Fragmentation de l'alpha-synucléine à l'aide du sonicateur VialTweeter

Les fibrilles et les rubans d'α-synucléine sont fragmentés dans le cadre de la recherche scientifique afin de générer des fragments de fibrilles plus petits ou même des molécules de protéines individuelles, qui peuvent être plus facilement analysés à l'aide de diverses techniques expérimentales. Le sonicateur VialTweeter est l'un des ultrasons les plus couramment utilisés pour une fragmentation efficace et fiable de l'alpha-synucléine.

L'α-synucléine dans la recherche

VialTweeter pour la fragmentation simultanée de plusieurs échantillons de fibrilles d'alpha-synucléine dans les mêmes conditions.Les fibrilles d'alpha-synucléine sont des agrégats de protéines fortement associés à des troubles neurodégénératifs tels que la maladie de Parkinson et certaines formes de démence, notamment la démence à corps de Lewy. La recherche sur les fibrilles d'alpha-synucléine vise à comprendre leur rôle dans la progression de la maladie et à mettre au point des interventions thérapeutiques potentielles. En divisant les fibrilles d'alpha-synucléine en fragments plus petits, les chercheurs peuvent étudier leurs caractéristiques structurelles spécifiques. Par exemple, la fragmentation des fibrilles d'alpha-synucléine permet aux chercheurs d'étudier leurs interactions avec d'autres molécules, telles que les protéines, les lipides ou les petites molécules. En produisant des fragments plus petits, les sites de liaison et l'affinité pour ces partenaires d'interaction peuvent être sondés plus efficacement. Les fribrilles et rubans α-Syn plus petits peuvent également présenter une toxicité et des effets biochimiques modifiés. Il est donc essentiel de disposer d'une technique de fragmentation fiable et efficace, qui produise des résultats reproductibles en traitant rapidement et simplement les échantillons.
Fragmentation ultrasonique de l'alpha-syn : Le sonicateur VialTweeter est le système de préparation d'échantillons par ultrasons qui sonifie jusqu'à 10 flacons simultanément dans les mêmes conditions. Les réglages programmables permettent de répéter simplement et rapidement les mêmes expériences, ce qui donne des résultats très fiables et reproductibles en matière de fragmentation des fibrilles d'alpha-synucléine.

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Le sonicateur VialTweeter est l'un des ultrasons les plus couramment utilisés pour une fragmentation efficace et fiable de l'alpha-synucléine.

Sonicateur VialTweeter pour la fragmentation ultrasonique simultanée de plusieurs échantillons d'alpha-synucléine.

 

Le VialTweeter est un système ultrasonique unique en son genre permettant de sonifier simultanément jusqu'à 10 flacons dans les mêmes conditions, sans contamination croisée.

UP200St avec VialTweeter pour la sonication de flacons fermés

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Préparation d'échantillons d'α-synucléine à l'aide d'un sonicateur

L'une des méthodes d'étude des fibrilles d'alpha-synucléine consiste à les extraire et à les fragmenter à l'aide de techniques telles que la sonication. La sonication est un processus qui utilise des ondes ultrasonores de haute intensité et de basse fréquence pour perturber et briser les agrégats de protéines, ce qui conduit à la libération de fibrilles plus petites ou de molécules de protéines individuelles. Le sonicateur VialTweeter est un appareil couramment utilisé à cette fin dans les études de recherche sur l'α-synucléine.

De nombreuses études de recherche décrivent des protocoles précis de préparation d'échantillons pour la sonication des fibrilles d'alpha-synucléine, qui utilisent le Hielscher VialTweeter pour une fragmentation efficace et fiable des fibrilles d'α-synucléine. En fragmentant les fibrilles par ultrasons, les chercheurs peuvent analyser les produits obtenus et examiner leur structure, leur toxicité et leurs interactions avec d'autres molécules. Cette recherche permet de mieux comprendre les mécanismes sous-jacents à la neurodégénérescence et d'identifier potentiellement de nouvelles cibles thérapeutiques. Les protocoles de sonication de l'α-synucléine bien établis utilisant le sonicateur VialTweeter permettent d'obtenir des résultats fiables et reproductibles.

Alpha synuclein fibril fragmentation VialTweeter sonicator

Images du haut : fibrilles d'alpha-synucléine non fragmentées
Images du bas : Fibrilles d'alpha-synucléine fragmentées par ultrasons avec le sonicateur VialTweeter
(étude et images : ©Dieriks et al., 2022)

Fragmentation ultrasonique des fibrilles d'α-synucléine – protocoles

Comme de nombreux chercheurs utilisent le sonicateur VialTweeter comme technique de fragmentation préférée pour produire des fragments uniformes de fibrilles d'α-synucléine, des protocoles établis sont facilement disponibles. Vous trouverez ci-dessous quelques protocoles de fragmentation exemplaires.
 

 
Préparation des semences ClearTau : Les fibrilles ClearTau ont été diluées à 10 μM dans du dH2O et soniquées à 70 % d'amplitude pendant 50 s avec un cycle de 1 s ON 1 s OFF in-tube à l'aide du sonicateur UP200St avec VialTweeter. Les graines ont été caractérisées par microscopie électronique.
Mesure de la fluorescence du ThS : Les fibrilles ClearTau ont été diluées à 2,5 μM dans du dH2O et soniquées à 70 % d'amplitude pendant 50 s avec un cycle de 1 s ON 1 s OFF dans le tube en utilisant l'UP200St avec VialTweeter. 2,5 μM de monomère Tau 4R2N de pleine longueur ont été utilisés comme contrôle. À la réaction de 100 μl, 100 μl de ThS (10 μM) ont été ajoutés, ce qui donne des concentrations finales de protéines de 1,25 μM. La fluorescence du ThS a été mesurée à l'aide de plaques à fond transparent de 96 puits installées dans le lecteur de microplaques FLUOstar Omega avec une excitation à 445 nm et une émission à 485 nm a été enregistrée.
(cf. Limorenko et al., 2023)
 
Longueur uniforme de l'α-synucléine par sonication : L'hétérogénéité de la longueur des fibrilles et des rubans d'α-syn a été réduite par sonication pendant 20 minutes sur la glace dans des tubes Eppendorf de 2 ml dans un VialTweeter réglé à 75 % d'amplitude, impulsions de 0,5 seconde.
(cf. Bousset et al., 2013)
 
Le contrôle de qualité de l'a-Syn recombinante humaine monomérique WT ou S129A et des polymorphes fibrillaires qu'ils génèrent ainsi que celui de l'a-Syn 1-110 a été effectué. Ensuite, les polymorphes fibrillaires ont été fragmentés par sonication pendant 20 minutes dans des tubes Eppendorf de 2 ml dans l'ultrasonateur VialTweeter pour générer des particules fibrillaires d'une taille moyenne de 42-52 nm qui conviennent à l'endocytose.
(cf. Shrivastava et al., 2020)
 

La fragmentation ultrasonique est une méthode très fiable et efficace pour fragmenter uniformément les fibrilles et les rubans d'alpha-synucléine. Le VialTweeter est l'un des sonicateurs les plus couramment utilisés pour la fragmentation de l'α-syn.

Caractérisation de cinq polymorphes α-Syn fibrillaires. (A) Des micrographies électroniques en transmission de polymorphes α-Syn fibrillaires colorés négativement, de rubans, de fibrilles-91, de fibrilles-65 et de fibrilles-110 avant (voie supérieure) et après fragmentation avec le VialTweeter (voie inférieure) sont montrées. (B) La distribution des longueurs des polymorphes fibrillaires fragmentés est représentée. Le nombre (n) d'assemblages fibrillaires à partir desquels les histogrammes ont été obtenus est indiqué.
(étude et images : Shrivastava et al., 2020)

 
Les fibrilles α-Syn ont été fragmentées par sonication pendant 20 min dans des tubes Eppendorf de 2 ml dans un VialTweeter pour générer des particules fibrillaires d'une taille moyenne de 42-52 nm comme évalué par l'analyse TEM.
(cf. Negrini et al., 2022)
 
Les fibrilles remises en suspension91 (dans du PBS) ont été fragmentées avant d'être ajoutées aux cultures cellulaires par sonication pendant 20 minutes dans des tubes Eppendorf de 2 mL à l'aide du sonicateur Vial Tweeter, puis aliquotées, congelées rapidement dans de l'azote liquide et conservées jusqu'à utilisation à -80 ̊C.
(cf. Vajhøj et al., 2021)
 

Sonicator UIP400MTP pour la fragmentation des fibrilles d'alpha-synucléine dans les plaques multi-puits.

Sonicator UIP400MTP pour la fragmentation des fibrilles d'alpha-synucléine dans les plaques multi-puits.

Sonicator UIP400MTP pour la fragmentation des fibrilles d'alpha-synucléine dans les plaques multi-puits.

VialTweeter et sonicateurs de laboratoire pour la fragmentation de l'α-Syn

VialTweeter avec tubes Eppendorf de 2,0 ml pour une fragmentation fiable des fibrilles d'alpha-synucléineHielscher Ultrasonics est reconnu dans le monde entier comme le principal fabricant d'appareils à ultrasons de pointe. Reconnus et établis dans les principaux laboratoires de recherche du monde entier, nos ultrasons offrent une qualité et des performances inégalées pour vos expériences critiques.
Avec le Hielscher VialTweeter et tout autre sonicateur Hielscher, vous ferez l'expérience d'un confort d'utilisation inégalé, car ils ont été conçus pour des résultats reproductibles, une facilité d'utilisation et un fonctionnement sans faille. Grâce aux fonctions d'enregistrement automatique des données, vous pouvez vous concentrer sur votre recherche pendant que nos sonicateurs enregistrent méticuleusement les données cruciales pour la reproductibilité et la précision.
Obtenez des résultats cohérents et reproductibles en toute confiance !
Nos ultrasons sont conçus et fabriqués en Allemagne. La précision allemande et la plus haute qualité d'ingénierie garantissent une préparation fiable et précise des échantillons, comme la fragmentation des fibrilles d'alpha-synucléine, à chaque fois. Ne vous inquiétez plus des résultats incohérents - notre technologie ultrasonique garantit que votre recherche reste à la pointe du progrès scientifique.
Mais ce n'est pas tout ! Notre engagement en faveur de l'excellence va au-delà de nos produits. Nous sommes fiers de notre service clientèle exceptionnel, qui fournit une assistance experte pour répondre à toutes les questions ou préoccupations que vous pourriez avoir. Notre équipe dévouée est là pour vous aider à chaque étape de votre parcours de recherche, en veillant à ce que vous tiriez le meilleur parti de nos ultrasons.
Optez pour l'innovation, la fiabilité et une expérience utilisateur exceptionnelle - choisissez nos sonicateurs de laboratoire tels que le VialTweeter pour la fragmentation des fibrilles d'alpha-synucléine. Bénéficiez des protocoles déjà établis et rejoignez les rangs des chercheurs de premier plan qui font confiance à notre technologie pour leurs études critiques. Améliorez votre recherche et explorez de nouvelles frontières dans la recherche sur la démence et les maladies neurodégénératives grâce à nos ultrasons de pointe.

Pourquoi Hielscher Ultrasonics?

  • haute efficacité
  • Une technologie de pointe
  • fiabilité & robustesse
  • reproductibilité
  • contrôle du processus réglable et précis
  • pour tout volume
  • logiciels intelligents
  • fonctions intelligentes (par exemple, programmable, protocole de données, contrôle à distance)
  • Facile et sûr à utiliser
  • Faible entretien
  • CIP (clean-in-place)

 

Ce tutoriel explique quel type de sonicateur est le mieux adapté à vos tâches de préparation d'échantillons telles que la lyse, la désintégration cellulaire, l'isolement des protéines, la fragmentation de l'ADN et de l'ARN dans les laboratoires, l'analyse et la recherche. Choisissez le type de sonicateur idéal pour votre application, votre volume d'échantillon, votre nombre d'échantillons et votre débit. Hielscher Ultrasonics a l'homogénéisateur à ultrasons idéal pour vous !

Comment trouver le sonicateur parfait pour la désintégration des cellules et l'extraction des protéines en science et analyse

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Conception, fabrication et conseil – Qualité Made in Germany

Les ultrasons Hielscher sont réputés pour leur qualité et leur conception de haut niveau. La robustesse et la facilité d'utilisation permettent une intégration harmonieuse de nos ultrasons dans les installations industrielles. Les conditions difficiles et les environnements exigeants sont facilement gérés par les ultrasons Hielscher.

Hielscher Ultrasonics est une entreprise certifiée ISO et met l'accent sur les ultrasons de haute performance, dotés d'une technologie de pointe et d'une grande facilité d'utilisation. Bien entendu, les sonicateurs Hielscher sont conformes à la norme CE et répondent aux exigences des normes UL, CSA et RoHs.
 
Le tableau ci-dessous vous donne une indication de la capacité de traitement approximative de nos ultrasons de laboratoire :
 

Appareils recommandéslot VolumeDébit
UIP400MTPplaques multi-puits / microtitresn / a.
cuphorn à ultrasonsCupHorn pour flacons ou béchersn / a.
GDmini2réacteur ultrasonique à micro-fluxn / a.
VialTweeter00,5 à 1,5 mln / a.
UP100H1 à 500 ml10 à 200 ml / min
UP200Ht, UP400St10 à 2000mL20 à 400 ml / min

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Veuillez utiliser le formulaire ci-dessous pour demander des informations supplémentaires sur le VialTweeter et d'autres sonicateurs, la fragmentation de l'alpha-synucléine, les protocoles et les prix. Nous serons heureux de discuter avec vous de votre procédé et de vous proposer un sonicateur répondant à vos exigences en matière de préparation d'échantillons !









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La vidéo montre le système de préparation d'échantillons par ultrasons UIP400MTP, qui permet la préparation fiable d'échantillons sur n'importe quelle plaque multi-puits standard en utilisant des ultrasons de haute intensité. Les applications typiques de l'UIP400MTP comprennent la lyse cellulaire, le cisaillement de l'ADN, de l'ARN et de la chromatine ainsi que l'extraction de protéines.

Ultrasonateur UIP400MTP pour la sonication de plaques multi-puits

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Le MultiSampleSonicator VialTweeter peut contenir jusqu'à 10 flacons plus petits et jusqu'à 5 tubes à essai plus grands

Le VialTweeter est couramment utilisé pour fragmenter les fibrilles d'alpha-synucléine lors de la préparation de l'échantillon avant analyse.



Littérature / Références


Des ultrasons de haute performance ! La gamme de produits Hielscher couvre l'ensemble du spectre, depuis les ultrasons compacts de laboratoire jusqu'aux systèmes ultrasoniques industriels complets, en passant par les unités de paillasse.

Hielscher Ultrasonics fabrique des homogénéisateurs à ultrasons de haute performance à partir d'une technologie de pointe. laboratoires à taille industrielle.


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