનું ફોર્મ ભરો. અમને તમારી સાથે તમારી પ્રક્રિયાની ચર્ચા કરવામાં અને તમારી જરૂરિયાતોને પૂર્ણ કરતી અલ્ટ્રાસોનિક સિસ્ટમ ઓફર કરવામાં આનંદ થશે!









મહેરબાની કરીને નોંધ કરો ગોપનીયતા નીતિ.



અલ્ટ્રાસોનિક હાઇ-શીયર હોમોજેનાઇઝર્સનો ઉપયોગ લેબ, બેન્ચ-ટોપ, પાયલોટ અને ઔદ્યોગિક પ્રક્રિયામાં થાય છે.

હિલ્સચર અલ્ટ્રાસોનિક્સ, લ applicationsબ, પાઇલટ અને industrialદ્યોગિક ધોરણે એપ્લિકેશન, વિખેરી નાખવું, પ્રવાહી મિશ્રણ અને નિષ્કર્ષણના મિશ્રણ માટે ઉચ્ચ-પ્રભાવવાળા અલ્ટ્રાસોનિક હોમોજેનાઇઝર્સનું ઉત્પાદન કરે છે.



સાહિત્ય / સંદર્ભો


ઉચ્ચ પ્રદર્શન અલ્ટ્રાસોનિક્સ! Hielscher ની પ્રોડક્ટ રેન્જ કોમ્પેક્ટ લેબ અલ્ટ્રાસોનિકેટરથી લઈને બેન્ચ-ટોપ યુનિટ્સથી લઈને ફુલ-ઔદ્યોગિક અલ્ટ્રાસોનિક સિસ્ટમ્સ સુધીના સંપૂર્ણ સ્પેક્ટ્રમને આવરી લે છે.

હિલ્સચર અલ્ટ્રાસોનિક્સ ઉચ્ચ-પ્રભાવવાળા અલ્ટ્રાસોનિક હોમોજેનાઇઝર્સનું ઉત્પાદન કરે છે લેબ માટે industrialદ્યોગિક કદ.