جداشدگی سلول اولتراسونیک

جداشدگی سلول های اولتراسونیک یک روش آماده سازی نمونه بسیار موثر و قابل اعتماد است که در زمینه های مختلف زیست شناسی سلولی و بیوتکنولوژی استفاده می شود. با استفاده از امواج اولتراسونیک، UIP400MTP چند چاه صفحه فراصوت سلول های چسبنده را از سطوح کشت جدا می کند و تعلیق سلولی را برای کاربردهای پایین دست آماده می کند. فراصوت مزایای متعددی نسبت به تکنیک های جداسازی سنتی آنزیمی، شیمیایی و مکانیکی ارائه می دهد و آن را به ابزاری ارزشمند برای محققان تبدیل می کند.

اصل جداشدگی سلول اولتراسونیک

جداشدگی سلول اولتراسونیک متکی به استفاده از سونوگرافی قدرت برای مختل کردن فعل و انفعالات بین سلول ها و بستر آنها به متصل. امواج اولتراسونیک میکرو حباب ها ، کاویتاسیون صوتی و ارتعاشات را در محیط کشت تولید می کنند و نیروهای مکانیکی تولید می کنند که به آرامی اما به طور موثر سلول ها را از بین می برند. این فرایند به طور معمول با استفاده از UIP400MTP صوتی غیر تماسی برای صفحات چند چاه انجام.

در زیر، یک دستورالعمل مثال زدنی برای جداسازی سلول با استفاده از UIP400MTP فراصوت صفحه چند چاه پیدا می کنید.
 

تجهیزات و مواد برای جداسازی سلول اولتراسونیک

• سونیکاتور غیر تماسی برای صفحات چند چاهی UIP400MTP: این فراصوت با توان عملیاتی بالا ابزار کلیدی است. UIP400MTP سونیکاتور صفحه برای هر صفحه چند چاه و میکروتیتر استاندارد و همچنین برای ظروف پتری مناسب است. امواج اولتراسوند انرژی مکانیکی لازم را برای جداشدگی سلول فراهم می کنند.
• صفحات کشت سلولی یا ظرف پتری: عروق استاندارد مورد استفاده برای رشد کشت سلولی چسبنده.
• محیط فرهنگ: محیط مایع که سلول ها در آن رشد و نگهداری می شوند.
• PBS استریل (نمکی بافر فسفات): برای شستشوی سلول ها قبل از جدا شدن استفاده می شود.
• لوله های جمع آوری: برای جمع آوری سوسپانسیون سلول جدا شده.

پروتکل جداسازی اولتراسونیک با استفاده از صفحه سونیکاتور UIP400MTP

1. آماده سازی
   – اطمینان حاصل کنید که تمام تجهیزات تمیز و استریل هستند تا از آلودگی جلوگیری شود.
   – محیط کشت و PBS را تا دمای مناسب (معمولا 37 درجه سانتیگراد) از قبل گرم کنید.
2. شستشوی سلول
   – محیط کشت را از فلاسک یا بشقاب کشت سلولی تنفس کنید.
   – سلول ها را به آرامی با PBS استریل بشویید تا محیط باقیمانده و سلول های جدا شده از بین برود.
3. فراصوت
   – حجم کمی از PBS یا محیط کشت تازه را به فلاسک یا صفحه اضافه کنید تا تک لایه سلول را بپوشاند.
   – ظرف یا بشقاب پتری را در سونیکاتور UIP400MTP قرار دهید.
   – برای مدت زمان مشخص، معمولا از چند ثانیه تا چند دقیقه، بسته به نوع سلول و قدرت اتصال، فراصوت کنید.
4. مجموعه سوسپانسیون سلولی
   – پس از فراصوت ، سلول ها را زیر میکروسکوپ مشاهده کنید تا از جدایی اطمینان حاصل شود.
   – سوسپانسیون سلول را به آرامی پیپت کنید تا سلول های جدا شده جمع آوری شوند.
   – سیستم تعلیق را به یک لوله جمع آوری منتقل کنید.
5. پردازش پس از جدایی
   – در صورت لزوم سوسپانسیون سلولی را سانتریفیوژ کنید تا سلول ها متمرکز شوند.
   – سلول ها را در محیط کشت تازه یا بافر برای کاربردهای پایین دست به حالت تعلیق درآورید.

یادداشت: پارامترها (مانند زمان و شدت فراصوت) باید برای انواع سلول های مختلف بهینه شوند تا از آسیب سلولی جلوگیری شود. برخی از انواع سلول های ظریف ممکن است حساس تر به درمان اولتراسونیک باشند، نیاز به بهینه سازی دقیق.

کاربردهای عملی جداشدگی سلول اولتراسونیک

جداشدگی سلول اولتراسونیک در تنظیمات مختلف تحقیقاتی و بالینی استفاده می شود:

1. فلوسایتومتری: آماده سازی سوسپانسیون های تک سلولی برای تجزیه و تحلیل.
2. سنجش شمارش سلولی و زنده ماندن: جدا کردن سلول ها برای شمارش دقیق و ارزیابی زنده ماندن.
3. فرهنگ فرعی: انتقال سلول ها از یک ظرف کشت به رگ دیگر.
4. آزمایش های زیست شناسی مولکولی: جداسازی سلول ها برای DNA، RNA و استخراج پروتئین.

در اینجا بخوانید که چگونه UIP400MTP 96 به خوبی سونیکاتور صفحه برای جابجایی بیوفیلم در سنجش بیوفیلم مانند پروتکل ASTM E2799 استفاده می شود!

چرا باید خراش دادن سلول توسط جداشدگی سلول را با UIP400MTP میکروپلیت سونسیاتور جایگزین کنم؟

جایگزینی خراش دادن سلول با جداشدگی سلولی با استفاده از ماسونیک میکروپلیت UIP400MTP مزایای متعددی را به محققان ارائه می دهد. بر خلاف خراش دادن دستی، فراصوت دقیق قابل کنترل با UIP400MTP جدایی سلول سازگار و ملایم را تضمین می کند، آسیب مکانیکی را به حداقل می رساند و زنده ماندن سلول را حفظ می کند. UIP400MTP کنترل دقیق بر پارامترهای فراصوت را فراهم می کند ، امکان درمان یکنواخت در تمام چاه ها و از بین بردن تنوع بین نمونه ها را فراهم می کند. این روش سریع تر، کارآمدتر و مقیاس پذیر است و آن را برای کاربردهای با توان عملیاتی بالا و در عین حال حفظ تکرارپذیری و یکپارچگی کشت های سلولی حساس ایده آل می کند. مطالعه مقایسه ای را در اینجا بیابید!