پروتکل آزمون حداقل غلظت مهارکننده (MIC)
آزمون حداقل غلظت مهارکننده (MIC) مبتنی بر بیوفیلم، روشی ضروری برای ارزیابی اثربخشی عوامل ضدمیکروبی علیه میکروارگانیسم‌های مرتبط با بیوفیلم است که به‌دلیل ماتریکس خارج‌سلولی محافظ خود، مقاومت بیشتری نشان می‌دهند. یکی از مراحل حیاتی این آزمون، جداسازی ساختارهای بیوفیلم برای آزادسازی سلول‌های محصور در آن‌ها و ارزیابی دقیق زنده‌مانی است. سونیکاتور پلیت چندچاهکی UIP400MTP با استفاده از فراصوت متمرکز برای ایجاد کاویتاسیون کنترل‌شده، این فرایند را تسهیل می‌کند و سلول‌های بیوفیلم را به‌طور مؤثر جدا کرده و در قالب سوسپانسیونی یکنواخت پراکنده می‌سازد. این تخریب دقیق و تکرارپذیر بیوفیلم، قابلیت اعتماد و ظرفیت پردازش آزمون‌های MIC را افزایش می‌دهد و UIP400MTP را به ابزاری ضروری برای پیشبرد پژوهش‌های بیوفیلم تبدیل می‌کند.
چرا باید در آزمون‌های MIC از فراصوت‌دهی استفاده کنم؟
- داده‌های دقیق و تکرارپذیر: سوسپانسیون‌های سلولی یکنواختی به دست آورید که اثر محافظتی ماتریکس را از بین می‌برند و تضمین می‌کنند شمارش کلنی‌ها و مقادیر چگالی نوری شما واقعاً بازتاب‌دهنده اثربخشی عوامل ضدمیکروبی باشند.
- کارایی با ظرفیت پردازش بالا: تمام یک پلیت 96 چاهکی را تنها در 1–3 دقیقه به‌طور هم‌زمان پردازش کنید و خراش‌دادن دستیِ کند و ناهماهنگ را با گردش کاری روان جایگزین سازید.
- حفظ زنده‌مانی سلول‌ها: سلول‌های محصور را به‌آرامی و بدون آسیب فیزیکی ناشی از خراش‌دادن جدا کنید و با حفظ نرخ بقای بالاتر، محاسبات قابل‌اعتماد MIC/MBEC را امکان‌پذیر سازید.
- خطر صفر آلودگی متقاطع: از طراحی غیرتماسی کاپ‌هورن بهره ببرید که همه چاهک‌ها را به‌طور یکنواخت پردازش می‌کند، بدون آنکه پروب‌ها با نمونه‌ها یا چاهک‌های منفرد تماس پیدا کنند.
- آمادگی برای انطباق با استانداردها: روش‌شناسی خود را با پروتکل‌های معتبر صنعتی مانند ASTM E2799-22 هماهنگ کنید تا داده‌هایتان برای مقاصد نظارتی یا انتشار علمی اعتبار بیشتری داشته باشند.
- غربالگری مطمئن دارو و درمان: با اتکا به نتایج حساسیت‌سنجی خود، درباره اثربخشی ضدمیکروبی، تعیین الگوی مقاومت یا توسعه درمان‌ها تصمیم‌های آگاهانه‌تری بگیرید.
با حفظ زنده‌مانی سلول‌ها، بازده آزمایشگاه خود را افزایش دهید. نوع میکروپلیت خود را به ما بگویید و توصیه‌هایی برای جداسازی کارآمد بیوفیلم و پراکنده‌سازی سلول‌ها با فراصوت‌دهی با ظرفیت پردازش بالا دریافت کنید.
سونیکاتور میکروپلیت UIP400MTP برای جداسازی بیوفیلم با قابلیت کنترل دقیق در آزمون‌های MIC و MBEC.
فراصوت‌دهی برای جداسازی بیوفیلم
آزمون MIC مبتنی بر بیوفیلم معمولاً زنده‌مانی باکتری‌ها یا مهار رشد آن‌ها را با روش‌هایی مانند کشت روی پلیت، شمارش کلنی یا اندازه‌گیری چگالی نوری می‌سنجد. هنگام ارزیابی حساسیت میکروارگانیسم‌های مرتبط با بیوفیلم به عوامل ضدمیکروبی، فراصوت‌دهی مرحله‌ای حیاتی در آزمون‌های MIC مبتنی بر بیوفیلم است. وظیفه اصلی آن، جداسازی سلول‌های محصور در ماتریکس بیوفیلم و پراکنده‌سازی آن‌ها در قالب سوسپانسیونی یکنواخت برای تحلیل دقیق است.
بیوفیلم‌ها در مقایسه با سلول‌های پلانکتونیک، مقاومت بسیار بیشتری به عوامل ضدمیکروبی دارند؛ بنابراین جداسازی صحیح برای تحلیل دقیق ضروری است. در این فرایند، امواج فراصوت کاویتاسیون کنترل‌شده ایجاد می‌کنند، ماتریکس بیوفیلم را از هم می‌گسلند و سلول‌های محصور را در قالب سوسپانسیونی یکنواخت در محیط بازیابی آزاد می‌سازند. این مرحله امکان ارزیابی دقیق زنده‌مانی سلول‌های پراکنده‌شده از بیوفیلم را با روش‌هایی مانند کشت روی پلیت، رقیق‌سازی و شمارش کلنی فراهم می‌کند. تخریب صحیح بیوفیلم از طریق فراصوت‌دهی مانع اثر محافظتی اجزای باقی‌مانده ماتریکس بر سلول‌ها می‌شود؛ اثری که در غیر این صورت می‌تواند به کمتر برآورد شدن فعالیت ضدمیکروبی منجر شود. سونیکاتور پلیت چندچاهکی UIP400MTP به‌ویژه برای این منظور مناسب است و با فراهم‌کردن شرایط دقیق و تکرارپذیر فراصوت‌دهی، آماده‌سازی قابل‌اعتماد پلیت‌های آزمون با ظرفیت پردازش بالا را تضمین می‌کند.
چرا فراصوت‌دهی در آزمون‌های حداقل غلظت مهارکننده مبتنی بر بیوفیلم ضروری است
برای اندازه‌گیری زنده‌مانی و شمارش سلول‌ها، جداسازی و پراکنده‌سازی کامل و قابل‌اعتماد سلول‌ها به‌صورت منفرد ضروری است. UIP400MTP جداسازی یکنواخت و بدون آسیب بیوفیلم و پراکنده‌سازی سلول‌ها را تسهیل می‌کند تا نتایج آزمون قابل‌اتکا باشند.
- پیچیدگی بیوفیلم: بیوفیلم‌ها اجتماعات میکروبی سازمان‌یافته‌ای هستند که در ماتریکسی از مواد پلیمری خارج‌سلولی (EPS) محصور شده‌اند؛ این ماتریکس از میکروارگانیسم‌ها محافظت می‌کند و مقاومت آن‌ها را به عوامل ضدمیکروبی افزایش می‌دهد.
- پراکندگی یکنواخت: برای اندازه‌گیری دقیق زنده‌مانی سلول‌های محصور در بیوفیلم یا حساسیت آن‌ها به عوامل ضدمیکروبی، ابتدا باید بیوفیلم جدا و از هم گسسته شود تا سوسپانسیونی همگن به دست آید.
درحالی‌که MIC استاندارد مقاومت سلول‌های پلانکتونیک را می‌سنجد، فراصوت‌دهی در آزمون‌های Biofilm-MIC و MBEC ضروری است تا از بازیابی تعداد مبنای صحیح سلول‌ها اطمینان حاصل شود.
پروتکل آزمون حداقل غلظت مهارکننده مبتنی بر بیوفیلم
آزمون حداقل غلظت مهارکننده (MIC)، کمترین غلظت یک عامل ضدمیکروبی را که برای مهار رشد قابل‌مشاهده میکروارگانیسم‌ها لازم است، تعیین می‌کند. این پروتکل برای میکروارگانیسم‌های مرتبط با بیوفیلم طراحی شده است و برای تخریب بیوفیلم از سونیکاتور پلیت چندچاهکی UIP400MTP استفاده می‌کند.
مرحله 1: آماده‌سازی مایه تلقیح باکتریایی
- سوسپانسیون باکتریایی را آماده کنید:
باکتری‌ها را در محیط‌های مناسب تا میانه فاز لگاریتمی رشد دهید.
کشت را رقیق کنید تا به تراکم سلولی استانداردشده برسید؛ برای مثال، استاندارد 0٫5 McFarland یا OD600 ~0٫1. - محلول‌های ضدمیکروبی را آماده کنید:
عامل ضدمیکروبی را در محیطی مناسب رقیق کنید تا طیفی از غلظت‌ها ایجاد شود؛ برای مثال، رقت‌های متوالی دوبرابری. - در پلیت 96 چاهکی توزیع کنید:
محلول‌های ضدمیکروبی را به چاهک‌های یک پلیت استاندارد 96 چاهکی اضافه کنید، به‌گونه‌ای که حجم نهایی هر چاهک ~150–200 µL باشد.
کنترل‌های رشد (بدون عامل ضدمیکروبی) و کنترل‌های استریلیتی (بدون مایه تلقیح باکتریایی) را نیز در نظر بگیرید.
مرحله 2: تشکیل بیوفیلم روی درپوش میخک‌دار
- درپوش میخک‌دار را قرار دهید:
درپوش میخک‌دار ویژه را روی چاهک‌های تلقیح‌شده قرار دهید و اطمینان حاصل کنید که میخک‌ها کاملاً در سوسپانسیون باکتریایی غوطه‌ور هستند. - پلیت را انکوبه کنید:
پلیت را در دمای مناسب (برای مثال، 37°C) و به‌مدت مشخص (برای مثال، 24 ساعت) در شرایط ساکن انکوبه کنید تا بیوفیلم روی میخک‌ها تشکیل شود. - میخک‌ها را آبکشی کنید:
درپوش میخک‌دار را از سوسپانسیون باکتریایی خارج کنید و به‌آرامی در محلول سالین استریل یا PBS آبکشی کنید تا سلول‌های پلانکتونیک با اتصال سست حذف شوند. - در معرض عوامل ضدمیکروبی قرار دهید:
درپوش میخک‌دار را به یک پلیت جدید 96 چاهکی حاوی رقت‌های ضدمیکروبی که قبلاً آماده شده‌اند، منتقل کنید.
برای مدت مشخصی (برای مثال، 24 ساعت) در شرایط ساکن انکوبه کنید تا عامل ضدمیکروبی بر بیوفیلم‌ها اثر بگذارد.
مرحله 3: مواجهه با عامل ضدمیکروبی
سونیکاتور پلیت چندچاهکی UIP400MTP برای آماده‌سازی نمونه‌ها با ظرفیت پردازش بالا
مرحله 4: فراصوت‌دهی با سونیکاتور میکروپلیت UIP400MTP
مرحله فراصوت‌دهی برای جداسازی بیوفیلم‌ها از درپوش‌های میخک‌دار به‌منظور ارزیابی زنده‌مانی حیاتی است. برای سونیکاتور UIP400MTP مراحل زیر را دنبال کنید:
- آرایش آزمایش را آماده کنید:
هر چاهک یک پلیت جدید 96 چاهکی را با محیط بازیابی (برای مثال، براث خنثی‌کننده یا محیط رشد استریل) پر کنید. - درپوش میخک‌دار را منتقل کنید:
درپوش میخک‌دار را از پلیت تیمار ضدمیکروبی بردارید.
درپوش میخک‌دار را در محلول سالین استریل یا PBS آبکشی کنید تا عوامل ضدمیکروبی باقی‌مانده حذف شوند. - پلیت را در سونیکاتور قرار دهید:
درپوش میخک‌دار را روی پلیت حاوی محیط بازیابی قرار دهید.
پلیت حاوی محیط بازیابی را داخل سونیکاتور UIP400MTP قرار دهید و مطابق توضیحات دفترچه راهنما اطمینان حاصل کنید که پلیت در مرکز و به‌صورت پایدار قرار گرفته است. - پارامترهای فراصوت‌دهی را تنظیم کنید:
پارامترهای فراصوت‌دهی را در UIP400MTP تنظیم کنید (تنظیمات را می‌توان متناسب با بیوفیلم تغییر داد):
دامنه: 70–100%.
زمان فراصوت‌دهی: 1–3 دقیقه (متناسب با ساختار بیوفیلم تنظیم شود) در حالت چرخه‌ای. - فراصوت‌دهی کنید:
فرایند فراصوت‌دهی را آغاز کنید. امواج فراصوت ماتریکس بیوفیلم را تخریب می‌کنند و سلول‌ها را جدا کرده و به محیط بازیابی وارد می‌سازند. - فرایند را پایش کنید:
برای پایش دمای نمونه در چاهک‌ها از حسگر دمای قابل‌اتصال استفاده کنید. UIP400MTP را می‌توان برای خنک‌سازی به یک چیلر آزمایشگاهی متصل کرد. - اقدامات پس از فراصوت‌دهی:
محیط بازیابی حاوی بیوفیلم‌های جداشده را بلافاصله برای تحلیل‌های بعدی به یک پلیت استریل جدید منتقل کنید.
(A) پلیت حاوی TSB با 2% گلوکز که برای تشکیل بیوفیلم، بازیابی سلول‌ها و تعیین MIC و MBEC استفاده شد؛ (B) درپوش میخک‌دار برای تشکیل بیوفیلم‌های استافیلوکوکی.
سلول‌های بیوفیلم تشکیل‌شده روی میخک‌ها، برای بازیابی سلول‌ها با فراصوت‌دهی (Hielscher Ultrasound Technology) به‌مدت 5 min در پلیت‌های 96 چاهکی حاوی محیط کشت تازه جدا شدند.
(تصویر و پژوهش: ©de Oliveira et al., 2016)
مرحله 4: ارزیابی زنده‌مانی
بیوفیلم‌های جداشده را روی پلیت کشت دهید و پرورش دهید:
- از محیط بازیابی رقت‌های متوالی تهیه کنید و برای شمارش واحدهای تشکیل‌دهنده کلنی (CFU)، آن‌ها را روی آگار کشت دهید.
- MIC را ارزیابی کنید:
MIC را به‌عنوان کمترین غلظت عامل ضدمیکروبی تعیین کنید که رشد میکروبی قابل‌مشاهده را در محیط بازیابی به‌طور کامل مهار می‌کند.
حداقل غلظت مهارکننده MIC: نمونه‌ای از پلیت میکروتیتر و تفسیر نتایج میکرودایلوشن.
(پژوهش و تصویر: ©Jaskiewicz et al. 2019)
از فراصوت‌دهی دقیق و غیرتماسی استفاده کنید تا از یکنواختی سوسپانسیون سلولی و قابل‌اعتماد بودن نتایج MIC اطمینان حاصل کنید!
چه کسانی از فراصوت‌دهی در آزمون‌های MIC بهره می‌برند؟
- تولیدکنندگان تجهیزات پزشکی: برای آزمودن اثربخشی پوشش‌های سطحی و اعتبارسنجی پروتکل‌های تمیزکاری تجهیزات مستعد تشکیل بیوفیلم.
- میکروبیولوژیست‌های بالینی: برای تشخیص دقیق عفونت‌های مرتبط با ایمپلنت (مانند PJI) از طریق بازیابی باکتری‌ها از قطعات و تجهیزات پزشکی.
- توسعه‌دهندگان دارو: برای ارزیابی اثربخشی عوامل ضدمیکروبی جدید علیه عوامل بیماری‌زای مقاومِ محصور در بیوفیلم.
- پژوهشگران دانشگاهی: برای انجام مطالعات تکرارپذیر با ظرفیت پردازش بالا درباره زیست‌شناسی بیوفیلم و سازوکارهای مقاومت ضدمیکروبی.
- تیم‌های کنترل کیفیت صنعتی: برای ارزیابی رسوب‌گرفتگی زیستی و اثربخشی مواد ضدعفونی‌کننده در محیط‌های صنعتی (برای مثال، با استفاده از استانداردهای ASTM E2799-22).
طراحی، تولید و مشاوره – کیفیت ساخت آلمان
دستگاه‌های فراصوت Hielscher به بالاترین استانداردهای کیفیت و طراحی شهرت دارند. استحکام و کاربری آسان، ادغام بی‌دردسر دستگاه‌های فراصوت ما را در تأسیسات صنعتی ممکن می‌سازد. سونیکاتورهای Hielscher به‌راحتی از عهده شرایط سخت و محیط‌های پرچالش برمی‌آیند.
Hielscher Ultrasonics شرکتی دارای گواهی ISO است و بر دستگاه‌های فراصوت با عملکرد بالا، مجهز به فناوری روز و با کاربری آسان تأکید ویژه‌ای دارد. البته دستگاه‌های فراصوت Hielscher با CE مطابقت دارند و الزامات UL، CSA و RoHs را برآورده می‌کنند.
آماده‌سازی نمونه در پلیت‌های 96 چاهکی و پلیت‌های آزمون را با استفاده از سونیکاتور پلیت چندچاهکی UIP400MTP تسهیل کنید
منابع علمی / مراجع
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- Dreyer J., Ricci G., van den Berg J., Bhardwaj V., Funk J., Armstrong C., van Batenburg V., Sine C., VanInsberghe M.A., Marsman R., Mandemaker I.K., di Sanzo S., Costantini J., Manzo S.G., Biran A., Burny C., Völker-Albert M., Groth A., Spencer S.L., van Oudenaarden A., Mattiroli F. (2024): Acute multi-level response to defective de novo chromatin assembly in S-phase. Molecular Cell 2024.
- Mochizuki, Chika; Taketomi, Yoshitaka; Irie, Atsushi; Kano, Kuniyuki; Nagasaki, Yuki; Miki, Yoshimi; Ono, Takashi; Nishito, Yasumasa; Nakajima, Takahiro; Tomabechi, Yuri; Hanada, Kazuharu; Shirouzu, Mikako; Watanabe, Takashi; Hata, Kousuke; Izumi, Yoshihiro; Bamba, Takeshi; Chun, Jerold; Kudo, Kai; Kotani, Ai; Murakami, Makoto (2024): Secreted phospholipase PLA2G12A-driven lysophospholipid signaling via lipolytic modification of extracellular vesicles facilitates pathogenic Th17 differentiation. BioRxiv 2024.
- Cosenza-Contreras M, Seredynska A, Vogele D, Pinter N, Brombacher E, Cueto RF, Dinh TJ, Bernhard P, Rogg M, Liu J, Willems P, Stael S, Huesgen PF, Kuehn EW, Kreutz C, Schell C, Schilling O. (2024): TermineR: Extracting information on endogenous proteolytic processing from shotgun proteomics data. Proteomics. 2024.
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
پرسش‌های متداول
آزمون MIC چیست؟
آزمون حداقل غلظت مهارکننده (MIC)، آزمونی استانداردشده برای تعیین کمترین غلظت یک عامل ضدمیکروبی است که برای مهار رشد قابل‌مشاهده یک میکروارگانیسم لازم است. این آزمون معمولاً با روش میکرودایلوشن در براث یا رقیق‌سازی در آگار انجام می‌شود که در آن‌ها میکروارگانیسم‌ها در معرض رقت‌های متوالی عامل ضدمیکروبی قرار می‌گیرند. آزمون‌های MIC برای ارزیابی اثربخشی ضدمیکروبی، هدایت درمان بالینی و سنجش میزان مقاومت در میکروارگانیسم‌های پلانکتونیک و مرتبط با بیوفیلم حیاتی هستند.
تفاوت آزمون حداقل غلظت مهارکننده مبتنی بر بیوفیلم با آزمون MBIC چیست؟
آزمون حداقل غلظت مهارکننده (MIC) مبتنی بر بیوفیلم و آزمون حداقل غلظت مهارکننده بیوفیلم (MBIC) با یکدیگر مرتبط‌اند، اما از نظر هدف و روش‌شناسی تفاوت دارند.
آزمون MIC مبتنی بر بیوفیلم، کمترین غلظت عامل ضدمیکروبی لازم برای مهار رشد قابل‌مشاهده یا زنده‌مانی بیوفیلم را ارزیابی می‌کند و تمرکز آن بر سلول‌های مرتبط با بیوفیلم است، نه باکتری‌های پلانکتونیک. در مقابل، آزمون MBIC به‌طور مشخص توانایی یک عامل ضدمیکروبی را در جلوگیری از تشکیل بیوفیلم، به‌جای درمان بیوفیلم‌های ازپیش‌تشکیل‌شده، اندازه‌گیری می‌کند. هرچند هر دو آزمون با باکتری‌های مرتبط با بیوفیلم سروکار دارند، آزمون MIC مبتنی بر بیوفیلم به درمان می‌پردازد و آزمون MBIC بر پیشگیری تأکید دارد؛ بنابراین این دو، ابزارهای مکملی برای مطالعه اثربخشی ضدمیکروبی علیه بیوفیلم‌ها هستند.
در آزمون‌های MIC از چه بیوفیلم‌هایی استفاده می‌شود؟
برای مطالعه اثربخشی ضدمیکروبی در شرایط مختلف، هم بیوفیلم‌های میکروبی و هم سلول‌های پلانکتونیک در آزمون‌های حداقل غلظت مهارکننده (MIC) استفاده می‌شوند.
- سلول‌های پلانکتونیک:
سلول‌های پلانکتونیک، سلول‌های میکروبی منفرد و آزادانه شناوری هستند که به‌عنوان مدل استاندارد در آزمون‌های متداول MIC به کار می‌روند. میکروارگانیسم‌های رایج شامل Escherichia coli، Pseudomonas aeruginosa، Staphylococcus aureus و Candida albicans هستند. این آزمون‌ها MIC لازم برای مهار رشد سلول‌های آزادزی را تعیین می‌کنند و برای غربالگری اولیه عوامل ضدمیکروبی حیاتی هستند. - سلول‌های مرتبط با بیوفیلم:
سلول‌های بیوفیلم، میکروارگانیسم‌هایی محصور در یک ماتریکس خارج‌سلولی هستند که مقاومت آن‌ها را به عوامل ضدمیکروبی به‌طور چشمگیری افزایش می‌دهد. آزمون‌های MIC بیوفیلم اغلب شامل موارد زیر هستند:- باکتری‌های گرم‌منفی: Escherichia coli، Pseudomonas aeruginosa و Klebsiella pneumoniae که به تشکیل بیوفیلم در عفونت‌ها و محیط‌های صنعتی شناخته می‌شوند.
- باکتری‌های گرم‌مثبت: Staphylococcus aureus (از جمله MRSA)، Staphylococcus epidermidis و Enterococcus faecalis که معمولاً در عفونت‌های مرتبط با تجهیزات نقش دارند.
- قارچ‌ها: Candida albicans و گونه‌های مرتبط که در عفونت‌های قارچی مرتبط با بیوفیلم اهمیت دارند.
- بیوفیلم‌های چندگونه‌ای: گاهی از این بیوفیلم‌ها برای بازسازی بیوفیلم‌های طبیعی چندمیکروبی، مانند بیوفیلم‌های موجود در زخم‌های مزمن یا رسوب‌گرفتگی زیستی صنعتی، استفاده می‌شود.
پژوهشگران با مقایسه مقادیر MIC سلول‌های پلانکتونیک و سلول‌های مرتبط با بیوفیلم می‌توانند مقاومت بیشتر بیوفیلم‌ها را ارزیابی کنند و عوامل مؤثر علیه این اجتماعات میکروبی مقاوم‌تر را شناسایی کنند.
تفاوت MIC و MBEC چیست؟
حداقل غلظت مهارکننده (MIC)، کمترین غلظت یک عامل ضدمیکروبی است که برای جلوگیری از تشکیل بیوفیلم لازم است، درحالی‌که حداقل غلظت ریشه‌کن‌کننده بیوفیلم (MBEC)، کمترین غلظت لازم برای ریشه‌کن‌کردن یک بیوفیلم استقرار‌یافته است. MIC بر پیشگیری از بیوفیلم تمرکز دارد، درحالی‌که MBEC اثربخشی درمان علیه بیوفیلم‌های بالغ را ارزیابی می‌کند.
چه پلیت‌هایی معمولاً برای آزمون‌های MBEC استفاده می‌شوند؟
پلیت‌های میکروتیتر رایج در آزمون‌های MBEC معمولاً پلیت‌های 96 چاهکی ساخته‌شده از پلی‌استایرن یا پلی‌پروپیلن هستند. این مواد سطح مناسبی برای تشکیل بیوفیلم فراهم می‌کنند و در برابر عوامل ضدمیکروبی آزمایش‌شده در طول آزمون، مقاومت شیمیایی دارند. پلیت‌های پلی‌استایرن به‌دلیل شفافیت نوری خود، که برای تحلیل‌های بعدی مانند اندازه‌گیری‌های اسپکتروفتومتری یا مبتنی بر فلورسانس سودمند است، به‌طور گسترده ترجیح داده می‌شوند. طراحی این پلیت‌ها شامل درپوش‌های میخک‌دار جداشدنی است که برای آزمون ضروری‌اند، زیرا بیوفیلم‌ها روی میخک‌هایی تشکیل می‌شوند که در چاهک‌های حاوی محیط رشد غوطه‌ور هستند. پلیت‌های استانداردشده، مانند پلیت‌های منطبق با پروتکل آزمون MBEC، به‌طور ویژه مهندسی شده‌اند تا تکرارپذیری و سازگاری با سونیکاتور UIP400MTP یا دیگر تجهیزات پردازش را تضمین کنند.
پلیت‌های دارای درپوش PEG چیستند؟
پلیت‌های دارای درپوش PEG، سامانه‌های تخصصی پلیت چندچاهکی هستند که درپوش آن‌ها به میخک‌ها یا پین‌های کوچکی از جنس پلی‌اتیلن گلیکول (PEG) مجهز است که به داخل هر چاهک امتداد می‌یابند. این میخک‌ها سطحی برای تشکیل بیوفیلم میکروبی در شرایط کنترل‌شده فراهم می‌کنند و رشد بیوفیلم در شرایط واقعی را شبیه‌سازی می‌کنند. این طراحی امکان رشد بیوفیلم روی میخک‌ها را درحالی‌که چاهک‌ها حاوی محیط رشد یا عوامل ضدمیکروبی هستند، فراهم می‌سازد و آزمون حساسیت بیوفیلم به درمان‌ها را با ظرفیت پردازش بالا، مانند آزمون‌های MBEC، MBIC و MIC، امکان‌پذیر می‌کند.
جداسازی فراصوتی بیوفیلم در مقایسه با خراش‌دادن سلول‌ها چه مزیتی دارد؟
جداسازی فراصوتی بیوفیلم با ارائه روشی غیرتهاجمی، یکنواخت و بسیار کارآمد برای حذف بیوفیلم‌ها از سطوح، مزیت چشمگیری نسبت به خراش‌دادن سلول‌ها دارد. برخلاف خراش‌دادن که ممکن است ناهماهنگ باشد و به سطح زیرین یا سلول‌ها آسیب برساند، امواج فراصوت به ماتریکس بیوفیلم نفوذ می‌کنند و بدون خدشه‌دارکردن یکپارچگی ساختارهای مجاور، آن را از هم می‌گسلند. این روش تکرارپذیری را تضمین می‌کند، خطر آلودگی را به حداقل می‌رساند و به‌ویژه برای کاربردهایی که به حذف دقیق بیوفیلم نیاز دارند، مانند مطالعات میکروبیولوژی یا آزمون تجهیزات پزشکی، مؤثر است. درباره برتری سونیکاتور UIP400MTP نسبت به خراش‌دادن سلول‌ها بیشتر بخوانید!
Hielscher Ultrasonics هموژنایزرهای فراصوتی با عملکرد بالا را در مقیاس‌های آزمایشگاهی تا صنعتی تولید می‌کند.